环胞霉素A诱导急性肾损伤大鼠肾脏热休克蛋白70的表达

目的 探讨环胞霉素A(CsA)诱导的急性肾损伤大鼠模型中肾脏热休克蛋白70(HSP70)的分布及表达规律.方法 150只大鼠随机分为对照组A和实验组B[CsA 2mg/(kg·d)注射],实验组C[CsA 5mg/(kg·d)注射],将对照组和实验组分别于注射后1、3、6、12、24h各取10只大鼠剖腹取肾,光镜、电镜下观察肾脏的病理变化,通过免疫组化法观察HSP70的表达情况.结果 HSP70在肾皮质肾小球周围近曲小管上皮细胞胞浆内分布增加,其表达量在注射后1h已经升高,3h达到高峰,24h仍高于正常对照组.同一时相点C组较B组HSP70的表达量差异显著(P＜0.01).结论 一次小剂量注射CsA即可引起急性肾损伤,在损伤的早期HSP70的表达亦显著增加,提示肾毒性药物早期即可引起肾小管上皮细胞的应激反应,可能与细胞的自我保护机制启动有关.     

氯胺酮对脓毒症大鼠肾脏保护作用的研究

目的探讨氯胺酮对脓毒症大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法选健康雄性Wistar大鼠54只,随机分为三组：假手术组（SHAM）组、盲肠结扎加穿孔组（CLP）组及氯胺酮组（KT）组。SHAM组开腹后不做任何处理,其余各组行盲肠结扎穿孔术（CLP）。KT组于CLP前20min腹腔给药40mg/kg。各组在3h、6h和12h分别经心脏采血,检测尿素氮和肌酐的含量,并取肾脏行HE染色观察其病理组织学变化,用免疫组化方法检测热休克蛋白70（HSP70）的表达。结果与SHAM组比较,CLP组大鼠血清BUN含量在术后6h和12h显著升高（P〈0.01）,血清Cr在术后12h显著升高（P〈0.01）;与CLP组比较,KT组大鼠血清BUN较CLP组含量在6、12h时相点明显降低（P〈0.05）。血清Cr在12h明显降低（P〈0.05）。三组肾组织中HSP70均有表达,CLP组及KT组均明显高于SHAM组（P〈0.01）,而KT组明显高于CLP组（P〈0.05）。结论氯胺酮能抑制脓毒症大鼠血清BUN和Cr的增高,减轻肾组织损害,对脓毒症大鼠肾脏具有一定的保护,此作用可能与诱导HSP70表达增强有关。     

HSP70mRNA对大鼠肾脏缺血再灌注损伤保护性的研究

目的 探讨热休克蛋白70(HSP70)在缺血预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤保护中的作用。 方法 根据病理组织学变化以及原位杂交法检测各组中不同灌注时间的热休克蛋白70mRNA(HSP70mRNA)的表达。 结果病理组织学肾小管评分IPC组均低于IR组(P<0.05),而IPC组和CON组之间差异无显著性(P>0.05);HSP70mRNA的表达IPC组明显高于IR组(P<0.01),并且在再灌注2h和6h时,该三者在IPC组中的表达明显高于CON组(P<0.01)。 结论 缺血预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤有保护作用,其保护机制与HSP70的诱导合成增多有关。     

热休克蛋白27在缺血后处理肾组织中的表达及意义

目的 观察热休克蛋白27（HSP27）在缺血后处理（IPO）肾组织中的表达及分布情况,探讨其在肾缺血后处理中的作用.方法 结扎右侧肾蒂,夹闭左侧肾蒂60 min、再灌注24 h制备肾缺血/再灌注损伤模型.雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组（S组）、缺血/再灌注组（I/R组）、缺血后处理组（IPO组）,每组8只.再灌注24 h后处死大鼠,腹主动脉取血并切取左肾.测定血清肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）浓度;光镜下观察肾组织病理学改变;免疫组织化学方法检测肾组织中HSP27的表达;TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡指数（AI）.结果 与S组比较,I/R组Cr和BUN浓度显著升高,组织损伤明显,肾组织中HSP27表达增多,肾小管上皮细胞凋亡指数较高（P〈0.05）;与I/R组比较,IPO组Cr和BUN浓度显著降低,组织损伤较轻,HSP27表达进一步增强,肾小管上皮细胞凋亡指数较低（P〈0.05）.结论 肾缺血后处理能上调肾组织中HSP27的表达,抑制肾小管上皮细胞凋亡,继而减轻肾缺血/再灌注损伤.     

