PCR法与ELISA法检测丙型肝炎病毒及乙型肝炎病毒比较5

目的：探讨PCR与ELISA2种方法检测丙型肝炎病毒和惭型肝炎病毒的差异和临床意义。方法：随机抽取无偿献血者标本300份，分为ALT升高组和ALT正常组，用ELISA法检测抗－HCV和HbsAg，用RT－PCR检测HCV－RNA和HBV－DNA。结果：抗－HCV阳性标本26例阳性率为8．7％，经RT－PCR检测，HCV－RNA均为阳性，抗HCV阴性的标本中有2例HCV－RNA为阳性。HCV－RNA的阳性率为16％，2种方法检测结果差异有统计学意义（P＜0．01）；300份标本中HBsAg阳性和HBV－DNA阳性比率分别为11．3％和12．7％，两者无明显差异（P＞0．05）。结论：ELISA方法检测丙型肝炎病毒存在一定的漏检现象，应用RT－PCR检测HCV－DNA利于早期诊断，也是筛选献血员是否携带丙型肝炎病毒的较可靠方法。     

455例丙型肝炎病毒抗体核糖核酸定量检测结果分析

目的探讨丙型肝炎患者血清丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)结果与丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)定量的相关性。方法采用酶联免疫吸咐实验(ELISA)和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)技术,对455例同时做抗-HCV和HCV-RNA的丙型肝炎患者检测。结果455份标本中有85份HCV-RNA含量高于1000拷贝/ml,91份抗-HCV阳性。经统计分析,两者有明显的相关性。结论血清抗-HCV与血清HCV-RNA之间有较好的一致性;抗-HCV检测和HCV-RNA检测均有一定的局限性,同时检测抗-HCV和HCV-RNA可提高丙型肝炎患者的检出率,为其诊断和治疗提供帮助。     

核酸检测对酶联免疫吸附试验法检测乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎病毒抗体结果呈灰区及弱反应性标本复检的必要性探讨

目的探讨乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)酶联免疫吸附试验(ELISA)检测呈灰区、弱反应性标本采用核酸检测(NAT)的复检情况。方法选取2011年1月‐2016年12月于该院就诊并经ELISA法检测HBsAg、抗-HCV结果呈灰区及弱反应性的标本741例为研究对象,所有研究对象均采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)复检,对两种方法检测结果进行比较。结果 ELISA法检测HBsAg、抗-HCV双试剂灰区标本HBV-DNA、HCV-RNA阳性率均高于单试剂灰区,差异均有统计学意义(P0.05);ELISA检测HBsAg和抗-HCV单试剂、双试剂弱反应性标本NAT检测阳性率比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论 ELISA法检测HBsAg、抗-HCV结果呈灰区、弱反应性标本存在一定的HBV-DNA、HCV-RNA阳性漏检和误诊,NAT检测对于HBV和HCV感染的早期诊断、治疗以及避免医疗纠纷的发生具有重要作用。     

丙型肝炎病毒母婴传播的研究

目的:研究丙型肝炎病毒(HCV)母婴传播机率及感染方式.方法:用ELISA和RT-PCR法检测母婴血清及母亲乳汁、羊水、唾液的抗-HCV IgG及HCV-RNA,循环测序法测定母婴HCV-cDNA序列.结果:对1 521例孕妇筛查,其中15例抗-HCV IgG阳性(12例HCV-RNA阳性).所生15例婴儿,随访结果仅1例抗-HCV IgG持续阳性,出生时2例血清HCV-RNA阳性者中的1例抗-HCV IgG及HCV-RNA持续阳性.HCV母婴传播率为16.7%(2/12).其中一对母婴间HCV-cDNA序列同源性为100%.羊水、乳汁、唾液抗-HCV及HCV-RNA检出率分别为100%和25.0%,53.5%和16.7%,100%和0.0%.结论:HCV母婴传播可能发生于宫内或分娩时,羊水可能是引起HCV母婴传播的重要因素,乳汁、唾液引起传播可能性较小.     

