供者抗原门静脉输注对大鼠皮肤移植存活的影响

目的：探讨特异性抗原诱导免疫耐受的作用。方法：通过门静脉途径输注脾细胞、骨髓细胞,观察皮肤移植模型。结果：受体接受供体脾细胞（DSC）、骨髓细胞（DBMC）及同时接受（DSC）和（DBMC）后能诱导受体产生免疫耐受。结论：肝脏特殊的免疫功能在免疫耐受产生中起重要作用。     

小剂量骨髓细胞联合脾细胞输注调节受体特异性免疫状态的研究

目的建立供体小剂量骨髓细胞输注同时联合脾细胞输注对受体特异性免疫状态的调节方法，建立相应的评估体系，探索其调节效应。方法C57BL／6小鼠输注小剂量BALB／C小鼠骨髓细胞或骨髓细胞脾细胞联合输注，观察受体存活状况，3个月后建立混合淋巴细胞培养体系，评估受体特异性免疫状态。结果受体存活好，移植物抗宿主反应强度较低，混合淋巴细胞反应联合输注较骨髓细胞输注稍低但差异无显著性。结论供体骨髓细胞联合脾细胞输注可以在减少骨髓细胞输注量时仍有效调节受体特异性免疫状态。混合淋巴细胞培养体系是一种有价值的评估方法。     

多异体脐血输注诱导产生免疫低反应性的实验与临床研究

目的　探讨多异体脐血输注诱导肾移植受者产生同种免疫低反应的可行性及对移植肾早期排斥反应的影响。方法　对 2 0例肾移植受者术前行多异体脐血输注 ,分别于输血前及输血后 1月、2月、3月 ,检测受者和供者特异性单向混合淋巴细胞反应 ( ML R)等指标的变化 ;并比较肾移植术后早期脐血组与对照组排斥反应的发生情况。结果　脐血输注后受者对供脐血的特异的 ML R显著降低 ( P<0 .0 1) ,对无关成人的 ML R亦有明显下降( P<0 .0 5 )。移植后三月脐血组无一例排斥反应发生。结论　多异体脐血输注能诱导肾移植受者产生同种免疫低反应性。这种低反应性可能对移植肾早期排斥反应的发生有抑制作用。肾移植前多异体脐血输注有望成为临床实用的耐受诱导途径     

输供体骨髓对可溶性Fas的影响

目的通过测定病人血清中sFas的含量,观察输供体骨髓对肾移植前后sFas含量变化的影响,探讨sFas与输供体骨髓(DBM)之间的关系及意义。方法：80例肾移植病人分为四组,第一组术前用免疫抑制剂霉酚酸酯(MMF) 输供体骨髓;第二组术前用免疫抑制剂;第三组术前输供体骨髓;第四组术前MMF与DBM均不使用。分别在术前、术后6月和12月采血测sFas含量。结果：第一组与第二组、第四组相比有极显著差异,第三组与第二、第四组相比有明显差异;第一、第三组术后6月、12月与术前相比有明显差异,但术后6月和12月相比无显著差异。结论：受者体内血清中sFas水平升高可能与输供体骨髓能持续提供抗原刺激有关,受者CTL及TH1被抗原激活后表达Fas及FasL而发生凋亡,起到抑制排斥反应的作用。     

非清髓性供者造血干细胞移植对肾移植受者免疫功能的影响

目的：探讨肾移植受者进行非清髓性供者造血干细胞移植诱导免疫耐受、降低排斥反应的有效性、安全性。方法：根据ABO／Rh血型相同及HLA氨基酸残基配型相容原则，将同期等待肾移植的96例女性慢性肾功能衰竭患者随机分为观察组和对照组，各48例。观察组接受同一供体的骨髓一肾联合移植；对照组接受上述供体的肾移植。应用流式细胞术检测外周血CD3＋、CD4＋．CD8＋、CD19＋、CD4＋CD25＋细胞百分比，应用酶联免疫吸附法检测IL-10、TNF-d浓度。结果：移植后随着时间延长，观察组CD3＋．CD4＋、CD19＋细胞百分比及TNF吨浓度持续降低，与对照组相比，60d后CD3＋、CD4＋．CD19＋下降最明显（P〈0．05），之后稳定在一个水平；观察组CD8＋降低不明显，但CD4＋／CD8＋比值明显降低；观察组CD4＋CD25＋百分比及IL-10浓度持续升高，与对照组相比，CD4＋CD25＋百分比90d时升高最明显（P〈0．05），IL-10浓度30d时升高最为明显（P〈0．05）。观察组急性排斥发生率为12％，对照组为29％，两组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：供体特异性造血干细胞移植是一种安全、有效地诱导肾移植免疫耐受的临床治疗方法，能够降低排斥反应的发生，但更深层次的免疫机制有待进一步探讨。     