雷公藤诱导急性肾损伤大鼠肾脏热休克蛋白70的表达

目的:探讨雷公藤诱导的急性肾损伤大鼠模型中肾脏热休克蛋白70(HSP70)的分布及表达规律。方法:150只大鼠随机分为对照组(A)和低剂量组B(雷公藤20mg/(kg·d))以及高剂量组C(雷公藤40mg/(kg·d))一次性灌胃,将对照组和实验组分别于给药后6、12、24、36、48小时各取10只大鼠剖腹取肾,光镜、电镜下观察肾脏的病理变化,通过免疫组化法观察HSP70的表达情况。结果:HSP70在肾皮质肾小球周围近曲小管上皮细胞胞浆内分布增加,其表达量在给药后6h已经升高,12h达到高峰,48h仍高于正常对照组。同一时相点高剂量组较低剂量组HSP70的表达量高(P<0.01)。结论:中药雷公藤一次性大剂量给药即可引起急性肾损伤,在损伤的早期HSP70的表达亦显著增加,提示肾毒性药物早期即可引起肾小管上皮细胞的应激反应,可能与细胞的自我保护机制启动有关。     

热休克蛋白HSP90α和miRNA-144在小鼠肾缺血再灌注损伤后的表达变化

目的研究小鼠肾缺血再灌注后不同时间点热休克蛋白HSP90α和miRNA-144的表达变化。方法用动脉夹夹闭小鼠双侧肾蒂45min建立肾缺血再灌注损伤模型,测定再灌注4、8、12、24、48h组及假手术组血清中肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平,光镜下观察肾组织形态学改变,采用定量RT-PCR的方法检测肾缺血再灌注各时间点HSP90αmRNA和miRNA-144的表达变化,Western blot法检测HSP90α蛋白的表达变化。结果 HE染色显示假手术组小鼠的肾组织结构及肾功能正常,再灌注组可见肾小管管腔扩张,肾小管上皮细胞有不同程度的肿胀、坏死、刷状缘消失,管腔内有管型,肾间质充血水肿,组织损伤以24h最重;肾功能指标显示再灌注组与假手术组相比,Scr、BUN水平随再灌注时间延长而升高,24h达峰值(P<0.01)。定量RTPCR和Western blot法检测结果显示,再灌注4h后HSP90α的mRNA和蛋白表达开始逐渐增强,mRNA在12h达高峰,蛋白水平在24h达高峰(P<0.01);miRNA-144在再灌注后表达降低(P<0.01)。结论 HSP90α在缺血再灌注损伤的肾组织中表达增高,提示其可能参与肾缺血再灌注损伤的保护作用;miRNA-144可能为调控HSP90α功能的潜在miRNA。     

他克莫司对大鼠肾缺血再灌注保护作用的研究

目的探讨他克莫司对大鼠肾缺血再灌注的保护作用。方法选用Wistar雄性大鼠60只,采用抽签法随机分为3组(每组20只):假手术组、对照组、实验组。到达设定的不同灌注时间点取血和肾脏标本,测定血清肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α);检测肾组织B细胞淋巴瘤(B cell lymphoma,Bcl-2)及病理情况。结果在缺血45 min后再灌注2、6和24 h时,实验组的Cr、BUN水平显著低于对照组(P<0.05),而Bcl-2免疫反应强度显著高于对照组(P<0.05)。在再灌注的各时间点,实验组的血清TNF-α含量水平均显著低于对照组(P<0.05)。HE染色光镜下对照组的肾小管及肾小管上皮细胞病变程度重;实验组的肾小管及肾小管上皮细胞病变程度明显减轻;假手术组肾小管及肾小管上皮细胞未见明显改变。结论他克莫司对大鼠肾缺血再灌注的保护作用可能是通过降低血清TNF-α表达水平和增加肾脏Bcl-2蛋白的表达,从而改善大鼠肾缺血再灌注损伤。     

