微波消解-原子荧光光谱法测定蒙成药中含量砷

目的:探讨测定蒙成药中砷含量的方法.方法:采用微波消解方式,应用AFS-230E原子荧光分光光度计,用工作曲线法测定了4种蒙成药样品中砷的含量.结果:回归方程为Y=24.803X-48.743,相关系数为0.9995,砷的工作曲线在0～500μg/L的浓度范围内线性良好.4种蒙成的回收率分别在2.68～3.23之间.结论:该方法简便,快速,干扰少,可作为蒙成药珍宝丸、扎冲十三味丸、红花清肝十三味丸、清咽六味散中重金属砷含量的控制测定方法.     

原子荧光光谱法快速检测蔬菜中汞含量

目的:建立快速检测蔬菜中汞含量的方法。方法:微波消解蔬菜样品后,用原子荧光光谱法测定蔬菜中的汞含量,并对该方法进行方法学考察。结果:标准曲线相关系数r=0.9994,检出限为0.056μg·L-1,回收率93.7%~101.9%,RSD4.79%。结论:该方法快速、准确且灵敏度高,为食品中汞含量检测提供了快速检测方法且可以达到满意效果。     

微波消解-AFS测定蛴螬中硒 汞 锑的含量

目的:建立微波消解-AFS测定蛴螬中硒、汞、锑的含量。方法:采用微波消解进行样品处理,原子荧光法测定蛴螬中硒、汞、锑的含量。结果:硒、汞、锑分别在1～100.0、0.1～10.0、0.5～10.0 ng·mL~(-1),线性关系良好(r≥0.999 4);平均回收率分别为93.4%(RSD=3.1%)、90.4%(RSD=3.9%)、89.2%(RSD=4.3%)。结论:蛴螬中富含硒元素、未检出有害元素锑,检测到汞元素。建立的微波消解-AFS方法简单、准确、重复性好,可用于蛴螬中硒、汞、锑的研究测定。     

微波消解-原子荧光光谱法测定中(蒙)成药中铅含量

目的:探讨测定中(蒙)成药中铅含量的方法。方法:采用微波消解方式,应用AFS-230E原子荧光分光光度计,用工作曲线法测定了5种中(蒙)成药样品中铅的含量。结果:回归方程为Y=64.801X+21.362,相关系数为0.9996,铅的工作曲线在0～40μg/L的浓度范围内线性良好。清咽六味散的回收率为92.33%。结论:该方法简便,快速,干扰少,可作为中(蒙)成药珍宝丸,扎冲十三味丸,红花清肝十三味丸,清咽六味散,藿香正气丸中重金属铅含量的控制测定方法。     

HPLC测定天麻胶囊中天麻素含量

目的应用HPLC测定天麻胶囊中天麻素的含量。方法采用DiamonsilC18柱色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相0.1%磷酸溶液-80%乙腈(97.2∶2.8);流速0.8mL.min-1;检测波长220nm,柱温40℃。结果天麻素线性范围为0.0392~0.3528μg(r=0.9998),平均加样回收率为95.69%,RSD=1.20%(n=5)。结论本方法稳定、可靠、灵敏度高、重现性好、杂质干扰小,方法操作简便、准确,可作为该制剂的质量控制标准,用于对天麻胶囊中主要成分天麻素的含量控制。     

氢化物发生-原子荧光光谱法测定中药中的砷含量

目的:测定18种中药饮片中的砷含量。方法:以微波法和灰化法处理样品,原子荧光光度法进行测定。结果:原子荧光光谱法测定砷元素的线性范围为0～80μg/L,r=0.9993,回收率=89.07%,RSD=2.47%。18种中药饮片中砷元素含量在80～800ng/g范围内。结论:18种中药饮片中的砷含量均未超标。原子荧光光谱法可用于中药中砷含量的测定。     

原子荧光光谱法测定丹参中砷和锑的含量

目的:建立丹参中药材的质量控制方法。方法:采用氢化物发生-双道原子荧光光谱法同时测定丹参药材中As(III),As(V),Sb(III)和Sb(V)的含量。结果:在最佳工作条件下As和Sb的最低检出限分别为90.31,57.82ng.L-1,RSD分别为2.01%和1.39%。丹参药材样品中As和Sb的形态分析,As(III)和As(V)的回收率分别为94.6%～97.2%和89.2%～102.0%,Sb(III)和Sb(V)的回收率分别为90.1%～93.5%和90.8%～98.4%。结论:本文提出的方法具有方便快捷、操作简单、精度高等特点,可作为丹参中药材的质量控制方法。     