荧光定量聚合酶链反应检测丙型肝炎病毒的临床应用

目的:用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)测定丙型肝炎病毒在临床的应用。方法:用FQ-PCR检测378例怀疑HCV感染的临床标本,并同时采用ELISA检测抗-HCV,用生化仪测定ALT水平,了解样本中HCQ-RNA含量与抗-HCV及ALT的相关性。结果:378份标本中216份HCV-RNA含量高于103拷贝/ml,348份抗-HCV阳性,156份ALT异常,经统计分析每两者间其有明显相关性。结论:FQ-PCR技术检测HCV-RNA特异性强,灵敏度高,具有良好的应用价值。     

抗-HCV抗体与HCV-RNA定量检测相关性分析

目的:了解酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗-HCV抗体和实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测HCV-RNA在丙型肝炎病毒感染者血清中结果的相关性。方法:同时采用ELISA法和RT-PCR法对87例疑为丙型肝炎患者和35例健康体检者的血清进行抗-HCV与HCV-RNA检测。结果:112份标本中抗-HCV阳性67例,阳性率为59.8%;HCV-RNA阳性78例,阳性率为69.6%;RT-PCR法阳性率高于ELISA法,但两者阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:抗-HCV抗体检测经济、迅速,但治疗过程中无法检测病毒载量且存在一定假阳性;HCV-RNA定量检测操作繁琐,费用较高,但准确度高,在实际工作中,两种方法同时检测,优势互补,减少漏诊率。     

丙型肝炎病毒抗体的两种检测方法结果比较

目的 比较双抗原夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法与间接ELISA法检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)灵敏度和特异性,为无偿献血的血液筛查提供参考依据.方法 采用双抗原夹心ELISA法和间接ELISA法分别对1500份无偿献血者标本(经血液筛查抗-HCV阴性标本1416份,抗-HCV阳性标本84份)进行检测,记录标本结果与丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)的符合性,评价两种检测方法的差异.结果 双抗原夹心ELISA法检测84份抗-HCV阳性标本的灵敏度为97.6%(82/84),间接ELISA法的阳性检出率为85.7%(72/84),双抗原夹心ELISA法灵敏度高于间接ELISA法,差异有统计学意义(P<0.05);双抗原夹心ELISA法的特异性为100.0%(1416/1416),高于间接ELISA法的85.9%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 双抗原夹心法的灵敏度和特异性优于间接法,可降低间接ELISA法引起的假阳性,减少血液不必要浪费,同时也避免了献血者淘汰.     

丙型肝炎病毒核心抗原检测的临床应用价值

目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原(HCV-Ag)ELISA法检测的临床应用价值.方法 采用ELISA法检测81份怀疑为HCV感染患者血清中的HCV核心抗原,并将HCV核心抗原检测与HCV-RNA PCR法和抗-HCV检测进行比较.结果 HCV-RNA PCR、HCV-Ag、抗-HCV阳性率分别为45.68%、42.00%、37 03%;测结果比较HCV-Ag 检测符合率92.59%(75/81),假阳性率3.70%(3/81),假阴性率3.70%(3/81);抗-HCV检测符合率82.71%(67/81),假阳性率4.94%(4/81),假阴性率9.87%(8/81).结论 HCV-Ag与HCV-RNA PCR检测符合性较高,可作为丙型肝炎病毒复制的标志,早期检测可明显缩短窗口期,ELISA法检测HCV-Ag方法简便、快捷、价廉,所需设备简单,适合大规模筛查和多数基层医院,比HCV-RNA PCR检测更具优越性.     

