新疆哈萨克民族食管癌淋巴结转移的血清蛋白质组学研究

目的:比较分析新疆哈萨克民族食管癌淋巴结转移患者和健康人血清蛋白质谱的差异,建立新疆哈萨克民族食管癌淋巴结转移的蛋白质指纹诊断模型,并筛选与食管癌淋巴结转移的相关蛋白质。方法:采用弱阳离子交换蛋白芯片(CM10)和表面加强激光解吸离子化飞行时间质谱技术,检测分析了21例食管癌有淋巴结转移,20例食管癌无淋巴结转移的患者和20例正常对照的哈萨克民族血清,用支持向量机方法建立蛋白质指纹图谱诊断模型,用留一法交叉验证作为评估模型判别效果的方法。两组之间的蛋白质峰的比较采用Wilconxon秩和检验。结果:结果显示新疆哈萨克民族食管癌淋巴结转移患者和健康人血清的蛋白质荷比峰值图谱明显不同。比较21例淋巴结阳性患者组与20例淋巴结阴性组食管癌血清蛋白质指纹图谱数据,其中5个峰差异有统计学意义(P0.05)。3个峰在食管癌淋巴结阴性组呈高表达,2个峰呈低表达。结论:建立的诊断模型在区分哈萨克民族食管癌淋巴结转移患者上,具有较高的灵敏度和特异度;筛选出的蛋白标记物可能为新疆哈萨克民族食管癌淋巴结转移提供依据。     

应用SELDI-TOF-MS技术建立鼻咽癌诊断中的血清蛋白质指纹图谱模型

目的:检测鼻咽癌、耳鼻部良性疾病和正常人血清中蛋白质指纹图谱,筛选特异的蛋白质标志物,构建用于鼻咽癌诊断的分类树模型.方法:采用CM10芯片及SELDI-TOF-MS技术对30例鼻咽癌患者及24例对照组血清样本进行蛋白质指纹图谱检测分析,所得到的结果采用Biomarker Wizard和Biomarker Patterns System软件分析并建立用于鼻咽癌诊断的分类树模型,并用其余10例鼻咽癌患者和12例对照组标本进行双盲验证.同时用酶联免疫法(ELISA)检测两组的血清EB病毒VCA-IgA抗体,将诊断模型的判定结果通过与血清EB病毒VCA-IgA抗体检测结果相对比验证其对于临床的应用价值.结果:从两组血清中筛选出Mr为8559,15 115,15 836,15 937,16 089的5个差别有统计学意义(P<0.05)的标志蛋白,所建立的诊断模型对鼻咽癌诊断的准确率、灵敏度和特异度分别为98.1%(53/54),96.7%(29/30)和100%(24/24).双盲验证后的准确率、灵敏度和特异度分别86.4%(19/22),80.0%(8/10),和91.7%(11/12).灵敏度优于血清EB病毒VC...     

应用SELDI-TOF-MS技术建立胃癌筛选血清蛋白质指纹图谱模型

目的 应用SELDI蛋白质芯片检测胃癌患者血清蛋白质指纹图谱,筛选候选肿瘤标志物以建立诊断模型,并探讨其诊断早期胃癌的临床意义.方法 表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱(SEL-DI-TOF-MS)技术及其配套蛋白质芯片检测40例胃癌患者和30例健康人的血清蛋白质组图谱,运用判别分析处理数据筛选标志物并建立诊断模型.结果 8592m/z、13725m/z、8678m/z等3个蛋白质峰组合所构建的诊断模型能达到鉴别胃癌患者和健康人的最佳诊断效果,灵敏度为90%(36/40),特异性为86.5%(26/30).结论 该方法 在胃癌的诊断尤其是早期诊断、术前分期及候选肿瘤标志物筛选等方面具有一定价值,值得进一步研究.     