间充质干细胞在致敏受者造血干细胞移植中的作用

【目的】 本实验拟研究骨髓间充质干细胞(MSC)在致敏受者造血干细胞移植中的作用?【方法】 体外分离BALB/c小鼠骨髓细胞,通过贴壁培养方法获得MSC,应用流式细胞仪检测细胞表面分子标记?通过异基因脾细胞输注方法建立致敏动物模型;绿色荧光染料标记骨髓MSC,分别移植到非致敏及致敏受者体内,并于移植后不同时间点检测MSC的归巢情况?致敏BALB/c小鼠经照射预处理,联合应用同基因MSC与异基因骨髓细胞移植,每日观察小鼠的生存情况?【结果】 体外培养第4代MSC表现为长梭形,阴性表达造血细胞表面分子而阳性表达粘附分子?动物体内实验发现移植后第48小时,MSC在非致敏受者体内主要归巢于骨髓,而在致敏受者体内主要归巢于脾脏?造血干细胞移植实验中,致敏小鼠接受同基因骨髓MSC与异基因骨髓细胞移植,结果发现致敏小鼠在移植后第12 ~ 16天全部死亡,生存中位数时间是14 d?【结论】 成功培养小鼠骨髓MSC;移植后MSC在致敏受者体内主要归巢于脾脏组织;联合应用MSC移植并不能有效促进异基因造血干/祖细胞在致敏受者体内植入?     

骨髓移植后粒系祖细胞异常的研究

骨髓移植受者在输注骨髓前,均需接受大剂量免疫抑制剂和射线,结果导致自身骨髓干细胞受到严重破坏。经同种或自身骨髓输注后,通常在1～2个月内,外周血细胞数及骨髓细胞数均可恢复正常水平,但这些受者较长时间内,对细胞毒药物特别敏感。为弄清骨髓移植后受者的干细胞是否能完式恢复,我们研究了29例骨髓移植受者的粒系祖细胞(CFU-GM)的改变。29例骨髓移植受者均来自UCLA骨髓移植中心,包括白血病、再生障碍性贫     

供者特异性抗原经外周输注诱导免疫耐受的研究

为探索诱导免疫耐受的途径和方法，作者采用大鼠异位心脏（颈部）移植模型，经外周途径输注不同品系供者的不同特异性抗原，包括供体特异性输血（ Ｄ Ｓ Ｔ）、供体特异性脾细胞（ Ｄ Ｓ Ｓ Ｌ）、供体特异性骨髓细胞（ Ｄ Ｓ Ｂ Ｍ）。结果显示： Ｄ Ｓ Ｔ、 Ｄ Ｓ Ｓ Ｌ和 Ｄ Ｓ Ｂ Ｍ 均能诱导受者对移植物产生特异性免疫耐受，其中以脾细胞和骨髓细胞效果最好，平均移植物存活时间分别达到 ４２９±６６７ 和 ４０３±１１６ 天。混合淋巴细胞反应（ Ｍ Ｌ Ｒ）和 Ｔ 亚群（ Ｃ Ｄ８＋ ）检测在一定程度上反映了机体 Ｔ 细胞免疫状态，有助于对耐受的评价。成分输注供者特异性抗原作为刺激抗原，可望成为较理想的临床耐受诱导途径。     

霉酚酸血药浓度监测在肾移植受者中的应用进展

霉酚酸是器官移植中广泛应用的免疫抑制剂,在肾移植受者体内暴露不足或过暴露可造成移植受者的不良临床结局。霉酚酸血药浓度监测主要通过有限采样法估算其血浆浓度,受多种因素(合并用药、有限采样方法、供体特异性抗体等)影响,特别是儿童肾移植受者等特殊人群。此外,霉酚酸在个体间及个体内存在显著的血药浓度变异性,因此霉酚酸的血药浓度监测可为肾移植受者合理个体化用药提供帮助。短期霉酚酸血药浓度监测有助于肾移植受者的良好临床结局,但远期效果仍需更多临床研究进一步证实。     

