TM和EPCR基因在百草枯中毒鼠肺组织中的表达及三七总皂甙保护作用

目的探讨急性百草枯(PQ)中毒鼠肺组织病理损伤变化和肺组织中血栓调节蛋白(TM)和内皮细胞蛋白C受体(EPCR)的表达及三七总皂甙(PNS)的保护作用。方法 150只SD雄性鼠分为正常对照组(C 30只)、百草枯染毒组(PQ 60只)及三七总皂甙干预组(PNS 60只)。PQ组和PNS组鼠一次性灌胃PQ25mg/kg染毒,C组予等体积生理盐水灌胃。其中PNS组鼠于染毒前15min以PNS50mg/kg阴茎静脉注射保护,以后每日1次给药直至处死前;PQ组、C组分别在同时间点予与等体积生理盐水。观察各组大鼠在中毒后6、12h、1、3、5、7天肺组织病理改变,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定鼠肺组织TM和EPCR mRNA的表达。结果 C组TM和EPCR mRNA有一定水平表达;与C组相比PQ组及PNS组鼠肺组织TM和EPCRmRNA的表达增强,差异有统计学意义(P<0.05);PQ组TM和EPCR mRNA的表达在1天达高峰之后下降,第3天基本恢复到C组水平;PNS组TM和EPCR mRNA的表达在6、12h及1天低于PQ组,至第3和5天显著高于PQ组,之后下降至正常水平,差异有统计学意义(P<0.05)。PQ组肺病理损伤评分在6、12h,1、3、5及7天各亚组均高于PNS相应组,差异有统计学意义(P<0.05),C组肺组织病理大致正常,与PQ组及PNS组相比,差异有统计学意义(P<0.00)。结论 TM和EPCR mRNA基因参与PQ中毒所致肺损伤,PNS对百草枯中毒所致肺损伤有保护作用。     

卵巢癌患者血浆TM及EPCR检测的临床意义

目的:检测卵巢癌患者血浆血栓调节蛋白(TM)和血管内皮细胞蛋白C受体(EPCR)的水平,探讨其临床意义.方法:采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测卵巢癌患者35例、卵巢良性肿瘤患者 28 例,健康体检妇女70例血浆TM、EPCR的含量.结果:91.4(32/35)卵巢癌患者血浆TM明显升高,与对照组相比差异有统计学意义...     

参附注射液对失血性休克大鼠血清及人脐静脉内皮细胞TM和EPCR表达的影响

目的探讨参附注射液对失血性休克大鼠血清和人脐静脉内皮细胞（HUVEC）中血栓调节蛋白（TM）、内皮细胞蛋白C受体（EPCR）表达的影响。方法将50只SD大鼠随机分为正常对照组、假休克组、失血性休克组、林格注射液治疗组（林格组）、林格注射液加参附注射液治疗组（参附组）,分别检测各组可溶性TM（sTM）、可溶性EPCR（sEPCR）水平及TM、EPCR mRNA和蛋白表达水平。结果与假休克组比较,休克组和林格组sTM、sEPCR及TM、EPCR mRNA含量均增高（P〈0.05）,TM和EPCR蛋白含量均降低（P〈0.05）。与林格组比较,参附组sTM、sEPCR含量和TM、EPCR mRNA含量均下降（P〈0.05）,TM和EPCR蛋白含量均升高（P〈0.05）。结论参附注射液可从基因、蛋白水平影响人血清和HUVEC中TM和EPCR的表达,从而阻止失血性休克的进展。     