食管癌血清差异蛋白质组测定结果分析

目的 用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)寻找食管癌(EC)患者血清中差异蛋白质组,并建立诊断模型,为其广泛用于临床诊断积累数据资料.方法 用SELDI芯片检测食管癌及其相关人群的血清,Biomarker Wizard Software软件筛选出差异蛋白,选择具有显著差异的蛋白质组建立人工神经网络诊断模型,经盲法验证后使用SPSS软件分析各个差异蛋白以及联合人工神经网络技术后的诊断效率,并鉴定相关蛋白.结果 筛选出显著差异(P<0.01)的蛋白质组如下:在食管癌患者血清中表达增高蛋白组[(5 017.6±4.89)、(7 458.5±6.49)、(7 908.1±7.80)、(8 111±8.45)、(8 577±7.80)kD],表达降低蛋白组[(7 748.3±9.10)、(5 890.9±7.32)、(4 213.8±5.93)kD].差异蛋白质组建立食管癌人工神经网络筛查模型和诊断模型,其灵敏度和特异性超过90%,盲法验证的效果好;人工神经网络预测输出值构成的ROC曲线下面积分别为81.6%和82.1%,经查阅数据库鉴定发现两种蛋白质.结论 血清蛋白质谱指纹图结合人工神经网络技术进行蛋白质组学数据挖掘所建模型诊断价值较大,与临床诊断符合程度良好.     

表面增强激光解析/离子化飞行时间质谱技术在神经管缺陷胎儿母亲血清、尿液和羊水蛋白质标志物筛查中的研究

目的 探讨利用表面增强激光解析/离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术结合分类与回归树分析(classification and regression tree analysis,CART)在筛选神经管缺陷胎儿母亲血清和尿液蛋白质标志物的应用.方法 孕母血清样本31例,尿液样本35例和羊水样本20例用于检测.采用PBSIIC型蛋白质芯片阅读机读取数据.SELDI数据结果采用分类与回归树分析(CART)建立血清和尿液诊断模型,用于区分神经管缺陷组与正常对照组.结果 与正常组比较,神经管畸形组血清中有8种蛋白质高表达,4种蛋白质低表达;尿液中有4种蛋白质高表达,1种蛋白质低表达;羊水中有6种蛋白质高表达,1种蛋白质低表达.4种蛋白质峰用于建立决策分类树诊断模型,血清诊断灵敏度88.20%,特异度100%;尿液诊断灵敏度80.00%,特异度93.33%.结论 血清和尿液蛋白质谱的高灵敏度和特异度提示表面增强激光解析/离子化飞行时间质谱结合分类与回归树分析能够筛选神经管缺陷胎儿和正常对照.     

SELDI-TOF质谱技术分析乳腺癌血清蛋白质谱的变化

目的 研究乳腺癌患者血清蛋白质的变化,建立灵敏度和特异度高的乳腺癌诊断模型.方法 利用SELDI-TOFMS技术对194例乳腺癌患者和60例正常人血清蛋白质分别进行检测,IMAC30芯片结合蛋白质后,用蛋白芯片仪读取数据,分析得到区分乳腺癌患者和正常人的树状分类规则,并构建诊断模型.结果 M11368、M7768、M2943等3个蛋白质组成的模型1可将2组准确分组,灵敏度和特异度分别为94.8%(184/194)和96.7%(58/60);以M11368蛋白质单独组成诊断模型2进行区分,灵敏度和特异度分别为89.69%(174/194)和93.33%(56/60).结论 SELDI-TOFMS技术可以应用于乳腺癌的诊断.     

非小细胞肺癌淋巴转移血清蛋白指纹图谱分析

目的 应用表面增强激光解析离子化-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)技术获得区分非小细胞肺癌患者淋巴结转移的诊断模型及血清特异性蛋白.方法 应用弱阳离子蛋白芯片CM10及SELDI-TOF-MS技术检测84例肺癌患者血清中蛋白的相对含量(其中N0、N1、N2患者分别为35例、19例和30例),从淋巴结转移(N0组对比N1+N2组)和纵隔淋巴结转移(N0+N1组对比N2组)两方面进行分析,分别建立诊断模型.结果 在随机抽取50例构建的模型中,诊断淋巴结转移组病例的灵敏度和特异度分别为96.3%(26/27)和95.7%(22/23),同时进行盲法验证;随后将15例病理确认第10至14站淋巴结均无转移的N0病例与49例出现淋巴结转移患者(N1+N2)对比构建模型,预测转移的灵敏度和特异度别为77.6%和93.3%,其中相对分子质量6682等6个蛋白峰有显著差异;而诊断纵隔淋巴结转移模型的灵敏度为80.0%(24/30),特异度为77.8%(42/54).结论 SELDI-TOF-MS技术在预测非小细胞肺癌患者淋巴结转移方面具有应用价值,而该诊断模型以及与转移相关的蛋白需进一步研究证实.     

