黄芪对培养心肌细胞过氧化氢损伤的保护作用

目的 :探讨中药黄芪 (Astragalus,AS)对培养的心肌细胞氧化性损伤的保护作用及其机制 .方法 :体外培养的新生大鼠心肌细胞 ,分为 3组 :①对照组 (Normal组 ) ;②H2 O2组 :H2 O2 (0 .2mmol/L)与心肌细胞共育 1h ;③黄芪 +H2 O2组 :黄芪处理心肌细胞 30min后 ,加入H2 O2 与心肌细胞共育1h .心肌细胞损伤以细胞线粒体活性和乳酸脱氢酶 (LDH)活性来表示 ,同时检测心肌细胞超氧化物歧化酶 (SOD)活性和丙二醛 (MDA)含量 ,均以比色法检测 .结果 :H2 O2 处理细胞后可使细胞LDH活性显著增高 (2 7± 3) μkat/L ,细胞线粒体活性明显下降 0 .36± 0 .0 4 ,SOD活性较正常细胞显著下降(2 31± 2 2 ) μkat/L ,MDA含量显著增高 (1 6± 3) μmol/L .黄芪处理细胞后可显著提高心肌细胞线粒体活性 0 .5 0± 0 .0 5 ,降低LDH活性 (1 6 .4± 1 .8) μkat/L ;并提高细胞抗氧化能力 ,表现为较H2 O2 处理组 ,SOD活性增高 (331± 4 0 ) μkat/L ,MDA含量下降 (1 0 .7± 2 .4 ) μmol/L .结论 :黄芪可对抗H2 O2 对心肌细胞的损伤 ,其机制与提高心肌细胞抗氧化损伤能力有关     

大豆苷元对乳鼠心肌细胞过氧化氢损伤的保护作用

目的 观察大豆苷元对心肌细胞损伤的影响并探讨其可能机理。方法 用体外细胞培养方法，培养乳鼠心肌细胞，制备过氧化氢损伤模型，测定细胞存活率、上清液中乳酸脱氢酶活性(LDH)、肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NEB)含量。结果 大豆苷元(10-160μmol/L)各剂量都能显著地提高过氧化氢损伤心肌细胞的存活率和用MIT法测得的A570 nm值；显著地抑制过氧化氢损伤引起心肌细胞的LDH和CK的释放；显著地减少过氧化氢损伤的心肌细胞MDA的生成．提高过氧化氢损伤的心肌细胞SOD的活性；显著地抑制过氧化氢损伤的心肌细胞NEB活性，降低NO水平。结论 大豆苷元对过氧化氢损伤的心肌细胞具有保护作用。     

阿替洛尔对过氧化氢损伤乳鼠心肌细胞有保护作用

目的：观察阿替洛尔对过氧化氢（H2O2）致心肌细胞氧化损伤的保护作用，并探讨此作用的机制。方法：用H2O2作用于新生SD大鼠心肌细胞，建立心肌细胞过氧化氢损伤模型。用阿替洛尔预处理后，观察心肌细胞状态，测定心肌细胞存活率、乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）活性。结果：阿替洛尔提高心肌细胞过氧化损伤的细胞存活率（P〈0.05），减少LDH和MDA的生成（P〈0．05）。结论：阿替洛尔对心肌细胞过氧化损伤有一定起保护作用。     