受者外周血淋巴细胞黏附分子基因表达对肾移植急性排斥反应的预测作用

目的 探讨肾移植受者外周血淋巴细胞LFA-1、ICAM-1基因表达水平对术后急性排斥反应的预测作用.方法 (1)在取肾同时取供体脾脏,并制成脾细胞悬液.在术前及术后第4天分别抽取受者外周静脉血,并分离出淋巴细胞.同时跟踪调查受者术后1个月内急性排斥反应的发生情况.(2)以供者及无关者脾细胞为刺激细胞,受者淋巴细胞为反应细胞,做混合淋巴细胞培养.采用MTT法测定供者及无关者脾细胞刺激受者淋巴细胞增殖的刺激指数.采用半定量RT-PCR方法测定在供体脾细胞、无关者脾细胞刺激及未刺激时,受者淋巴细胞LFA-1、ICAM-1基因表达水平.结果 (1)本组研究了35例能够获取外周血淋巴细胞及供体脾细胞的患者,术后1个月内发生过急性排斥反应10例,未发生急性排斥反应25例,急性排斥反应发生率28.6%.(2)术前及术后第4天时,供体及无关者脾细胞刺激受者淋巴细胞增殖的刺激指数在发生急性排斥反应与未发生急性排斥反应受者之间差异无统计学意义(P＞0.05).术后第4天,正常组淋巴细胞对供体脾细胞反应的刺激指数术后较术前的下降值明显高于排斥组,二者之间差异有统计学意义(P＜0.05);而正常组和排斥组淋巴细胞对无关者脾细胞反应的刺激指数术后较术前的下降值差异无统计学意义(P＞0.05).(3)术前及术后4d,未刺激时,受者淋巴细胞LFA-1、ICAM-1基因表达水平在发生急性排斥反应与未发生急性排斥反应受者之间差异无统计学意义(P＞0.05);术前及术后4d,无关者脾细胞对受者淋巴细胞刺激时,受者淋巴细胞LFA-1、ICAM-1基因表达水平在发生急性排斥反应与未发生急性排斥反应受者之间差异无统计学意义(P＞0.05);术前及术后4d,供者脾细胞对受者淋巴细胞刺激时,受者淋巴细胞LFA-1、ICAM-1基因表达水平在发生急性排斥反应与未发生急性排斥反应的受者之间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 (1)术前、术后受者淋巴细胞对供体特异抗原及无关者抗原反应的刺激指数,对术后急性排斥反应发生无预测作用;而术后,受者淋巴细胞对供体抗原反应的刺激指数较术前的下降值可能有一定的预测作用.(2)术前、术后在无关者抗原刺激及无抗原刺激时,肾移植受者外周血淋巴细胞LFA-1、ICAM-1基因表达水平对术后急性排斥反应发生无预测作用.(3)术前、术后在供体特异抗原刺激时,肾移植受者外周血淋巴细胞LFA-1、ICAM-1基因表达水平对术后急性排斥反应发生有明显预测作用.     

输供体骨髓对可溶性人类白细胞抗原-I的影响

目的：通过测定肾移植病人各处理组的可溶性人类白细胞抗原-1(sHLA-Ⅰ)含量,探讨sHLA-Ⅰ在排斥及预后中的意义。方法：80例肾移植病人分为四组,第一组术前用免疫抑制剂骁悉(MMF) 输供体骨髓;第二组术前用MMF;第三组术前输供体骨髓;第四组术前不用MMF也不输供体骨髓。术前、术后6月和12月采血测sHLA-Ⅰ含量。结果：第一组与第二组、第四组相比有极显著差异,第三组与第二、第四组有明显差异;第一、第三组术前术后相比有明显差异,且术后12月表现更为显著;第二、四组之间无差异。结论：输供体骨髓后,血清中sHLA-Ⅰ含量增加,sHLA-Ⅰ以阻断受者识别供体抗原,形成免疫耐受,这可能是移植后排异反应减少的原因之一;免疫抑制剂MMF对sHLA-Ⅰ影响不大,说明MMY、是通过非sHLA-Ⅰ途径起作用的。     

Establishment of a sensitized canine model for kidney transplantation

Objective:To establish a sensitized canine model for kidney transplantation. Methods: 12 male dogs were averagely grouped as donors and recipients. A small number of donor canine lymphocytes was infused into different anatomic locations of a paired canine recipient for each time and which was repeated weekly. Specific immune sensitization was monitored by means of Complement Dependent Cytotoxicity (CDC) and Mixed Lymphocyte Culture (MLC) test. When CDC test conversed to be positive and MLC test showed a significant proliferation of reactive lymphocytes of canine recipients, the right kidneys of the paired dogs were excised and transplanted to each other concurrently. Injury of renal allograft function was scheduled determined by ECT dynamic kidney photography and pathologic investigation. Results:CDC test usually conversed to be positive and reactive lymphocytes of canine recipients were also observed to be proliferated significantly in MLC test after 3 to 4 times of canine donor lymphocyte infusions. Renal allograft function deterioration occurred 4 d post-operatively in 4 of 6 canine recipients, in contrast to none in control dogs. Pathologic changes suggested antibody-mediated rejection (delayed) or acute rejection in 3 excised renal allograft of sensitized dogs. Seven days after operation, all sensitized dogs had lost graft function, pathologic changes of which showed that the renal allografts were seriously rejected. 2 of 3 dogs in control group were also acutely rejected. Conclusion：A convenient method by means of repeated stimulation of canine lymphocyte may induce specific immune sensitization in canine recipients. Renal allografts in sensitized dogs will be earlier rejected and result in a more deteriorated graft function.     