蛋白质组学技术在胃癌诊断中的应用及临床意义

目的应用SELDI蛋白质芯片检测胃癌患者血清蛋白质指纹图谱，筛选候选肿瘤标志物以建立诊断模型，并探讨其诊断早期胃癌的临床意义。方法表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱（SEL-DI-TOF-Ms）技术及其配套蛋白质芯片检测40例胃癌患者和30例健康人的血清蛋白质组图谱，运用判别分析处理数据筛选标志物并建立诊断模型。结果8592m／z、13725m/z,8678m/z等3个蛋白质峰组合所构建的诊断模型能达到鉴别胃癌患者和健康人的最佳诊断效果，灵敏度为90％（36／40），特异性为86．5％（26／30）。结论SELDI蛋白质芯片技术在胃癌的诊断尤其是早期诊断、术前分期及候选肿瘤标志物筛选等方面具有一定价值，值得进一步研究。     

SELDI-TOF-MS蛋白芯片技术在宫颈癌早期诊断和鉴别诊断中的应用

目的 采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片技术检测宫颈浸润癌和原位癌患者血清蛋白质指纹图谱,通过差异蛋白组学筛选特有的蛋白标记物.方法 应用SELDI-TOF-MS技术和WCX2(弱阳离子)芯片采集74例宫颈癌(44例宫颈浸润癌和30例宫颈原位癌)患者和51例健康人血清蛋白质指纹图谱,采用Biomarker Wizard软件筛选差异蛋白,应用Biomarker patternsoftware 5.0.2版建立诊断模型,并盲法验证其诊断效率.结果 宫颈癌患者与对照组血清蛋白质指纹图谱有12个差异表达的蛋白质峰(P<0.05),筛选出分子量分别为5642、5912、5905、5660、2288和8700 Da 6个标志蛋白,将125例血清随机分为30例宫颈癌和30例健康人血清作为训练组用于建立人工神经网络(ANN)模型,44例宫颈癌和21例健康人血清作为验证组,其对宫颈癌的诊断敏感性为95.45%,特异性为95.23%.宫颈浸润癌与原住癌血清蛋白质谱有16个差异表达的蛋白质(P<0.01),筛选出分子量分别为13776、2796、2697、2070、2768和9222 Da 6个标志蛋白,随机将15例宫颈浸润癌和15例原位癌血清分为训练组,29例浸润癌和15例原位癌作为验证组,其鉴别宫颈浸润癌的敏感性为93.10%.特异性为93.33%.宫颈原位癌患者与对照组血清蛋白质谱比较有6个差异表迭的蛋白质(P<0.05),分别随机选取15例宫颈原位癌和15例健康人血清作为训练组,15例原位癌和36例健康人血清作为验证组,其诊断宫颈原位癌的敏感性为60%,特异性为98.08%.结论 血清蛋白质谱技术可望用于宫颈浸润癌和原位癌的鉴别,标志蛋白的鉴定可能对宫颈癌浸润机制的探讨和新的治疗手段的开展具有重要的指导意义.     

CM10蛋白质芯片在鼻咽癌血清蛋白组学诊断模型的建立

目的 建立鼻咽癌血清蛋白组学诊断模型.方法 采用CM10蛋白质芯片,应用SELDI-TOF-MIS技术对28例鼻咽癌患者血清蛋白组学检测.结果 从鼻咽组与健康对照组中筛选出7个蛋白质荷比(n/z)分别为2509、2803、3953、6702、7588、7659和7843,建立鼻咽癌诊断模型,其敏感性为90％ (18/20),特异性为92.86％( 26/28).结论 通过CM10蛋白芯片建立了鼻咽癌诊断模型,该模型在鼻咽癌癌的诊断中具有较高的敏感性和特异性.     