金丝桃苷对过氧化氢损伤心肌细胞的保护作用研究

目的研究金丝桃苷对过氧化氢(H2O2)损伤心肌细胞的保护作用。方法以原代培养的乳鼠心肌细胞建立H2O2损伤模型。实验分为7组:正常对照组、模型对照组、二甲基亚砜组(1%二甲基亚砜)、维拉帕米组(25μmol/L)、金丝桃低剂量组(0.6μmol/L)、金丝桃中剂量组(6μmol/L)、金丝桃高剂量组(60μmol/L)。测定各组心肌细胞一氧化氮合酶(NOS)、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)活性变化及心肌细胞肌钙蛋白(cTnI)的含量。结果金丝桃苷中、高剂量组结构型一氧化氮合酶(cNOS)、总一氧化氮合酶(tNOS)、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性较模型对照组显著增加(P<0.01),诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性较模型对照组降低(P<0.05);金丝桃苷低剂量组、中剂量组、高剂量组上清液的CK-MB、cTnI含量较模型对照组低(P<0.01)。结论金丝桃苷具有抗心肌细胞过氧化氢损伤作用,这可能与其提高心肌细胞膜的Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性,并调节不同亚型NOS活性有关。     

缬沙坦对乳鼠心肌细胞过氧化损伤的保护作用

目的:探讨缬沙坦对过氧化氢(H2O2)致心肌细胞过氧化损伤的保护作用.方法:分离培养SD乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞过氧化损伤模型.用2～10 μmol/L缬沙坦预处理后,测定各组心肌细胞存活率;用10μmol/L缬沙坦预处理后,检测各组心肌细胞培养介质中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)浓度.结果:在2～10 μmol/L范围内,缬沙坦剂量依赖性地提高心肌细胞过氧化损伤的细胞存活率(P＜0.05);10μmol/L缬沙坦预处理后,培养介质中LDH和MDA的生成减少(P＜0.05),而SOD含量增高(P＜0.05).结论:缬沙坦可能通过稳定细胞膜、抗脂质过氧化反应及提高清除氧自由基,对心肌心肌细胞过氧化损伤起剂量依赖性保护作用.     

黄芪注射液对培养乳鼠心肌细胞再灌注损伤的保护作用

目的研究黄芪注射液抗培养乳鼠心肌细胞再灌注损伤的作用。方法采用培养的SD乳鼠心肌细胞缺氧复氧模型,实验分为六组:A正常对照组,B缺氧组,C黄芪20组,D黄芪100组,E黄芪200组,F黄芪400组。黄芪各组缺氧过程中给予不同浓度黄芪,缺氧4 h,复氧2 h。比较缺氧复氧前后心肌细胞存活率,培养液中心肌酶含量。结果各组缺氧前后谷草转氨酶(GOT)均有差异。复氧后2 h,B、C、D组培养液中心肌酶含量均有不同程度升高(P<0.05)。E、F组GOT值较基础值降低(P<0.05)。与正常组比较,各组细胞经过缺氧复氧后,存活数均有不同程度下降(P<0.01)。与缺氧复氧组比较,加入黄芪保护的黄芪20,黄芪100,黄芪200组均优于单纯缺氧复氧组。黄芪200组存活率最高(P<0.01)。结论黄芪能够减轻培养乳鼠心肌细胞再灌注损伤。     

红景天甙对乳鼠心肌细胞过氧化损伤的保护作用

目的：探讨红景天甙对活性氧致心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法：在应用低浓度过氧化氢处理原代培养乳鼠心肌细胞，建立心肌细胞氧化损伤模型的基础上，通过检测培养介质中乳酸脱氢酶(LDH)活力和电镜观察细胞超微结构的方法评价红景天甙对心肌细胞的保护作用，并通过测定丙二醛(MDA)含量和Na^ ,K^ -ATPase活力探讨其机制。结果：过氧化氢对心肌细胞有显著的损伤作用。红景天甙可使培养介质中的LDH和MDA水平显著下降，细胞Na^ ，K^ -ATPase活力显著提高，同时细胞超微结构得到显著改善。结论：红景天甙对过氧化氢致心肌细胞损伤有保护作用，机理与其抑制脂质过氧化和提高钠泵活力的作用有关。     

诃子提取物含药血清对乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的:研究诃子提取物含药血清对H2O2所致心肌细胞损伤的保护作用.方法:采用H2O2处理培养心肌细胞,造成氧化应激模型,通过检测细胞培养液中LDH、CK漏出量、MDA含量和SOD活性反映诃子提取物含药血清对H2O2氧化模型的影响.结果:与模型组比较,诃子提取物含药血清能显著减少LDH、CK漏出量(P＜0.05,P＜0.01);降低培养液中MDA含量(P＜0.05,P＜0.01),升高SOD活性(P＜0.01).结论:诃子提取物含药血清可减轻H2O2对心肌细胞的损伤程度,对心肌细胞具有保护作用,其机制可能与稳定细胞膜和抗氧化有关.     

