抗人肝癌细胞膜单克隆抗体HCMP—1的制备及其生物学特性的初步鉴定

用超选择免疫法，诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠对正常人肝细胞抗原产生选择性低兔疫反应后，二步腹腔注射人肝癌细胞悬液，２－４周后用人肝癌细胞作强化免疫动物１次，取出脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞用ＰＥＧ法融合制备杂交瘤。采用细胞抗原ＥＬＩＳＡ法，同时测定培养上清对肝癌细胞及正常肝细胞的免疫反应，筛出一株能稳定分泌抗人肝癌细胞膜抗原的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，ＨＣＭＰ－１ＭＡｂ是一种ＩｇＧ２亚型的单抗，它与ＨＢｓ     

一株新的抗角蛋白单克隆抗体的研制及鉴定

从流产的人胎皮提纯的角蛋白作为抗原，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，通过杂交瘤技术获得一株稳定分泌抗角蛋白单抗（命名为ⅢＧ１）的杂交瘤，其染色体数为９０～９８条，用ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法检测ⅢＧ１单抗亚类的ＩｇＧ１。用人胚胎及正常成人多组织的免疫组化法显示皮肤基底细胞，肾近曲线小管和肠上皮呈阳性染色，同时检测部分肿瘤组织也呈阳性反应，表明ⅢＧ１针对抗原决定簇相对狭窄，可能是一株仅对低分子量角蛋白反应的单抗。对     

大肠粘液癌的组织化学及免疫组织化学的比较研究

目的：采用ＡＢ／ＰＡＳ,ＨＩＤ／ＡＢ／ＰＡＳ,以及多种抗人结肠粘液相关抗原的单克隆抗体（ＭＣＡｂｓ对９２例大肠粘液癌进行组织化学和免疫组织化学的比较研究。方法：以阿尔这碘酸雪夫（ＡＢ／ＰＡＳ）和高铁二胺－阿尔新蓝－过碘酸雪夫（ＨＩＤ／ＡＢ／ＰＡＳ）组化法及单克隆抗体（ＭＣＡｂｓ）、癌胚抗原（ＣＥＡ）在肠癌单克隆抗体ＳＣ３Ａ、ＳＣ６和ＳＣ１３Ａ与６２例粘液癌和３０例印戒细胞癌进行染色标记。结果：两咱     

克隆化人肝癌裸鼠移植瘤株的建立及其转移性状观察

应用单个细胞克隆化技术，从已建系的人肝癌细胞（ＳＭＭＣ－７７２１）中选育出３个亚系７７２１－ＣＡ，７７２１－ＣＢ，７７２１－ＣＳ（ＣＡ、ＣＢ、ＣＳ），并进行扩大培养，将上述各亚系肝癌细胞接种到裸鼠体内，成瘤率与自发转移率以ＣＳ组最高，ＣＢ组最低。主要的转移器官是肺。原发灶和转移灶肿瘤形态结构一致。ＣＳ细胞形态及其接种的裸鼠移植瘤形态结构和ＳＭＭＣ－７７２１母系细胞基本相似。用ＡＢＣ免疫酶标法检测ＨＢｓＡｇ、ｋｅｒａｔｉｎ、ＡＦＰ、Ｈ－ｒａｓ、Ｃ－ｅｒｂ－２、Ｐ５３癌基因蛋白等肿瘤标记物，ＣＳ组裸鼠移植瘤对Ｈ－ｒａｓ、Ｃ－ｅｒｂ－２癌基因蛋白呈阳性反应，对ＡＦＰ、Ｐ５３呈弱阳性反应，而ＣＢ组裸鼠移植瘤仅对Ｋｅｒａｔｉｎ、Ｃ－ｅｒｂ－２呈弱阳性反应，对其它肿瘤标记物均呈阴性反应。     

^188Re—HAb18F（ab‘）2肝癌放射免疫显像的研究

目的 探讨＾１８８Ｒｅ标记的肝癌单抗片段ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ’）２在荷人肝癌移植瘤裸鼠体内的放免显像和生物学分布。方法 采用２－硫基乙醇为还原剂的直接法标记肝癌单抗片段ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ’）２,Ｗｈａｔｍａｎ ３ｍｍ纸层析法测＾１８８ＲｅＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ’）２标记率,活细胞放射免疫结合法测标记物的免疫活性。放免显像实验时,于荷肝癌裸鼠尾静脉注射标记物１１．１ＭＢｑ,ＳＰＥＣＴ低通通用型标直器显像。     

双弹头组合单抗免疫导向治疗肝癌的实验研究

以肝癌单克隆抗体ＨＡｂ１８、ＨＡｂ２５为载体，以￣（１３１）Ｉ、阿霉素（ＡＤＭ）为“弹头”．应用间接交联方法及氯胺Ｔ法，制备出肝癌“双弹头组合单抗”免疫导向偶合物［￣（１３１）Ｉ－ＨＡｂ１８－ＡＤＭ］／［￣（１３１）Ｉ－ＨＡｂ２５－ＡＤＭ］，其标记率４９．８％，比放射性６．８８×１０４Ｂｑ／μｇ，免疫结合率４２．５％。细胞毒实验结果显示双弹头组合单抗偶合物杀伤力显著强于单弹头单抗体偶合物（Ｐ＜０．０５）。荷肝癌棵鼠导向治疗实验，１６８小时ＳＰＥＣＴ扫描清楚定位，瘤／肝比值３．７３５±０．１２０，治疗效果显著强于其它各组（Ｐ＜０．０５）。上述结果表明，“双弹头”集中了化疗与放疗优点，二者协同，明显提高了杀伤效应；组合单抗较好地消除了肿瘤异质性对导向治疗的影响。     

