热休克蛋白27和热休克蛋白70与视网膜视神经疾病关系的研究进展

热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是细胞受到不同刺激时产生的一组高度表达的蛋白。这种蛋白在结构上高度保守,在功能上常被认为具有保护细胞的作用。近年来,有研究表明HSP27和HSP70具有保护视网膜视神经细胞的作用,而其相关抗体具有促进这些细胞凋亡的作用。在细胞培养和动物实验中,我们观察到阻断HSP27抗体和HSP70抗体的表达有利于保护视网膜视神经细胞。本文就HSP27和HSP70与视网膜视神经疾病的关系作一综述。     

热休克蛋白70与青光眼视神经保护

对环境变化做出反应是生物细胞的基本特征及生存的必要条件.生物细胞在高温环境下所表现的以基因表达变化为特征的反应称热休克反应（heat shock response,HSR）,所产生的一组蛋白质叫热休克蛋白（heat shock proteins,HSP）.HSP是一组在结构上高度保守的蛋白质家族,广泛存在于各种原核细胞和真核细胞内,在细胞正常生命活动中发挥重要作用;在应激状态下,HSP表达增多,发挥内源性细胞保护作用：帮助新合成蛋白质正确折叠,获得自然构象;帮助细胞内变性蛋白质复性,并清除严重受损的蛋白质.     

热休克蛋白72（HSP72）对大鼠青光眼模型视网膜神经节细胞和视神经的保护作用

目的　探讨热休克蛋白72（heat shock protein 72,HSP72）对大鼠青光眼模型视网膜神经节细胞（retinal ganglial cells,RGCs）和视神经的保护作用。方法　选取Wistar大鼠46只，采用随机数字表法将所有大鼠分为正常对照组（6只）和实验组（40只），实验组40只大鼠中8只不作处理（实验对照组），在制作青光眼模型后2 d，给予16只大鼠热休克反应处理（热休克反应组），16只大鼠硫酸锌腹腔注射（硫酸锌注射组）。观察及比较治疗前后各组大鼠眼压、RGCs中HSP72抗体含量、RGCs平均密度。结果　激光后3 d、7 d、14 d、28 d，各组大鼠右眼眼压均较激光前有所上升，且各组间差异均无统计学意义（均为P>0.05）。正常对照组大鼠不同时间点HSP72抗体在RGCs中无表达，激光后3 d实验组各组大鼠RGCs中HSP72抗体含量缓慢上升，7 d、14 d达高峰，此后逐渐下降至接近正常水平。激光后，实验组各组大鼠RGCs中HSP72抗体含量显著高于正常对照组，且热休克反应组RGCs中HSP72抗体含量均高于实验对照组，低于硫酸锌注射组，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。激光后3 d、7 d、14 d、28 d实验组各组大鼠RGCs平均密度均明显低于正常对照组，且热休克反应组RGCs平均密度显著高于实验对照组和硫酸锌注射组，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　热休克蛋白反应可在青光眼模型大鼠RGCs中诱导HSP72的生成，且对青光眼性RGCs和视神经具有保护作用。     

热休克蛋白与视网膜

热休克蛋白是一组在结构上高度保守的蛋白质，广泛存在于人、动物、微生物及植物细胞内，参与细胞正常的生长、发育和分化，当机体受到各种有害刺激时，细胞通过诱导热休克蛋白的产生而启动内源性保护机制，而外源性抗热休克蛋白抗体的应用则可加重细胞的损伤。本对热休克蛋白的产生、分布、生物学功能及与视网膜有关的热休克蛋白等进行了综述。     