血清蛋白指纹图谱筛选食管鳞癌特异相关性蛋白与临床病理因素关系分析

目的应用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测食管鳞状细胞癌患者血清蛋白指纹图谱,分析特异相关性蛋白与临床病理因素的关系。方法 144例经手术后病理证实的食管鳞状细胞癌患者,用弱阳离子交换芯片(WCX2)检测各血清标本获得血清蛋白指纹图谱,用Biomarker Wizard筛选差异峰;比较不同年龄、临床分期、淋巴结转移及食管外膜侵犯各组差异有统计学意义的蛋白峰。结果年龄40～60岁(77例)和>60岁(67例)患者表达的蛋白差异峰差异无统计学意义(>0.05)。28例I期与51例III期患者比较发现10个差异峰差异有统计学意义(<0.05);28例I期与6例IV期患者比较发现1个差异峰差异有统计学意义(<0.05)。而28例I期与59例II期患者比较,未发现差异峰差异有统计学意义(>0.05)。69例淋巴结转移和75例无淋巴结转移患者比较,发现5个差异峰差异有统计学意义(<0.05)。53例无外膜浸润和91例有外膜浸润患者比较,发现有9个差异峰差异有统计学意义(<0.05)。结论应用SELDI-TOF-MS技术检测分析食管鳞状细胞癌患者血清蛋白指纹图谱,对个体化治疗、预后判断有一定的预测提示作用。     

河南食管癌高发区青年食管癌患者食管鳞癌组织雌激素和孕激素受体的表达

目的：探讨河南食管癌高发区青年食管癌患者（≤40岁）食管鳞癌组织中雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）的表达变化特征。方法：采用免疫组织化学ABC法，检测43例高发区青年食管癌患者手术切除标本ER和PR表达变化。结果：高发区青年食管癌患者食管癌组织中雌激素受体阳性率为47％，孕激素受体的阳性率为7％。EP、PR阳性率与组织分化程度、性别、淋巴结转移无关。结论：食管癌高发区青年食管癌患者癌组织中有较高的ER表达，而PR阳性表达明显低于ER，提示ER变化是青年食管癌患者频发的分子事件，进一步了解血清和组织雌、孕激素水平和ER的变化关系，将有助于加深对食管癌变机制的了解。     

有、无淋巴结转移食管癌患者外周血中淋巴细胞肝素酶基因表达比较

目的 :比较有、无淋巴结转移食管癌患者手术前、后外周血中淋巴细胞肝素酶基因表达水平。方法 :采用逆转录聚合酶链反应技术对 2 1例有淋巴结转移、33例无淋巴结转移的食管癌患者手术前、后外周血及 7例正常人外周血中淋巴细胞肝素酶表达水平进行检测。结果 :2 1例淋巴结转移患者 1 9例肝素酶基因阳性表达 ,33例无淋巴结转移的食管癌患者 1 0例肝素酶基因阳性表达。 1 9例有淋巴结转移的肝素酶基因阳性食管癌患者手术前、后外周血中淋巴细胞肝素酶基因表达水平 (9.91± 2 .4 8,9.33± 2 .2 5 )高于 1 0例未发生淋巴结转移的肝素酶基因表达水平 (8.98±2 .0 1 ,8.87± 1 .97) (P <0 .0 1 ) ;而手术前后外周血中淋巴细胞肝素酶基因表达水平差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。 7例正常人外周血中淋巴细胞肝素酶均呈阴性表达。结论 :食管癌患者外周血中淋巴细胞肝素酶基因表达水平与食管癌淋巴结转移有关 ,对食管癌患者外周血中此基因表达水平的检测可能成为预测其转移与否的指标     

