不同饮食负荷对葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽的影响

目的探讨不同饮食负荷对正常糖耐量人群的葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽(glucose-dependent insulinotropicploypeptide,GIP)分泌模式的影响,及其与胰岛素分泌、血浆葡萄糖水平的关系。方法 14例正常糖耐量受试者先后接受75 g葡萄糖耐量及混合餐耐量试验,检测空腹及葡萄糖或混合餐后15,30,60,90和120 min的血糖、胰岛素及GIP。结果(1)葡萄糖负荷后GIP的第一个峰值在糖负荷后15 min(45.09±4.67)pmol/L,短暂下降之后持续上升至120 min(59.66±11.73)pmol/L;(2)混合餐负荷后GIP分泌呈双时相曲线,第一峰值在15 min(71.69±14.19)pmol/L,显著高于同时点的葡萄糖负荷(P<0.05);第二个峰在90 min(55.35±13.19)pmol/L。两种饮食负荷后GIP曲线下面积无统计学差异(P>0.05);(3)随着混合餐负荷时GIP早期分泌(15 min)第一峰值升高幅度较葡萄糖负荷大,胰岛素达峰时间提前(30 min vs 60min),同时混合餐负荷后15 min血糖升高幅度明显低于葡萄糖负荷(P<0.05)。结论正常糖耐量人群两种饮食负荷后GIP分泌曲线明显不同,混合餐后GIP分泌呈典型的双相分泌,其第一峰值显著高于葡萄糖负荷,提示混合餐(含脂肪)刺激GIP释放较强,使胰岛素达峰时间提前,可能是混合餐血糖峰值较低的重要原因之一。     

口服新型降糖多肽ODA的设计及其口服降糖活性

肠促胰岛素分泌肽胰高血糖素样肽-1(GLP-1)和葡萄糖依赖性促胰岛素释放多肽(GIP)能通过血糖依赖机制促进胰岛素分泌,其特异性结合受体GLP-1R和GIPR是治疗2型糖尿病的良好靶点。以本实验室前期设计的口服降糖多肽OHP2为基础,设计了可口服的新型降糖多肽——ODA。ODA较OHP2的亲脂性提高,在Caco-2细胞中的胞吞能力及跨细胞转运能力更强。ODA保留了OHP2对GLP-1R的激活能力,增强了与GIPR的结合能力。口服低剂量ODA(0.53 mg/kg)即可达到与口服OHP2(1.06 mg/kg)相当的降糖水平。研究结果显示,ODA是治疗2型糖尿病极具潜力的口服药物。     

腹内侧前额叶注射β淀粉样多肽对大鼠自发活动的影响

目的检测腹内侧前额叶微注射B淀粉样多肽对大鼠自发活动的影响。方法双侧腹内侧前额叶边缘下皮层区（IL区）微量注射Aβ142作为Aβ组,微注射溶媒为溶媒组,27天后进行自发活动检测,腹内侧前额叶进行石蜡切片HE染色。结果虽然HE染色显示Aβ组IL区细胞受损或完全消失,但Aβ组和溶媒组在大鼠自发活动的总路程、总时间、中间区域活动路程和中间区域活动时间等方面比较,差异均无显著性。结论腹内侧前额叶边缘下皮层区微注射β淀粉样多肽不影响大鼠本身的自发活动。     

携带抑胃多肽序列的HBc 病毒样颗粒蛋白疫苗的制备及其免疫效果

目的:设计及制备携带抑胃多肽(GIP)抗原序列的HBc病毒样颗粒(VLP)蛋白疫苗,并研究其免疫效果,为肥胖免疫干预治疗提供新的策略。方法:克隆GIP cDNA序列,并与HBc VLP(1~144aa)cDNA序列进行融合,通过原核表达及纯化,制备携带GIP序列的HBc VLP疫苗(HBc-GIP);同时将该融合基因的cDNA序列克隆入pVAX1真核表达载体,制备GIP核酸疫苗。用2种疫苗免疫大鼠并进行免疫学指标评价。结果:成功制备了携带GIP抗原序列的HBc-GIP,并同时制备了编码该融合蛋白序列的核酸疫苗pVAX1-HBc-GIP。经过两种疫苗的联合免疫,可以获得高滴度的GIP特异性抗体IgG,显示了良好的免疫效果。结论:采用HBc(1~144aa)作为GIP的载体,制备VLP蛋白疫苗,联合核酸疫苗免疫可以有效地诱导靶向大鼠GIP的特异性体液免疫反应,打破大鼠自身抗原耐受。该疫苗可以作为一种新的控制肥胖的免疫干预药物来进一步深入研究。     

