肺耐药蛋白基因在急性白血病中的表达及意义

目的 :检测急性白血病患者肺耐药蛋白 (lung resistance protein,LRP)基因 m RNA表达 ,探讨其与多药耐药和预后的关系。方法 :采用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT-PCR)技术检测 47例急性白血病患者及 7例正常对照者骨髓细胞 LRP基因的表达。结果 :正常骨髓细胞 LRP基因表达阴性 ,2 5例初治急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)患者中 1 4例 LRP表达阳性 ,1 2例初治急性淋巴细胞白血病 (ALL)中仅 1例阳性 ,1 0例复发难治患者 8例阳性 ;初治 ANLL组及复发难治组较正常对照组相比表达率明显升高 ,差异有显著性 (P=0 .0 0 1 ,P=0 .0 2 4) ,LRP m RNA表达水平与初次化疗不敏感及预后差有关 ,LRP阳性患者的完全缓解率明显低于表达阴性者 (分别为 3 / 1 1 ,4/ 5 ,P<0 .0 5 )。结论 :LRP基因表达水平与急性非淋巴细胞白血病化疗效果及预后密切相关 ,是一项新的耐药指标。检测 LRP的表达可以指导治疗 ,估计预后     

急性白血病患者血清sFas，TNFα水平及其与疗效的关系

目的 :探讨急性白血病患者血清可溶性跨膜蛋白 (s Fas)和肿瘤坏死因子 α(TNFα)的变化及意义。方法 :采用 EL ISA法测定 30例急性白血病患者血清 s Fas,放免法测定 32例急性白血病患者血清 TNFα含量 ,并与正常对照组比较。结果 :急淋白血病患者未完全缓解组 s Fas为 (7.14± 2 .18) μg/L,急非淋白血病未完全缓解组为 (9.6 9± 3.5 1) μg/L,均明显高于正常对照组的 (3.49± 2 .36 ) μg/L,亦明显高于其相应的完全缓解组。s Fas比正常对照组高出 2倍的患者化疗获得完全缓解的机会明显下降。急性白血病患者初发未治时血清 TNFα为 (6 .0 7± 1.32 ) nmol/L,化疗后未完全缓解者为 (5 .79± 1.2 7) nm ol/L,复发者为 (7.5 0± 1.6 7) nm ol/L,均明显高于正常对照组的 (2 .32± 0 .90 ) nm ol/L 和化疗后完全缓解者的 (4 .14±1.5 ) nm ol/L。结论 :血清 s Fas,TNFα在急性白血病患者均明显升高 ,是预后不良的因素。监测二者变化有助于疗效判断     

复发及难治急性髓细胞白血病病人多药耐药基因检测及意义

目的研究复发及难治急性髓细胞白血病（AML）病人多药耐药基因（mdr1）的表达及其与临床疗效的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测65例AML病人（其中初诊组38例,完全缓解组14例,复发难治组13例）、27例非白血病病人和健康人（包括健康人15例、缺铁性贫血病人10例、特发性血小板减少性紫癜病人2例）mdr1基因的表达水平,并分析其临床意义。结果AML病人mdr1基因表达阳性率高于对照组,复发难治组mdr1基因表达阳性率高于初诊组和完全缓解组,临床耐药组mdr1基因表达阳性率显著高于非临床耐药组,CR率非临床耐药组显著高于临床耐药组,差异均有显著性（χ^2=8.334～49.630,P〈0.01）。结论mdr1基因阳性表达与AML病人临床耐药密切相关,是影响预后的重要因素,可作为检测临床耐药和判断预后的指标之一。     

三氧化二砷与化疗药物联合对急性非早幼粒细胞白血病体外细胞毒性的实验研究

目的:为三氧化二砷 (As2O3) 适应证的扩展提供实验依据.方法:应用MTT法,检测了As2O3分别与柔红霉素(DNR)、阿糖胞苷(Ara-C)、三尖杉酯碱(H)和长春新碱(VCR)联合对23例初治急性非早幼粒细胞白血病(ANPL)、16例难治复发ANPL原代细胞的细胞毒性.结果:①As2O3对初治及难治复发ANPL细胞具有明显的细胞毒性,1.0 μmol/L As2O3的细胞毒性分别为12.6%±7.7%和10.1%±6.2%,该毒性作用在两组间无统计学差异(P>0.05).②As2O3与Ara-C、H和VCR的细胞毒性无相关性(r分别为:0.279、0.276、0.204,P均>0.05),与DNR有相关性(r=0.432,P<0.05).③As2O3分别与DNR、Ara-C、H和VCR联用,对多数患者的细胞毒性呈协同及相加作用,当As2O3分别与DNR、VCR联用时,其细胞毒性明显大于单用化疗药物(P<0.05).结论:As2O3与Ara-C、H及VCR无交叉耐药性,与DNR有部分交叉耐药性;可与DNR、VCR等组成新的化疗方案,治疗初治及难治复发ANPL患者.     