艾灸对脾虚胃溃疡模型大鼠MT及HSP 70影响

目的:观察艾灸对脾虚胃溃疡模型大鼠血清金属硫蛋白(MT),胃黏膜组织热休克蛋白70(HSP 70)的影响。方法:将50只健康SD大鼠随机分为空白组、模型组、四君子汤组、艾灸非穴位组和艾灸组,采用大黄法建立大鼠脾虚模型,在此基础上运用无水乙醇灌胃制备脾虚胃溃疡大鼠模型,按Guth法计算胃黏膜损伤指数(UI),光镜下观察大鼠胃黏膜组织学改变,酶联免疫附法(ELISA)检测血清中MT的含量,免疫组化法测胃黏膜细胞HSP 70的表达。结果:艾灸足三里、中脘等穴能使胃黏膜损伤大鼠UI明显降低(P<0.05或P<0.01),血清MT含量明显升高(P<0.01),胃黏膜组织HSP 70的表达增多(P<0.05或P<0.01)。结论:艾灸能促进脾虚胃溃疡大鼠胃黏膜损伤的修复,这一作用可能是通过促进内源性保护蛋白MT的含量及HSP 70的表达而实现的。     

促红细胞生成素后处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的  探讨促红细胞生成素（EPO）后处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）的保护作用。方法  将18只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、缺血再灌注损伤组（IRI组）及EPO后处理组（EPO组）。采用全自动生化分析仪检测血清尿素氮（BUN）及肌酐（Cr）含量;用HE染色观察病理组织学变化;用免疫组织化学法检测肾组织中HSP70的表达。结果  IRI组血清BUN及Cr含量较Sham组明显升高,EPO后处理组血清BUN及Cr含量介于Sham组和IRI组之间;HE染色检测发现IRI组肾小管上皮细胞坏死明显;肾小管管腔扩张,EPO后处理组较IRI组肾小管上皮坏死明显减轻;免疫组织化学检测发现HSP70在EPO后处理组表达最强,Sham组表达明显降低,IRI组表达则介于前两者之间。结论  EPO后处理能增强缺血再灌注损伤过程中HSP-70的表达量,因而有助于减轻肾脏的缺血再灌注损伤。

     

L-精氨酸对大鼠肾缺血再灌注损伤HSP70表达的影响

目的：探讨左旋精氨酸（L-arg）对大鼠肾缺血再灌注损伤（RIRI）HSP70表达的影响。方法：健康雄性SD大鼠48只,随机分为6组：假手术（Sham）6 h、24 h组;缺血再灌模型（IR）6 h2、4 h组和L-精氨酸（L-arg）6 h2、4 h组。IR组和L-arg组采用夹闭双侧肾动、静脉45 min后松夹再灌的方法制备RIRI模型,L-arg组于夹闭前和再灌前15 min分别尾静脉注射L-arg 0.2 mL（100 mg/kg）,于再灌后6 h和24 h测定血清肌酐（Scr）、一氧化氮（NO）及尿NAG酶（UNAG）含量,观察肾组织形态学改变和肾皮质HSP70表达。结果：缺血再灌注后6 h和24 h,大鼠肾功能和肾小管上皮细胞明显受损,Scr和UNAG含量均明显高于假手术组（P〈0.01）,血清NO及肾皮质细胞HSP70表达明显增加。尾静脉注射L-arg可明显改善RIRI大鼠肾功能,减轻肾损伤,并明显增加血清NO及肾皮质细胞HSP70表达（P〈0.05）。结论：L-arg可通过增加体内NO水平,提高肾小管上皮细胞HSP70表达,对大鼠RIRI起到一定的保护作用。     

依达拉奉对大鼠肾脏缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的研究依达拉奉对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及探讨其相关机制,为预防肾脏缺血再灌注损伤用药提供实验依据。方法雄性SD大鼠36只,随机分为A组（对照组）、B组（缺血再灌注组）、C组（依达拉奉组）。测定SOD活性和MDA含量,观察肾组织Bcl-2、Bax的表达;测定血肌酐和尿素氮浓度。结果 （1）与A组比较,B组、C组SOD活性明显下降,MDA含量明显升高。与B组比较,C组SOD活性明显升高,MDA含量明显降低。（2）与A组比较,B组、C组Bax表达明显增加,Bcl-2表达增加,Bcl-2/Bax比值降低。与B组比较,C组Bcl-2表达增加,Bax表达减弱,Bcl-2/Bax比值增高。（3）与A组比较,B组和C组Cr、BUN浓度升高,与B组比较,C组Cr、BUN浓度降低。结论 （1）依达拉奉能够改善大鼠肾脏缺血再灌注后的肾功能,减轻损伤;（2）其机制可能是通过调控Bcl-2/Bax介导的细胞凋亡而实现。     

