人胚胎期小肠六种肽能神经发生的研究

采用免疫组织化学ＰＡＰ法，对５３例不同胎龄的人胚胎小肠的亮氨酸脑啡肽（Ｌ－Ｅｎｋ）、Ｐ物质（ＳＰ）、神经肽Ｙ（ＮＰＹ）、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）、血管活性肠肽（ＶＩＰ）和甘丙素（ＧＡＬ）等６种肽能神经的发生发育过程进行观察，并与ＡＣｈ能神经和膀胱的肽能神经的发生做了对比研究。结果表明，人胚胎小肠神经中ＡＣｈ能神经发生早于肽能神经；同一个体不同器官肽能神经并非同时发生。本文观察到的小肠肽能神经的     

抗肿瘤生物活性肽研究进展

 生物活性肽（bioactive peptide）是指具有特殊生理功能的肽类物质。生物活性肽的结构可以从简单的二肽到较大分子的多肽[1]。1902 年，伦敦大学医学院的 Bayliss 和 Startling从动物的胃肠中发现了一种能引起胰腺分泌活动的物质，称为分泌素，这是人类第一次发现生物活性肽类物质[2]。此后，随着现代生物技术和化学技术的应用，反相高效液相色谱、快速原子轰击质谱测定法（fast atom bombardment mass spectromentry）、二维核磁共振（two dimension nuclear magnetic resonance）等技术的发展，对生物活性肽，特别是抗肿瘤活性肽的研究取得了很大进展，本文对此予以综述，并展望抗肿瘤生物活性肽开发利用的前景。     

合成肽库及其应用

合成肽库由含特定长度的肽片段所组成，它包含了该长度短肽的各种可能序列或绝大部分序列。合成肽库家族包括随机合成肽库、合成肽组合文库（SPCL）、多用途肽库（MUPL）、位置扫描合成肽组合文库（PS．SPCL）、寡核苷酸编码的合成肽库等。肽库技术除可用于蛋白质研究及分子识别，也开始应用于免疫学领域，如抗原表位分析、药物设计及疫苗研制等方面。     

充血性心衰病人心房利钠肽和脑利钠肽的不同分泌方式

００２充血性心衰病人心房利钠肽和脑利钠肽的不同分泌方式［英］／ＹｏｓｈｉｍｕｒａＭ…／／Ｃｉｒｃｕ－ｌａｔｉｏｎ．－１９９３，８７．－４６８～４６９在严重充血性心衰（ＣＨＦ）患者血浆中心房利钠肽（ＡＮＰ）和脑利钠肽（ＢＮＰ）增加与ＣＨＦ的严重性有关。...     

合成肽库及其应用

合成肽库由含特定长度的肽片段所组成，它包含了该长度短肽的各种可能序列或绝大部分序列。合成肽库家族包括随机合成肽库、合成肽组合文库（ＳＰＣＬ）、多用途肽库（ＭＵＰＬ）、位置扫描合成肽组合文库（ＰＳ－ＳＰＣＬ）、寡核苷酸编码的合成肽库等。肽库技术除可用于蛋白质研究及分子识别，也开始应用于免疫学领域，如抗原表位分析、药物设计及疫苗研制等方面。     

利用血清中血管紧张肽—转换酶的活性作为一肿瘤标记物

利用血清中血管紧张肽—转换酶的活性作为一肿瘤标记物［英］ＶａｒｅｌａＡＳ…／／Ｏｎｃｏｌｏｓｙ．－１９９３，５０（６）：４３０～４３５血管紧张肽一转换酶（ＳＡＣＥ）是起源于肺内皮的一种蛋白酶，已有研究表明血清中血管紧张肽一转换酶的活性，在良性疾病中增...     

