端粒酶活性的原位检测在食管癌早期诊断中的意义

目的 :研究端粒酶活性的原位检测在食管癌早期诊断中的意义。方法 :应用原位杂交技术检测30例食管癌组织、癌旁组织及其正常黏膜中端粒酶mRNA的表达显示端粒酶的活性。结果 :端粒酶活性在食管癌组织中阳性表达率显著性高于癌旁组织、正常黏膜。结论 :端粒酶的原位检测对食管癌的早期诊断有一定意义。     

贲门癌生长抑素表达特征的研究

目的 研究贲门癌组织中生长抑素的表达特征及与生物学行为的相互关系。方法 应用免疫组化SP法检测64例贲门癌及31例胃窦癌组织生长抑素的表达。结果 贲门癌组织中生长抑素的表达率为21．8％，胃窦癌生长抑素的表达率为48．3％，两者差异有显著性。表达强度前者亦低于后者，生长抑素表达阴性的贲门癌分化较差，淋巴结转移广泛。结论 贲门癌组织中生长抑素的表达水平较胃窦癌偏低，其生物学行为与生长抑素的表达有相关性。     

乳腺癌组织中端粒酶活性的定量检测及其与临床病理的关系

背景与目的:端粒酶是一种在细胞永生化及癌症发生过程中起重要作用的核蛋白酶。最近关于乳腺癌中端粒酶活性与预后因素间的关系,因研究方法的差异而呈现出不一致的报道。本研究旨在建立一种可行的银染端粒酶定量检测法,以探讨乳腺癌中端粒酶活性与临床病理学预后因素间的关系。方法:运用银染端粒重复序列扩增法(SS-TRAP)检测了52例新鲜乳腺癌及其癌旁组织,32例乳腺良性病变和14例正常乳腺组织中端粒酶的活性表达,对结果予以定量并结合临床资料进行分析。结果:乳腺癌、癌旁组织、良性病变及正常乳腺组织中端粒酶阳性率分别为90.38%(47/52)、28.85%(15/52)、31.25%(10/32)、0(0/14)。端粒酶分别为36.91±15.35、8.27±4.37、14.10±5.28、0(TPG单位),单因素方差分析结果显示,乳腺癌组端粒酶活性水平明显高于其他3组(P值均<0.01)。Logistic回归分析结果表明,乳腺癌中端粒酶的表达与病理类型、分化程度明显相关(P=0.003及0.004),即随着肿瘤的进展,端粒酶活性亦增加。其中,浸润性非特殊癌端粒酶活性水平明显高于浸润性特殊癌(P<0.05);中、低分化癌端粒酶活性均高于高分化癌(P<0.05),中、低分化癌间无显著性差异(P>0.05)。端粒酶活性表达在患者病程、年龄、绝经状况间均无显著性差异(P>0.05)。结论:与经典TRAP     

COX-2 mRNA表达与食管癌发生发展关系的研究

目的：探讨环氧化酶-2（cyclooxy—genase-2，COX-2）mRNA的表达与食管癌发生发展的关系。方法：用原位杂交技术检测80例食管癌组织中COX-2mRNA的表达，并结合肿瘤的病理生物学行为进行分析。结果：80例食管癌组织中COX-2mRNA阳性表达率为80％（64／80）明显高于正常食管黏膜（0／20），P〈0．01。COX-2mRNA阳性表达与食管癌的分化程度显著相关，P〈0．05；但与食管癌的TNM分期、浸润深度及有无淋巴结转移无关，P〉0．05。结论：COX2mRNA阳性表达与食管癌的发生及其生物学行为密切相关，可作为食管癌早期诊断客观指标。     

大肠癌hTERT、SYK分子边界的临床研究

目的 探讨大肠癌及其切缘组织中hTERT、SYK活性表达、存在的分子边界及其与手术切缘的安全性关系.方法 采用SABC、Supervion二步免疫组织化学法分别检测20例大肠癌标本及其远近端癌旁各1、2、3、4、5 cm组织中hTERT、SYK活性的表达.结果 hTERT在大肠癌的阳性表达率为80.00%,癌旁3、4、5 cm组织中其阳性表达率为0;hTERT的阳性表达从癌中心向癌旁1、2、3 cm组织逐渐递减(P<0.01).SYK在大肠癌的阳性表达率为10.00%,SYK的阳性表达从癌中心向癌旁1、2、3 cm组织逐渐递增(P<0.05).结论 在大肠癌周边组织中存在着分子边界,根据hTERT和SYK的表达情况,3 cm可以定义为大肠癌根治手术安全切除的分子边界.     

