麻风病

20110440Toll样受体2,4在麻风患者外周血单一核细胞中的表达/罗丽(遵义医学院附院皮肤科),刘源,张信江…∥中华皮肤科杂志.-2010,43(9).-623~625用SYBR Green荧光定量RT-PCR技术检测麻风现症患者与已痊愈患者各30例外周血单一核细胞中Toll样受体2,4mRNA的表达水平,并以正常人作对照。结果 :Toll样受体2mRNA在麻风患者外周血单一核细胞中的     

TLR4和TLR9 mRNA在麻风患者外周血单核细胞中的表达

目的观察TLR4和TLR9mRNA在麻风患者外周血单核细胞中的表达情况。方法运用SYBRGreen荧光定量RT-PCR技术检测麻风现症患者(30例)与已痊愈患者(30例)外周血单核细胞中TLR4和TLR9mRNA的表达水平,并与正常人作比较。结果 TLR9mRNA在麻风患者外周血单核细胞中的表达明显高于已痊愈组和正常对照组(P均<0.01),但痊愈组和正常对照组的差异不显著;且TLR4mRNA在麻风现症患者外周血单核细胞中的表达与痊愈组和正常对照组的差异也无统计学意义(P均>0.05)。结论 TLR9mRNA在麻风患者外周血单核细胞的表达明显升高,提示TLR9mRNA可能是麻风杆菌的特异识别受体,TLR9可能参与了机体感染麻风分枝杆菌后的免疫反应。TLR4是否参与了机体感染麻风分枝杆菌后的免疫反应尚有待于进一步论证。     

慢性特发性荨麻疹患者外周血单一核细胞Toll样受体2和5 mRNA的表达

目的检测慢性特发性荨麻疹(CIU)患者外周血单一核细胞Toll样受体2和5 mRNA的表达.方法 收集45例CIU患者,38名正常人作为对照,采集PBMC提取RNA,应用逆转录聚合酶链扩增法检测Toll样受体2和5 mRNA表达水平.结果 CIU患者外周血单一核细胞Toll样受体2 mRNA表达水平低于健康对照组,分别为0.302±0.243和0.81±0.364(P＜0.01).Toll样受体5 mRNA表达水平低于对照组,差异有统计学意义,分别为0.558±0.342和0.722±0.350(P=0.035).结论 CIU患者外周血单一核细胞Toll样受体2和5 mRNA表达显著降低,提示CIU患者可能存在固有免疫异常.     

Toll样受体2,4mRNA在带状疱疹患者外周血单个核细胞中的表达

目的探讨带状疱疹患者外周血单个核细胞中Toll样受体(TLR)2,4 mRNA的表达情况及其与带状疱疹的发病关系。方法实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测30例带状疱疹患者和20例正常人的外周血单一核细胞中TLR2,TLR4 mRNA的表达水平。结果带状疱疹患者与正常人对照,其外周血单一核细胞中TLR2,TLR4 mRNA的表达水平均明显升高(P0.05)。结论 TLR2,TLR4 mRNA可能参与了水痘-带状疱疹病毒的识别及抗病毒免疫。     

寻常型银屑病患者外周血单个核细胞TLR4和NF - кBp65的表达

检测寻常型银屑病患者外周血单个核细胞Toll样受体4(TLR4)和核转录因子кBp65(NF -кBp65)的表达.采用直接免疫荧光法定位并分别用流式细胞术及免疫细胞化学法检测22例寻常型银屑病外周血单个核细胞TLR4、NF- кBp65的表达,15名正常人做正常对照.结果:寻常型银屑病外周血单个核细胞TLR4的表达高于正常对照组(P＜0.05),而进行期寻常型银屑病外周血单个核细胞TLR4表达明显高于稳定期寻常型银屑病患者的表达(P＜0.05).寻常型银屑病组和正常对照组,进行期寻常型银屑病组和稳定期寻常型银屑病组活化NF-кBp65的表达,各组之间差异无显著性(p＞0.05).     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞Toll样受体4及2mRNA表达的研究

目的 研究系统性红斑狼疮(SLE)患者与正常人外周血单一核细胞Toll样受体4(TLR4)mRNA、TLR2mRNA的表达情况。方法 运用Taqman实时定量PCR方法检测活动期SLE患者28例、稳定期SLE患者13例外周血单一核细胞TLR4、TLR2的mRNA表达水平,并与正常人作对照。结果 活动期SLE患者外周血单一核细胞TLR4mRNA较正常人和稳定期SLE患者表达水平显著升高(P<0.01);其中复发的、经糖皮质激素治疗的活动期SLE患者较未经治疗的初发患者TLR4mRNA升高更明显(P<0.05)。SLE活动期和稳定期患者TLR2mRNA较正常人对照显著降低(P<0.01)。结论 活动期SLE患者TLR4mRNA表达水平升高,尤其是使用过糖皮质激素的患者TLR4升高更为显著,其原因可能与感染作为诱发SLE活动因素之一有关。     

