甘草耐盐性愈伤组织的诱导及植株再生研究

目的通过对耐盐性甘草愈伤组织再生植株研究,促进在盐碱滩人工栽培甘草技术的发展。方法诱导乌拉尔甘草G ly cy rrh iza ura lensis无菌苗子叶块和胚轴段在含盐培养基上脱分化均成功。逐步提高盐质量浓度诱导愈伤组织扩增,继之诱生不定芽,芽经扶壮后诱根,得到大量试管苗。结果子叶块和胚轴段在M S BA1.5 m g/L 2.4-D 1.2 m g/L N aC l 100 m g/L中脱分化效果好,愈伤多为淡黄色,稍透明。N aC l质量浓度增至250m g/L后愈伤组织长势很快下降,色暗,有些死亡。愈伤组织经无盐培养继代两轮后,转入M S BA 0.5 m g/L KT1.0 m g/L NAA 1.0 m g/L N aC l 200 m g/L上分化出大量不定芽,说明不定芽的耐盐性是遗传所致。降温(18~22℃)、自然光照、并添加适量的GA3有利于壮芽形成,在诱导生根的83个芽中的55个生根,其中1/2M S IAA1.0 m g/L NAA 1.0 m g/L N aC l 200 m g/L最适宜生根,生根率达66.26%。结论通过对耐盐性甘草愈伤组织的诱导可得到耐盐性甘草的再生植株。     

粉葛组织培养及同源四倍体诱导

目的建立粉葛的组织培养体系;培育粉葛同源四倍体新种质。方法以M S培养基为基本培养基,培养外植体茎尖或茎段获得组培再生植株;用不同体积分数的秋水仙素对无菌苗茎尖进行不同时间的处理,诱导遗传物质加倍的同源四倍体。结果其最适愈伤组织诱导培养基为M S 6-BA 1.0 m g/L 2,4-D 1.0 m g/L NAA0.2 m g/L,分化和增殖培养基为M S 6-BA 1.0 m g/L 2,4-D 0.2 m g/L,生根培养基为1/2 M S IBA 0.2 m g/L;从长出约1 cm的丛生芽上切取0.3~0.5 cm的茎尖用0.4%~0.5%的秋水仙素处理48 h效果较好,体积分数过低或过高和处理时间太短或太长都不易成功。结论同源四倍体粉葛为葛根中药用物质质量分数的提高提供了基础。     

麻花秦艽休眠芽离体培养时的丛生芽发生途径研究

目的:以休眠芽为外植体,建立麻花秦艽丛生芽再生的实验技术体系,为麻花秦艽种苗工厂化离体快繁和种质资源离体保存提供理论依据和技术支撑。方法:以MS为基本培养基,添加不同浓度和种类的细胞分裂素和生长素,诱导休眠芽产生丛生芽。以1/2MS为基本培养基,添加不同浓度和种类的生长素诱导丛生芽生根。结果:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂培养基是诱导休眠芽产生丛生芽及丛生芽继代的最佳培养基,丛生芽诱导率为93.3%,丛芽经继代培养后芽增殖系数为5.6。最佳生根培养基是1/2MS(无机盐减半)+2.0 mg/L IAA+0.5 mg/L IBA+15 g/L蔗糖+7 g/L琼脂,生根率达93.5%,再生植株生长健壮。结论:该试验建立了以休眠芽为外植体的麻花秦艽丛生芽再生植株的技术体系。     

五指毛桃组织培养获得再生植株的研究

目的采用组织培养快繁技术培养五指毛桃种苗,为人工种植提供种源。方法采用五指毛桃叶片作外植体,以MS和1/2 MS为基本培养基,采用正交设计研究植物生长调节剂多因素组合(6-BA、NAA、2,4-D、IAA、KT和IBA)对五指毛桃初代诱导、不定芽分化和诱导生根的影响。结果不定芽最佳诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,外植体经20 d诱导培养,可分化形成不定芽72个;MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+0.3 mg/L KT最利于不定芽继代增殖,增殖倍数6.67;1/2 MS+1.0 mg/L IBA+0.3 mg/L NAA最适于诱导生根获得再生植株,生根率100%;宜移栽于泥炭-珍珠岩(1︰1)的基质上,成活率为93%。结论此途径繁殖速度快、再生率高,能为栽培五指毛桃提供大量种苗。     

