TTC在食品菌落总数测定中的应用

在食品菌落总数的测定中 ,菌落计数直接影响检验结果的准确性。为区别平板上菌落与食品残渣 ,在营养琼脂中加入２．３．５ -氯化三苯四氮唑 (ＴＴＣ) ,使菌落显色 ,以提高工作效率 ,减小计数误差。１材料与方法１．１材料０．５ｇ／１００ｍｌＴＴＣ溶液 :取ＴＴＣ０．５ｇ溶于纯水中并稀释至１００ｍｌ,通过滤菌器除菌后 ,盛于棕色瓶内 ,避光、避热保存 ;营养琼脂培养基 :供一般细菌培养用。１．２方法国标法 :菌落总数测定按国家食品卫生微生物检验方法ＧＢ４７８９．２ -９４［１］操作 ;ＴＴＣ法 :当营养琼脂培养基溶解后冷却至４６℃时…     

用TTC琼脂培养基测定食品中细菌总数的应用

食品中细菌总数的测定，国标法是采用普通琼脂倾注平皿培养计数法。在实际工作中，常遇到样品残渣微粒（特别是一些较难溶食品如糕点等）与细菌菌落难以区分的问题，影响了细菌计数的准确性。近年来不少学者在普通琼脂培养基中加入氯化三苯甲基四氮唑（ＴＴＣ），使菌落着色，从而将菌落与样品残渣微粒区分开来，以提高判数结果的准确性和可靠性。本文将９６份食品用此法和国标法进行细菌总数测定对照试验，结果报告如下：１材料和方法１．１材料 干燥营养琼脂：江苏省宜兴市万石培养基厂出品。 １％ＴＴＣ溶液：商品名为红四氮唑，由上海前…     

TTC──营养琼脂培养基在检测食品菌落总数中的应用

ＴＴＣ──营养琼脂培养基在检测食品菌落总数中的应用邵越细菌总数是判定食品被细菌污染的标志，检测方法采用营养琼脂培养基平板计数。为了使细菌生长显色易检，减少食品颗粒造成的细菌计数误差，我们采用细菌生长指示剂─—２．３，５─氯化三苯四氮唑（ＴＴＣ）加入营...     

TTC在测定化妆品细菌总数中的应用

化妆品细菌总数的测定是验证化妆品卫生质量的重要标志。但在进行某些化妆品的细菌总数检测时,常遇到菌落与化妆品中小颗粒难以区分的问题,以致影响实验结果的观察。为此,我们根据测定细菌脱氢酶的原理,用氯化三苯四氮唑(TTC)加以指示,使培养后的菌落呈现红色进行菌落计数,从而提高了测定化妆品细菌总数的准确性和可靠性。1 材料和方法 1.1 材料 氯化三苯四氮唑(简称TTC)由上海试剂三厂生产。卵磷脂吐温琼脂培养基(简称SCDLP琼脂培养基)由北京海淀区微生物     

关于TTC法用于食品菌落计数适用性的研究与探讨

食品卫生细菌学检验菌落总数的测定,我们一直采用国家标准推荐的普通营养琼脂倾注平皿法。但有人用ＴＴＣ法做菌落计数,使绝大部分细菌染成红色利于计数,且对菌落总数没有影响〔１、２〕。我们发现国标法菌落计数超标样品,ＴＴＣ法的检出结果明显低于国标法。为了解作...     

分值计算法在营养琼脂的质量检测中的应用

营养琼脂是微生物实验室应用最广泛的干燥培养基 ,它的质量好坏直接影响实验结果的准确性 ,本次实验采用3株指示菌在普通营养琼脂上生长的菌落直径、菌落差和生长率与质控数据比较的计算分值法对 2个厂家生产的 4个不同批次培养基进行鉴定评价和方法验证 ,现报告如下。材料与方法1材料　 4批不同营养琼脂 (本实验室购买某 2个厂家不同的 4个批次的营养琼脂 ) ,按要求称量配制 ,12 1℃灭菌 15分钟 ,每只平皿倾注 2 0ｍｌ,对照培养基 1号 (浙江省疾控中心消杀科提供 )。2　菌落计数与直径测量　试验菌为鼠伤寒沙门氏菌(ＡＴＣＣ ,5 0 0 13)。…     