WT1基因在白血病患者中的表达及临床意义

目的 :探讨 WT1基因在白血病患者中的表达及其临床意义。方法 :采用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)方法测定 5 3例急性白血病、15例慢性粒细胞白血病、2 1名正常人的 WT1基因表达。结果 :5 3例急性白血病患者中 4 1例 WT1基因表达阳性 ,阳性率为 77.35 % ,其中急性髓系白血病 (AML )和急性淋巴细胞白血病 (AL L )阳性率分别为 80 .6 %和 72 .0 % ,两组相比差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ;15例的慢性粒细胞白血病 (CML ) WT1基因表达阳性率为 4 6 .7% ,其中 7例急变期和加速期阳性率为 10 0 % ,8例慢性期阳性率为 0 %。 2 7例急性白血病完全缓解 (CR)患者中 2 2例 (81.5 % ) WT1基因表达转阴 ,4例复发患者 WT1基因表达再次升高。 2 1例正常人的 WT1基因表达阴性 ;RT- PCR检测 WT1基因灵敏度为 10 - 4水平。结论 :1WT1基因在各种类型白血病患者中均有表达 ,在正常人中不表达。 WT1的表达与白血病病程相关 ;2 WT1基因可作为检测MRD的标记性基因。 WT1基因的表达与白血病患者的化疗效果及预后密切相关。     

senex基因在急性髓系白血病中的表达及意义

目的 探讨senex基因在急性髓系白血病(AML)中的表达水平,并探讨其在AML发生发展中的意义.方法 应用实时荧光定量PCR检测senex基因在21例初诊AML患者(初诊组)、27例骨髓完全缓解的AML患者 (缓解组)、19例骨髓复发的AML患者(复发组)以及12例对照者(对照组)的骨髓单个核细胞中的表达情况,比较4组之间的基因表达水平差异,并分析senex基因表达水平与临床特征和疗效的关联性.结果 初诊组senex基因表达水平高于缓解组(4.06±2.72 vs 2.52±1.83,P=0.04)和对照组(4.06±2.72 vs 1.22±0.48,P=0.001),复发组senex基因表达水平高于对照组(3.27±2.54 vs 1.22±0.48,P=0.017),且各亚型之间以AML-M3的senex基因表达水平最高.AML患者senex基因mRNA表达水平与骨髓原始细胞比例存在相关性(rs=0.557,P=0.000).此外分析AML初诊患者的临床特征显示1次化疗缓解的患者(n=14)的senex基因表达显著低于1次化疗未缓解的患者(n=7)(1.77±1.47 vs 4.85±2.20,P=0.003),并且1次化疗未缓解的患者预后均较差.结论 senex基因的异常表达可能与AML的发生发展以及预后密切相关.     

人类白细胞抗原-G在急性白血病患者的表达及意义

目的 检测急性白血病患者膜结合型人类白细胞抗原-G(mHLA-G)和分泌型HLA-G(sHLA-G)的表达,探讨HLA-G表达水平的变化对急性白血病发生和发展的影响.方法 采用酶联免疫吸附法和流式细胞术分别检测40例初发、10例难治复发、30例化疗前后患者及10例正常人sHLA-G和mHLA-G的表达情况.结果 正常人血清中sHLA-G的平均水平为5.87±2.07 ng/ml,初发患者为10.05±6.5 ng/ml、难治复发患者为12.32±5.85 ng/ml;正常人mHLA-G的平均水平为(0.29±0.20)%,初发患者(0.60±0.44)%、难治复发患者(0.77±0.41)%.白血病初发患者sHLA-G和mHLA-G水平均显著高于正常人组(P＜0.05),初发与难治复发患者比较无统计学差异(P＜0.05).15例1疗程化疗后获得完全缓解患者sHLA-G和mHLA-G水平显著低于化疗前(P＜0.05),而15例未缓解患者其sHLA-G和mHLA-G水平较治疗前无明显差异(P＜0.05).结论 HLA-G表达水平变化可能与急性白血病的病情发展、疗效以及预后有关.     

