胰腺癌的分子遗传学研究进展

胰腺癌是严重危害人类健康的疾病，人们对其发病机制了解甚少。分子遗传学研究揭示该病的发生涉及多种癌基因和肿瘤抑制基因变化，其中Ｋ－ｒａｓ基因突变率高达９０％以上，ＡＰＣ、ｐ５３、ＤＣＣ等基因频繁失活，以上研究对胰腺癌的诊断、预后、治疗有极大的意义。     

胰腺癌的基因诊断

用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术对２７例胰腺及其周围器官组织细针穿刺标本进行ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子突变检测。结果１５例胰腺癌中１４例有ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子突变。阳性率达９３．３％；而１１例慢性胰腺炎、胰腺囊肿、胆管炎、胆囊癌、壶腹癌及胃淋巴瘤均无ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子突变。本研究结果证实ＰＣＲ－ＲＦＬＰ检测胰腺ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子突变是诊断胰腺癌的一种快速、准确、敏感、实用的基因诊断方法。     

PCR—SSP快速检测胰腺癌Ki—ras基因点突变

为判定有Ｋｉ－ｒａｓ基因突变及突变方式，我们采用针对Ｋｉ－ｒａｓ基因点突变方式 顺序特异性引物，对冰冻胰腺癌组织进行聚合酶链反应。产物借助常规电泳即可判定有无Ｋｉ－ｒａｓ基因突变及突变方式，无需酶切，杂交，放射性及非放射性显影。     

癫痫的分子遗传学研究进展

癫痫是常见的神经系统疾病，遗传因素在癫痫的发生中起一定作用。近几年来，已经确定了几种特发性癫痫的相关基因定位及基因克隆，并对一些基因产物功能进行了研究，就近年研究的特发性癫痫类型及基因定位。基因突变检测与发病机理研究的进展作一综述。     

胰腺癌中OPG表达及与预后的相关性

目的探讨胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC)中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)的表达与临床病理学特征、KRAS基因突变及预后的相关性。方法收集2008～2012年南京医科大学第一附属医院PDAC标本102例,制作组织芯片,采用免疫组化法检测OPG在PDAC中的表达。采用荧光定量PCR法检测其中46例肿瘤组织KRAS基因第12、13号外显子突变情况。结果肿瘤组织中OPG与癌旁组织相比,其表达更高。46例KRAS基因突变检测中有24例野生型(52.2%),22例突变型(47.8%)。相关性分析显示KRAS基因突变与糖尿病有关(P=0.025),与OPG表达及其他临床病理特征无相关性(P0.05)。Cox单因素生存分析显示组织大小(P=0.008)、分化程度(P0.001)、肠系膜上动脉受侵犯(P=0.043)、肠系膜上静脉受侵犯(P=0.004)、门静脉受侵犯(P=0.033)、术后化疗(P=0.023)、OPG表达(P0.001)与PDAC预后显著相关。Cox多因素生存分析显示OPG高表达(P0.001)是PDAC患者总生存期的独立预后因素。结论 OPG高表达提示PDAC患者预后差,其可以作为PDAC预后的生物学标志物。     

淋巴系统恶性增殖性疾病的分子遗传学基础

几乎所有淋巴系统恶性增殖性疾病都伴有染色体易位、基因重排和突变，并且大多数与肿瘤的系列属性及／或分化阶段有着密切的相关性。不同种类淋巴细胞白血病及淋巴瘤基因异常均可通过肿瘤相关基因及／或功能的改变，从而影响淋巴细胞的分化、增殖或程序化死亡过程。本文综述一组常见淋巴系统恶性增殖性疾病的分子遗传学异常及其产生机理，并简述其在临床的意义。     