热休克蛋白27在实验性青光眼中表达的研究

目的　观察大鼠眼压升高后热休克蛋白 2 7(HSP2 7)在视网膜中的表达。方法　5 0只Wistar大鼠随机分为高眼压组和sham对照 (假手术 )组。采用电凝鼠巩膜表面至少3组静脉及角膜缘周围血管 ,减少房水静脉回流升高眼压。观察手术后 1、2、3、4及 8周大鼠眼压 ,同时免疫组化检测视网膜中HSP2 7的表达及分布情况。结果　高眼压组右眼术后眼压明显升高。术后 1周眼压 :(30 .12± 5 .18)mmHg(1kPa =7.5mmHg) ,1周后眼压基本稳定。术后各时间点高眼压组右眼眼压与术前、左眼及sham对照组右、左眼间比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 0 1)。视网膜中HSP2 7阳性表达主要表现在视网膜神经节细胞的胞浆内及神经纤维层中 ,HSP2 7阳性表达率在术后 1、2、3、4及 8周 ,高眼压组右眼与左眼、sham对照组右、左眼间比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 0 1) ,同时发现视网膜中HSP2 7阳性表达随着眼压升高及高眼压持续时间延长逐渐增强。结论　内源性HSP2 7在青光眼视网膜神经节细胞中表达增强可能在青光眼视神经保护中具有重要作用。     

热休克蛋白表达调控对角膜创伤修复作用的研究进展

在角膜创伤修复过程中,热休克反应及热休克蛋白（HSP）的表达调控有着重要作用。因此,探究调控HSP表达的因素及物质已成为研究角膜创伤修复机制及调控该过程的一个研究热点。本文就HSP的表达调控及其对角膜创伤修复作用的最新研究进展作一综述。     

热休克蛋白72对大鼠急性高眼压性视网膜神经节细胞损伤的保护作用

目的探讨热休克蛋白72(heat shock proteiu,11SP 72)对大鼠急性高眼压性视网膜神经节细胞(1GCs)损伤的保护作用.方法右眼前房内灌注平衡盐溶液制作大鼠急性高眼压性RGC损伤模型;用热休克反应或腹腔内注射硫酸锌诱导模型大鼠RGCs中HSP 72表达,观察HSP72表达以后,模型大鼠RGC密度的改变情况,并与术处理的模型大鼠RGC密度相比较.结果正常大鼠RGC密度为2 504±181个/mm2;急性高眼压模型大鼠RGC密度为2 015±111个/mm2.热休克反应组和硫酸锌注射组RGC密度分别为2 207±200个/mm2和2 262±155个/mm2,显著高于模型组(P热休克=0.036,P硫酸锌=0.019);IISP 72阴性对照组与模型组RGC密度差异无显著意义(P槲皮黄酮 热休克=0.260,P槲皮黄酮 硫酸锌=0.748).结论热休克反应和腹腔内硫酸锌注射在急性高眼压模型大鼠RGCs中诱导产生的HSP72;可能对急性高眼压性RGC损伤具有保护作用.     

大鼠高眼压模型中热休克蛋白27抗体及视网膜神经节细胞凋亡的研究

背景 青光眼是一组以视网膜神经节细胞( RGCs)慢性丢失为特征的常见致盲性眼病.目前青光眼的发病机制尚不完全清楚,热休克蛋白27 (HSP27)抗体可能与青光眼视神经病变有关系. 目的 通过建立大鼠高眼压模型,检测血清中HSP27抗体的表达及RGCs的凋亡,了解HSP27抗体与眼压及RGCs凋亡的关系.方法 将51只Wistar大鼠按随机数字表法随机分为高眼压组34只和伪手术对照组17只,均取右眼为实验眼,左眼为对照眼.采用双极水下电凝器电凝高眼压组大鼠右眼巩膜表面3组静脉,建立高眼压动物模型.伪手术对照组大鼠右眼只剪开上方球结膜,不做电凝.分别于术后1、2、4、6、8周处死高眼压组大鼠6、6、6、8、8只,伪手术对照组大鼠3、3、3、4、4只.处死前测大鼠双眼眼压,并收集血清1 ml测定大鼠血清HSP27抗体.10只大鼠(2个组各时间点各1只)实验眼剥离视网膜,经匀浆后提取视网膜蛋白质用于Western blot分析.摘除剩余41只大鼠双侧眼球,制作石蜡切片.TUNEL法检测视网膜组织切片中RGCs的凋亡情况.结果 大鼠造模后3d,1、2、4、6、8周实验眼眼压较术前均明显增高,各时间点的总体比较差异有统计学意义( F=318.502,P＜0.01),但伪手术对照组手术前后眼压变化差异无统计学意义(F=2.076,P＞0.05).高眼压组大鼠实验眼视网膜HSP27蛋白水平与伪手术对照组大鼠实验眼比较均有升高.高眼压组大鼠术后1、2、4、6、8周血清中HSP27抗体各时间点总体比较差异有统计学意义(F=154.221,P＜0.01),随着造模时间的延长,血清HSP27抗体呈逐渐升高的趋势,而伪手术对照组手术前后HSP27抗体的变化差异无统计学意义( F=0.422,P＞0.05).高眼压组造模后实验眼不同时间点RGCs凋亡阳性细胞率比较差异有统计学意义(x2=856.12,P＜0.05).高眼压组不同时间点RGCs凋亡阳性细胞率均较伪手术对照组高(P＜0.05).结论 随着眼压的升高以及高眼压持续时间的延长,大鼠血清中的HSP27抗体水平逐渐升高,视网膜在高眼压状态下HSP27表达上调.逐渐升高的HSP27抗体水平与RGCs凋亡增加的趋势一致.     