αB—晶状体蛋白在保护过氧化氢所致心肌细胞损伤中的作用

采用热休克对新生大鼠心肌细胞进行预处理,以诱导αＢ－晶状体蛋白的表达,并观察其对１ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１的过氧化氢所致心肌细胞损伤的保护作用。发现：热休克预处理组心肌细胞中αＢ－晶状体蛋白表达明显增加,Ｈ２Ｏ２所致的细胞死亡率及ＬＤＨ释放率降低,总抗氧化能力增强;Ｈ２Ｏ２可引起αＢ－晶状体蛋白从胞浆向胞核及微丝位。     

淫羊藿苷预适应对乳鼠心肌细胞的保护作用

目的:探讨淫羊藿苷预适应对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤和氧化损伤的作用及其机制。方法:体外培养原代乳鼠心肌细胞,淫羊藿苷预适应24h后,采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)诱导心肌细胞缺氧/复氧损伤和过氧化氢(H2O2)诱导氧化损伤模型,测定细胞存活率(MTT法)、细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)释放量、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:在缺氧/复氧损伤模型和氧化损伤模型中,淫羊藿苷预适应明显提高细胞存活率,增加胞内SOD活性,降低培养液中LDH释放量和胞内MDA含量。结论:淫羊藿苷预适应对缺氧/复氧损伤以及氧化损伤心肌细胞都具有明显的保护作用,可能与其抑制脂质过氧化作用有关。     

褪黑素对过氧化氢损伤的心肌细胞自身NO生成的影响

目的：探讨氧化损伤时褪黑素（Melatonin,MT)对心肌细胞自身NO生成的影响以及NO水平与其它氧化指标的关系。方法：分高培养原代心肌细胞，分5组：对照组，H2O2处理组，MT组，MT干预组和N－硝基－L－精氨酸（L-nitro-arginine methylester,L-NAME)干预组；用外源性H2O2造成氧化损伤，用生化法检测培养液中乳酸脱氢酶（LDH）浓度，硫代巴比妥酸法检测细胞中丙二醛（MDA）含量，用试剂盒检测细胞培养液中NO含量。结果：H2O2处理组和L－NAME干预组中NO的含量，LDH含量和MDA含量与对照组相比，均差异显（P＜0．01），只是H2O2处理组中三项均比对照组明显增高，而L－NAME干预组中NO含量比对照组明显低；MT组中这三项指标没有明显的变化。MT干预组中虽然与对照组相比也升高，但低于H2O2处理组（P＜0．01）。MT干预组与L－NAME干预组相比其LDH含量和MDA含量也较低（P＜0．01），与H2O2组相比，加入MT干预后，培养液中NO和LDH及MDA含量明显降低（P＜0．01）。，结论：心肌细胞在受H2O2损伤时，心肌细胞自身产生的NO增加，并且在一定程度上参与了对心肌细胞的氧化损伤；MT不仅能抑制LDH和MDA的升高，还能抑制NO的产生。     

玫瑰茄提取物对体外乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

本文利用体外培养的乳鼠心肌细胞,造成缺糖、缺氧性损伤和使用氯丙嗪,丝裂霉素C造成中毒性损伤的心肌细胞病理模型,并以损伤后培养液中乳酸脱氢酶(LDH)量的变化为指标,从细胞水平研究玫瑰茄提取物对培养心肌细胞损伤有无保护作用,结果发现玫瑰茄提取物能使上述因素损伤的心肌细胞乳酸脱氢酶漏出显著减少,表明玫瑰茄提取物对上述因素所致的心肌细胞损伤有保护作用。     