葡萄糖依赖性促胰岛素多肽受体基因敲除小鼠不同部位骨密度的动态改变

[目的]观察葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)受体基因敲除小鼠(GIPR-/-小鼠)不同部位骨密度的动态改变.[方法]用双能X线吸收仪(DEXA)测定不同月龄(1月龄、3月龄和5月龄)的雌性GIPR-/-小鼠和野生型对照C57BL/6小鼠不同部位(全身、股骨和腰椎)的骨密度(BMD)、骨矿含量(BMC)和骨骼面积.[结果]1月龄、3月龄和5月龄GIPR-/-小鼠的全身BMD、BMC和骨骼面积以及1月龄和3月龄GIPR-/-小鼠的股骨BMD均低于对照小鼠相应值,而1月龄GIPR-/-小鼠的腰椎BMD则高于对照小鼠相应值(P均＜0.05).5月龄与3月龄相比,GIPR-/-小鼠上述部位的BMD、BMC和骨骼面积无显著变化,而在对照小鼠仍有明显增加(P均＜0.05).[结论]与对照小鼠相比,GIPR-/-小鼠的BMD、BMC和骨骼面积均有明显改变,并与部位和月龄相关,提示GIP对小鼠骨转换有一定的作用.进一步提示在营养物的获得和骨代谢之间,除甲状旁腺激素-维生素D轴外,还存在着"肠-骨轴",即肠道与营养代谢相关激素对骨代谢也有一定的调节作用.     

胃促生长素对大鼠胃排空的影响

目的观察不同剂量的胃促生长素（Ghrelin）腹腔注射后大鼠胃排空效应,阐明Ghrelin在胃排空调节中的作用。方法将50只Wistar大鼠随机分为对照组和4个实验组（A、B、C、D）,每组各10只,4个实验组分别采用不同剂量的Ghrelin（0.5、1.0、1.5、2.0 nmol/kg）腹腔注射,对照组采用0.9%氯化钠注射液1ml腹腔注射,45min后每只大鼠半固体糊1.0ml灌胃,30min后处死,测定胃排空率,比较5组间胃排空率的差异。结果腹腔注射Ghrelin后大鼠胃排空率（36.08±5.57）%,与对照组的（27.18±2.37）%相比有明显加快（P＜0.05）,而且该效应与腹腔注射Ghrelin的量有一定的关系,小剂量Ghrelin（0.5nmol/kg）腹腔注射对胃排空无明显影响（P＞0.05）,但中、大剂量Ghrelin腹腔注射能明显加速大鼠胃排空效应（均P＜0.01）。结论中、大剂量Ghrelin腹腔注射能明显加快健康大鼠的胃排空效应。     

糖尿病大鼠胃旁路手术前后抑胃肽水平的检测及其意义

目的:检测糖尿病大鼠胃旁路手术（GBP）前后抑胃肽（GIP）水平的变化,探讨GBP治疗2型糖尿病的可能机制。方法：将40只8周龄的Wistar大鼠腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病大鼠模型,并随机分为对照组、饮食控制组、假手术组和手术组,每组10只。对照组大鼠自由进食,饮食控制组控制大鼠进食量为15 g/d,假手术组大鼠行GBP后行原位端端吻合,手术组大鼠行GBP;分别于术前及术后1、2、4、8周检测各组大鼠空腹、餐后血糖和胰岛素及GIP水平。结果：与术前比较,手术组大鼠术后空腹和餐后血糖显著下降并低于其他各组的相应时间点(P<0.01);空腹和餐后血清胰岛素水平显著升高,且明显高于其他各组的相应时间点(P<0.01);术后第4和8周手术组大鼠空腹、餐后血清GIP水平明显低于其他各组相应时间点 (P<0.01);术后1周,手术组及假手术组大鼠平均进食量均减少,之后均逐渐增加。手术组大鼠平均进食量自术后第2周起再次减少,术后第3周至实验结束少于假手术组和对照组 (P＜0.05)。与术前比较,术后1周内手术组、假手术组、饮食控制组大鼠体质量均明显下降(P＜0.05)。结论：糖尿病大鼠施行GBP后血糖及血清GIP水平下降,其机制可能与GIP分泌减少和解除周围组织胰岛素抵抗有关。     