SD大鼠自体原位肝移植模型中的急性肾损伤

 【目的】 建立SD大鼠自体原位肝移植模型,观察自体模拟肝移植后大鼠肾功能与病理学变化特点。【方法】 SD大鼠40只,随机均分为对照组（C组,n=8）,再灌注4h模型组（M1组,n=8）,再灌注8h模型组（M2组,n=8）,再灌注16h模型组（M3组,n=8）,再灌注24h模型组（M4组,n=8）共五组。对照组在麻醉后只进行开腹和血管的分离,不进行肝脏的阻断和灌注;模型组则进行自体肝移植手术,分别在肝脏再灌注后4、8、16、24h时取左肾组织和血标本,观察其血肌酐、尿素氮和病理形态学变化。【结果】与C组相比,模型组大鼠肾脏在肝脏再灌注后出现明显的病理学损伤,以再灌注8h时最为显著;血清肌酐和尿素氮明显升高,在再灌注后16h达到高峰,达峰后损伤逐渐减轻。【结论】 SD大鼠经历自体原位肝移植后,肾脏出现病理损伤和功能损害。     

拘束冷应激对大鼠肾脏热休克蛋白表达和血清皮质醇含量的动态影响

目的：研究拘束冷应激对大鼠肾脏组织热休克蛋白（heat shock protein 70,HSP70）表达和血清中皮质醇（Cortisol,CORT）含量的动态影响及可能的机制。方法：选取50日龄清洁级大鼠77只,随机分为7组,即0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0 h。采用拘束冷应激法,应激相应时间后,用免疫组织化学方法观察大鼠肾脏组织HSP70的表达,并检测血清中CORT含量。结果：血清中的CORT浓度在1.5 h呈现最高值,其余各时点变化不明显。光镜下可见HSP70在肾小球毛细血管内皮细胞的胞核及肾小管上皮细胞的胞核和胞浆中均有表达。肾脏中HSP70的表达首先呈增加的趋势,1.5～2.5 h HSP70持续高表达（P〈0.01）,之后下降（P〈0.05）。结论：适当强度的拘束冷应激能诱导肾脏组织中HSP70的合成,并且随着时间的延长而增加,但过度的拘束冷应激则可能降低或阻断肾脏HSP70的表达。     

替米沙坦对糖尿病大鼠肾脏组织中TSP-1的影响

目的 探讨替米沙坦对糖尿病大鼠肾组织中血小板反应蛋白-1(TSP-1)表达的影响.方法 采用一次性腹腔注射链脲佐菌素60 mg/kg建造大鼠糖尿病模型.将实验动物随机分为正常对照组(A组)、糖尿病未干预组(B组)和糖尿病替米沙坦干预组(C组)3组.C组给予替米沙坦10/mg·kg-1·d-1灌胃,A组和B组给予等剂量生理盐水灌胃作对照.12周后,测定各组大鼠血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、24 h尿蛋白及肾脏肥大指数等肾脏功能指标;RT-PCR法和免疫组化法检测肾脏TSP-1 mRNA及其蛋白的表达水平.结果 与A组相比,B组和C组24 h尿蛋白和肾脏肥大指数显著增高(P＜0.05或0.01);与B组相比,C组24 h尿蛋白和肾脏肥大指数显著降低(P＜0.05).与A组相比,B组和C组TSP -1表达显著增高(P＜0.01);与B组相比,C组TSP-1表达显著降低(P＜0.01);TSP 1蛋白表达水平与24h尿蛋白、肾脏肥大指数均呈显著正相关(P＜0.01).结论 ARB类药物对糖尿病大鼠具有肾脏保护作用,其机制可能部分与降低了肾组织内TSP-1的表达有关.     