党参休眠芽离体培养时的丛生芽发生途径研究

目的:以休眠芽为外植体,建立党参丛生芽发生途径的实验技术体系,为党参种苗工厂化离体快繁及党参种质资源的离体保存提供理论依据和技术支持。方法:以MS为基本培养基,添加不同浓度和种类的细胞分裂素和生长素,诱导休眠芽产生丛生芽。以1/2 MS为基本培养基,添加不同浓度和种类的生长素诱导丛生芽生根。结果:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7.5 g/L培养基是诱导休眠芽产生丛生芽及丛生芽继代培养的最佳培养基,丛生芽诱导率为50%。每个小芽丛经继代培养后可增殖12～18个新芽。最佳生根培养基是1/2 MS+IBA 2.0 mg/L+蔗糖15 g/L+琼脂7.5 g/L+活性炭1 g/L,生根率达85.7%,植株生长健壮。结论:建立了以休眠芽为外植体的党参丛生芽再生植株的离体培养体系。     

珐菲亚组织培养条件的优化研究

目的 优化珐菲亚组织培养快速繁殖技术.方法 分别以MS和1/2MS为基本培养基,采用正交设计研究植物生长调节剂多因素组合(6-BA、NAA、IBA和IAA)对珐菲亚继代增殖和诱导生根的影响.结果 MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA0.1 mg/L+IBA 0.2 mg/L利于丛生芽继代增殖,30 d繁殖系数6.0以上;1/2 MS+NAA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L适于诱导生根获得再生植株,生根率100％;生根苗移栽于排水良好的沙床上,成活率98％.结论 本实验为保护珐菲亚的野生资源,发展人工栽培和探讨育种新途径奠定基础.     

绞股蓝叶片分化与植株再生

目的 建立高效稳定的绞股蓝受体系统,为绞股蓝基因转化研究奠定基础.方法 以五叶绞股蓝Gynostemma pentaphyllum叶片作为外植体,采用不同配比激素的MS培养基进行诱导培养获得丛生芽,进而生根获得再生植株.结果 采用MS 6-BA 1.0 mg/L培养基时,绞股蓝叶片分化频率最高(40%),MS 6-BA1.0 mg/L适合绞股蓝丛生芽继代增殖,1/2 MS适宜诱导生根获得健全再生植株.结论 为利用根癌农杆菌介导法进行绞股蓝基因转化建立了稳定的直接分化再生系统.     

正交试验优化山豆根组织培养条件

目的:建立和优化山豆根组织培养快速繁殖技术,为保护山豆根的野生资源,发展人工资源和探讨育种新途径奠定基础。方法:采用正交设计对影响山豆根组织培养的激素进行优化研究。结果:培养基MS+6-BA(1.5mg/L)+NAA(0.2 mg/L)利于诱导出芽,可用于初代培养;MS+6-BA(1.5 mg/L)+IBA(0.2 mg/L)+NAA(0.1mg/L)利于丛生芽继代增殖,增殖倍数6.5(30 d);MS+NAA(1.5 mg/L)+IBA(0.5 mg/L)适于诱导生根获得再生植株,生根率97%;生根苗移栽于排水良好的沙床上,成活率达90%。结论:本试验优化的山豆根离体培养条件,为山豆根快速繁殖和工厂化育苗提供技术支撑。     

紫背金盘愈伤组织诱导与再生体系的建立

目的 建立紫背金盘Ajugae nipponensis愈伤组织诱导体系,筛选出具较高再生率的植株发生途径,旨在构建高效、稳定的再生体系。方法 MS为基本培养基,添加不同种类和浓度配比的植物生长调节剂,以茎尖、带芽茎段和花序为外植体进行实验。结果 花序是较适宜诱导愈伤组织的外植体,在MS+6-BA 0.1 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L中可在1周内诱导出愈伤组织,2周后即分化出绿色小芽丛;丛生芽增殖的适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,愈伤组织芽丛再生率高达100%,再生系数为4.10,4周后增殖倍数5.0以上;生根的适宜培养基为1/2 MS+NAA 1.0 mg/L,3周后即可获得再生植株,生根率100%;生根苗移栽至排水良好的沙土中,成活率100%。结论 紫背金盘不同外植体均可诱导出愈伤组织,其中花序愈伤发生率最好,是最适宜的外植体;为保护紫背金盘野生资源和发展人工栽培奠定了良好基础,也为遗传转化研究提供重要的科学依据。     