食管鳞癌患者组织和血清中VEGF-C的表达

目的:检测食管鳞癌患者组织和血清中VEGF-C的表达,探讨其在判断淋巴结转移中的作用.方法:62例食管鳞癌患者和10例正常人的血清,用酶联免疫吸附法检测血清中VEGF-C的含量,用免疫组织化学法检测食管癌组织中VEGF-C的表达,并进行ROC曲线分析.结果:食管鳞癌组织中VEGF-C在有淋巴结转移者的阳性表达率高于无转移者(P=0.015),肿瘤浸润深度T3者阳性表达率高于T1-2者(P=0.039);组织学检查诊断淋巴结转移的灵敏度为55.5%,特异性为76.1%,准确率为67.8%.食管鳞癌患者血清VEGF-C的水平高于正常人(P＜0.0001),有淋巴结转移者高于无转移者(P＜0.0001),肿瘤浸润深度T3者高于T1-2者(P=0.009);如果血清VEGF-C水平以2 474.5 ng/L为界值,则诊断淋巴结转移的灵敏度和特异性分别为85.0%和73.8%,准确率77.4%.结论:血清VEGF-C检测是判断食管鳞癌淋巴结转移的可靠标志物.     

基质金属蛋白酶-9与食管鳞癌预后的关系

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)与食管癌预后之间的关系。方法:采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中MMP-9的含量。结果:MMP-9在淋巴结转移的食管癌患者血清中的含量为814.67±83.41μg/ml,在无淋巴结转移的食管癌患者血清中的含量为706.22±61.37μg/ml。MMP-9在淋巴结转移的食管癌患者血清中的含量显著高于无淋巴结转移的食管癌患者(P<0.05)。MMP-9在生存期>3年患者血清中的含量为716.22±54.18μg/ml,在生存期<3年患者血清中的含量为825.39±47.23μg/ml。MMP-9在生存期>3年患者血清中的含量显著低于生存期<3年的患者(P<0.05)。结论:MMP-9在食管癌的转移过程中发挥着重要作用,对判断预后有重要意义。     

血清VEGF-C水平作为食管鳞癌淋巴结转移标志物的临床研究(英文)

目的血管内皮生长因子C(VEGF-C)是一特异的淋巴管生长因子,已有的研究发现它在肿瘤细胞转移至淋巴结和远处器官的过程中起一定作用。本研究的目的在于通过检测食管鳞状细胞癌患者血液循环中VEGF-C的含量,探讨其在判断淋巴结转移中的作用。方法收集62例食管鳞癌术前患者和10例正常人的血清,用酶联免疫吸附实验检测VEGF-C的含量,并收集相应的临床资料。结果食管鳞癌患者的血清VEGF-C的水平高于正常人的水平(P<0.001);食管鳞癌患者中有淋巴结转移组高于无转移组(P<0.001);依据肿瘤浸润深度的分组中,T3高于T1-2(P=0.009);如果血清VEGF-C水平以2474.5pg/mL为界值,则预测淋巴结转移的敏感度和特异度分别达到了85%和73.8%。结论在食管鳞癌患者中,血清VEGF-C的水平为区分有无淋巴结转移提供了有意义的补充,是食管鳞癌淋巴结转移的可靠标志物。     

血清VEGF-C水平作为食管鳞癌淋巴结转移标志物的临床研究

目的 血管内皮生长因子C（VEGF-C）是一特异的淋巴管生长因子，已有的研究发现它在肿瘤细胞转移至淋巴结和远处器官的过程中起一定作用。本研究的目的在于通过检测食管鳞状细胞癌患者血液循环中VEGF-C的含量，探讨其在判断淋巴结转移中的作用。方法 收集62例食管鳞癌术前患者和10例正常人的血清，用酶联免疫吸附实验检测VEGF-C的含量，并收集相应的临床资料。结果 食管鳞癌患者的血清VEGF-C的水平高于正常人的水平（P〈0．001）；食管鳞癌患者中有淋巴结转移组高于无转移组（P〈0．001）；依据肿瘤浸润深度的分组中，T3高于T1-2（P=0．009）；如果血清VEGF-C水平以2474．5pg／mL为界值，则预测淋巴结转移的敏感度和特异度分别达到了85％和73．8％。结论 在食管鳞癌患者中，血清VEGF-C的水平为区分有无淋巴结转移提供了有意义的补充，是食管鳞癌淋巴结转移的可靠标志物。     