热休克蛋白及其在眼部疾病中作用的研究进展

热休克蛋白(HSP)是生物体在应激状态下合成的一类高度保守的蛋白,具有分子伴侣、协同免疫、抗凋亡等生物学功能。近来随着对热休克蛋白研究的不断深入,HSP在眼病的发病机制、防治方面的作用已受到广泛关注。     

热休克蛋白与白内障发生的研究进展

热休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)最初发现是细胞在物理刺激下(如热刺激等)产生的一种应激蛋白,随着后来的大量研究发现,HSPs是一切生物体在许多应激状态下(如高温、重金属、缺氧、乙醇、病毒及细菌感染等)合成增加的一种在进化上高度保守的细胞应激蛋白。作为分子伴侣,Hsps在蛋白质的折叠,稳定性,合成等方面发挥重要作用。晶状体浑浊称为白内障,是最常见的致盲原因之一,大量的研究表明,白内障的发生与自由基的产生,氧化损伤,晶体蛋白比例改变及晶状体上皮细胞的凋亡有直接关系.近年来的研究表明,晶状体能表达一系列的HSP,它们对维持晶状体的稳定和透明起到关键作用。本文就热休克蛋白与白内障近年的研究情况做一综述。     

人晶状体上皮细胞内热休克蛋白mRNA的表达

目的通过观察HSP27、HSP70、HSP90在高温、氧化应激的人晶状体上皮细胞中的表达情况,探讨白内障的发病机制。方法体外培养人晶状体上皮细胞,分别在高温(45℃)、氧化(50mmol·L-1H2O2)条件下培养30min后,恢复至正常条件,于不同时间段(0h、2h、4h、6h、16h、24h)采用RTPCR法检测HSP27、HSP70、HSP90的表达情况。结果晶状体上皮细胞在生理和应激情况下均有HSP的表达。热休克和氧化应激后2h导致热休克蛋白mRNA表达明显增加。其中HSP27在2种应激后6h表达最高;HSP70于高温后2h表达最高,以后逐渐降低,而在氧化组中6h表达最高;HSP90在2种应激后4h达到峰值。随后逐渐降低,但它们在16h后仍维持在较高水平。结论晶状体上皮细胞中存在HSP。应激情况下,诱导HSP合成增加,其作为一种对抗应激的蛋白质可能对晶状体上皮细胞起着重要的保护作用。     

热休克蛋白A12B在大鼠角膜、晶状体和视网膜组织中的表达

目的　观察大鼠角膜、晶状体、视网膜中热休克蛋白Ａ１２Ｂ（ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎＡ１２Ｂ,ＨＳＰＡ１２Ｂ）的表达。方法　取ＳＰＦ级ＳＤ大鼠９只,用水合氯醛处死后立即摘取眼球,采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和ＲＴ-ＰＣＲ分别检测大鼠角膜、晶状体和视网膜组织中ＨＳＰＡ１２Ｂ蛋白和ｍＲＮＡ的表达情况;免疫荧光化学法观察ＨＳＰＡ１２Ｂ在角膜、晶状体和视网膜组织中的表达及定位。结果　Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和ＲＴ-ＰＣＲ检测结果显示:ＨＳＰＡ１２Ｂ在大鼠角膜、晶状体、视网膜均有少量表达,其中角膜组织（０．２８０±０.０３４、０．３７４±０.０３１）中表达强度相对最低,晶状体（０．３３１±０．０３６、０．４５３±０．０４０）次之,视网膜组织（０．４５３±０．０２９、０．６８０±０．０４５）中表达强度最高。免疫荧光化学法结果表明,在角膜组织中ＨＳＰＡ１２Ｂ主要表达于上皮层,其中基底细胞染色最强,而角膜基质细胞上仅有弱表达;在晶状体组织中ＨＳＰＡ１２Ｂ主要表达于上皮细胞和皮质;在视网膜组织中ＨＳＰＡ１２Ｂ主要表达于视网膜神经纤维层、神经节细胞层和内核层,并与ＮｅｕＮ标记的神经元及ＧＳ标记的Ｍüｌｌｅｒ细胞存在共定位。结论　ＨＳＰＡ１２Ｂ在大鼠角膜、晶状体、视网膜组织中均有表达,且呈特异性表达。     