肝细胞肝癌hTERT和PTEN基因表达与临床病理特征关系的研究

目的:研究hTERT和PTEN基因在肝细胞肝癌中的表达情况,探计其在肝细胞肝癌发生发展中的作用及意义.方法:应用免疫组化(SP法)和半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),同步检测78例肝细胞肝癌及对应癌旁组织和12例正常肝组织中hTERT蛋白和mRNA、PTEN蛋白和PTEN mRNA表达情况.分析hTERT和PTEN基因表达及肝细胞肝癌临床病理参数的关系.结果:hTERT蛋白主要定位于肝癌细胞胞质内,偶见核内染色.hTERT蛋白和mRNA在肝细胞肝癌中的阳性率分别为84.62％(66/78)和78.21％ (61/78),均高于癌旁肝组织的阳性率10.26％(8/78)和8.97％ (7/78),差异有统计学意义,P＜0.01.hTERT蛋白及其mRNA在12例正常肝组织均未见表达.PTEN蛋白明确定位于肝细胞胞质内.PTENmRNA和蛋白在肝细胞肝癌中的阳性率分别为41.03％ (32/78)和43.59％(34/78),明显低于癌旁肝组织的阳性率100.00％ (78/78),差异有统计学意义,P＜0.01.统计学分析显示,在肝细胞中hTERT基因的表达与肿瘤分期分级、门静脉有无癌栓、血清中甲胎蛋白表达水平、是否合并HBV感染等因素有关,P＜0.05;与患者年龄、性别、肿瘤大小等因素无关.相关分析显示,PTEN与hTERT在肝细胞肝癌中的表达呈负相关,P＜0.05.结论:hTERT和PTEN表达呈负相关,提示PTEN可能在肝细胞肝癌的发生发展过程中对hTERT的活化起着调控作用,其表达有望成为肝细胞肝癌的重要分子生物学指标.     

端粒酶与肝癌

端粒酶在85%以上的肝癌细胞中激活并维持细胞无限增殖的能力,是肝细胞癌变过程中的早期事件.端粒酶活性的表达随肝癌的发生发展而升高,并与分化程度密切相关,可运用于肝癌早期诊断和术后观察,具备肝癌靶向治疗的物质基础,有望为肝癌综合治疗提供一种新途径.     

贲门癌组织中Survivin的表达及其临床意义

目的:探讨凋亡抑制基因生存素蛋白(Survivin)在贲门癌组织中表达及其与各临床病理因素的关系。方法:采用二步法免疫组化技术(Envision),检测66例贲门癌组织中Survivin的表达情况,分析Survivin与各临床病理因素间的关系。结果:肿瘤组织及癌旁组织Survivin阳性表达率分别为62·1%(41/66)和24·2%(16/66),正常胃黏膜无Survivin表达,三者之间阳性率差异有统计学意义,P<0·05。Survivin蛋白在低分化贲门癌中表达为73·8%(31/42),与高、中分化癌41·7%(10/24)相比,差异有统计学意义,χ2=5·4094,P<0·05;在伴有淋巴结转移者阳性率为73·3%(33/45),无淋巴结转移者为38·1%(8/21),两者差异有统计学意义,χ2=6·1324,P<0·05;伴有浆膜层浸润者阳性率为74·4%(29/39),无浆膜层浸润者为44·4%(12/27),两者相比差异有统计学意义,χ2=4·8628,P<0·05。Ⅲ期贲门癌Survivin表达阳性率95%(19/20)显著高于Ⅰ、Ⅱ期者47·8%(22/46),χ2=11·2544,P<0·05。Survivin基因表达与贲门癌组织的分化程度、临床分期及淋巴结转移呈正相关,而与贲门癌的年龄、性别及肿瘤大小无显著相关性。结论:凋亡抑制基因Sur-vivin与贲门癌发生、发展有一定联系,检测其表达对于判断贲门癌的恶性程度及病情进展有一定的价值。     

乳腺癌组织人端粒酶逆转录酶表达及其临床病理意义

目的:分析乳腺浸润性导管癌中人端粒酶逆转录酶(hTERT)的蛋白表达与肿瘤的临床分期、组织学分级、转移及患者预后的关系。方法:采用免疫组化SLAB法,检测67例乳腺浸润性导管癌石蜡包埋组织中hTERT的蛋白表达。结果:67例乳腺浸润性导管癌中强阳性者44例,弱阳性者23例。hTERT蛋白主要定位于癌细胞胞质,少部分细胞核也有表达。本组乳腺癌分期和分级越高,hTERT蛋白表达的强阳性率越高,P值分别为0.002 8和0.010 2。hTERT强阳性组转移率为63.6%(28/44),弱阳性组转移率为30.4%(7/23),两者差异有统计学意义,P=0.000 0。hTERT强阳性组3年生存率为69.2%(27/39),hTERT弱阳性组3年生存率为95.7%(22/23),两者差异有统计学意义,P=0.000 0。结论:hTERT的蛋白表达可能与乳腺浸润性导管癌的分化和转移有关,可以作为判断乳腺癌患者预后的指标之一。     