151例血清抗-HCV阳性患者的HCV RNA检测分析

目的:探讨丙型肝炎抗体(抗-HCV)和丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)的关系.方法:研究对间接ELISA法检测抗-HCV阳性患者的血清进行HCV RNA检测(采用RT-PCR法).结果:151例血清抗-HCV阳性患者有85例HCV RNA阳性,阳性率为56.2%.另外,还观察了40例抗HCV阳性病人的双份血清,急性期第一份血清ALT升高、HCV RNA为阳性;经抗病毒治疗后的第二份血清,部分病人ALT复常,HCV RNA阴转,另外部分病人反复ALT异常,HCV RNA则始终为阳性.结论:HCV RNA能鉴别活动性HCV感染及非活动性感染,可为抗病毒药物疗效的评价和临床合理用药提供依据.     

丙氨酸转氨酶升高者肝炎病毒感染情况调查

用ELISA法测定了154份丙氨酸转氨酶(ALT)升高者血清的抗-HAVIgM、HBsAg、抗-HCV.结果表明,抗-HAVIgM、HBsAg、抗-HCV的阳性率分别为7.8%、14.3%、3.2%;抗-HAVIgM阳性率随ALT值的升高而增加;男女HBsAg阳性率有显著性差异;HBV、HCV混合感染发生率为0.6%.提示ALT升高者中存在着甲、乙、丙型肝炎病毒的的感染,以乙肝病毒感染为主,不同型肝炎病毒存在混合感染.     

双抗原夹心法与间接酶联免疫吸附试验法检测丙型肝炎病毒抗体的应用效果分析

目的探讨双抗原夹心法与间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测丙型肝炎病毒抗体的应用效果,旨在分析两种检测方法的灵敏度及特异度,为血液筛查提供参考。方法选取2016年3月至2018年3月我县无偿献血者血液标本1200例作为研究对象,其中抗丙型肝炎抗体(抗-HCV)阴性标本1123例,抗-HCV阳性标本77例。采用双抗原夹心法与间接ELISA法分别进行检测,记录检测结果与丙型肝炎病毒核酸符合率,并进行统计学分析。结果77例抗-HCV阳性标本中,双抗原夹心法阳性检出率96.1%(74/77)高于间接ELISA法87.0%(67/77),差异具有统计学意义(P<0.05),双抗原夹心法检测及间接ELISA法分别有3份和10份假阴性样本出现;双抗原夹心法检测准确度、灵敏度、特异度均高于间接ELISA法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在检测丙型肝炎病毒抗体的方法中,相比于间接ELISA法,双抗原夹心ELISA法的检测结果较为理想,能够有效提高其阳性检出率、准确度、灵敏度及特异度。     

ALT作为血液质量判断指标的评价

目的:评价丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)作为血液质量判断指标的价值。方法:对经过初筛合格且ALT>40U/L的标本使用ELISA方法检测HBsAg、抗-HCV,利用核酸扩增检测技术(nucleic Acid amplification tech-niques,NAT)对标本进行HBV-DNA和HCV-RNA的检测。结果:3 675份无偿献血者标本中有397份(10.80%)ALT>40U/L。在这397份标本中有389份(97.99%)的HBsAg和抗-HCV定性均阴性、HBV-DNA和HCV-RNA定量均呈现低拷贝数。而另8份(2.01%)标本的HBV-DNA或HCV-RNA呈现高拷贝数,其中3份标本HBsAg定性阳性、HBV-DNA呈现高拷贝数;4份标本抗-HCV定性阳性、HCV-RNA呈现高拷贝数;1份标本HBV-DNA呈现高拷贝数,HBsAg和抗-HCV定性阴性。结论:ALT作为判断血液质量的指标将造成大量血液资源的浪费。采用NAT作为判断血液质量指标,既能保证血液质量,又能保证血液不浪费。     

