兔眼晶状体上皮细胞的体外培养

目的 建立兔晶状体上皮细胞体外培养的模型。方法 采用组织块培养法,对兔眼晶状体前囊膜进行培养,并利用形态学检查方法和免疫组化技术鉴定。结果 组织块接种２４ｈ后即可见细胞生长,且保持上皮细胞形态,１ｗｋ左右细胞融合,在体外可传至７代,５代以后细胞呈成纤维细胞状,α－晶状体蛋白间接免疫荧光呈阳性反应。结论 成功地建立晶状体上皮细胞体外培养模型,可用于后发性白内障发病机制的研究。     

盖玻片辅助人晶状体上皮细胞原代培养法

目的：建立人晶状体上皮细胞原代培养的简便方法并比较不同来源人品状体上皮细胞的生物学特性。方法：取胎龄20周合法引产胚胎眼晶状体囊膜、中山眼科中心眼库眼晶状体囊膜和白内障患者术中撕取的前囊膜，分别在培养皿中铺平，加10乩10％DMEM培养液润湿后加盖盖玻片防止卷曲并促进粘贴．添加培养液浸没盖玻片，37℃培养。同时取相同来源的囊膜按照组织块法培养。观察细胞增殖情况并比较原代人晶状体上皮细胞与人晶状体上皮细胞系SRA01／0413晶体蛋白的表达差异。结果：在盖玻片辅助下，胚胎眼晶状体囊膜第2天即可见明显的增殖细胞由囊膜缘长出，眼库眼囊膜和白内障患者术中撕取的囊膜在3～4d的潜伏期后亦可见增殖细胞长出；组织块法培养出现部分组织块漂浮，且胚胎眼囊膜潜伏期延长至3-4d，眼库眼囊膜和白内障患者晶状体囊膜潜伏期延长至4-5d。结论：盖玻片辅助的改良组织块培养法能尽快获得体外培养的原代晶状体上皮细胞，且操作简便，值得推广应用于品状体病的研究。     

白内障术后后囊浑浊发生机制的研究--老年性白内障晶状体上皮细胞的体外培养

目的观察老年性白内障晶状体上皮细胞体外培养的生长特点。为研究老年性白内障及术后后囊浑浊的发生机制及防治奠定基础。方法应用改良组织块培养法对超声乳化术中老年性白内障晶状体前囊上皮细胞进行体外培养，在倒置显微镜下观察其生长和分化的规律。结果前囊接种3—5天，有新生上皮细胞自囊片的边缘长出并向四周延伸，第3-4周部分细胞内出现空泡和颗粒等结构改变，生长近于停止；传代培养细胞不能增生。结论老年性白内障晶状体前囊上皮细胞体外增生能力有限。改良组织块培养法培养晶状体上皮细胞简单有效。     

鼠晶状体上皮细胞的体外培养

目的:建立鼠晶状体上皮细胞体外培养的模型。方法:应用组织块贴片法和酶逐步消化法对10~14d的SD大鼠晶状体上皮细胞进行体外培养,在相差显微镜下观察其生长规律。结果:组织块贴片法在加入培养基4~5d后见细胞生长,2wk细胞融合。而酶逐步消化法在加入培养基后7d左右见细胞贴壁,2wk左右见细胞融合。结论:鼠晶状体上皮细胞体外培养较困难,本试验采用酶逐步消化方法和组织块贴片法。成功地建立了鼠晶状体上皮细胞体外培养的模型,为研究后发性白内障发病机制提供了基础。     

人外伤性白内障晶状体上皮细胞的组织块培养

目的建立人外伤性白内障晶状体上皮细胞体外培养的简单有效方法，观察晶状体上皮细胞的体外生长规律和特点。方法应用改良组织块贴附培养法对儿童及成人外伤性白内障的晶状体上皮细胞进行体外培养，倒置显微镜下观察其生长规律。结果儿童和成人外伤性白内障晶状体上皮细胞都具有增生能力，晶状体上皮细胞均可传3代，晶状体上皮细胞多次传代后生长缓慢。结论儿童和成人外伤性白内障晶状体上皮细胞体外培养增生能力有限，儿童晶状体上皮细胞增生能力较强。改良组织块贴附培养法简单易行，重复性好，是晶状体上皮细胞体外培养的较好方法。     