乳腺癌组织人端粒酶逆转录酶表达及其临床病理意义

目的：分析乳腺浸润性导管癌中人端粒酶逆转录酶（hTERT）的蛋白表达与肿瘤的临床分期、组织学分级、转移及患者预后的关系.方法：采用免疫组化SLAB法,检测67例乳腺浸润性导管癌石蜡包埋组织中hTERT的蛋白表达.结果：67例乳腺浸润性导管癌中强阳性者44例,弱阳性者23例.hTERT蛋白主要定位于癌细胞胞质,少部分细胞核也有表达.本组乳腺癌分期和分级越高,hTERT蛋白表达的强阳性率越高,P值分别为0.002 8和0.010 2.hTERT强阳性组转移率为63.6%（28/44）,弱阳性组转移率为30.4%（7/23）,两者差异有统计学意义,P=0.0000.hTERT强阳性组3年生存率为69.2%（27/39）,hTERT弱阳性组3年生存率为95.7%（22/23）,两者差异有统计学意义,P=0.0000.结论：hTERT的蛋白表达可能与乳腺浸润性导管癌的分化和转移有关,可以作为判断乳腺癌患者预后的指标之一.     

上皮性卵巢癌hTERT表达及端粒酶活性的研究

目的探讨人端粒酶反转录酶(hTERT)表达及端粒酶活性与卵巢癌发生、发展的关系,评价其可否作为卵巢癌的肿瘤标志物及预后指标.方法应用RT-PCR及端粒重复扩增方法对43例上皮性卵巢癌、11例良性卵巢肿瘤和卵巢正常组织以及4例交界性卵巢肿瘤共69份标本进行hTERTmRNA及端粒酶活性检测.结果hTERT表达及端粒酶活性率在卵巢癌中分别为83.7%(36/43)及76.7%(33/43),良性肿瘤中均为9%(1/11),在正常卵巢组织和交界性卵巢肿瘤中阴性,其差异在卵巢癌与良性肿瘤及正常组织间均有显著性(P值分别为0.0004及0.0001).hTERT及端粒酶阳性率在某些预后因素如肿瘤类型、组织学分级、临床分期及肿瘤转移之间的差异皆无显著性.结论卵巢癌中存在高频率的hTERT表达及端粒酶激活,表明hTERT作为端粒酶的催化亚基,在肿瘤细胞端粒酶的激活中起关键作用.hTERT表达及端粒酶活性可望作为有价值的肿瘤标志物而用于卵巢癌的早期诊断,但其预后价值尚有待于进一步研究.     

人端粒酶逆转录酶mRNA在胃癌组织中的定量表达及其与胃癌预后的关系

目的 探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA在胃癌组织中的表达,及其与胃癌生物学行为和根治术后患者预后的关系.方法 应用荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测89例胃癌根治性切除术后患者的肿瘤组织和阴性切缘组织中hTERT mRNA的表达量,对hTERT mRNA表达量与患者的临床病理参数(年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、病理类型、组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移情况、pTNM分期及生存期)进行单因素分析,采用Cox模型进行胃癌患者生存的多因素分析.结果 hTERT mRNA在阴性切缘组织中的表达量为11.37±2.15,在胃癌组织中的表达量为16.98±3.56,差异有统计学意义(P<0.05).胃癌组织中hTERT mRNA的表达量与组织学分级、浸润深度、pTNM分期及淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与胃癌患者的生存期呈负相关(P<0.01).结论 胃癌组织中hTERT mRNA高表达表明胃癌恶性程度较高且病期较晚,检测胃癌组织中hTERTmRNA的表达水平有助于对胃癌患者的预后做出更准确的判断.胃癌组织中hTERT mRNA的表达量、肿瘤浸润深度和pTNM分期是影响胃癌患者预后的重要因素.