丙型肝炎病毒母婴垂直传播的研究

目的了解丙型肝炎病毒(HCV)母婴垂直传播情况.方法采用酶联免疫法(ELISA)和聚合酶链反应(PCR)检测1047例肝病孕产妇血清丙型肝炎病毒抗体(抗～HCV)和丙型肝炎病毒基因(HCV～RNA),对HCV感染产妇血清进行HCV分型及半定量分析.再对HCV感染产妇的丈夫静脉血及新生儿脐血、出生后24小时内、1、6、12个月股静脉血进行抗-HCV、HCV-RNA和HCV分型的检测.结果1047例肝病孕产妇中有12例(1.15%)HCV感染,其丈夫血清抗-HCV、HCVRNA均为阴性,而12名新生儿中有3例脐血及出生后24小时内外周血均抗-HCV阳性,其中2例HCV-RNA同时阳性,仅1例婴儿在出生后1、6、12个月时检测抗-HCV与HCV-RNA均阳性,且与其母所感染的HCV基因型相同,其余2例婴儿出生后1个月均阴转.本组HCV母婴传播率为8.3%.结论支持我国存在HCV母婴垂直传播.     

湛江地区初次无偿献血者HCV感染情况研究

目的:检测湛江地区初次献血者丙型肝炎病毒(HCV)-RNA,调查初次献血人群HCV感染的"窗口期"情况以及感染HCV的具体基因型.方法:分别采用ELISA法和RT-PCR法检测2 357名在2004年1～12月初次无偿献血者感染HCV的情况.并把经RT-PCR法检测阳性的标本进行基因型检测.结果:在2 357名初次献血者中,ELISA法阳性率为1.64%,而RT-PCR法的阳性率为1.86%,2种方法符合率为99.5%,二者间无显著性差异(P＞0.05).感染者中2型基因型为84.1%,3型基因型为13.6%,2/3混合型为2.27%.结论:RT-PCR法检测血液HCV-RNA能早期发现"窗口期"HCV感染者,湛江地区初次无偿献血者感染丙型肝炎病毒的基因型以2型和3型为主.     

抗-HCV和HCV-RNA检测及其与ALT的相关性分析

目的探讨化学免疫发光法(CLIA)定量检测抗-HCV和FQ-PCR法检测HCV-RNA含量与丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平的相关性。方法用CLIA定量筛选抗-HCV阳性的100例病人标本,以荧光定量PCR法检测HCV-RNA含量和酶速率法检测ALT浓度水平,并对所得数据进行统计分析。结果在100份抗-HCV阳性标本中,检出HCV-RNA阳性者76例,阳性率为76%。随着抗-HCV的S/CO值增高,HCV-RNA检出率增高较明显;ALT水平与HCV-RNA含量无显著相关性(P>0.05),但ALT异常率与HCV-RNA含量呈正相关。结论在HCV诊断与疗效观察中,血清抗HCV、HCV-RNA和ALT指标各有利弊,3者有机结合能正确诊断和预测肝脏损伤及评价疗效。     

探讨丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）和丙型肝炎病毒核酸（HCV-RNA）荧光定量检测在丙型肝炎诊断中的临床应用价值

目的探讨丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）和丙型肝炎病毒核酸（HCV-RNA）荧光定量检测在丙型肝炎诊断中的临床应用价值。方法对我院96例丙型肝炎患者同时应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测丙型肝炎抗体（抗-HCV）,应用实时荧光定量法(FQ-PCR)检测HCV-RNA。结果FQ-PCR检测阳性率为73.96%(71/96),漏检率为26.04%。ELISA法检测阳性率为75.0%（72/96）,漏检率为25%。两种方法联合检测敏感性为92.71%(89/96),漏检率为7.29%（7/96）。结论两种方法联合检测,可实现优势互补,降低丙型肝炎病毒的漏检率,有利于疾病的早期诊断,有利于“窗口期”感染的筛选并提高输血安全。     

湛江地区初次无偿献血者HCV感染情况研究

目的检测湛江地区初次献血者丙型肝炎病毒(HCV)-RNA,调查初次献血人群HCV感染的"窗口期"情况以及感染HCV的具体基因型.方法分别采用ELISA法和RT-PCR法检测2 357名在2004年1～12月初次无偿献血者感染HCV的情况.并把经RT-PCR法检测阳性的标本进行基因型检测.结果在2 357名初次献血者中,ELISA法阳性率为1.64%,而RT-PCR法的阳性率为1.86%,2种方法符合率为99.5%,二者间无显著性差异(P＞0.05).感染者中2型基因型为84.1%,3型基因型为13.6%,2/3混合型为2.27%.结论RT-PCR法检测血液HCV-RNA能早期发现"窗口期"HCV感染者,湛江地区初次无偿献血者感染丙型肝炎病毒的基因型以2型和3型为主.     