不同缺血预处理方案对大鼠肾脏缺血再灌注损伤组织HSP70表达的研究

目的探讨单、多循环两种缺血预处理方案对大鼠肾脏急性缺血再灌注损伤的保护作用及对HSP70表达的影响。方法60只雄性SD大鼠切除右肾、分离出左肾动脉后随机均分为四组。1）缺血再灌注（I/R）组;2）单循环缺血预处理（SCP）组;3）多循环缺血预处理（MCP）组;4）假手术（Sham）组。24 h取材行生化、常规病理、免疫组化检查及肾小管损伤评分。结果假手术组未见明显改变;肌酐（Scr）水平、肾小管损伤评分单循环缺血预处理组多循环缺血预处理组低于缺血再灌注组,差异显著;多循环缺血预处理组低于单循环缺血预处理组,差异显著（P〈0.01）。HSP70表达水平多循环缺血预处理组最高。结论缺血预处理可从功能和组织学上减轻肾脏的急性缺血再灌注损伤,多循环预处理方案诱导HSP70表达及保护作用在24 h内强于单循环的方案。     

原位逆行灌注兔肾IRI模型的建立及术后肾功能与组织结构的研究

目的观察原位逆行灌注法对兔子肾脏缺血再灌注损伤的保护,为临床提供理论依据。方法 20只新西兰雄性大白兔,随机分为二组,顺行灌注组与逆行灌注组,每组10只,在建立缺血再灌注损伤（IRI）模型后,二组分别于术前、术后第1、2、3、5、7天采静脉血,分别检测血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）,第7天取标本做常规病理及电镜检查。最后统一测定每组兔子第1天的IL-1浓度值。结果顺行灌注组SCr、BUN值升高的快,与逆行灌注组相比有显著差异（P〈0.01）。肾脏组织病理与电镜肾小管超微结构的损伤程度与SCr、BUN呈正相关。顺行灌注组1 d时IL-1浓度高,和逆行灌注组相比差异有统计学意义（P〈0.01）。结论与顺行灌注组相比逆行灌注组对兔子肾IRI更具有保护作用。逆行灌注法可能为肾移植带来更为安全、便捷的手段。     

缺血预处理对鼠神经细胞HSP70、GFAP表达的影响

目的通过缺血预处理后大鼠局灶脑缺血模型观察神经细胞HSP70、GFAP变化。方法成年健康SD大鼠72只,随机分为预处理组、缺血组、假手术组,用大脑中动脉栓塞法制作脑缺血动物模型,每组在造模成功后24h、48 h、72 h取出大鼠脑组织。免疫组化（Immunohistochemistry,IHC）方法观察各个时间观察点HSP70蛋白和GFAP蛋白的表达。结果免疫组化结果显示,HSP70蛋白和GFAP蛋白大脑皮质等部位的细胞上呈阳性表达,其表达程度随时间延长存在明显差异。结论脑缺血预处理可上调大鼠神经细胞HSP70和GFAP的表达。     

灯盏细辛对大鼠肾冷缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨中药灯盏细辛对大鼠肾冷缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用及机制。方法:采用随机数字表将36只SD大鼠分为假手术组、模型对照组和实验组3组(n=12);实验组术前15min尾静脉注射灯盏细辛注射液1.2mL/100g,其他2组给予生理盐水。假手术组切除右肾并游离左肾蒂;模型对照组和实验组制作冷IRI模型。3组大鼠均在术后24h再次手术切除左肾,采用透射电镜观察超微结构的变化,并制作肾脏组织匀浆,检测肾组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)含量。手术前后取血标本检测血浆中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)以评估肾脏功能。结果:①假手术组肾小球及肾小管及细胞器结构正常;模型对照组肾小管细胞呈现典型IRI,线粒体肿胀明显,部分线粒体膜撕裂,微绒毛脱落,胞质内空泡变性,部分细胞核可见凋亡迹象;实验组病变较模型对照组明显减轻。②3组肾组织匀浆SOD活及MDA含量差异有统计学意义(F分别为44.534和145.535,P<0.001)。③IRI后模型对照组、实验组血浆BUN、Cr均高于术前,且模型对照组高于实验组(BUN:F组间=88.647,F时间=188.620,F交互=88.331,P<0.001;Cr:F组间=200.470,F时间=555.184,F交互=375.640,P<0.001)。结论:灯盏细辛注射液对大鼠肾脏冷IRI具有保护作用。