Abstract：

Objective By quantitative detection of telomerase expression, we investigated the relationship between telomerase expression and malignant behavior and prognosis in gastric carcinoma.Methods A real-time quantitative RT-PCR (RQ-PCR) was used to quantify the hTERT mRNA copy numbers in 89 samples of gastric carcinoma and corresponding non-cancerous tissues.The clinicopathological data of enrolled patients such as age, sex, tumor size, tumor site, pathologic type, histodifferentiation,infiltration depth, lymph node metastasis, stage and survival were obtained, and were made one factor analysis of variance and COX regression prognostic analysis with those above mentioned markers.Follow-up was completed as of February 28, 2010.The median follow-up was 24 months.Results hTERT from gastric carcinomas and corresponding non-cancerous tissues was 16.98 ± 3.56 and 11.37 ± 2.15, respectively (P<0.05 ),the telomerase activity in gastric cancer was significantly higher than that in non-cancerous tissue ( P < O.05 ).Telomerase activity showed a positive correlation with depth of invasion, tumor differentiation and nodal metastasis ( P < 0.01 ), and negative correlation with survival.Conclusions Gastric cancer with high hTERT mRNA expression indicates a more malignant potential.Detection of hTERT mRNA in gastric cancer may be useful in a better understanding of invasion, metastasis, as well as prognosis of gastric cancer and provide a more efficient therapy.The quantitative expression of hTERT mRNA, infiltration depth and pTNM stage are significant afactors affecting the prognosis of patients with gastric carcinoma.     

hTERT基因在肺癌和癌前病变中的表达研究

目的:探讨端粒酶逆转录酶(human telomeras ereverset ranscrip tase,hTERT)在肺癌癌前病变(支气管黏膜上皮不典型增生)和肺癌中的作用。方法:41例支气管黏膜上皮不典型增生患者经纤维支气管镜取气管上皮组织、150例肺癌患者手术标本及40例正常肺组织,用免疫组化的方法检测hTERT基因在上述肺组织中的表达。结果:5·0%(2/40)的正常肺组织中可检测到hTERT基因的蛋白表达,61·0%(25/41)的支气管黏膜上皮不典型增生组织和90·0%(135/150)的肺癌组织中可检出hTERT基因表达,组间差异有高度显著性,χ2=111·9,P<0·01;且随着肺组织癌变过程的变化,hTERT基因的表达呈逐渐增高的趋势,χt2rend=107·7,P<0·01。结论:支气管黏膜上皮细胞的不典型增生和恶性转化与hTERT基因的表达有关;hTERT基因检测有望成为诊断肺癌变的早期生物标志物。     

hTERT基因在肺癌和癌前病变中的表达研究

目的：探讨端粒酶逆转录酶（human telomerase reverse transeriptase，hTERT）在肺癌癌前病变（支气管黏膜上皮不典型增生）和肺癌中的作用。方法：41例支气管黏膜上皮不典型增生患者经纤维支气管镜取气管上皮组织、150例肺癌患者手术标本及40例正常肺组织，用免疫组化的方法检测hTERT基因在上述肺组织中的表达。结果：5．0％（2／40）的正常肺组织中可检测到hTERT基因的蛋白表达，61．0％（25／41）的支气管黏膜上皮不典型增生组织和90．0％（135／150）的肺癌组织中可检出hTERT基因表达，组间差异有高度显著性，X^2=111．9，P〈0．01；且随着肺组织癌变过程的变化，hTERT基因的表达呈逐渐增高的趋势，X^2trend=107．7，P〈0．01。结论：支气管黏膜上皮细胞的不典型增生和恶性转化与hTERT基因的表达有关；hTERT基因检测有望成为诊断肺癌变的早期生物标志物。     

食管癌和贲门癌患者术后呼吸衰竭原因分析及防治

目的分析研究食管癌和贲门癌患者手术后发生呼吸衰竭的原因和治疗措施。方法应用SPSS统计软件Logistic回归分析及x^2检验,对114例呼吸衰竭患者的原因及死亡风险进行分析。结果因手术相关并发症引发的呼吸衰竭者40例（35．1％）,因严重呼吸道感染诱发的呼吸衰竭者43例（37．7％）,二者占全组的72．8％（83／114）。其他原因为麻醉清醒不完全或术中输液过量造成肺水肿、肺动脉栓塞、严重心律失常等。单因素和Logistic回归多因素分析发现,出现手术相关并发症者、术后并发症种类愈多者、术前肺功能差者、术前放疗者、术后第2天以后开始插管者、辅助呼吸时间愈长者、呼吸衰竭合并肺炎或‘肾衰者,其死亡危险性显著增加。其中前3者为显著独立致死因素,相对风险度分别为2．50,2．37和1．68;而与年龄、性别、手术治疗方式、术前合并疾病史、术前应用抗菌素等因素无显著相关性。结论食管癌和贲门癌患者术后发生呼吸衰竭多因手术相关的并发症和呼吸道感染所致。仔细谨慎的手术操作和术后防止严重并发症的发生,是避免食管癌和贲门癌术后发生呼吸衰竭的最重要措施。术后严密观察各项生命指征、及时插管或气管切开行机械通气辅助呼吸,是减少术后呼吸衰竭死亡的有效措施。     