原代白血病细胞人端粒酶催化亚单位的表达

目的 :研究原代白血病细胞人端粒酶催化亚单位 (hEST)的表达及其临床意义。方法 :应用RT -PCR方法检测 30例初发急性白血病 (AL)患者、1 2例AL获完全缓解 (CR)患者和 6例正常志愿者骨髓单个核细胞 (MNCs)hESTmRNA的表达。结果 :初发AL患者骨髓MNCshESTmRNA表达量 (0 .71± 0 .34)明显高于CR患者 (0 .4 3± 0 .2 5 ,P <0 .0 5 )及正常志愿者 (0 .2 2± 0 .2 1 ,P <0 .0 1 )。初发AL患者骨髓常规涂片中原始细胞百分率与骨髓MNCs的hESTmRNA表达量呈正相关 (r =0 .4 5 7,P <0 .0 5 )。结论 :初发AL患者骨髓MNCs的hESTmRNA表达增高。hESTmRNA表达可能代表白血病细胞的一种高增殖状态     

急性髓细胞白血病患者血清VEGF测定及其临床意义

目的观察急性髓细胞白血病(AML)患者血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达水平及临床意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)对36例初治、18例复发AML患者,及20例正常献血员血清VEGF表达水平进行检测。结果36例初治、18例复发AML患者血清VEGF水平分别为(779.0±214.51)ng/L,(792.15±169.72)ng/L,二者相近(P>0.05),正常对照组(128.25±30.47)ng/L(P<0.01)。初治组经诱导化疗后达到完全缓解(CR)的患者血清VEGF水平为(532.24±25.72)ng/L与治疗前比较有明显降低(P<0.01),但仍高于正常对照组(P<0.01)。结论血管内皮生长因子在刺激AML细胞增殖、迁移中发挥重要作用,观察AML患者血清VEGF水平对预测AML的复发具有临床意义。     

恶性淋巴瘤mdr1和MRP mRNA及 P-gp表达水平与化疗疗效的相关研究

目的探讨恶性淋巴瘤mdr1、MRP mRNA和P-gp表达水平与化疗疗效的相关性.方法应用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术和流式细胞术(FCM)方法,以8例人正常淋巴结为正常对照,对46例淋巴瘤患者[23例初治(HD1例,NHL22例)及23例复发(HD5例,NHL18例)]的mdr1 mRNA、MRP mRNA和P-gp表达水平与化疗疗效间的关系进行了前瞻性研究.结果复发患者mdr1基因和P-gp表达水平及阳性率均高于初治患者(P<0.001),而MRP基因表达水平及阳性率在复发与初治患者间差异无显著意义(P>0.05).mdr1基因及P-gp表达阳性患者的化疗有效(CR+PR)率(33.33%和26.67%)明显低于mdr1基因及P-gp表达阴性患者(85.71%和83.87%,P<0.001),而MRP基因表达阳性患者与阴性患者的化疗有效率差异无显著意义(P>0.05).相关分析显示,mdr1基因和P-gp表达水平之间有明显相关性(r=0.296 3,P<0.05),而mdr1和MRP之间、MRP与P-gp之间均无明显相关性(r=0.072 3,P>0.05;r=0.081 8,P>0.05).结论 mdr1基因及P-gp表达是恶性淋巴瘤患者多药耐药的主要机制,而MRP基因不是产生耐药的主要机制.mdr1基因及P-gp表达水平的高低与恶性淋巴瘤化疗疗效密切相关,而MRP基因的表达与化疗疗效未见相关.     

多药耐药蛋白和 bcl-2 蛋白表达与初治急性白血病预后的关系

目的 探讨多药耐药蛋白和 bcl-2 蛋白表达与初治急性白血病 (AL)患者化疗效果的关系.方法 用流式细胞仪检测 29 例初诊未治AL患者多药耐药蛋白和 bcl-2 蛋白表达.结果 初治AL患者多药耐药蛋白和bcl-2蛋白表达率分别为 37.9% 和 83%;bcl-2 蛋白阳性与阴性患者的首次完全缓解(CR)情况经统计学分析显示差异无显著性(P＞0.05);而多药耐药蛋白阳性与阴性患者的首次完全缓解(CR)情况经统计学分析显示有显著性差异(P＜0.05);多药耐药蛋白和 bcl-2 蛋白两者之间无相关性.结论 多药耐药蛋白可作为预测初治AL患者化疗效果的敏感性指标.     