Induction of heat shock proteins 27 and 72 in retinal ganglion cells after acute pressure-induced ischaemia

Background:  We wanted to investigate whether heat shock protein (HSP) 27 and HSP 72 are induced in retinal ganglion cells (RGCs) after acute intraocular pressure (IOP)-induced ischaemia.
Methods:  Retinal ischaemia was induced by acutely increasing IOP to 100–110 mmHg for 30 or 90 min unilaterally in Sprague Dawley rats. A fluorescent tracer (fluorogold, FG) was applied to the superior colliculi to label RGCs. Twenty-four hours, 1 week or 2 weeks after of IOP elevation, rats were killed, RGCs counted, and immunohistochemical labelling of the retina was performed. HSP-positive RGCs were counted and normalized HSP RGC counts determined.
Results:  The ratio of FG-positive labelled RGCs in the experimental to the contralateral eye as a marker of RGC survival remained unchanged after 30 min of ischaemia: 1.09 ± 0.11 at 1 week, and 0.94 ± 0.28 at 2 weeks. After 90 min of ischaemia RGC survival decreased to 0.19 ± 0.14 at 1 week, and 0.20 ± 0.14 at 2 weeks. After 30 min of ischaemia, the normalized HSP 27- and HSP 72-positive RGC count was detected at highest levels (HSP 27: 5.42 ± 1.18; HSP 72: 12.23 ± 1.24) at 2 weeks compared with controls, whereas after 90 min ischaemia it was detected at higher levels at 1 week (HSP 27: 52.63 ± 3.65; HSP 72: 206.84 ± 60.38), as well as at 2 weeks (HSP 27: 89.00 ± 17.21; HSP 72: 191.00 ± 50.05).
Conclusion:  These results demonstrate an enhanced induction of HSP 27 and HSP 72 after 90 min acute IOP-induced ischaemia. In contrast to 30 min ischaemia, we showed time-dependent loss of RGCs after 90 min of ischaemia after 1 week or 2 weeks.     

热休克蛋白70的主要功能及与白内障发病的相关研究

热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)在正常细胞中水平较低,而在应激后表达显著增高,是HSP中重要的成员。HSP的功能涉及细胞的结构维持、更新、修复、免疫等,但其基本功能为帮助蛋白质的正确折叠、移位、维持和降解。我们就热休克蛋白70的主要功能及其与白内障发病的相关研究进展作一简要概述。     

恒河猴经瞳孔温热疗法与热休克蛋白相关研究

目的探讨恒河猴经瞳孔温热疗法（transpupillary thermotherapy，TTT）治疗后视网膜和脉络膜组织热休克蛋白70（heat shock protein 70，HSPT0）表达。方法利用恒河猴做动物模型。于1TIrr治疗后不同时间点（1h、1d、1周、2周、1月、4月）摘除双眼固定。应用免疫组化技术，分析TTT治疗对猴眼视网膜和脉络膜组织HSP70的影响。结果TTT治疗后，于1d起，在强反应光斑边缘视网膜和脉络膜有HSP70的表达，4个月时仍有弱表达。弱反应光斑1d时，在视网膜全层及脉络膜均有HSP70表达，4个月时消失。同时,TTT治疗可以引起视网膜不同程度组织病理学的损害。结论TTT可以引起视网膜、脉络膜组织病理学损害。局部温度的升高会诱导视网膜、脉络膜内源性HSP70的产生，并且这种表达在激光治疗后1～4个月的猴眼中仍可以存在。