结直肠癌患者外周血人类端粒酶反转录酶及基质金属蛋白酶-7 mRNA的表达及其相关性研究

 目的　应用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测结直肠癌患者外周血中人类端粒酶反转录酶（hTERT）及基质金属蛋白酶-7（MMP-7）mRNA 的表达情况,探讨其对监测结直肠癌血液微转移的临床意义及二者的相关性。方法　采用TRIzol法提取血液标本中的总RNA,将其反转录成cDNA,然后用RT-PCR技术检测血液标本中MMP-7 mRNA和hTERT mRNA表达,计算样本的△Ct值。结果　在181例结直肠癌患者中,hTERT mRNA表达阳性63例,阴性118例。MMP-7 mRNA 表达阳性61例,阴性120例。不同性别、不同年龄的结直肠癌患者外周血hTERT、MMP-7 mRNA表达阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）。低分化腺癌患者MMP-7 mRNA表达阳性率（43.9 %）较中高分化腺癌（27.8 %）增高（χ2＝4.873,P＜0.05）。Ⅲ、Ⅳ期患者外周血hTERT mRNA表达阳性率（42.5 %）较Ⅰ、Ⅱ期患者（24.0 %）增高（χ2＝6.591,P＜0.05）。Ⅲ、Ⅳ期患者外周血MMP-7 mRNA表达阳性率（39.6 %）较Ⅰ、Ⅱ期患者（25.3 %）增高（χ2＝4.014,P＜0.05）。有远处转移的结直肠癌患者外周血hTERT mRNA表达阳性率（53.3 %）较无远处转移的患者（28.7 %）增高（χ2＝9.059,P＜0.05）。有远处转移的结直肠癌患者外周血MMP-7 mRNA表达阳性率（46.7 %）较无远处转移的患者（29.4 %）增高（χ2＝4.506,P＜0.05）。CEA阳性患者外周血hTERT mRNA表达阳性率（52.6 %）较CEA阴性的患者（30.1 %）明显增高（χ2＝6.735,P＜0.05）。CEA阳性患者外周血MMP-7 mRNA表达阳性率（60.5 %）较CEA阴性的患者（26.6 %）明显增高（χ2＝15.490,P＜0.05）。无远处转移的结直肠癌患者中,以hTERT、MMP-7 mRNA一项高于正常值范围为血液微转移表达阳性。检测后6个月微转移表达阳性组肿瘤复发转移率（36.58 %）与阴性组（7.14 %）比较增高（χ2＝13.027,P＜0.05）;检测后12个月微转移表达阳性组肿瘤复发转移率（68.29 %）与阴性组（12.5 %）比较增高（χ2＝31.948,P＜0.01）。至检测12个月后,微转移表达阳性组41例患者中28例出现复发转移,微转移表达阴性组56例患者中7例出现复发转移。联合检测的敏感度80.00 %,特异度79.03 % 。Spearman相关性分析结果表明,hTERT与MMP-7 mRNA呈正相关（r＝0.341,P＝0.000）。结论　联合检测结直肠癌患者外周血hTERT、MMP-7 mRNA的表达,对早期发现血液微转移及预后具有重要意义。     

胃癌hTERT、Syk表达与分子边界的临床研究

目的探讨胃癌及其切缘组织中hTERT、Syk表达及其分子边界与手术切缘的安全性关系。方法应用免疫组化方法检测39例胃癌标本及其切缘组织中的hTERT、Syk的表达。结果（1）hTERT在胃癌组织中阳性表达率为69.2%,近端切缘距癌肿4 cm的阳性表达率为0,远端切缘距癌肿3 cm的阳性率为0。（2）Syk在胃癌的阳性表达率为5.1%,肿瘤旁正常胃黏膜组织中表达率为100.0%。（3）hTERT的阳性表达从癌中心向胃癌周边切缘组织逐渐递减,而Syk则相反,在近端切缘癌中心与癌旁3 cm、4 cm处比较差异有统计学意义（P〈0.05）,在远端切缘癌中心与癌旁2 cm、3 cm处比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论hTERT和Syk在胃癌及其周边组织中存在着分子边界,距胃癌中心近端4 cm及远端3 cm是hTERT、Syk的分子边界。