2,3,5-三苯基氯化四氮唑浓度对细菌菌落总数测定的影响

目的了解2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)浓度对细菌菌落总数测定的影响,以规范该法在食品细菌菌落总数测定中的应用。方法采用细菌定量培养的方法,观察含不同浓度TTC营养琼脂培养基对不同细菌生长形成菌落数的影响。将不同稀释度的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌纯培养物各1mL,分别依次接种到TTC质量浓度分别为0.02、0.05、0.10g/L的平板计数琼脂中,同时设空白对照和盐水试剂对照,观察菌落生长状况。结果大肠埃希菌在不同TTC浓度培养基中均能正常生长,其形成菌落数不受影响。培养基中含TTC质量浓度≥0.05g/L对金黄色葡萄球菌菌落数形成有明显影响,≥0.02g/L对蜡样芽胞杆菌的菌落数形成有明显影响。结论培养基中含TTC浓度≤0.10g/L对大肠埃希菌生长基本无影响,0.02g/L对金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌生长均会产生影响。     

TTC琼脂平板法检测生活饮用水细菌总数的探讨

氯化三苯甲基四氮唑(2.3.5-Triphenyl-tetrazolium chloride,TTC)琼脂平板是在营养琼脂中加入TTC指示剂后制成的,我们将其应用于生活饮用水细菌总数的检测,取得了较好的效果,同时在培养时间上进行探讨,现报告如下。1 材料与方法 样品来源:送本站检验的深井水、浅井水、山泉水、二次供水等样品149份。 实验方法:营养琼脂法细菌和总数的检测与评判按GB5750-85。TTC法仅在营养琼脂中加入1％TTC溶液,使其最终浓度为0.003％,于12磅15分钟高压灭菌,置冰箱备用。     

氯化消毒饮用水中损伤大肠菌的检测

氯化消毒饮用水中 ,有许多受损伤的大肠菌。这些受损伤的大肠菌在适宜条件下仍能发育为正常菌落 ,现行培养法只能回收不足 30 %的损伤菌[1] ,因此会影响水卫生评价的准确性。为提高大肠菌的检出率 ,对氯化消毒饮用水大肠菌的损伤率进行了测定 ,并用增菌培养法和多管发酵法对损伤大肠菌的检测进行了比较。结果报告如下。1　材料与方法1 1　抽滤装置　滤膜 (直径 3 5ｃｍ)用前灭菌。增菌培养基 (在Ｍ＿ＦＣ培养基上临用前 1ｈ加注薄层营养琼脂 ) ,乳糖胆盐发酵管。氯化消毒水样 (采样时加硫代硫酸钠脱氯处理 )。1 2　大肠菌损伤率的测定　将每…     

影响蜜饯菌落总数测定因素的实验报告

目前,蜜饯菌落总数测定的方法,是按GB4789检验方法进行,菌落总数测定的培养时间为24±2h。但我们在实践中发现,检样在同一条件下,因培养时间和检样酸度不同,所得结果也不同,现将实验结果报告如下,有待进一步探讨。 1 材料与方法 1.1 操作方法:按GB4789进行菌落总数测定。 1.2 检样:日常送检的蜜饯、凉果。 1.3 培养基:营养琼脂培养基:营养琼脂(上海市医学化验所,批号84212)。 1.4 菌落总数计数方法:用肉眼和10倍放大镜,同一检样结果由两名检验人员分别计数。     

沙门氏菌—志贺氏菌培养基的质量研究

沙门氏菌—志贺氏菌培养基(简称ＳＳ琼脂)是分离肠道致病菌的最常用的强选择性培养基,其内在质量的优劣直接影响到肠道致病菌的检出率。本研究采用计算分值方法对ＳＳ琼脂进行质量比较,并采用模拟样品进行致病菌(鼠伤寒沙门氏菌和痢疾杆菌)分离比较,现将结果报告如下。1　方法11　菌落计数和菌落直径测量　试验菌株为鼠伤寒沙门氏菌(ＡＴＣＣ50013)、痢疾杆菌(ＡＴＣＣ12022)、大肠杆菌(ＡＴＣＣ44131)。试验时将各菌株分别接种于营养肉汤中,于37℃培养18～24小时,取一接种环营养肉汤菌悬液,接种营养琼脂,37℃培养18～24小时,挑取单个菌落,…     