犬肾移植致敏模型的建立

目的建立犬致敏后的肾移植动物模型。方法雄性家犬各6条配对作为淋巴细胞供受体,采用小剂量（0.4×10^7-1.2×10^7个/kg）淋巴细胞多部位多次输注的方法诱导致敏。用补体依赖的淋巴细胞毒（complement deendent cytotoxicity,CDC）和混合淋巴细胞培养（mixed lymphocyte culture,MLC）试验进行检测。当CDC转为阳性和MLC显示反应淋巴细胞增殖明显活跃后,淋巴细胞供受体犬间进行交叉肾移植,术后定期ECT动态显像观察移植肾功能变化;分批摘取移植肾行病理检查,观察排斥反应发生情况。结果实验犬均在输注淋巴细胞3-4次后CDC转为阳性,MLC显示反应淋巴细胞增殖明显活跃。肾移植术后4天ECT检查有4条致敏犬移植肾血流灌注下降,肾功能出现损害,摘取的3只移植肾病理检查表现为抗体介导的排斥（延缓）或急性排斥反应;对照组未见异常。术后7天,致敏犬移植肾均因急性排斥失功;对照组3条犬有2条出现肾功能损害,病理检查示急性排斥反应。结论小剂量淋巴细胞多部位多次输注可以诱导出家犬的免疫致敏状态。致敏犬肾移植术后移植肾排斥反应出现较早,肾功能损害更严重。     

供体脾灌注对高度致敏肾移植受者嵌合体形成的影响

目的探讨供体脾灌注对高度致敏肾移植受者稳定期嵌合体形成及移植肾功能的影响。方法对16例高度致敏患者进行配对分组,实验组肾移植术中先予供体脾灌注40min,前瞻性观察脾灌注对患者术后6个月内嵌合体形成、移植肾排斥反应发生及移植肾功能的变化。结果脾灌注后受者外周血中供者来源的有核细胞数量显著增加,受者形成稳定嵌合体的时间较早,例数比对照组更多;肾移植术后脾灌注组排斥反应发生时间较对照组延迟,排斥反应严重程度明显较对照组轻微;术后6个月时,脾灌注组患者血肌酐值低于对照组。结论供体脾灌注可以显著提高高敏肾移植受者外周血中供者来源的有核细胞数量,减轻排斥反应强度,从而促进受者嵌合体的形成,有利于改善稳定期移植肾功能。     

AZATHIOPRINE INDUCED BONE MARROW SUPPRESSION IN LIVE RELATED RENAL ALLOGRAFT RECIPIENTS

Over a follow-up period of 6 years, 4 out of 31 live related renal allograft recipients (12.9%) developed azathioprine induced bone marrow suppression. Presentation in 3 patients was with fever and 2 patients also had associated graft dysfunction. All patients had leucopenia, 2 patients in addition had anaemia and one patient had pancytopenia. Bone marrow suppression developed 9.6 months (3.5-16.0 months) following transplantation and recovery followed over a period of 30 (18-49 days) days after withdrawal of the drug. One patient succumbed during the phase of bicytopenia.KEY WORDS: Azathioprine, Bone marrow suppression, Kidney transplantation     

应用普乐可复、霉酚酸酯与强的松预防心脏移植排斥反应

目的评价普乐可复、霉酚酸酯与强的松联合使用预防心脏移植排斥反应的效果及毒副作用。方法受者为４３岁, 终未期扩张型心肌病女性患者,于２０００年４月行同种异体原位心脏移植术。术后应用普乐可复、霉酸酚酯与强的松预 防心脏移植排斥反应。结果　患者术后１３个月无明显排斥反应征象,无感染、肝肾功能损害等严重并发症。药物的副作 用主要表现为胃肠道不适及轻度的骨髓抑制。结论新型免疫抑制剂普乐可复、霉酚酸酯联合强的松预防术后排斥反应 疗效显著,毒副作用少。     