百草枯中毒鼠肺组织中TM-EPCRmRNA与IL-1β的表达

目的探讨IL-1β与TM、EPCR基因在百草枯中毒鼠所致急性肺损伤中的表达．方法90只SD雄性大鼠分为正常对照组（C组30只）、百草枯中毒组（PQ组60只）．PQ组一次性灌胃PQ25mg/kg染毒,C组予等体积生理盐水灌胃．观察各组大鼠在中毒后6h、12h、1d、3d、5d、7d肺组织病理改变,采用反转录一聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测鼠肺组织TM、EPCRmRNA的表达;采用ELISA方法检测血清的IL-1β表达．结果C组肺组织结构完整,无炎症细胞渗出．PQ组肺组织炎性细胞浸润明显增多,且随时间推移肺损伤加重．C组TM和EPCRmRNA有一定水平表达;与c组相比PQ组鼠肺组织TM和EPCRmRNA的表达增强,差异有统计学意义（P〈0．05）;PQ组TM和EPCRmRNA的表达在1d达高峰之后下降,第3天基本恢复到C组水平．PQ组IL-1β与TM表达呈正相关（P〈0．01）;IL-1β与EPCR表达呈正相关（P〈0．01）．结论IL-1β与TM、EPCR基因介导的炎症反应参与百草枯中毒所致肺损伤．     

百草枯中毒鼠肺组织中TM-EPCR mRNA与IL-1β的表达

［摘要］目的　探讨IL-1β与TM、EPCR基因在百草枯中毒鼠所致急性肺损伤中的表达．方法　90只SD雄性大鼠分为正常对照组（C组30只）、百草枯中毒组（PQ组60只）．PQ组一次性灌胃PQ25 mg/kg染毒,C组予等体积生理盐水灌胃．观察各组大鼠在中毒后6 h、12 h、1 d、3 d、5 d、7 d肺组织病理改变,采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测鼠肺组织TM、EPCR mRNA的表达;采用ELISA方法检测血清的IL-1β表达．结果　C组肺组织结构完整,无炎症细胞渗出．PQ组肺组织炎性细胞浸润明显增多,且随时间推移肺损伤加重．C组TM和EPCR mRNA有一定水平表达;与C组相比PQ组鼠肺组织TM和EPCR mRNA的表达增强,差异有统计学意义（P＜0.05）;PQ组TM和EPCR mRNA的表达在1 d达高峰之后下降,第3天基本恢复到C组水平．PQ组IL-1β与TM表达呈正相关（P＜0.01）;IL-1β与EPCR表达呈正相关（P＜0.01）．结论　IL-1β与TM、EPCR基因介导的炎症反应参与百草枯中毒所致肺损伤．     

狼疮性肾炎患者血浆中内皮细胞损伤标志物的变化及意义

目的探讨血浆可溶性血栓调节蛋白(sTM)及可溶性内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)水平与狼疮性肾炎(LN)关系。方法采用酶联免疫吸附实验检测54例LN患者(LN组)及18例健康者(对照组)血浆sTM和sEPCR水平。结果 LN组血浆sTM、sEPCR水平分别为(32.87±13.39)ng/ml、(180.97±14.92)ng/ml,均明显高于对照组的(18.04±3.72)ng/ml、(147.68±34.97)ng/ml(P均<0.01)。Ⅳ型LN患者sTM和sEPCR水平均高于Ⅲ型和Ⅴ型患者(P均<0.05)。LN组sTM与sEPCR呈正相关关系(P<0.05);sTM、sEPCR均与尿蛋白水平及狼疮活动指数呈正相关关系(P均<0.05);sTM与血清内生肌酐清除率呈负相关关系(P<0.05)。结论 LN存在血管内皮损伤,血浆sTM及sEPCR水平可作为判断LN疾病活动性及肾脏损伤程度的指标。     