初诊2型糖尿病患者肠促胰岛素和胰高血糖素水平的变化

目的 探讨初诊2型糖尿病(T2DM)患者血清肠促胰岛素和胰高血糖素水平的变化.方法 选取21例初诊T2DM患者(T2DM组)和17例血糖正常的健康体检者(对照组).两组均行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),测定0、30、120 min时静脉血中胰高血糖素样肽1(GLP-1)、葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽(GIP)和胰高血糖素水平.结果 T2DM组患者OGTT中各时点的GLP-1水平[分别为(11.6±4.4)、(14.2±5.4)、(15.1±7.3)pmol/L]较对照组[分别为(18.8±3.1)、(21.8±4.2)、(23.7±4.8)pmol/L]显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05);而两组患者各时点GIP水平无显著变化;但T2DM组患者各时点胰高血糖素水平[(16.1±4.3)、(25.1±5.4)、(25.2±5.6)pg/ml]显著高于对照组[(14.8±5.9)、(18.7±4.7)、(15.7±5.2)pg/ml],差异有统计学意义(P＜0.05).结论 对于初诊的T2DM患者,空腹及糖负荷后30、120 min时GLP-1水平显著下降,GIP水平无变化,胰高血糖素水平显著升高.     

长期体外培养大鼠胰岛的动态研究

目的观察长期体外培养大鼠胰岛在分泌功能、基因表达及免疫荧光组织化学染色法的动态变化。方法采用胶原酶灌注消化和nextran密度梯度离心分离、纯化获得大鼠胰岛,连续培养20 d,定期检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS);实时聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光组织化学染色法检测胰高糖素(Glu)、胰岛素、胰腺十二指肠同源盒基因(PDX)-1、葡萄糖转运蛋白(Glut)-2基因mRNA及蛋白水平的表达。结果连续培养胰岛的GSIS水平持续下降;但RT-PCR及免疫荧光显示随培养时间延长,胰岛内关键基因表达并未见明显减弱。结论长期体外培养大鼠胰岛的胰岛素分泌功能持续下降,并非由胰岛素含量减少所致,可能存在更深层次的原因。     

不同剂量腺苷对大鼠自发活动的影响

目的：观察不同剂量腺苷对大鼠自发活动的影响。方法：大鼠分为实验组（分别腹腔注射1、5、10mg/kg腺苷）和对照组（腹腔注射相同体积的NS）；用开场实验分析大鼠自发活动的改变。结果：实验组腹腔注射腺苷后可引起自发活动总路程与中央活动路程减少（P〈0．05）。休息时间增加（P〈0．05）；随着腺苷剂量的增加（1、5、10m∥k），其自发活动总路程逐渐减少（P〈0．05），休息时间逐渐延长（P〈0．05）。而中央活动路程无明显变化（P〉0．05）。结论：腺苷可引起大鼠自发活动的减少。但腺苷是否可致大鼠行为性抑郁还需进一步验证。     

葡萄糖依赖性促胰岛素释放肽在胃肠转流术治疗2型糖尿病中的作用

葡萄糖依赖性促胰岛素释放肽(glucose-dependent insulinotropic peptide,GIP)是十二指肠及空肠上段合成、分泌的一种肠促胰岛素.长期高脂饮食可以刺激GIP的大量分泌,引起脂质在胰岛细胞和外周组织中沉积,导致胰岛素抵抗和分泌功能受损;抑制GIP可以明显改善2型糖尿病.胃肠转流手术通过...     