供肾质量和受者体质量与移植肾远期功能的关系

OBJECTIVE: To investigate the relationship of the renal allograft weight and the recipient's body weight with allograft function after transplantation. METHODS: The correlation of the renal allograft weight, the recipient's body weight, the ratio of the allograft weight to the recipient body weight and the mean serum creatinine (sCr) 3 years after transplantation were measured in 108 kidney recipients. RESULTS: The allograft weight was inversely correlated with the mean sCr 3 years after transplantation (P<0.01). CONCLUSION: The renal allograft weight, recipient's body weight and the ratio of allograft weight to recipient's body weight are important indicators of the long-term allograft function after transplantation, and recipients with greater body weight should receive allografts of higher weight.     

亲属肾移植患者术后肾功能与HLA配型和PRA相关性研究

目的研究活体亲属肾移植受者人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)配合率、群体反应性抗体(panelreactive antibody,PRA)的产生和肾功能变化对移植肾存活的影响。方法将336例活体亲属肾移植患者分为5组:①父母给子女供肾组(118例)。②子女给父母供肾组(12例)。③兄弟姐妹间供肾组(107例)。④其他亲属供肾组(92例)。⑤夫妻间供肾组(7例)。进行HLA供受者配合率分析,并于肾移植术后1-4年追踪肾功能变化和PRA产生的情况。HLA分型检测采用美国One lanmbda公司提供的HLA-PCR-SSP分型试剂盒。PRA采用美国莱姆德公司和美国GTI公司提供的酶联免疫吸附试剂盒检测。结果第1组的118例肾移植供受者HLA-A、B、DR、DQ抗原单体型半相合,其中有22例抗原配合率高于单体型半相合。肾移植术后有36例患者出现肾功能下降,其中8例为PRA阳性。第2组的12例肾移植供受者HLA-A、B、DR、DQ抗原单体型半相合,其中有7例HLA抗原配合率高于单体型半相合。肾移植术后1例患者肾功能下降,且为再次肾移植患者。第3组的107例兄弟姐妹间HLA-A、B、DR、DQ配型完全相配合有18例,73例为单体型半相合或大于单体型半相合,其余为低于单体型半相合或不相合。肾移植术后中有13例患者肾功能下降,其中3例PRA阳性。第4组的92例其他亲属移植的供受者间HLA-A、B、DR、DQ等于或大于单体型半相合的有24例,完全不相合的有9例,虽然HLA抗原配合率大于4个抗原,但并不是单体型半相合抗原的有8例,等于或小于3个抗原配合的有51例。肾移植术后有11例患者肾功能下降,其中6例患者PRA阳性。第5组的7例夫妻间肾移植患者,HLA配合率均≤3个抗原。肾移植术后有2例患者肾功能下降,且为PRA阳性。结论父母、子女及兄弟姊妹等直系亲属肾移植供受者中HLA配合率高于其他亲属间移植供受者,但兄弟姊妹间HLA配型完全相同的则较低。HLA配型与近期移植肾存活无关,而与供者的年龄有关。良好的HLA配型与肾移植术后PRA生成的概率低有关。     

剔除CCR5基因供者小鼠细胞加重急性移植物抗宿主疾病

目的评价供者CCR5在经过强化预处理的骨髓移植动物模型受者体内的作用,为异基因造血干细胞移植的临床应用提供科学依据。方法经过致死剂量照射的BALB/C小鼠接受异基因C57BL/6小鼠骨髓移植。根据回输的细胞不同分为4组:1)B6 CCR5 KO组,受者接受C57BL/6 CCR5-/-小鼠骨髓和脾脏细胞;2)B6 WT组,受者接受野生型C57BL/6小鼠骨髓和脾脏细胞;3)B6 CCR5 KO BMC组,受者只接受C57BL/6 CCR5-/-小鼠骨髓细胞;4)B6 WT BMC组,受者只接受野生型C57BL/6小鼠骨髓细胞。结果与B6 WT组比较,B6 CCR5 KO组小鼠以更快的速度死于急性移植物抗宿主疾病(GVHD);其受者体内的CD8+T细胞大量增生;T细胞恢复后产生更多的干扰素-γ(INF-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),T细胞有丝分裂原刀豆素水平处于较高水平,进一步促进T细胞增生。组织学检测提示移植剔除CCR5基因受者细胞的小鼠肾脏出现病理损伤,肝脏存在更为严重的病理变化。结论剔除CCR5基因的异基因骨髓移植使GVHD发病率增加,供者CD8+T细胞在受者体内增生加重肝肾损害。提示CCR5在异基因骨髓移植中起着重要作用。