无症状心肌缺血和心绞痛患者血浆中内皮素,降钙素基因相…

本文测定了无症状心肌缺血组（１４例）、心绞痛组（１１例）和对照组（７例）运动试验前后血浆内皮素（ＥＴ）、降钙素基因相关肽和Ｐ物质的含量，探讨了这３衙 肽类物质在ＳＭＩ和心痛发生中作用的差异。     

甘丙肽对GT1-7细胞GnRH释放的调节作用

目的：GT1-7细胞是替代研究GnRH神经元的理想细胞模型。本实验研究甘丙肽1型，2型受体mRNA在GT1-7细胞中的表达及对GnRH的调节作用。方法：（1）采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法观察甘丙肽受体mRNA在GT1-7中的表达；（2）将不同浓度的甘丙肽以不同时间与GT1-7细胞卵育，用RIA法测定细胞上清液中GnRH含量。结果：（1）GT1-7细胞同时表达甘丙肽1型和2型受体mRNA;(2)甘丙肽能刺激GnRH释放，且呈明显的量效关系。结论：甘丙肽可通过其受体直接作用下丘脑GnRH神经元，而对生殖功能起调节作用。     

结核杆菌热休克蛋白肽段对胶原诱导性关节炎保护作用的研究

目的：研究结核杆菌HSP65肽段（P256-270）和结核杆菌HSP70肽段（P111-125）对类风湿关节炎动物模型——胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠的保护性作用。方法：结核杆菌HSP肽段滴鼻免疫大鼠，观察其对CIA的防治效果，观察指标包括关节炎指数评分、关节病理学分析、酶联免疫斑点实验（ELISPOT）检测脾脏淋巴细胞分泌细胞因子（IL4、IFN-γ）水平、流式细胞术分析外周血T淋巴细胞亚群及酶联免疫吸附实验（ELISA）测定血清中抗CⅡ抗体水平。结果：分别经结核杆菌HSP65和HSP70肽段滴鼻免疫的实验组大鼠，与阳性对照组比较，关节炎指数明显下降（P〈0．05），病理变化减轻，抑制性细胞因子IL-4水平升高（分别为P〈0．05和P〈O．01），而炎性细胞因子IFN-1水平降低（P〈0．01），CD4^＋／CD8^＋T细胞比值降低（P〈0．05），血清中抗CIⅡ抗体水平也降低（分别为P〈0．05和P〈0．01）。结论：应用结核杆菌HSP65肽段或HSP70肽段能减轻CIA大鼠的症状和体征，其作用机制与调节T细胞的功能有关，此研究可为探讨人类RA新的免疫治疗方法提供依据。     

老年慢性肺源性心脏病血浆内皮素测定及其临床意义

内素素（ET）是日本学者Yanagisawa等1988年首次从猪主动脉内皮细胞中分离纯化的一种新的生物活性肽。ET有广泛的生物活性，但其主要作用是收缩血管平滑肌，是目前所知最强的缩血管物质，ET由ET-1，ET-2，ET-3和血管活性肠收缩肽（VIC）4种异形肽组成。     

血管紧张素转换酶（ACE）的遗传多态性：其与血浆ACE水平和…

血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）是一种锌金属肽酶（ｚｉｎｃ ｍｃｔａｌｌｏｐｅｔｉｄａｓｅ），在血管生理学中起重要作用，主要涉及肾素－血管紧张素和血管舒缓素－激肽，其底物为血管紧张素Ｉ和缓激肽。     

胃泌素释放肽和血管活性肠肽对E_2诱致的大鼠垂体泌乳素（PRL）瘤细胞PRL基因转录的调控

胃泌素释放肽和血管活性肠肽对Ｅ_２诱致的大鼠垂体泌乳素（ＰＲＬ）瘤细胞ＰＲＬ基因转录的调控狄安稞，单惠敏，黄曼影，许荣　（中国医学科学院基础医学研究所，中国协和医科大学基础医学院生理研究室，北京１００００５）先前我们所得的结果表明，胃泌素释放肽（ＧＲ?..     

甘丙肽（GAL）和胆囊收缩素（CCK）对垂体前叶催乳素和β－内啡肽释放的影响

甘丙肽（ＧＡＬ）和胆囊收缩素（ＣＣＫ）对垂体前叶催乳素和β－内啡肽释放的影响许荣 ，周远征，黄曼影，单惠敏，郭传海（中国医学科学院基础医学研究所生理研究室北京１００００５）本工作通过在体（ｉｎｖｉｖｏ）和离体（ｉｎｖｉｔｒｏ）实验，探讨甘丙肽（ｇａｌ?..     