肝癌“双弹头”组合单抗导向治疗的实验研究

以肝癌单抗ＨＡｂ１８、ＨＡｂ２５为载体，以１３１Ⅰ、阿霉素（ＡＤＭ）为弹头，应用间接交联及氯胺Ｔ法，制备出肝癌＂双弹头＂组合单抗免疫导向结合物１３１Ⅰ－ＨＡｂ１８－ＡＤＭ／１３１Ⅰ－ＨＡｂ２５－ＡＤＭ，其标记率４９.８％，比放射性６.８８×１０４Ｂｑ／ｕｇ，免疫结合率４２.５％。细胞毒实验结果显示“双单头”组合单抗结合物杀伤力显著强于单弹头单抗体结合物（Ｐ＜０.０５）。荷瘤鼠导向治疗实验，１６８小时ＳＰＥＣＴ扫描定位清晰，瘤／肝比值３.７３５±０.１２０，治疗效果显著强于其它各组（Ｐ＜０.０５）。上述结果表明，“双弹头”集中了化疗与放疗的优点，二者协同，提高了杀伤效应；组合单抗较好消除了肿瘤异质性对导向治疗的影响。     

硫代硫酸钠在体内、外辅佐抗癌药药效学初步研究

目的 研究硫代硫酸钠（ＳＴＳ）是否能在体内,外作为化疗药的辅药,方法：应用ＭＴＴ法研究ＳＴＳ分别与ＡＤＭ,ＭＭＣ和ＣＤＤＰ等６种抗癌单药合用时对ＢＥＬ－７４０２和ＭＧｃ８０－３细胞的细胞毒性作用,应用小鼠肝癌腹水瘤（Ｈ２２）模型判断ＳＴＳ与ＡＤＭ等３种药合用时的抗癌疗效,２０例人原发性肝癌病人肝动脉插管化疗（ＡＤＭ,ＭＭＣ和ＣＤＤＰ）前３０ｍｉｎ静脉推注ＳＴＳ（１．２５～２．５ｇ／ｍ＾２）考察ＳＴ     

肝癌病人血清学检测的综合探讨

检测４２例肝癌病人血清中ＡＦＰ、γ－ＧＴ、ＨＢＳＡｇ及抗－ＨＢＣ结果发现：①γ－ＧＴ在ＡＦＰ低浓度时诊断价值较大（ＡＦＰ低浓度时γ—ＧＴ的阳性率为１９％，而γ－ＧＴ低浓度时ＡＦＰ的阳性率仅为２％）。②ＨＢＳＡｇ阳性的肝癌病人其血清ＨＢＳＡｇ的效价多维持在低水平；③同一标本的ＡＦＰ与γ－ＧＴ无相关性（Ｐ＞０．０５）；④几例转移性肝癌与原发性肝癌出现了ＨＢＳＡｇ滴度与γ－ＧＴ浓度动态反常现象；⑤抗－ＨＢＣ的出现将在肝癌血清学诊断上有辅助作用（阳性率达６７％）。     

半乳糖基修饰的反义硫代寡核苷酸对肝癌多药耐药细胞株MDR_1基因过度表达的抑制作用

设计合成三种互补ＭＤＲ１ｍＲＮＡ的反义硫代寡核苷酸（ＡＳＯＤＮ），分别互补ＭＤＲ１ｍＲＮＡ序列起始区、含ＡＵＧ起始密码子区及针对Ｌｏｏｐ形成位点区的序列，作用于阿霉素（ＤＯＸ）诱导的肝癌多药耐药细胞株ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＸ。经流式细胞分析及ＲＴ－ＰＣＲ的方法检测，发现三种ＡＳＯＤＮ均能不同程度地降低ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＸ细胞膜表面Ｐ－ＧＰ含量；同时ＭＤＲ１ｍＲＮＡ的表达也有轻度降低，其中尤以互补ＭＤＲ１ｍＲ－ＮＡＬｏｏｐ形成位点的ＡＳＯＤＮ抑制作用最强。以导向配体Ｇａｌ１０－ＰＬＬ修饰此ＡＳＯＤＮ后，作用于ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＸ细胞，发现与相同剂量未修饰ＡＳＯＤＮ比较，Ｐ－ＧＰ含量由７６．８％降至１９．８％；对ＡＤＭ的ＩＣ５０由１．２８μｇ／ｍｌ降至０．４２μｇ／ｍｌ。实验说明，半乳糖基修饰的互补ＭＤＲ１ｍＲＮＡＬｏｏｐ形成位点的ＡＳＯＤＮ能够明显降低肝癌多药耐药细胞膜表面Ｐ－ＧＰ的含量，并较大程度地逆转多药耐药细胞ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＸ对化疗药物的耐受性。