TLR7及TLR9在SLE患者外周血单个核细胞内的表达

目的:检测Toll样受体7(TLR7)mRNA及TLR9 mRNA在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞内的表达.方法:运用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)半定量方法检测40例SLE患者(活动期25例,稳定期15例)和30名健康对照者外周血单个核细胞TLR7和TLR9 mRNA表达水平.结果:活动期SLE患者外周血单个核细胞TLR7 mRNA表达显著高于稳定期患者和正常人(Ps<0.01);活动期TLR9 mRNA表达与稳定期无统计学差异(P>0.05),但高于正常人(P<0.01).两者表达量与SLEDAI积分均呈正相关.结论:TLR7及TLR9在SLE的发病中可能起一定作用.     

尖锐湿疣Toll样受体TLR3与TLR7水平的检测

目的: 检测Toll样受体TLR3和TLR7在尖锐湿疣(CA)中的水平.方法: 应用实时定量PCR(real time-PCR)法检测了30例CA患者皮损和30例健康人外周血单个核细胞中TLR3和TLR7 mRNA的表达,用流式细胞仪分析了外周血白细胞中TLR3和TLR7的表达.结果: CA患者皮损与外周血单个核细胞中TLR3和TLR7 mRNA表达水平均显著高于健康对照组(均P<0.001),外周血白细胞中TLR3、TLR7的表达率分别为(23.86±2.56)%与(55.15±4.18)%,显著高于健康对照组(均P<0.001).结论: Toll样受体TLR3、TLR7可能参与了机体对人乳头瘤病毒的识别,在CA的发病机制中起重要作用.     

尖锐湿疣患者外周血单一核细胞中干扰素调节因子7和Toll样受体9 mRNA的表达

目的 探讨干扰素调节因子7、Toll样受体9在尖锐湿疣发病中的作用及临床意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应检测25例尖锐湿疣患者外周血单一核细胞中干扰素调节因子7、Toll样受体9 mRNA的水平,20例正常人作对照。结果 尖锐湿疣患者外周血单一核细胞中干扰素调节因子7与Toll样受体9 mRNA表达水平均明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P值均 < 0.01）。结论 尖锐湿疣患者外周血中干扰素调节因子7、Toll样受体9表达升高。     

白癜风患者外周血单一核细胞Toll样受体7、9 mRNA表达的初步研究

目的 探讨Toll样受体7、9 （TLR7、TLR9）mRNA在白癜风患者外周血单一核细胞（PBMC）中的表达及其意义。方法 应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测50例白癜风患者及25例正常人对照PBMC中TLR7、TLR9 mRNA的表达。采用SPSS11.5软件进行统计学分析,两样本均数比较采用t检验。结果 白癜风患者PBMC中TLR7 mRNA（目的基因绝对定量校正拷贝数为0.85 ± 1.90）、TLR9 mRNA（0.94 ± 2.25）表达均明显高于对照组（分别为0.44 ± 1.18和0.11 ± 0.31,P ＜ 0.05和 ＜ 0.01）;稳定期与进展期、局限型与泛发型白癜风患者TLR7、TLR9 mRNA表达差异均无统计学意义（P值均 ＞ 0.05）。结论 白癜风患者PBMC中TLR7、TLR9 mRNA的表达均上调,TLR7、TLR9的异常表达可能参与白癜风的发病机制。     

寻常性银屑病患者外周血单一核细胞IFN-γ受体和TNF-α受体mRNA表达的研究

目的 探讨寻常性银屑病患者外周血单一核细胞IFN-γ受体mRNA和TNF-α仅受体mRNA的表达及其在银屑病发病机制中的作用.方法 采集50例寻常性银屑病患者外周静脉血,分离单一核细胞后,以RT-PCR法检测其IFN-γ受体mRNA和TNF-α受体mRNA的表达,PASI评分法评估银屑病的严重程度.以24例正常人作对照.结果 50例银屑病患者外周血单一核细胞IFN-γ受体mRNA的表达均值为1.11±0.55,其中37例进行期患者为1.13±0.57,13例静止期患者为1.03±0.52,正常人对照组为0.72±0.17,银屑病患者显著高于正常人对照组(P=0.0034),进行期显著高于正常人对照组(P=0.008),而静止期与正常人对照组差异无统计学意义.正常人对照组和银屑病患者外周血单一核细胞TNF-α受体mRNA的表达水平差异无统计学意义.银屑病患者外周血单一核细胞IFN-γ受体mRNA表达水平与TNF-α受体mRNA表达水平及PASI值均无相关性.结论 IFN-γ受体mRNA在寻常性银屑病患者外周血单一核细胞中异常高表达,但与疾病的活动性无关.     