大鼠脑外伤后TM、vWF的表达与脑水肿及MVD变化的相关性研究

目的观察大鼠脑外伤后脑组织与外周血中血栓调节蛋白(TM)、血管假性血友病因子(vWF)的表达、脑含水量以及微血管面密度(MVD)的动态变化,探讨TM、vWF与MVD及脑含水量的相关性。方法 90只Wistar大鼠随机分为对照组和外伤组,采用自由落体打击法制做大鼠脑外伤模型。按伤后处理时间各组再分为9个亚组,每组5只,分别于30 min、1 h、3h、6 h、12 h、1 d、3 d、7 d、14 d不同时间点处死大鼠。采用干湿重法检测损伤侧脑组织含水量;免疫组化法测定脑组织中TM、vWF表达,CD34标记损伤灶周围脑皮层区微血管并计算MVD,酶联免疫吸附(ELISA)法检测外周血中TM、vWF的表达。结果大鼠颅脑创伤后外伤组脑组织及外周血中TM、vWF表达水平与对照组比较有明显升高(P0.05),脑组织TM、vWF表达均与MVD呈负相关(r=-0.378,P0.05、r=-0.426,P0.05);血浆TM、vWF表达与MVD呈负相关(r=-0.663,P0.05、r=-0.884,P0.05)。结论 TM、vWF的表达水平变化可以反映脑外伤早期微血管内皮细胞活化状态,并且与脑水肿的发生发展密切相关。     

TLR-4在多器官功能障碍综合征大鼠肺组织表达的变化及意义

目的：检测TOLL样受体4（TLR4）在多器官功能障碍综合征大鼠肺组织中表达的变化,探讨其与肺组织中血栓调节蛋白（TM）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达的关系。方法：雄性SD大鼠采用二次打击建立MODS模型,随机分为正常对照组和MODS模型6h,12h,24h,48h组,不同时相点处理动物。肉眼、光镜观察肺组织的形态结构变化;流式细胞技术（FCM）检测TLR4蛋白表达;免疫组化法测定TM和MMP-9蛋白表达。结果：①正常对照组肺组织结构无改变;MODS组肺组织损伤较重;②与对照组比较,造模后6h肺组织TLR4的表达显著增高,12h达到高峰,24-48h开始下降;③与对照组相比,肺组织TM的阳性表达6h组有所增加,12h达到高峰,随后24-48h下降,至48h与正常对照组TM的阳性表达无显著性差异。肺组织MMP-9的阳性表达6～48h组均比正常对照组有所增加。结论：在MODS肺组织发生病变的早期,TLR4表达上调,TLR4的激活可能通过促进多种炎性因子的分泌损伤肺内皮细胞和基质,TLR4可能参与了MODS后肺组织损伤的病理生理过程,有可能成为治疗MODS的新靶点。     

TM与VEGF在子宫内膜癌组织中的表达和意义

目的:了解TM与VEGF在子宫内膜癌组织中的表达及与肿瘤的浸润程度、组织学分级等病理参数的关系,分析VEGF与TM的相关性.方法:采用免疫组织化学方法分别检测50例子宫内膜腺癌、10例子宫内膜复杂型增生过长、10例正常子宫内膜组织中TM与VEGF的表达.结果:TM和VEGF表达在子宫内膜腺癌与子宫内膜复杂型增生过长和正常子宫内膜之间均有显著性差异(P＜0.05);TM的表达与临床分期有关(P＜0.05),与组织学分级、肌层浸润程度、患者年龄无明显关系(P＞0.05);VEGF的表达与临床分期、组织学分级、肌层浸润程度、患者年龄均无明显关系(P＞0.05);TM与VEGF在子宫内膜腺癌中的表达亦无明显相关性(P＞0.05).结论:TM与VEGF与肿瘤的发生有关;TM表达水平与子宫内膜癌的转移有关,有望成为判断子宫内膜癌患者病情发展和预后的一项新指标.     