GLP-1/GIP双靶点受体激动剂DA5-CH对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织的作用及其机制研究

目的 研究胰高血糖素样肽-1/抑胃肽(GLP-1/GIP)双靶点受体激动剂DA5-CH对脑缺血再灌注损伤(I/R)大鼠脑组织的作用及其可能机制。方法 将30只脑I/R大鼠随机分为模型组、DA5-CH组、DA5-CH+SB431542组,每组10只。另取10只大鼠仅做假手术(假手术组)。DA5-CH组腹腔注射10 nmol/kg DA5-CH;DA5-CH+SB431542组腹腔注射10 nmol/kg DA5-CH和5 mg/kg SB431542,假手术组、模型组腹腔注射等体积生理盐水。检测各组大鼠脑组织含水量;免疫组织化学染色检测海马CA1区神经核抗原(NeuN)阳性细胞数;Western blotting检测脑组织转化生长因子β₁(TGF-β₁)、Smad3、p-Smad3蛋白的表达。结果 与假手术组比较,模型组脑组织含水量增加,海马CA1区每个视野NeuN阳性细胞数减少,脑组织TGF-β₁、p-Smad3/Smad3蛋白表达升高(P <0.05);与模型组比较,DA5-CH组脑组织含水量降低,海马CA1区N...     

瑞巴匹特对胃粘膜保护作用的实验研究

目的：观察瑞巴匹特对空腹大鼠胃粘膜血流量（ＧＭＢＦ）、胃碱分泌的影响及对盐酸乙醇损伤胃粘膜的保护作用。     

中华胃宝对大鼠实验性胃溃疡的影响

大鼠预先灌胃２．８％中华胃宝２ｍｌ／１００ｇ体重后能抑制消炎痛溃疡、利血平溃疡及结扎幽门溃疡的形成，缩小醋酸溃疡的面积和体积，其抑制率分别为５６％、８３％、５０％、８３％和９４％。与各对照组比较差异显著（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）。中华胃宝对胃溃疡大鼠的胃液分泌量及胃酸的影响与对照组比较无明显差异，其作用相似于得乐     

铝对大鼠神经行为学的影响

目的观察铝对大鼠神经行为学的影响。方法经筛选,12只合格大鼠随机分为正常组(n=6)和模型组(n=6),模型组饮用1.6g.L-1 AlCl3溶液,正常组饮用等量蒸馏水,3mo后Morris水迷宫检测大鼠的空间辨别学习记忆能力,以反映其神经行为学情况;石墨炉原子吸收光谱法测定大鼠脑皮质与海马铝含量。结果饮用AlCl3溶液3mo后,模型组大鼠神经行为学改变,学习记忆下降(P<0.05),大鼠脑皮质与海马铝含量较正常组明显增加(P<0.01)。结论铝可在大鼠脑皮质与海马蓄积,诱导其学习记忆力减退。     

Feeding deterrent and growth inhibitory activities of PONNEEM,a newly developed phytopesticidal formulation against Helicoverpa armigera (Hubner)

ObjectiveTo assess the feeding deterrent, growth inhibitory and egg hatchability effects of PONNEEM on Helicoverpa armigera (H. armigera).MethodsFive oil formulations were prepared at different ratios to assess the feeding deterrent, growth inhibitory and egg hatchability effects on H. armigera.ResultsInvariably all the newly formulated phytopesticidal oil formulations showed the feeding deterrent and growth inhibitory activities against H. armigera. The maximum feeding deterrent activity of 88.44% was observed at 15 μL/L concentration of PONNEEM followed by formulation A (74.54%). PONNEEM was found to be effective in growth inhibitory activities and egg hatchability at 10 μL/L concentration. It exhibited statistically significant feeding deterrent activity and growth inhibitory activity compared with all the other treatments.ConclusionsPONNEEM was found to be effective phytopesticidal formulation to control the larval stage of H. armigera. This is the first report for the feeding deterrent activity of PONNEEM against H. armigera. This newly formulated phytopesticide was patented in India.     