微波消解——原子荧光光谱法同时测定中成药中砷、汞

目的:为了建立一种同时快速测定出口中成药中砷、汞的方法。方法:用微波消解技术-原子荧光光谱测定中成药样品中砷汞,并对溶样方法及共存元素的干扰进行了研究。并用于实际样品的测定。结果:方法的检出限分别为:砷0.17 ng/mL,汞0.26 ng/mL,相对标准偏差RSD分别为7.4%、1.89%(n=11),回收率均大于80%。结论:方法具有快速、准确、灵敏度高等优点。     

不同产地滇重楼中重金属含量的湿法消解-原子荧光光度法测定

目的 考察滇重楼药材的重金属含量情况.方法采用原子荧光光度法测定不同产地滇重楼中砷、铅、汞和铬的含量.结果 滇重楼中重金属均低于<药用植物及制剂进出口绿色行业标准>(2001)规定的重金属限量标准,不同产地滇重楼中重金属元素的含量有一定差异.结论 实验检测滇重楼中重金属既为滇重楼药材的质量评价及发展道地药材生产提供资料,也为制定该药材中重金属限量标准提供参考依据.     

氢化物发生-原子荧光光谱法测定锁阳中汞和砷的含量

目的: 建立氢化物发生-原子荧光光谱法测定锁阳药材中有害元素汞、砷的定量检测方法。 方法: 采用高氯酸-硝酸消解,原子荧光光谱法测定。 结果: 汞在0.1~0.5 ng ·mL^-1线性关系良好,回归方程Y=3.54×10²X+9.54,r=0.999 7,最低检出限为0.022 ng ·mL^-1;砷在1.0~10.0 ng ·mL^-1线性关系良好,回归方程Y=1.65×10²X-3.89,相关系数r=0.999 9,最低检出限为0.151 ng ·mL^-1。 结论: 该方法简便快速,结果准确可靠,结果满意,可为锁阳药材质量标准体系中有害成分的限量规定提供参考。     

RP-HPLC同时测定天麻中4种成分的含量

目的：建立RP-HPLC同时测定天麻药材中天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛的含量。方法：采用Kromasil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以甲醇-0.1%醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长270 nm,柱温35 ℃。结果：天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛分别在19.1～383 μg·mL^-1(r=0.999 9),0.620～12.4 μg·mL^-1(r=0.999 9),2.45～49.0 μg·mL^-1(r=0.999 9),0.280～5.63 μg·mL^-1(r=0.999 6)与峰面积线性关系良好;平均加样回收率(n=9)均在96.7%～97.7%,RSD均小于1.6%。结论：本法准确可靠,分离度好,适用于天麻药材中天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛的含量测定。     

RP-HPLC同时测定天麻中4种成分的含量

目的:建立RP-HPLC同时测定天麻药材中天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛的含量.方法:采用Kromasil C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.1%醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min~(-1),检测波长270 nm,柱温35℃.结果:天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛分别在19.1～383(r=0.999 9),0.620～12.4(r=0.999 9),2.45～49.0(r=0.999 9),0.280～5.63 mg·L~(-1)(r=0.999 6)与峰面积线性关系良好;平均加样回收率(n=9)均在96.7%～97.7%,RSD均小于1.6%.结论:本法准确可靠,分离度好,适用于天麻药材中天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛的含量测定.     

天麻饮片等级研究

探讨天麻饮片等级分类方法。在文献研究及产地调研的基础上,结合传统评价和现代评价方法综合评价天麻饮片,并对其进行等级分类。根据调研,天麻药材已有等级分类,饮片大都以统货形式销售;所调查的中药饮片生产企业、医院及药房销售的天麻饮片并未分级;对已分级的饮片一般只有一级和统货2个等级,而只有冬麻加工的饮片有分级。天麻饮片等级的综合评价有助于提高饮片质量,实现"优质优价",该研究可为其他中药饮片的等级划分提供思路和借鉴。     