参附注射液对失血性休克大鼠肾脏血栓调节蛋白及内皮细胞蛋白C受体基因表达的影响

目的探讨参附注射液对失血性休克大鼠肾脏血栓调节蛋白（TM）及内皮细胞蛋白C受体（EPCR）基因表达的影响及可能的机制。方法成年健康SD大鼠50只,随机分为5组：正常对照组、实验对照组、失血性休克组、林格液复苏组、参附复苏组,每组10只。建立失血性休克大鼠模型。林格液组用3倍失血量的林格液复苏;参附组用含参附注射液（10ml/kg）和林格液组成的3倍失血量的液体复苏。休克后4h及复苏后3h处死大鼠,留取肾组织,用RT-PCR法检测TM及EPCR的基因表达。结果与正常对照组比较,实验对照组肾组织TM和EPCR的mRNA表达升高（P〈0.05）,休克后明显升高（P〈0.01）;林格液组和参附组复苏后肾组织TM和EPCR的mRNA表达较休克组均下降,差异有统计学意义,林格液组下降更明显（P〈001）;林格液组与参附组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论失血性休克时大鼠肾脏组织TM和EPCR表达增加,这与休克时存在内皮细胞功能损伤有关,参附注射液可以从基因水平影响大鼠肾组织TM和EPCR的mRNA表达,保护内皮细胞功能。     

脂多糖诱导急性肺损伤大鼠肺组织GRK2变化的实验研究

目的：探讨脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)的变化规律。方法：Wistar大鼠18只，随机分为3组。LPS组自尾静脉注射LPS 8mg/kg，LPS 山莨菪组注射LPS8mg/kg 山莨菪碱10mg/kg，正常对照组注射等量生理盐水。90min放血处死后取肺脏，用Western blot检测各组GRK2的变化。结果：LPS组和LPS 山莨菪碱组GRK2表达较正常对照组显著增加，LPS组和LPS 山莨菪碱组GRK2表达无显著差异。结论：Wistar大鼠肺组织有GRK2表达；LPS诱导的ALI大鼠肺组织GRK2表达显著增加，山莨菪碱对LPS诱导的ALI大鼠肺组织GRK2表达增加无显著抑制作用。     

内皮蛋白C受体在重度子痫前期孕妇胎盘组织和血浆中的表达及意义

目的 探讨内皮蛋白C受体(ERCR)在重度子痫前期孕妇胎盘组织和血浆中的表达及意义.方法 选取2017年5月至2020年6月南昌市第一医院接收的70例重度子痫前期孕妇(研究组)和70名健康孕妇(健康组)作为本研究对象,两组进行胎盘组织和血浆ERCR检测,比较两组的血浆游离ERCR水平、胎盘组织结合型ERCR mRNA相...     

受体相互作用蛋白140在脓毒症急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞中的表达及其作用

目的 探讨受体相互作用蛋白140 (receptor interacting protein140,RIP140)在脓毒症急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠肺泡巨噬细胞中的表达及其在炎症反应过程中的作用.方法 36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组和盲肠结扎穿孔术(CLP)致脓毒症肺损伤3、6、12、24 h组.HE染色观察肺组织病理变化;免疫组化检测RIP140在肺组织的表达分布;Western blot及免疫荧光观察肺泡巨噬细胞RIP140的表达变化及定位;RT-qPCR测定肺泡巨噬细胞IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA水平变化.结果 CLP组可见明显肺损伤病理改变且随时间进展逐渐加重.RIP140在脓毒症肺损伤大鼠肺组织中主要表达于炎性渗出细胞,且随时间进展,表达RIP140的细胞数量逐渐增多.CLP术后6h大鼠肺巨噬细胞RIP140蛋白表达水平较正常对照组开始升高(P＜0.05),至12～24 h维持一较高水平,且主要表达于细胞核.CLP术后3h大鼠肺巨噬细胞IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA水平较正常对照组开始升高(P＜0.05),至12～24 h维持一较高水平,下调肺泡巨噬细胞RIP140的表达可明显抑制IL-1 β、TNF-α、IL-6 mRNA的表达.结论 脓毒症肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞可通过上调RIP140表达增强肺组织炎症反应,从而参与早期急性肺损伤的炎症应答.     