河南食管癌高发区食管和贲门癌组织中PTEN蛋白的表达

目的：探讨PTEN蛋白在食管鳞癌和贲门腺癌组织中表面变化及其与细胞分化程度及淋巴结转移的关系。方法：采用免疫组化卵白素－生物素－过氧化物酶复合物（ABC）法和组织病理学方法，分析河南食管癌高发区林州市141例食管鳞癌和贲门腺癌患者PTEN的表达状况。结果：食管鳞癌和贲门腺癌PTEN阳性率分别为47％（34／73）和43％（29／68）。随着肿瘤分化程度的升高，PTEN蛋白的表达有增高的趋势，淋巴结转移组PTEN免疫阳性率较无淋巴结转移组高，但统计分析未发现PTEN免疫阳性反应率与分化程度和淋巴结转移间存在相关性（P均大于0．05）。结论：河南食管癌高发区食管鳞癌和贲门腺癌存在一致的PTEN蛋白变化，提示2者可能具有相似的发病因素和分子机制。     

胸段食管癌淋巴结转移特点的研究

目的探讨胸段食管癌淋巴结转移的特点,指导食管癌淋巴结清除术及为术后综合治疗方案的制定提供依据。方法回顾性分析2002年1月至2004年12月河南省肿瘤医院胸外科收治的623例胸段食管癌患者的手术及病理资料,分析其淋巴结转移特点。结果全组共清除3689组淋巴结（8603枚）,淋巴结转移率47．2％,淋巴结转移度10．3％;Tis期食管癌无淋巴结转移,T1期以后各期食管癌均可见淋巴结转移。不同T分期胸段食管癌间,淋巴结转移率和转移度差异均有统计学意义（x^2=38,407,P=0．000和x^2=118．438,P=0．000）;随T分期增加,淋巴结转移率和转移度均增加,两者间存在显著相关关系（r=1,P=0．000;r=1,P=0．000）;不同病理类型的胸段食管癌间,其淋巴结转移率差异并无统计学意义（x^2=6．284,P=0．179）,而淋巴结转移度差异存在统计学意义（x^2=84．577,P=0．000）,食管腺鳞癌、腺癌、小细胞癌的淋巴结转移率及转移度均明显高于食管鳞癌;食管癌淋巴结转移具有上下双向性和跳跃性;各段食管癌均可以发生腹腔淋巴结转移,胸下段食管癌腹腔淋巴结转移率和转移度最高。结论食管癌淋巴结清除应适度,应重视对腹腔淋巴结的清除;在保证手术的相对彻底性的基础上,根据淋巴结转移趋势及其他一些指标,尽早接受合理的多学科综合治疗才应该是食管癌治疗的方向。     

皮肤鳞状细胞癌组织中埃兹蛋白和水通道蛋白3的表达

目的:探讨埃兹蛋白(Ezrin)和水通道蛋白3(AQP3)在皮肤鳞状细胞癌(SCC)组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组化染色SP法检测65例皮肤SCC(患者中男36例,女29例;高分化24例,中分化23例,低分化18例;有颈淋巴结转移9例;均无合并症且未经治疗)和20例正常皮肤组织中Ezrin和AQP3的表达情况。结果:SCC组织中Ezrin、AQP3阳性表达率分别为81.5%(53/65)和86.2%(56/65),2者在正常皮肤组织中的阳性表达率均为5.0%(1/20),SCC组织中Ezrin和AQP3阳性表达率高于正常皮肤组织(χ2分别为38.669,45.598,P均<0.001)。Ezrin的表达与SCC的分化程度有关,分化程度越低阳性表达率越高(P=0.024);且与淋巴结转移无关(χ2校正=0.022,P=0.881)。AQP3蛋白的表达与SCC的分化程度有关,随SCC分化程度的增高而升高(P=0.012);与淋巴结转移无关(χ2校正<0.001,P>0.999)。SCC组织中Ezrin和AQP3的表达呈正关联(rP=0.446,P<0.001)。结论:Ezrin和AQP3的高表达可能参与了皮肤SCC的发生、发展和转移,并与其恶性程度相关。