脂多糖结合蛋白抑制肽抑制脂多糖与人单核巨噬细胞株的结合

目的： 研究脂多糖结合蛋白（LBP）抑制肽对脂多糖（LPS）与人单核巨噬细胞株U937细胞结合的抑制作用，从而探讨LBP抑制肽阻断内毒素信号转导通路的机制。 方法: 夹心ELISA检测LBP抑制肽与LPS的相对亲和力；流式细胞检测分析（FACS）异硫氰酸荧光素标记的LPS（FITC-LPS）与U937细胞的结合；ELISA检测U937细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量。 结果： 在相同的浓度下，LBP抑制肽与LPS的亲合力比LBP高，约为LBP的1.15倍。LPS组平均荧光强度（MFI）明显高于对照组，LBP显著增强了LPS与U937细胞的结合，促进了LPS的内在化；LBP抑制肽组MFI显著低于LBP组(P<0.01)，即P12减弱了FITC-LPS与U937细胞的结合。而且P12抑制了LPS诱导的U937细胞TNF-α的生成。 结论： LBP抑制肽与LPS有一定的亲和力，LBP抑制肽与LBP的致炎位点竞争结合FITC-LPS，从而抑制LPS与单核巨噬细胞的结合，阻止了LPS的内在化，并显著降低了LPS诱导的TNF-α释放。     

OPG与MBP融合蛋白在大肠杆菌中的表达

目的 克隆人骨保护素（OPG）成熟肽段编码区基因，并在大肠杆菌中表达。方法 采用RT－PCR法，扩增人OPG成熟肽段编码区cDNA，并克隆入原核表达载体pMAL-c2x中，转化BL21（DE3）PlysS大肠杆菌感受态细胞，经0.1mmol/L IPTG诱导后，收集菌体蛋白，进行SDS－PAGE及Western blot鉴定。结果 获得人OPG成熟肽段编码区cDNA，以构建的原核表达载体pMAL-OPG转化菌株后，可表达人OPG和麦芽糖结合蛋白（MBP）的融合蛋白，相对分子质量（M）为85000。表达产物的蛋白量约为菌体总蛋白的13％。Western blot表明，融合蛋白能与抗人OPG多克隆抗体特异性结合。结论 获得人OPG成熟肽全长cDNA，并在大肠杆菌中以OPC－MBP融合蛋白的形式表达。     

C肽联合胰岛素对糖尿病小白鼠肾脏的影响

目的研究C肽联合胰岛素治疗对糖尿病小白鼠肾脏病变的改善作用。方法选取小白鼠50只，分为正常对照组（NC组）、糖尿病组（DM组），糖尿病组用链脲佐菌素诱发小白鼠成模后，随机分为三组：糖尿病对照组（DC组）、胰岛素组（IG组）和胰岛素＋C肽组（ICG组）。治疗8周后测定各组小白鼠24小时尿白蛋白排泄率（UAER）、肾重／体重，并观察糖尿病小白鼠肾脏超微结构变化。结果胰岛素＋C肽组肾重／体重比值低于糖尿病组（P〈0．05），与胰岛素组和正常对照组差异无显著性。胰岛素＋C肽组小白鼠肾小球体积明显小于糖尿病组（P〈0．05），与胰岛素组和正常对照组无显著性差异（P〉0．05）。24小时尿白蛋白排泄率糖尿病组明显升高，胰岛素组低于糖尿病组，但差异无显著性，胰岛素＋C肽组与正常对照组相似。结论C肽联合胰岛素治疗可明显改善糖尿病小白鼠肾脏病变。     