Toll样受体2mRNA在梅毒血清固定患者外周血单核细胞中的表达

目的研究梅毒血清固定患者外周血单核细胞(PBMCs)中Toll样受体2(TLR2)mRNA的表达情况,并探讨其与梅毒血清固定的发病关系。方法采用实时定量PCR方法检测TLR2 mRNA在观察组中40例梅毒血清固定患者PBMCs的表达水平,并以30例驱梅治疗后TRUST阴转者和30例正常人分别作为对照组。结果观察组PBMCs中TLR2 mRNA的表达水平(1.54±0.51)明显低于两对照组(2.49±0.86)和(2.45±0.74),差异有统计学意义(P均<0.05);两对照组PBMCs中TLR2mRNA的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论梅毒血清固定患者PBMCs中TLR2mRNA的表达水平较驱梅治疗阴转者及正常人低,表明天然免疫异常可能导致梅毒血清固定的发生。     

Toll样受体7、9及其调控分子MyD88、NF-κB在白癜风患者外周血单个核细胞中的表达

目的：探讨Toll样受体7、9（TLR7、TLR9）及调控分子MyD88、NF?κB在白癜风患者以及健康个体外周血单个核细胞（PBMC）中的表达差异及意义。方法用流式细胞仪检测36例白癜风患者及22例健康对照PBMC中TLR7、TLR9的表达,并用反转录聚合酶链反应（RT?PCR）检测上述样本中MyD88、NF?κB mRNA的表达。结果白癜风患者TLR7的表达高于健康对照组,但差异无统计学意义（t=1.477,P=0.145）;TLR9的表达低于健康对照组,差异无统计学意义（t=-1.761, P=0.084）。白癜风患者外周血PBMC中MyD88 mRNA的表达稍高于对照组,但差异无统计学意义（t=0.058,P=0.954）;NF?κB mRNA的表达明显高于对照组,差异有统计学意义（t=2.814, P=0.008）。结论 TLR7、TLR9的调控通路中的关键信号分子NF?κB表达升高,提示NF?κB可能参与白癜风的发病机制。     

金黄色葡萄球菌肽聚糖对HaCaT细胞Toll样受体2和4的影响

目的观察金黄色葡萄球菌胞壁成分肽聚糖对HaCaT细胞Toll样受体(TLR)2和TLR4表达的影响。方法用不同浓度的肽聚糖(10μg/mL、30μg/mL、100μg/mL)处理培养的HaCaT细胞,用RT-PCR检测TLR2 mRNA和TLR4 mRNA含量变化,用流式细胞术检测HaCaT细胞表面TLR2和TLR4蛋白的表达。结果30μg/mL肽聚糖处理组HaCaT细胞的TLR2 mRNA和TLR4 mRNA相对表达水平分别为0.826±0.06和0.801±0.04,明显高于未处理的对照组的TLR2 mRNA(0.433±0.04,P<0.05)和TLR4 mRNA(0.351±0.05,P<0.01)。各浓度的肽聚糖处理HaCaT细胞24h,及100μg/mL浓度的肽聚糖处理HaCaT细胞12h、24h、36h和48h时,及100μg/mL肽聚糖处理24h后,HaCaT细胞表面TLR2和TLR4蛋白表达量均最高。结论肽聚糖可以上调HaCaT细胞TLR2和TLR4的mRNA和蛋白的表达。     

早期梅毒患者外周血单一核细胞Toll样受体2的表达

目的：观察早期梅毒患者外周血中TOLL样受体2表达水平的变化，探讨TLR2在早期梅毒免疫学发病机制中的作用。方法：采用双色免疫荧光抗体染色流式细胞仪检测59例梅毒患者外周血TLR2的表达水平，以20例正常人作为对照组。结果：早期梅毒患者TLR2表达的阳性率显著低于正常对照组，二者差异有统计学意义(P﹤0.001)；显性梅毒患者外周血TLR2表达的阳性率显著低于隐性梅毒组，差异有统计学意义(P﹤0.001)。结论：在显性梅毒患者外周血中TLR2的表达水平低下，而在隐性梅毒患者组中TLR2的表达水平与正常对照组相似，提示显性梅毒患者体内可能缺乏非特异性免疫反应，TLR2可能反映了机体的免疫功能状态。     