植物生长物质对地榆不同性质芽体诱导分化及增殖的影响

目的:研究植物生长物质对地榆不同性质芽体诱导分化及增殖的影响,建立地榆无性系快繁技术体系。方法:采以地榆叶茎和花茎为外植体,接种到添加不同激素的培养基上,分别进行丛生芽途径和愈伤组织植株再生的组培快繁。结果:花茎在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA培养基中诱导丛生芽的生长情况最好,在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA培养基中次之;叶茎在4种诱导丛生芽培养基中均不能诱导出丛生芽。继代增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA,丛生芽均生长情况良好。结论:建立了地榆无性系快速繁殖技术体系。     

姜茎尖的离体培养与试管苗快繁

目的 探索姜茎尖组织培养及其试管苗快速繁殖的适宜条件。方法 剥取不大于1mm的姜茎尖生长点为外植体，以MS为基本培养基，附加不同种类和浓度的植物生长物质进行培养。结果 小于0．3mm的姜茎尖可进行良好的分化与生长；在各类激素中，以BA对姜芽分化最为有效，培养基MS BA 1．0mg／L NAA 0．2～0．4mg／L最有利于芽的分化和生长；在生根培养基中添加适量的BA不仅不影响不定根的形成，且能增加成苗数，对不定根的分化和成苗最适的培养基为1／2 MS NAA 0．1mg／L BA 0．15mg／L。结论 试验为姜的茎尖离体培养提供了有效途径。     

黑果枸杞基茎丛生芽诱导及植株高效再生体系的建立

目的优化黑果枸杞Lycium ruthenicum离体培养方法及条件,探索有效增殖方式,筛选适宜的植株再生途径,建立其人工高效繁殖技术体系。方法以无菌实生苗带1～2个节的茎段为材料,采用MS、改良的MS1以及改良的MS2为基本培养基,通过单因素、完全组合及L_9(3~4)正交试验研究不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、腋芽萌发、基茎不定丛芽诱导及植株再生的影响。结果在MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.1 mg/L培养基中,可诱导出大量愈伤组织,但其再分化能力较弱,培养35 d后最高增殖系数仅为4.36;而在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.05 mg/L+KT 0.5 mg/L中培养,随着腋芽萌发,茎段与培养基接触的节处开始膨大并出现不定芽点,萌发出基茎丛生芽,发生率达100%,培养45 d增殖系数最高可达到42.84;试管苗生根的适宜培养基为改良的MS1+NAA 1.0 mg/L,培养40 d后生根率达98.9%;试管苗经炼苗后移栽成活率90%以上。结论研究通过基茎丛生芽这一全新的增殖途径,成功建立了黑果枸杞体外高效再生体系,不仅大大提高了试管苗的产量及品质,也为枸杞属其他植物的体外快繁提供了另一思路。     

馥芳艾纳香快繁体系的建立

目的建立馥芳艾纳香Blumea aromatica的快繁技术体系,为大量生产种苗提供基础。方法利用不同激素配比的培养基,筛选出馥芳艾纳香快速繁殖的最适培养基。结果带腋芽茎段是丛生芽诱导的最佳材料;丛生芽诱导的最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,诱导率为100%;最佳继代增殖培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.2mg/L NAA,增殖倍数为6.83;最适的生根培养基为1/2 MS+0.3 mg/L NAA,生根率100%,移栽成活率84.07%。最适培养条件为温度26℃、光照强度为2 000 lx、光照时间10 h。结论快繁技术体系可在短时间内提供大量种苗,并为馥芳艾纳香规模化生产种苗提供技术指导。     

明党参愈伤组织诱导及植株再生

目的:通过愈伤组织的增殖与分化实现快速繁殖,以建立明党参愈伤组织培养体系.方法:以明党参的嫩茎为外植体,在不同激素组合的脱分化、分化培养基上培养.结果:MS培养基附加NAA 0.5～1 mg/L,KT 0.1 mg/L适合于愈伤组织的诱导和培养;附加6-BA 1～2 mg/L适合愈伤组织芽的分化;附加IBA 0.5～1 mg/L适合根的诱导.结论:在一定培养条件下,通过愈伤组织的再分化是实现明党参植株再生的有效途径.     