槲皮素对百草枯致大鼠急性肺损伤治疗作用的实验研究

目的 探讨槲皮素对百草枯所致急性肺损伤的治疗作用。方法 雄性SD大鼠45只随机分为对照组（5只）、百草枯组（20只）和槲皮素组（20只），后两组均再分为8，24，48和72 h四个小组（每组5只）。百草枯组和槲皮素组大鼠腹腔注射百草枯（50 mg/kg），槲皮素组在百草枯注射后3 h再腹腔注射槲皮素（100 mg/kg）。分别测定百草枯中毒后8，24，48，72 h大鼠血浆和支气管肺泡灌洗液（BALF）中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活力，并观察肺组织结构改变，测定肺组织湿/干重比（W/D），采用免疫组化方法测定肺组织核转录因子κB（NF-κB）p65的表达。结果 与对照组比较，百草枯组血浆及BALF中MDA含量均显著升高；血浆中SOD活力呈下降趋势，24 h后明显下降；GSH-Px活力呈增加趋势，在48 h后明显升高；BALF中SOD、GSH-Px活力均下降，但48 h后SOD活力显著升高。槲皮素组与百草枯组比较，血浆和BALF中MDA含量下降，GSH-Px和SOD活力升高。百草枯组肺泡壁充血、增厚，炎症细胞浸润，并有局灶性出血；槲皮素组肺泡壁充血、出血均有减轻。槲皮素组肺组织NF-κB p65的表达及W/D值较百草枯组明显下降。结论 槲皮素对百草枯诱导的急性肺损伤具有治疗作用。     

磷酸化蛋白激酶样内质网激酶、C/EBP同源蛋白在慢性间歇低氧大鼠肺组织中的表达变化及意义

目的  探讨慢性间歇低氧（CIH）大鼠肺组织中磷酸化的蛋白激酶样内质网激酶（p-PERK）、CCAAT增强子结合蛋白（C/EBP）同源蛋白（CHOP）表达变化及意义。方法  将60只大鼠随机分成正常组（UC组）、CIH组,每组各自分成3、7、14、21和28 d 5个时间亚组。采用HE法观察UC组和CIH组大鼠肺组织病理形态变化;采用免疫组织化学法检测p-PERK、CHOP蛋白表达及两者的相关性;采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测两组大鼠肺组织CHOP mRNA表达。结果  ①CIH组肺泡壁及间质轻度水肿,少量炎症细胞浸润,肺泡结构紊乱,部分肺泡融合;UC组大鼠肺组织无明显病理变化。②CIH组肺组织p-PERK、CHOP蛋白表达高于UC组,于21 d表达最高。③CIH组肺组织CHOP mRNA表达高于UC组,于21 d表达最高。④P-PERK、CHOP表达的上调呈正相关。结论  慢性间歇低氧可引起肺组织损伤,而p-PERK、CHOP蛋白的活化表达在慢性间歇低氧大鼠肺组织的损伤中可能存在一定的作用。

     

糖尿病大鼠血栓调节蛋白与颈动脉病变的关系

目的:探讨血栓调节蛋白在糖尿病大鼠颈动脉病变中的作用。方法:Wistar大鼠48只随机分为A组24只和B组24只,B组注射链脲佐菌素制造糖尿病模型。成模后6、10和14周每组处死8只,测定颈动脉内中膜厚度、血糖、体重、血栓调节蛋白、空腹胰岛素、C肽及血脂水平。结果:随病程延长,B组空腹血糖、血栓调节蛋白、总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白显著高于A组,胰岛素、C肽及高密度脂蛋白显著低于A组;B组右颈动脉内中膜厚度在10,14周时较A组厚度明显增加;B组颈动脉内中膜厚度与血栓调节蛋白呈显著正相关。结论:糖尿病大鼠血栓调节蛋白升高与颈动脉病变显著相关,血栓调节蛋白升高先于颈动脉病理改变的发生,可能成为糖尿病颈动脉病变发生的重要早期预测指标。