206例抗-HCV抗体检测阳性分析

目的分析丙型肝炎病毒(HCV)抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)阳性吸光度值/临界值(S/CO)与HCVRNA定量的相关性。方法采用实时荧光定量PCR检测HCV-RNA及ELISA法检测抗-HCV。结果206份抗-HCV阳性样本中,HCV-RNA阴性33例,将HCV-PCR阳性173例按S/CO值分组。1.0≤S/CO<2.0者22例,占12.8%;2.0≤S/CO<3.8者35例,占20.2%;S/CO≥3.8者116例,占67%。经统计学分析,两者有明显的相关性。结论ELISA法检测抗-HCV在S/CO≥3.8时,才高度预示抗-HCV呈阳性状态。本文作者建议对S/CO≥3.8的标本做确认实验。     

血透患者丙型肝炎病毒感染情况调查

目的:了解血液透析(血透)患者丙型肝炎病毒(HCV)的感染情况,比较利用抗HCV和RT-PCR方法检测HCV-RNA阳性率的差别。方法:对2000-2008年间的150例血透患者,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法于血透前后检测抗HCV,采用RT-PCR方法检测HCV-RNA,对阳性率进行对比分析。结果:血透前抗HCV检测阳性率为8%,HCV-RNA检测阳性率10%;血液透析后抗HCV阳性率为19.57%,HCV-RNA检测阳性率28.15%。血液透析年限<4年者,抗HCV阳性率为20.45%,HCV-RNA检测阳性率28.41%;明显低于>4年者抗HCV阳性率33.87%,HCV-RNA检测阳性率45.16%;两者间相比,差异有高度显著性(P<0.01);HCV-RNA检测阳性率和抗HCV阳性率差异有显著性(P<0.01);不同年龄和性别抗HCV和HCV-RNA阳性率差异无显著性(P>0.05)。结论:血透患者是HCV感染和传播的高危人群,且感染率随血透年限的延长而增高。采用RT-PCR方法检测HCV-RNA优于检测抗HCV,可避免漏诊并能发现病情活动者。医院应做好消毒隔离工作,防止医院内交叉感染的发生。     

7285例患者输血前感染性指标检测的意义

目的 通过对住院患者输血前乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)、艾滋病病毒抗体(抗-HIV1/2)、梅毒螺旋体抗体(抗-TP)进行检测,分析4项感染性指标在输血前检测的重要意义.方法 对2007年1月至2010年1月7285例住院输血的患者进行输血前HBsAg、抗-HCV、抗-HIV1/2、抗-TP4项感染性指标的检测,采用ELISA法检测,HBsAg、抗-HCV阳性标本采用胶体金复查;抗-HIV1/2筛查为阳性的标本送省疾控中心确证实验室进行确证;抗-TP阳性标本用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)确证.结果 7285例患者输血前HBsAg、抗-HCV、抗-HIV1/2、抗-TP检测总阳性率为15.31%,HBsAg阳性率为11.01%,抗-HCV阳性率为2.72%,抗-HIV1/2阳性率为0.03%,抗-TP阳性率为1.19%.HBsAg和抗-HCV合并阳性率为0.32%,HBsAg和抗-TP合并阳性率为0.04%.结论 输血前检测感染性指标,有利于患者传染病的早期诊治、医院感染及医务人员职业感染的预防及输血所致医疗纠纷的防范.