视网膜色素变性的分子遗传学研究进展

视网膜色素变性 (retinitis pigmentosa,RP)是眼科常见的遗传性致盲眼病之一。具有明显的遗传异质性 ,有不同的遗传方式与不同表型。病人常有夜盲和进行性视野缩小。随着分子遗传学的迅速发展 ,人们对于其分子病理有了一定的了解和认识 ,至少发现有 2 4个疾病位点 ,其中已有 12个致病基因被克隆     

脾脏异位胰腺癌1例

患者男性,65岁,食欲下降,厌油,上腹饱胀不适3个月。体重明显下降达10kg,血CEA( )。CT示:脾脏增大,内见一低密度包块,约12·6cm×8·5cm×9·0cm,边界欠清,密度均匀,考虑血管瘤、淋巴瘤。B超示脾中下极见9·0cm×7·0cm,稍强回声团,边界欠清,形态不规则。彩色多普勒血流显像检查     

石蜡包埋胰腺癌组织中DPC4基因改变的检测

目的 研究石蜡包埋胰腺癌组织中ＤＰＣ４基因的改变。方法 用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染技术检测４６例石蜡包埋胰腺癌组织中ＤＰＣ４基因的缺失和突变。结果 ＤＰＣ４基因第１、２、３、４、８和１１外显子的纯合性缺失率为１３／４６（２８．３％）,具体分布为１例在第１１外显子;１例在第１、２、３、４、８和１１外显子的纯合性缺失率为１３／４６（２８．３％）,具体分布为１例在第１１外     

肿瘤标志物mesothelin在胰腺癌组织的表达及其临床意义

研究胰腺癌组织mesothelin的表达及其与临床肿瘤指标的关系.收集43例手术切除的胰腺癌及39例癌旁胰腺组织石蜡标本,利用EnVision免疫组化法分别检测癌组织和癌旁胰腺组织mesothelin的表达情况.结果显示,43例胰腺癌组织中mesothelin阳性表达32例(74.4%),39例癌旁胰腺组织中无阳性表达病例;mesothelin阳性率与肿瘤分化程度有关(P＜0.005),与肿瘤的大小、淋巴及远处转移无关(P＞0.05).结论:mesothelin在胰腺癌组织中有较高的阳性表达率,检测其表达有助于胰腺癌的诊断,并可作为判断胰腺癌恶性程度的重要指标.     

NK4基因在人胰腺癌细胞中的表达及其对血管内皮生长的影响

目的:构建NK4基因真核表达载体并进行转染研究。方法:对重组质粒pcDNA3/hNK4进行酶切,将目的基因NK4克隆到较强的真核表达载体pRC/CMV2中,应用脂质体将NK4基因转染到胰腺癌细胞株SW1990中,G418筛选获得稳定表达克隆,采用RT-PCR及Western blot鉴定及筛选出高转录和高表达的细胞克隆。以MTT法检测转染重组质粒pRC/CMV2-hNK4的细胞克隆表达产物对血管内皮细胞生长的影响。结果:在转染NK4基因的SW1990细胞克隆中,RT-PCR能扩增出NK4 mRNA预期的453bp片段,但强弱不同,Western blot显示均有约50 kD的NK4蛋白的表达。其上清可显著抑制血管内皮细胞的生长。结论:重组质粒pRC／CMV2-hNK4是一种高效真核表达载体,并且能够在SW1990细胞中高表达;NK4能够抑制血管内皮细胞的生长,提示其在肿瘤基因治疗中可能具有重要意义。     

精神分裂症的分子遗传学研究进展

精神分裂症的流行病学研究提示了遗传因子的作用,但精神分裂症的分子遗传学研究至今尚未发现导致该病的主要的、特异性的基因。连锁（linkage）和关联（association）研究几乎都得出阴性或有争议的结果,这些研究主要涉及某些侯选基因,如多巴胺受体基因和其它脑神经递质基因,目前,有些侯选基因已被排除作为精神分裂症的特异性病因学因素。最近大多数实验结果提示：精神分裂症的遗传易感性极可能是多基因的,其作用效果依赖于生理、心理、环境因素的相互作用。     