北柴胡愈伤组织诱导、分化及不定芽增殖条件研究

目的研究北柴胡叶片、茎段和花芽愈伤组织诱导、分化和不定芽增殖的条件,探讨快速繁殖的新途径。方法选择优良的北柴胡类型,在附加不同种类、不同质量浓度和不同配比外源植物激素的MS培养基中,进行不同外植体愈伤组织的诱导和分化培养以及愈伤组织再生植株的繁殖和生根培养。结果附加2,4-D 1.0 mg/L、KT0.5 mg/L和6-BA 0.5 mg/L的MS培养基最适合于叶片、茎和花芽愈伤组织的诱导,其中以花芽愈伤组织的诱导效果最好;在附加6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.03 mg/L和CM 15%、CH500 mg/L的培养基中,愈伤组织的分化率最高;附加6-BA 1.5 mg/L、NAA 0.05 mg/L和CH 250 mg/L的MS培养基为芽苗增殖的适宜培养基;附加NAA0.5 mg/L的1/2 MS培养基是生根的适宜培养基。结论北柴胡的茎段和花芽外植体在适宜的激素组合中均可通过愈伤组织途径分化出不定芽,继而得到正常生长、发育的再生植株。     

药用植物粉花绣线菊的组织培养的建立与快速繁殖研究

目的 建立了粉花绣线菊Spiraea japonicaL.f.愈伤培养系统和快速繁殖方法。方法 通过用SM、6,7-V、B5等3种不同的培养基对粉花绣线菊植株的茎尖、嫩叶、叶柄等不同部位进行愈伤组织诱导和成苗诱导。结果 通过本研究,建立了愈伤培养系统,实现了快速繁殖,结论 MS培养基诱导愈伤效果最好。在MS 2,4-D2.0mg/L KT0.3mg/L培养基中,幼叶、茎尖、叶柄等外植体均能诱导出愈伤组织,其中以茎尖外植体诱导的效果最好;茎尖外植体在MS 2mg/LBA 0.1mg/LNAA能长出丛生苗,将丛生苗转入培养基1/2MS 0.25mg/LBA 0.5mg/LNAA可生根成小苗。     

乌头植株再生体系的建立

目的 建立乌头高效再生系统，短期内获得大量优质种苗。方法 以试管苗叶片为外植体，在添加不同激素配比的培养基上培养。结果 培养基MS BAl．0mg/L KT0．5mg/L NAA0．2mg/L最适合于乌头叶片不定芽的分化；培养基MS BAl．5mg/L NAA0．1mg/L有利于芽的增殖；培养基MS BA0．5mg/L NAA0．1mg/L有利于芽的伸长；不加激素的1／2MS培养基有利于根的诱导。结论 采用组织培养方式可进行乌头的快速繁殖，使乌头种苗的工厂化生产成为可能。     

水半夏组培快繁体系的建立

目的建立水半夏的组培快繁体系,为快速、大量生产水半夏种苗提供基础。方法利用不同植物激素配比的培养基,以水半夏块茎为外植体进行试验。结果愈伤培养基MS+NAA 0.2 mg/L+KT 1.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L可成功诱导水半夏愈伤组织;丛生芽培养基MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L诱导不定芽效果较好,增殖倍数高;生根培养基1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.4 mg/L+KT 0.2 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L+AC 0.3 g/L,有利于水半夏不定根的快速形成,12～14周即可获得再生水半夏植株。培养基MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 1.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L为诱导水半夏分化一次性成苗的最佳激素配比,5～6周可形成试管苗,10周后可用于炼苗。结论建立的水半夏组培快繁体系为水半夏优良品种的快速繁殖奠定基础,且可应用于工厂化生产水半夏种苗。     

药用紫锥菊叶片离体培养技术研究

目的研究药用紫锥菊叶片离体培养技术,建立最佳培养条件。方法在紫锥菊的种子苗上采取叶片,接种到附加不同生长物质的培养基中,诱导其成为完整植株。结果对于药用紫锥菊的叶片,适宜在MS IBA 2 mg/L NAA 1 mg/L培养基上分化成苗;在MS IBA 0.2 mg/L BA 0.7 mg/L GA 0.5 mg/L培养基上增殖,增殖率可达5~6;无根苗在1/2MS IBA 0.5 mg/L NAA 0.1 mg/L培养基上迅速长根,生根率很高。结论采用药用紫锥菊的叶片作为外植体,利用组织培养的方法能够实现种苗的工厂化快速繁殖。