ABCA3在急性髓系白血病中的表达及其临床意义

目的 检测三磷酸腺苷结合盒转运体A3（ABCA3）基因在急性髓系白血病（AML）细胞中的表达,探讨ABCA3在AML耐药方面的作用及临床意义。 方法 ①应用半定量RT PCR检测33例初治、13例复发/难治成人AML患者及10例正常对照者骨髓单个核细胞ABCA3 mRNA的表达水平,并分析其在不同组间的表达规律;②将初治AML患者按化疗效果分为完全缓解组和未完全缓解组,比较两组间ABCA3的表达水平;③分析ABCA3与AML患者初诊白细胞数、免疫表型、FAB分型等临床特征之间的相关性。结果 ABCA3的表达水平：初治及复发/难治AML组均明显高于正常对照组（P均＜0.01）;复发/难治AML组高于初治组（P＜0.05）;完全缓解组低于未完全缓解组（P＜0.05）;慢性粒细胞白血病急变患者高于其他AML亚型（除M3外,P均＜0.05）。ABCA3的表达水平与AML患者初诊白细胞数、骨髓原始细胞百分数、免疫表型、性别及年龄无明显相关性。结论 ABCA3与AML患者的多药耐药及治疗、预后密切相关。     

儿童急性白血病survivin,bcl-2,mdr1的表达及意义

目的：探讨急性白血病患儿survivin、bcl-2、mdr1 mRNA表达及临床意义.方法：用RT-PCR的方法检测患儿骨髓survivin、bcl-2和mdr1的mRNA.结果：初诊患儿survivin、bcl-2和mdr1的阳性表达率高于对照组.初诊急性淋巴细胞性白血病和急性髓细胞性白血病survivin、bcl-2、mdr1阳性表达率无显著性差异.完全缓解期患儿survivin和bcl-2阳性表达明显低于初诊白血病患儿.复发组survivin、bcl-2、mdr1三者阳性率明显高于缓解组.survivin阳性和阴性表达者外周血白细胞总数无显著性差异（P＞0.05）.结论：survivin和bcl-2在急性白血病患儿表达增高,其表达与急性白血病的类型和外周血白细胞总数无关.survivin、bcl-2和mdr1在儿童白血病的共表达可能提示预后不良.     

外周血微小残留白血病细胞的定量检测及临床应用

目的: 探讨定量检测急性白血病患者外周血微小残留白血病细胞的临床价值。方法: 采用极限稀释定量PCR法对25例初诊急性白血病患者及1个疗程化疗后外周血标本进行Fms样酪氨酸激酶3（FLT3）基因表达进行检测，并定量计算体内残留的白血病细胞数，10例门诊健康体检者为对照组。结果: ①25例初诊急性白血病患者外周血标本FLT3基因表达阳性率为80.0%（20/25），其中急性髓细胞白血病（AML）88.2%（15/17），急性淋巴细胞白血病（ALL）62.5%（5/8）。②20例FLT3基因表达阳性的白血病初诊患者外周血DNA含量为（2.36±1.25）×10⁸ μg•L^-1，外周血含有的白血病细胞数为（18.66±8.79）×10⁶•μL^-1。经过1个疗程化疗后，1例未缓解者，外周血DNA含量为1.69×10⁷μg•L^-1，残留的白血病细胞数为1.01×10⁶•μL^-1；3例部分缓解者，外周血DNA含量为（0.57±0.24）×10⁶ μg•L^-1，残留的白血病细胞数为（1.82±0.19）×10³•μL^-1；16例完全缓解者，其中FLT3基因表达阴性9例，FLT3检测阳性7例，其外周血DNA含量为（0.16±0.06）×10⁶ μg•L^-1，残留的白血病细胞数为（1.86±1.31）×10²•μL^-1。健康对照组FLT3基因表达均为阴性。结论: 定期、定量检测急性白血病患者治疗后体内残留的白血病细胞数，有助于临床观察白血病治疗效果及时调整治疗方案。     