5-氟胞嘧啶对胞嘧啶脱氨酶基因修饰的胰腺癌细胞凋亡的诱导作用

目的:探讨5-氟胞嘧啶(5-FC)对基因修饰的胰腺癌细胞凋亡的影响及特征。方法: 以腺病毒介导的胞嘧啶脱氨酶(CD)基因转染胰腺癌SW1990细胞,以Western blot检测目标基因蛋白水平表达,通过细胞形态学、脱氧核糖核酸(DNA)凝胶电泳和流式细胞术观察5-FC对表达CD基因的SW1990细胞凋亡的影响作用。结果: 以含CD基因的重组腺病毒转染的SW1990细胞,给予5-FC100 μmol·L^-1, 培养48 h,细胞出现典型的凋亡形态、DNA梯形改变及凋亡峰, 细胞在G₁,S 和G₂/M各期分别为64%、11%和7%,凋亡率达34.6%。结论:5-FC的上述诱导凋亡作用可能是胰腺癌CD基因疗法的重要机制。     

眼白化病1型的分子病理生理基础

Ocular albinism type 1 (OA1), the most form of the ocular albinism, is an X-linked disorder mainly characterized by a severe reduction of visual acuity, hypopigmentation of the retina, photophobia, strabismus and nystagmus. The OA1 gene is located on chromosome Xp22.32 and the coding sequence is divided into nine exons. The OA1 gene codes for a 404 amino acid protein thought to be a melanosomal transmembrane glycoprotein. The OA1 protein is similar to the G protein-coupled receptors, but it‘s exact function is not clear. There are many mutations and deletions of the OA1 gene have been found.     

大鼠胰腺癌模型及胰腺肌纤维母细胞计数

目的建立大鼠胰腺癌模型,研究胰腺导管癌和非癌胰腺组织中成肌纤维细胞(MF)的分布和计数。方法将二甲基苯并蒽(DMBA)直接置入大鼠胰腺被膜下实质内,并设立曲古霉素(TSA)干预组和空白对照组,3~5个月内处死,常规制作石蜡切片;Heidenhain染色,高倍镜下计数MF。结果1)实验组癌发生率为48·7%(18/37),17例为胰腺导管癌,1例为纤维肉瘤;TSA组癌发生率为33·3%(12/36),11例为胰腺导管癌,1例为纤维肉瘤;实验组胰腺癌最大径均值大于TSA组(P<0·05)。2)实验组和TSA组全部胰腺癌组织中的MF计数明显高于全部非癌胰腺组织(P<0·01);对照组无癌发生;非癌胰腺组织中正常细胞或导管上皮细胞轻度不典型增生组的MF计数明显低于中~重度不典型增生组(P<0·05)。对照组MF计数明显低于实验组和TSA组的非癌胰腺组织或胰腺癌组织(P<0·05或P<0·01),癌组织中存在呈明显异型性的MF样癌细胞。结论胰腺癌内的MF在胰腺癌的发生、发展中可能具有重要作用。     

胰腺癌基础研究进展

胰腺导管腺癌占所有胰腺肿瘤的85％～90％,通常所说的胰腺癌即指这一类型的恶性肿瘤。其全球发病率差别不大,男性约3．1～20．8／10万,女性约2～11／10万。其发病率虽不高,但由于高度恶性的生物学行为,其死亡率却非常高。鉴于胰腺癌如此高的致死率和目前有效治疗手段的匮乏,分析研究胰腺癌的发生发展机制及其内在的分子生物学特性,从而寻找有效的诊治手段成为多年来胰腺癌研究的焦点问题。总结近年在胰腺癌基础研究方面的进展,主要在三个方面取得了比较重大的成就：胰腺癌组织形态学进展模式的确立、胰腺癌发生发展的分子生物学基础的逐步明了和胰腺癌小鼠动物模型的成功制备。