基于主成分分析的天麻矿质元素含量研究

目的:研究不同来源天麻矿质元素含量,分析天麻特征元素及评价药材质量。方法:采用ICP法对不同来源的天麻药材必需的磷(P),钾(K),钙(Ca),镁(Mg),铁(Fe),锌(Zn),硼(B),锰(Mn),铜(Cu)等10种矿质元素含量进行测定,用主成分分析法分析天麻特征元素并对药材质量进行评价。结果:天麻药材中K元素含量最高,平均为15.31 g·kg-1;其次是N元素,平均含量为8.99 g·kg-12元素变异系数小;Mn元素含量的变异系数最大,为51.39%;N,P,K元素间达极显著正相关;主成分分析选择3个主成分对药材质量进行评价,发现天麻药材特征元素为P,B,N,K,Cu,Mn,Fe,Mg等8种元素。结论:天麻K和N元素含量高,且相对稳定;Mn元素含量差异大;其中P,B,N,K,Cu,Mn,Fe,Mg等8种元素是天麻特征元素;从矿质元素角度分析30份天麻资源中贵州、云南天麻药材质量较好。     

免疫亲和柱净化UPLC-MS-MS测定天麻药材中黄曲霉毒素的含量

目的：研究建立了免疫亲和柱净化UPLC-MS-MS测定天麻药材中黄曲霉毒素B₁,B₂,G₁,G₂的含量测定方法。方法：采用甲醇溶液超声提取、玻璃纤维滤纸滤过、黄曲霉毒素亲和免疫柱净化的方法对天麻药材样品进行处理,以超高液相色谱-三重四级杆串联质谱仪（UPLC-MS-MS）对黄曲霉毒素B₁,B₂,G₁,G₂含量进行研究并测定。结果：被测定的4种黄曲霉毒素分别在选定的范围内线性关系良好,精密度、重复性、准确度均良好,利用标准参考物质对本方法的验证结果良好,采用所建立的方法对30批不同产地天麻药材中黄曲霉毒素B₁,B₂,G₁,G₂含量进行了测定,结果均未检出。结论：该方法科学、可行、方便、快速,适用于对天麻药材中黄曲霉毒素B₁,B₂,G₁,G₂进行含量测定。     

不同产地和规格等级天麻矿质元素分析与评价

目的:研究不同产地和规格(变型)等级天麻中矿质元素的分布特征及分类鉴定依据.方法:采用原子吸收分光光度法、钼锑抗比色法和姜黄比色法对31批次不同产地和规格(变型)等级天麻样品中14种矿质元素进行测定,运用相关性分析、判别分析与主成分分析对测定结果进行系统分析与评价.结果:天麻中K,N,P元素含量高,为影响天麻生长的营养...     

不同产量下天麻根际土壤微生物多样性分析

目的 分析不同产量下天麻根际微生物的多样性,探讨土壤微生物对天麻产量的影响。方法 该试验采用16S DNA和内转录间隔区（ITS）序列高通量测序对天麻根际土壤中高产土样（GC）和低产土样（DC）下的细菌和真菌群落多样性进行分析。结果 天麻根际土壤中细菌占主导地位的有变形杆菌门Proteobacteria、厚壁菌门Firmicutes和其他不明细菌unidentified Bacteria,真菌占主导的为子囊菌门Ascomycota、担子菌门Basidiomycota、被孢霉门Mortierellomycota;高产和低产天麻根际土壤中微生物群落丰度没有差异,仅在群落组成上存在显著差异,高产天麻根际土壤中慢生根瘤菌Bradyrhizobium、施氏乳酸杆菌属Schleiferilactobacillus、古根菌属Archaeorhizomyces等38属微生物大量聚集,低产天麻根际土壤中则镰刀菌属Fusarium、鬼伞属Coprinellus、氨氧化古菌属Nitrosotalea等30属微生物大量聚集;在属和种的水平上,发现6个差异物种,绒紫红菇Russula mariae、古根菌属Archeaeorhizomyces、土赤壳属Ilyonectria偏向集中于高产天麻根际土壤中,氨氧化古菌属Nitrosotalea、簇生鬼伞Coprinellus disserminatus、镰刀菌属Fusarium则偏向集中于低产天麻根际土壤中。结论 在不同产量下,天麻根际土壤中的真菌群落和细菌群落中均存在差异微生物,推测这些微生物与天麻产量高低有关,研究结果可为后续天麻的高产研究提供重要的理论基础。     