姜黄素对血管内皮细胞过氧化氢损伤的保护作用及其机制研究

目的研究不同浓度姜黄素（Cur）对正常血管内皮细胞活力的影响,及Cur对血管内皮细胞过氧化氢（H2O2）损伤的保护作用及机制。方法用不同浓度Cur（12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L）处理体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）8 h,MTT法检测不同浓度Cur对HUVECs存活率的影响;H2O2（250μmol/L）孵育建立HUVECs损伤模型,不同浓度Cur（12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L）与H2O2共同处理HUVECs 4 h,检测细胞存活率,黏附能力和培养液中乳酸脱氢酶（LDH）释放量;Griess法测定培养液中NO2-浓度,反映内皮细胞释放一氧化氮（NO）量。结果不同浓度Cur处理内皮细胞8 h后,内皮细胞的存活率无统计学差异（P〉0.05）;Cur能明显提高H2O2损伤的内皮细胞存活率和黏附能力（P〈0.01）,降低内皮细胞LDH的释放（P〈0.01）;增加H2O2损伤后HUVECs培养液中NO含量（P〈0.01）。其中Cur浓度为25μmol/L时效果最明显。结论不同浓度Cur（12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L）对内皮细胞的存活率均无影响;Cur对血管内皮细胞氧化损伤具有保护作用,机制可能与其促进NO的合成有关。     

脂质过氧化对培养心肌细胞的损伤作用

应用氢过氧化枯烯作用于培养的心肌细胞，观察到心肌细胞细胞及培养液中脂质过氧化物含量增加，细胞膜流动性下降，细胞维生素Ｅ含量减少，＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率降低，细胞内酶类漏出增加以及细胞超微结构改变。表明氢过氧化枯烯激发和促进了培养心肌细胞的脂质过氧化过程，提示以氢过氧化枯烯作用于培养心肌细胞，可作为估价体外心肌细胞脂质过氧化损伤的模型之一。     

牛磺酸对培养乳鼠心肌细胞缺氧坏死的保护作用

目的　观察牛磺酸 (Tau)对缺氧引起的心肌细胞坏死有无直接保护作用。方法　将培养心肌细胞分为正常对照、Tau对照缺氧 Tau和缺氧 4个组。测定培养细胞上清液中肌酸磷酸激酶 (CPK)活性 ,用原子吸收法测定细胞内钙、镁含量 ,Annexin V- FITC/ PI双染流式细胞术和台盼蓝染色镜检检测坏死细胞。结果　 Tau可使缺氧时培养细胞上清液中CPK活性降低 30 % ,坏死细胞减少大约 2 0 %。减少细胞内钙超载和镁丢失。结论　 Tau对缺氧导致的心肌细胞坏死有直接保护作用 ,此作用可能与减少细胞内钙超载和镁丢失有关。     

牛磺酸对培养乳鼠心肌细胞缺氧坏死的保护作用

目的观察牛磺酸(Tau)对缺氧引起的心肌细胞坏死有无直接保护作用.方法将培养心肌细胞分为正常对照、Tau对照缺氧 Tau和缺氧4个组.测定培养细胞上清液中肌酸磷酸激酶(CPK)活性,用原子吸收法测定细胞内钙、镁含量,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术和台盼蓝染色镜检检测坏死细胞.结果Tau可使缺氧时培养细胞上清液中CPK活性降低30%,坏死细胞减少大约20%.减少细胞内钙超载和镁丢失.结论Tau对缺氧导致的心肌细胞坏死有直接保护作用,此作用可能与减少细胞内钙超载和镁丢失有关.     