转染反义MIF对人胃癌细胞的影响

目的 探讨反义巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对人胃癌MGC-803细胞的影响.方法 将胃癌MGC-803细胞分为pcDNA3.1-Anti MIF组与空白对照组.pcDNA3.1-Anti MIF组采用转染技术将MIF反义RNA真核表达质粒(pcDNA3.1-AntiMIF)转入MGC-803细胞;空白对照组转染pcDNA3.1-sh-MIF质粒.qRT-PCR与蛋白质印迹法检测转染效率;采用MTT法、侵袭实验、AnnexinV-FITC和PI染色法分别检测反义MIF对MGC-803细胞增殖、侵袭、凋亡的影响.结果 qRT-PCR结果显示,pcDNA3.1-Anti MIF组MIF mRNA表达量(2.086±0.248)较空白对照组(6.992±0.342)明显下调;Western blot显示,pcDNA3.1vAntiMIF组MIF蛋白表达水平量(0.361±0.043)较空白对照组(1.171±0.091)明显下调;MTT实验结果显示,pcDNA3.1-AntiMIF组MGC-803细胞的OD值(0.436±0.017)较空白对照组(0.563±0.019)明显下降;侵袭实验结果显示,pcDNA3.1-AntiMIF组穿过基质胶的MGC-803细胞数(73.67±8.54)较空白对照组(137.30±11.91)明显减少;AnnexinV-FITC和PI染色法结果显示,pcDNA3.1-AntiMIF组MGC-803细胞的凋亡率(21.61±4.62)%较空白对照组(7.67±0.63)%明显增加.以上各项指标比较差异均具有显著统计学意义(P<0.01).结论 反义MIF能抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖与侵袭,并能诱导凋亡.     

脑利钠肽与糖尿病大鼠胃肠排空的关系

目的观察糖尿病大鼠血浆、胃窦平滑肌中脑利钠肽(BNP)的变化并探讨其与胃肠排空的关系。方法将大鼠随机分为糖尿病组、单纯肥胖组和对照组,通过高糖高脂饮食结合腹腔注射小剂量链脲佐菌素的方法建立糖尿病大鼠动物模型;用葡萄糖酚红溶液灌胃30 min后处死大鼠,取胃和小肠近、中、远各段留取内容物后使用分光光度计测定胃肠各段酚红残留率;放射免疫法测定血浆N-末端脑利钠肽原(NT-pro BNP)的浓度;免疫组化检测胃窦平滑肌内BNP的表达。结果糖尿病组大鼠胃和近段小肠内酚红残留率均多于对照组和单纯肥胖组(P<0.05),而中段和远段小肠酚红残留率均少于对照组和单纯肥胖组(P<0.05);12周后糖尿病组大鼠血浆NT-pro BNP的浓度较对照组和单纯肥胖组显著升高(P<0.05);胃窦平滑肌层中BNP免疫反应阳性细胞各组间比较无明显差异;糖尿病大鼠血浆NT-pro BNP浓度与胃内、近段小肠内酚红残留率呈正相关。结论糖尿病大鼠液体胃肠排空减慢可能与血浆NT-pro BNP浓度增加有关。     

安胃汤对胃溃疡大鼠溃疡修复及表皮生长因子的影响

目的 探讨安胃汤对实验性乙酸大鼠胃溃疡模型的作用机制.方法 采用放射免疫方法和免疫组织化学方法观察安胃汤对实验性乙酸大鼠胃溃疡模型愈合时血清EGF和胃黏膜EGF表达的影响,对后者进行图像分析及统计学处理.结果 与模型组相比,安胃汤治疗组和雷尼替丁组可提高血清表皮生长因子,差异具有统计学意义(P<0.01),安胃汤大剂量组与雷尼替丁组相比差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,安胃汤治疗组和雷尼替丁组可显著增强胃黏膜EGF,差异具有统计学意义(P<0.01),安胃汤大剂量组强于雷尼替丁组,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 安胃汤可能通过提高血清EGF和增强胃黏膜EGF表达,而促进溃疡愈合、提高溃疡愈合的质量.