固体培养基螺旋接种和涂布接种方法比较研究

目的评价固体培养基螺旋接种代替涂布接种方法的可能性。方法以国内外6个厂家的7种固体培养基(麦康凯琼脂、亚硫酸铋琼脂、HE琼脂、沙门菌显色培养基、平板计数琼脂、营养琼脂、胰蛋白胨大豆琼脂),分别用螺旋平板法与传统的涂布平板法对7株不同菌株(鼠伤寒沙门菌、伤寒沙门菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、福氏志贺菌)进行比对测定。结果对用2种接种方法在各培养基上生长的菌落数进行方差统计,金黄色葡萄球菌菌株在平板计数琼脂和营养琼脂上差异有统计学意义(P0.05),其余各菌株基本上在7种培养基上差异均无统计学意义(P0.05)。结论对大部分菌株的接种,螺旋平板法可代替传统的涂布平板的接种方法。     

五种定期移植法保存非苛养菌的效果比较

菌种保存是从事微生物研究、检验及教学工作中所不可缺少的重要环节 ,定期移植保存法 (又称传代培养保存法 )为最常用的菌种保存方法 ,由于其操作简便 ,无需特殊设备和技术 ,因而被各级微生物实验室和检验室所普遍采用。该法包括斜面培养、半固体穿刺培养、液体培养等多种方法 ,我们就常用的 5种定期移植方法对非苛养细菌的保藏效果进行了长达 6年的对比观察 ,现报告如下 :1　材料与方法1 1　菌种　共 14种 (见附表 ) ,均由中国医学细菌保藏中心(ＣＭＣＣ -Ｂ)提供。1 2　培养基　营养肉汤培养基、半固体琼脂培养基、营养琼脂培养基 ,均购自…     

氯化三苯四氮唑对金黄色葡萄球菌抑制性的实验观察

在细菌检验工作中，菌落总数测定是用于检验样品被污染程度的一项基本指标。我国的食品检验国家标准采用普通琼脂倾注法，但是，在实际工作中，往往会因为被检验样品中含有沉渣（食品中的碎屑、化妆品中的颗粒等），其形态类似细菌，给菌落计数工作造成一定的困难。我国的化妆品国家标准《化妆品卫生规范》2007版中介绍：在每100mL卵磷脂吐温80营养琼脂培养基中可加入0．5％氯化三苯四氮唑（TIC）溶液1mL用于菌落总数的测定的实验方法拉，其原理是检样中如有细菌存在，培养后细菌在脱氢酶的作用下，TTC接受氢而变成红色，使细菌着色，而检验样品中如存在碎屑或颗粒无颜色变化，便于菌落计数。     

一种在菌落总数测定中防止芽胞杆菌菌落弥漫生长的方法

目的研究一种在菌落总数测定中利用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)有效防止芽胞杆菌弥漫生长的方法。方法取适宜稀释度的枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)、蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)、大肠埃希菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus),在平板计数琼脂培养基中分别添加0.01%、0.05%、0.08%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.8%、1.0%TTC水溶液,同时以不添加TTC的计数琼脂培养基作为对照,观察细菌的生长状况。结果 TTC浓度为0.2%～0.3%时,能有效防止枯草芽胞杆菌和蜡样芽胞杆菌在计数琼脂培养基上出现菌落弥漫生长,同时对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的生长无显著影响。结论菌落总数测定时,在培养基中加入0.2%～0.3%浓度的TTC,可以有效防止芽胞杆菌菌落出现弥漫现象,便于准确计数。     