冰片对过氧化氢损伤后大鼠心肌微血管内皮细胞的保护作用

目的 研究冰片对心肌微血管内皮细胞的保护作用。方法 体外培养的大鼠心肌微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelial cells, CMECs),采用CCK-8(cell counting kit-8)检测细胞活力,建立过氧化氢H₂O₂损伤CMECs模型,确定实验适宜的H₂O₂浓度及冰片治疗浓度。将CMECs分为对照组、H₂O₂损伤组及冰片治疗组。通过检测氧化应激反应多种中间产物含量及线粒体功能等,观察比较冰片对H₂O₂诱导的CMECs损伤的保护作用。结果 H₂O₂损伤组与对照组比较,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、NADPH氧化酶、氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione, GSSG)含量明显增加,还原型谷胱甘肽(reduced ...     

黄芪甲苷诱导NO生成并激活PKCε对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究黄芪甲苷(AsⅣ)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,阐明其作用机制。方法:30只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、再灌注模型组、阳性药尼可地尔(10mg.kg-1)组、AsⅣ(5mg.kg-1)组及AsⅣ+氯化白屈莱赤碱(CHE)(3mg.kg-1)组,每组6只,结扎左冠状动脉前降支30min,松扎再灌注120min制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,检测AsⅣ对其血清中LDH、MDA和SOD以及NO的影响,同时光镜下观察心肌细胞病理组织形态学变化,Western blotting法检测心肌细胞胞浆及胞膜PKCε蛋白表达。结果:AsⅣ组与模型组比较,LDH漏出量降低(P<0.05),MDA含量明显降低(P<0.01),SOD活力增强(P<0.01),NO含量增加(P<0.01)。HE染色组织形态学观察,与模型组比较,AsⅣ组心肌细胞形态有明显的改善,炎细胞浸润也有减轻。Western blotting法检测,AsⅣ组心肌细胞胞膜PKCε表达量高于模型组(P<0.05)。CHE减弱了ASⅣ的这种保护作用;与AsⅣ组比较,AsⅣ+CHE组LDH漏出量升高(P<0.05),MDA含量升高(P<0.01),SOD活力降低(P<0.01),PKCε胞膜表达量降低(P<0.05),心肌细胞水肿明显、胞质着色较浅。结论:AsⅣ通过诱导NO的生成对大鼠心肌缺血再灌注损伤产生保护作用,PKCε的激活可能是AsⅣ保护心肌细胞信号传导通路的组成部分。     

黄芪甲苷诱导NO生成并激活PKCε对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究黄芪甲苷（AsⅣ）对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,阐明其作用机制。方法：30只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、再灌注模型组、阳性药尼可地尔(10 mg/kg) 组、AsⅣ (5 mg/kg)组及AsⅣ+氯化白屈莱赤碱(CHE)（3 mg/kg）组,每组6只,结扎左冠状动脉前降支30 min,松扎再灌注120 min 制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,检测AsⅣ对其血清中LDH、MDA和SOD以及NO的影响,同时光镜下观察心肌细胞病理组织形态学变化, Western blotting 法检测心肌细胞胞浆及胞膜PKCε 蛋白表达。结果：AsⅣ组与模型组比较,LDH漏出量降低 (P<0.05), MDA含量明显降低(P<0.01), SOD活力增强(P<0.01), NO含量增加(P<0.01)。HE染色组织形态学观察,与模型组比较,AsⅣ组心肌细胞形态有明显的改善,炎细胞浸润也有减轻。Western blotting 法检测,AsⅣ组心肌细胞胞膜PKCε表达量高于模型组（P<0.05）。CHE减弱了ASⅣ的这种保护作用;与AsⅣ组比较,AsⅣ+CHE组LDH漏出量升高 (P<0.05), MDA含量升高(P<0.01), SOD活力降低(P<0.01),PKCε胞膜表达量降低（P<0.05）,心肌细胞水肿明显、胞质着色较浅。结论：AsⅣ通过诱导NO的生成对大鼠心肌缺血再灌注损伤产生保护作用,PKCε的激活可能是AsⅣ保护心肌细胞信号传导通路的组成部分。