快速筛选高纯合度天麻PCR-RFLP鉴定方法

目的 建立一种快速筛选高纯合度天麻种质材料的方法,为其纯系育种和杂交育种奠定基础。方法 以本课题组前期天麻全基因组测序和群体重测序为基础,利用单核苷酸多态性（SNP）位点开发20个限制性内切酶片段长度多态性（RFLP）标记,并采用聚合酶链式反应（PCR）-RFLP法对15份天麻种质的20个RFLP标记进行限制性内切酶实验,根据20个RFLP标记位点酶切条带数目,计算15份天麻种质的纯合度,进而对天麻种质纯合度进行评估;在此基础上,利用基因组重测序技术对评估结果进行验证。结果 利用PCR-RFLP法筛选获得10份纯合度>95%的种质材料,其中3份种质材料的纯合度为95%,7份种质材料的纯合度为100%;利用基因组重测序法筛选获得9份纯合度>95%的种质材料,其中8份种质材料与PCR-RFLP法检测结果一致。结论 该文所建立的用于筛选高纯合度天麻种质的PCR-RFLP法精确度为80%,准确率为89%。该方法实验操作简便、检测效率高,且成本显著低于基因组重测序技术,为天麻纯系育种提供了技术支撑,也为其他中药材品种选育研究提供了借鉴。     

天麻褐腐病与土壤微生物菌群结构的关联分析

目的:研究褐腐天麻与土壤微生物菌群的组成及变化,阐述天麻种植过程中天麻褐腐病与土壤微生物菌群之间的关系,为揭示天麻褐腐病的原因提供理论基础。方法:采用内转录间隔区(ITS)和16S rDNA高通量测序技术,分别对健康、褐腐天麻及其周际土壤中真菌和细菌的微生物多样性、群落组成结构、群落结构相似性进行分析。结果:与健康组相比,褐腐天麻及其土壤中真菌和细菌分类单元(OTUs)数目均有增加,且土壤中真菌、细菌丰富度和多样性显著增高,褐腐天麻真菌多样性显著降低,细菌多样性显著增高。在属分类水平上,健康天麻及其周际土壤中的优势真菌属为被孢霉属Mortierella,该属在褐腐天麻及其土壤中分别减少7.62%和15.75%,优势细菌属为慢生根瘤菌属Bradyrhizobium和Burkholderia-Paraburkholderia;褐腐天麻及其周际土壤中的优势真菌属为土赤壳属Ilyonectria,优势细菌属分别为沙雷氏菌属Serratia和慢生根瘤菌属Bradyrhizobium。结论:褐腐天麻与其周际土壤中真菌菌群具有极高相似度,说明土壤微生物真菌群落变化在一定程度上造成天麻褐腐病的发生,其中褐腐天麻真菌群落组成中致病真菌土赤壳属Ilyonectria成为优势菌属,推测该菌属可能含有天麻褐腐病的致病菌。     

天麻种植对土壤微生物群落结构的影响分析

目的:分析不同生境种植天麻前后土壤微生物的群落结构变化,探讨土壤微生物对种植天麻的响应程度。方法:对贵州大方和安徽金寨未种植天麻土壤(CK1和CK2),采收前天麻块茎周围土壤(GE1和GE2)和蜜环菌菌索周围土壤(AGE1和AGE2)进行ITS和16S rDNA测序分析。结果:PCA主成分分析说明与对照土壤相比,种植天麻后土壤微生物发生较大改变。测序结果分析发现种植天麻使得土壤中真菌和细菌OTUs数目均有一定的增加。与对照土壤相比,贵州大方种植天麻后的土壤真菌和细菌群落的多样性及丰度均呈增加的趋势;安徽金寨种植天麻后的土壤真菌的多样性及丰度变化不大,土壤细菌群落丰度增加。二者土壤中土赤壳属Ilyonectria,硝化螺菌属Nitrospira的相对丰度显著升高,红菇属Russula的相对丰度显著降低;贵州大方土壤中镰刀菌属Fusarium,被孢霉属Mortierella的相对丰度显著增加。结论:种植天麻后土壤微生物平衡被打破,并且土赤壳属Ilyonectria,镰刀菌属Fusarium等病原微生物丰度增加,推测与天麻病虫害有一定的相关性。