应用TTC琼脂培养基对食品样品中菌落生长情况的初步观察

用普通营养琼脂作培养基进行食品样品的菌落计数时。往往因某些菌落太小或细菌菌落的形态与样品颗粒相似。导致菌落与样品颗粒不易区分。使计数结果出现误差，影响计数结果的准确性。该文利用嗜中温性需氧菌在其新陈代谢过程中产生的琥珀酸脱氢酶可以使无色的氯化三苯四氮唑（TTC）还原为红色的甲腊的特性，将氯化三苯四氮唑作为细菌生长的指示剂．对同一份绿豆糕样品进行了菌落生长情况的初步观察。     

培养基的不同储存条件对细菌检测结果的影响

营养琼脂培养基是日常工作中最常用的细菌计数用培养基,按照国家标准[1],营养琼脂培养基配制后宜新鲜使用或保存于冰箱冷藏室48 h内使用,而在实际工作中较难做到。为此,我们用不同温度和时间来存放配制好的营养琼脂培养基,并观察各种存放条件对细菌检测效果的影响,现将结果报道如下。1材料与方法1.1材料营养琼脂培养基干粉购自杭州天和微生物试剂有限公司;实验用金黄色葡萄球菌、大肠杆菌由本室分离鉴定,用半固体培养基保存于4℃冰箱。1.2方法[2]按常规法配制倾注的营养琼脂培养基用密封筒包装,分别于冰箱冷藏室(4℃)、恒温箱(18~22℃)及室…     

对市购SS琼脂的质量评价

ＳＳ琼脂是分离肠道致病菌最常用的强选择性培养基。所以ＳＳ琼脂的内在质量优劣直接影响到肠道致病菌的检出率。本次实验采用浙江省卫生防疫站杨更发研究的分值计算法[1～5]对市场购入的几个同不企业生产、不同批号的ＳＳ琼脂进行质量检测评价,现将结果报告如下。1　材料与方法11　材料111　被检测ＳＳ琼脂由市场购取。112　对照培养基1号(浙江省卫生防疫站提供)113　试验菌株　鼠伤寒沙门氏菌(ＡＴＣＣ50013)痢疾杆菌(ＡＴＣＣ12022)、大肠杆菌(ＡＴＣＣ44131)。12　方法121　菌落计数和菌落直径测量[2]　试验时将试验菌株分别接种于营养…     

TTC嗜盐培养基的实验观察

嗜盐性试验是弧菌科等细菌鉴定的一项重要鉴别试验 ,在实际应用中 ,尤其是市售嗜盐微量生化反应管的使用 ,常常遇到难以判断的结果即细菌真正繁殖的混浊与因接种菌量过量的混浊之区别。根据细菌在繁殖过程中能将 2、 3、5—氯化三苯四氮唑 (ＴＴＣ)还原成红色的甲的原理 ,我们将ＴＴＣ加于嗜盐培养基中作为指示剂 ,观察培养基的颜色变化。同时对ＴＴＣ浓度、培养基高压灭菌、保存条件作了一些实验研究。现将结果报告如下。材料与方法1　培养基　嗜盐性培养基配制按文献[1 ] 进行 ,根据实验设计选择含ＮａＣｌ为 0 %、 3%、 6 %及 10 % 4种…     

5种营养琼脂培养基细菌生长情况比较

营养琼脂培养基是微生物实验中最为常见的培养基。为了解不同单位生产的营养琼脂培养基对细菌生长情况是否存在影响 ,我们选用了枯草芽胞杆菌黑色变种作为试验菌株 ,对 5种营养琼脂培养基进行了实验比较。材料与方法1　枯草芽胞杆菌黑色变种ＡＴＣＣ9372 ,取其第七代琼脂斜面新鲜培养物接种加有 0 0 0 1%氯化锰的营养琼脂培养基上 ,于 5 6℃培养 5天 ,放置室温 3天 ,镜检芽胞达 95 %以上 ,用 0 0 3Ｍ磷酸盐缓冲液 (ｐＨ7 2 )洗下 ,转入放有玻璃珠的瓶内振摇 5分钟 ,将芽胞悬液放 80℃水浴中 10分钟后 ,离心 (30 0 0ｒｐｍ ,15分钟 ) ,取沉…