siRNA干扰跨膜转运蛋白21的表达对KO小鼠胚胎成纤维细胞γ分泌酶活性的影响

目的探讨跨膜转运蛋白21（TMP21）对γ分泌酶活性的影响。 方法将淀粉样前体蛋白基因缺陷型KO小鼠胚胎成纤维细胞[MEF（KO）]分为转染组（T）和对照组（C），转染组转染载有TMP21小分子干扰RNA（siRNA）的质粒，对照组转染空质粒。每组均制备包含细胞全膜蛋白的样品（T1、C1），经CHAPSO进一步溶解后超速离心制备所得纯化全膜蛋白样品（T2、C2），用γ分泌酶组分早老蛋白1（PS-1）特异性抗体免疫沉降C2或T2后获得的γ分泌酶样品（IPT2、IPC2）。蛋白质印迹法检测各类样品中γ分泌酶重要组分TMP21、PS-1和Nicastrin（NCT）蛋白表达量；应用ELISA法检测β淀粉样肽40和β＆#61472;淀粉样肽42的生成总量。 结果蛋白质印迹法检测显示，TMP21蛋白表达量在转染组样品IPT2中为（5294±247）ng/ml，在对照组样品IPC2中为（19110±579）ng/ml，组间差异有统计学意义（P〈0.05）；各类样品中PS-1与NCT蛋白表达量无明显变化；TMP21可与PS-1共沉降。ELISA法检测显示，转染组样品IPT2与饱和浓度底物C99反应生成的β淀粉样肽40和β淀粉样肽42总量为（348±18）pg/ml，对照组样品IPC2为与饱和浓度底物C99反应生成的β淀粉样肽40和β淀粉样肽42总量为（342±18）pg/ml，组间差异有统计学意义（P〈0.01）。 结论TMP21可能为γ分泌酶的组分之一。在TMP21蛋白低表达状态下γ分泌酶活性升高，提示TMP21为γ分泌酶的负调控因子之一。     

应用合成肽研究柯萨奇B病毒衣壳蛋白VP1共的抗原表位

对柯萨奇Ｂ４病毒（ＣＶＢ４）衣壳蛋白ＶＰ１保守区的亲水性和二级结构进行分析和预测，选择可能代表优势抗原表位的肽段进行合成（ＶＰ１－１肽，ＲＩＹＦ ＫＰＫＨＶＫ ＡＹＶ），并截取了该肽段的前１２个残基（ＶＰ１－２肽）用同样方法进行合成。用ＶＰ１－１肽免疫家兔制备出高效阶抗体，应用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测，这些抗体与ＣＶＢ１－６病毒均有结合反应，ＶＰ１－１肽与型特异性ＣＶＢ１－６抗体均有良好的     

TIL识别的HLA-A2限制性人黑色素瘤特异抗原肽的研究

目的：探讨TIL识别的人黑色素瘤HLA-A2限制性的肿瘤抗原肽特性。方法：通过亲和层析柱从三种肿瘤细胞系（624-Mel、Chap-Mel和JY）中纯化HLA-A2蛋白和结合的多肽分子，经弱酸高温处理和离心超滤后，应用反相．高效液相色谱层析（RT-RPLC）分离各多肽组份，并将其各组份与T2细胞共同孵育、进行重建TIL识别的人黑色素瘤特异表位试验，鉴定肽分子生物活性，通过质谱分析所获活性肽分子特性，参照活性肽序列，制备人工合成肽加以进一步证实。结果：从RT-RPLC层析的624-Mel的肽组份，经特异表位鉴定发现3个活性峰（P19、P25和P31）。其中P31，TIL杀伤率达67％，质谱分析表明肽分子量为948，氨基酸序列为H^＋Ala Lue Trp Lue Phe Phe Gly Val Lue OH^-的9肽分子。经特异表位测定表明人工合成肽具有纯化活性肽的生物活性特征。结论：分离鉴定的这-9肽分子是一种TIL识别的HLA-A2限制性肿瘤抗原肽，为肿瘤防治、合成肽疫苗的研究奠定了可靠的实验基础。     

恶性肿瘤患者血清C肽水平的变化及意义

C肽（C—peptide，C—P）和胰岛素（insulin，INS）是由胰岛素原裂解而成，因此，临床上血液中C肽主要用于鉴别血清胰岛素的来源及B细胞的功能。近年来C肽和胰岛素作为鉴别诊断1型、2型糖尿病的重要指标在临床上也得到广泛应用。但由于异位激素分泌作用的存在，一些非内分泌肿瘤能产生和分泌激素或激素类物质，由此可能导致肿瘤患者体内C肽水平的变化。本文通过对105例不同恶性肿瘤患者进行血清C肽的检测，以探讨恶性肿瘤患者血清C肽水平的变化规律及意义。