人晶状体上皮细胞的组织块培养

目的建立人晶状体上皮细胞体外培养的简单有效方法,观察不同年龄人晶状体上皮细胞的体外生长规律和特点。方法应用改良组织块培养法对胎儿、成人和年龄相关性白内障的晶状体上皮细胞进行体外培养,在倒置显微镜下观察其生长、分化规律。结果胎儿、成人和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞都具有增殖能力,胎儿和成人晶状体上皮细胞可传3代,年龄相关性白内障晶状体上皮细胞传代培养基本不能增殖。结论人晶状体上皮细胞体外培养困难,不同年龄人晶状体上皮细胞体外均能增殖,但增殖能力均很有限;改良组织块培养法是晶状体上皮细胞体外培养的较好方法。     

晶状体上皮细胞培养及Ⅳ型胶原表达

目的体外培养小牛晶状体上皮细胞，免疫组织化学SABC法检测1V型胶原表达。方法小牛晶状体前囊组织块培养，晶状体上皮细胞原代和传代培养。传代2次后免疫组织化学法检测细胞内1V型胶原表达。结果原代培养2-3周后细胞成单层后传代培养，传代细胞易贴壁，9～10d后可再传代，免疫组织化学检测发现细胞质内有大量Ⅳ型胶原表达，形成细胞的骨架成分。结论晶状体上皮细胞在增生时有大量Ⅳ型胶原表达，其与晶状体后囊混浊有关。     

碱性成纤维细胞生长因子基因在胎儿与白内障患者晶状体上皮细胞内表达的比较

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子基因在胎儿和白内障患者晶状体上皮细胞内表达的区别。方法:采用原位杂交方法,用cDNA探针检测胎儿培养及组织切片中的晶状体上皮细胞和白内障患者前囊中的晶状体上皮细胞的bFGF的mRNA,并用图像分析进行相对定量,比较胎儿培养细胞、组织切片细胞及患者囊膜细胞的积分光吸收度值。结果:胎儿的培养及组织切片中晶状体上皮细胞和白内障患者前囊中的晶状体上皮细胞都存在bFGF基因表达。胎儿体外培养晶状体上皮细胞、胎儿组织切片晶状体上皮细胞和白内障患者晶状体上皮细胞积分光吸收度值分别为627.1±268.7,131.5±42.8和79.2±26.3。胎儿体外培养晶状体上皮细胞积分光吸收度值显著高于胎儿组织切片晶状体上皮细胞(P<0.01);白内障患者晶状体上皮细胞积分光吸收度值显著低于胎儿晶状体上皮细胞(P<0.01)。结论:晶状体上皮细胞体外培养可增加bFGF基因表达;胎儿晶状体上皮细胞bFGF基因表达显著高于白内障患者晶状体上皮细胞。     

小牛晶状体上皮细胞传代培养的细胞学特征

目的通过建立小牛晶状体上皮细胞的传代培养,观察晶状体上皮细胞的离休生长特性。方法组织块接种培养;用计数法及ＭＴＴ法测细胞生长曲线;绘制细胞分裂指数曲线。结果采用组织块培养法晶状体上皮细胞原代及传代培养生长良好;ＭＴＴ及细胞计数法所测细胞生长过程基本一致;细胞分裂指数曲线显示细胞在培养第５天达分裂高峰。结论组织块法是晶状体上皮细胞离体培养的较好方法;晶状体上皮细胞具有较好的离体生长能力;ＭＴＴ比色法是检测晶状体上皮细胞的有效方法。     

晶状体前囊膜的立体培养研究

目的 观察立体培养条件下牛晶状体前囊膜上皮细胞增殖情况。方法 将牛晶状体前囊膜用所设计的支架悬挂于无菌培养瓶中分别培养1～6周，在不同培养时间用Giemsa染色后在倒置显微镜下观察细胞增殖情况。结果 所有前囊膜培养3d后均有细胞增殖，并随时间推移增殖显著。3周后增殖细胞开始脱落，6周后细胞全部脱落，囊膜上无细胞增殖。结论 在晶状体前囊膜立体培养时，晶状体上皮细胞的增殖和凋亡现象明显，向纤维细胞分化现象不明显。该培养模型可解释保留晶状体前囊膜白内障手术后的临床现象。