BAALC蛋白在急性白血病中的表达及其临床意义

目的探讨脑和急性白血病胞质（Brain and acute leukemia cytoplasmic,BAALC）蛋白在急性髓细胞性白血病（Acute myeloid leukemia,AML）的表达及其临床意义。方法采用Western blot方法半定量检测BAALC蛋白在58例AML患者（初诊24例、完全缓解28例和复发6例）的骨髓单个核细胞（Bone marrow mononuclear cells．BM-MNCs）的表达水平。15例非恶性血液病患者以及AML细胞系KG1a和HL-60分别作为阴性和阳性对照。结果KG1a和HL-60细胞BAALC均为阳性高表达,非恶性血液病对照者BAALC表达均为阴性。BAALC阳性率在AML初诊组（83．3％）与复发组（100％）均高于完全缓解（CR）组（7．1％）和阴性对照组（0）（P〈0．001）;AML初诊组和复发组的BAALC蛋白相对含量明显高于CR组和阴性对照组（P〈0．01）,且CR组和阴性对照组之间BAALC表达阳性率和相对含量差异无统计学意义（P〉0．05）。结论BAALC蛋自在AML中表达水平异常增高,提示BAALC可能与AML的发生发展密切相关。     

卵巢癌中多药耐药基因的表达及其意义

为探讨卵巢癌隐含的耐药机制及其对化疗的影响,用RT－PCR方法对7例正常卵巢组织及32例卵巢癌进行了多药耐药基因（mdr1)检测,结果表明：正常卵巢组织中,rdr1基因均无表达,32例卵巢癌中,mdr1表达阳性率为28．1％,mdr1基因表达与病理类型有关（P＜0．05）,而且mdr1表达阳性者耐药发生率（55．6％）显著高于阴性者（8．6％,P＜0．01）。结果提示：卵巢癌中隐含有由mdr1介导的多药耐药机制,mdr1的表达与卵巢癌的化疗耐药有一定的关系。     

急性白血病多药耐药基因检测及其临床意义

应用原位杂交方法检测多药耐药基因（Ｍｄｒｌ）表达，观察其与临床耐药的关系，探讨Ｍｄｒｌ检测的临床应用价值。方法自行构建ＲＮＡ探针直接在骨髓涂片上行原位杂交，检测４５例急性白血病ＭｄｒｌｍＲＮＡ表达。对部分高表达者调整临床治疗方案。结果复治组中Ｍｄｒｌ阳性占８８％，初治组４２．８％，有极显著差异。经标准化疗２个疗程后初治组中Ｍｄｒｌ阳性者完全缓解率（ＣＲ）２２％，阴性者ＣＲ６３．６％，Ｐ＜０．００１。对Ｍｄｒｌ阳性病例通过调整化疗方案或加用逆转剂可改善预后。结论Ｍｄｒｌ高表达确为白血病不良预后的主要指标，原位杂交检测Ｍｄｒｌ表达对临床治疗有指导意义。     

环孢素A对THP-1细胞的增敏作用及与多药耐药相关蛋白-1的关系

目的:观察环孢素A(CsA)处理急性单核细胞白血病细胞株THP-1后对柔红霉素(DNR)的耐药性及与多药耐药相关蛋白-1(MRP1)表达的关系,探讨CsA对THP-1细胞的化疗增敏作用及相关机制.方法:噻唑蓝(MTY)法、荧光分光光度法、共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)法分别检测CsA处理前后50%THP-1细胞生长受抑的DNR浓度(IC50)、THP-1细胞内DNR含量及分布的变化.免疫细胞化学法、Western blot法检测CsA处理前后THP-1细胞MRPI蛋白表达量的变化.结果:CsA处理后11{P-1细胞的IC50明显下降(1.536 4±0.175 1 vs 0.558 8±0.054 7,P<0.01),细胞内DNR含量明显增加(21.40±1.71 vs131.96±16.45,P<0.01),且胞浆内分布更加均匀;同时MRP1蛋白表达量增高(0.266 5±0.004 2 vs 0.316 9±0.006 2,P<0.01),结论:CsA可增加THP-1细胞对DNR的敏感性,降低其耐药性,并提示CsA对THP-1细胞耐药性的改变不是通过降低其MRPl蛋白表达量来实现的.     

急性白血病患者P~(170)糖蛋白过度表达的临床意义

为探讨多药耐药基因的表达产物P170 糖蛋白在急性白血病异常表达的临床意义 ,用免疫细胞化学间接免疫荧光法 (APAAP法 )检测 30例急性白血病 (AL)患者。结果 :P170 糖蛋白在 30例急性白血病患者中有 9例表达 ,其中15例难治复发性白血病患者有 10例表达 ,其阳性表达率明显增高 ,化疗缓解率较阴性者明显减低 (P <0 0 5 )。表明P170 糖蛋白异常表达与肿瘤生物学行为关系密切 ,已成为提示急性白血病患者预后的有用指标之一。