生殖器疱疹患者外周血CD14+单核细胞Toll样受体的表达及其意义

目的:探讨CD14 单核细胞Toll样受体(TLRs)的表达在复发性生殖器疱疹(RGH)发病机制中的作用.方法:采用双色免疫荧光抗体染色流式细胞术检测了34例RGH患者外周血单核细胞表面TLR4、TLR1、TLR2的表达水平,并以36例正常人作为对照.结果:RGH患者外周血单核细胞TLR4的表达水平显著高于对照组(P＜0.001),TLR1的表达水平则比对照组明显降低(P＜0.001),TLR2的表达水平在以上两组中差异无统计学意义(P＞0.05)).结论:单纯疱疹病毒感染能上调单核细胞TLR4的表达,在病毒识别、增强信号传导、启动抗病毒的固有免疫反应中起着重要作用.     

Toll样受体2 mRNA在梅毒患者外周血单一核细胞的表达

目的研究一期梅毒、二期梅毒、早期潜伏梅毒患者驱梅治疗前、后外周血单一核细胞(PBMCs)Toll样受体2(TLR2)mRNA的表达情况。方法采用实时定量PCR方法检测一期梅毒、二期梅毒、早期潜伏梅毒患者各15例驱梅治疗前和驱梅治疗结束后3个月PBMCs中TLR2mRNA的表达水平,并与20例正常人作对照。结果驱梅治疗前一期梅毒、二期梅毒及早期潜伏梅毒患者与正常对照组TLR2mRNA表达水平比较差异有统计学意义(P<0.001);一期梅毒、二期梅毒及早期潜伏梅毒组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05);经驱梅治疗后,一期梅毒、二期梅毒及早期潜伏梅毒患者PBMCs中TLR2mRNA的表达水平显著下降,与驱梅治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.001);与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);TLR2mRNA的表达水平与血清RPR滴度不存在相关关系(P>0.05)。结论TLR2可能参与了免疫细胞对梅毒螺旋体的识别和信号转导,并在梅毒的发生、发展过程中可能起重要作用。     

寻常痤疮患者外周血单核细胞TLR2的表达及其与IL-8和TNF-α的相关性研究

目的 探讨Toll样受体2(TLR2)在寻常痤疮发病中的作用及意义.方法 选择轻、中、重度痤疮患者各30例,采用流式细胞仪检测其外周血CD14+单核细胞TLR2的表达,并采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-8和TNF-α的水平.另取30例正常人作为对照组.结果 轻、中、重度组痤疮患者外周血单核细胞表面TLR2的表达均显著高于正常人对照组(P＜0.01).各组患者血清中IL-8和TNF-α的水平也显著高于正常人对照组(P＜0.01).直线相关分析显示,各组患者TLR2的表达与IL-8、TNF-α水平均呈正相关性(r分别为0.382、0.517、0.436、0.641、0.725、0.593,P＜0.05).痤疮严重程度与TLR2的表达呈正相关性(r=0.406,P＜0.01).结论 TLR2表达水平及相关细胞因子浓度与痤疮严重程度密切相关.

Abstract：

Objective To explore the role of Toll like receptor 2 (TLR2) in the pathogenesis of acne vulgaris. Methods Venous blood was collected from 30 normal human controls and 90 patients with acne vulgaris. The patients were equally divided into three groups, i.e., mild, moderate and severe groups, according to disease severity. Flow cytometry was performed to detect the expression of TLR2 in PBMCs, and double antibody sandwich ELISA to measure the levels of serum interleukin-8 (IL-8) and tumor necrosis factor-α (TNF-α). Results A significant increase was observed in the expression of TLR2 in PBMCs, serum level of IL-8and TNF-α in the three groups of patients with acne vulgaris compared with the normal human controls (all P ＜0.01). The expression of TLR2 was positively correlated with the expression of IL-8 (r=0.382, 0.517,0.436,respectively, all P＜0.05) and TNF-α(r=0.641, 0.725, 0.593, respectively, all P＜0.05) in the patients with mild, moderate and severe acne vulgaris, respectively, and with the severity of acne vulgaris (r = 0.406,P＜0.01 ). Conclusion The expression level of TLR2 and related cytokines seems closely correlated with the severity of acne vulgaris.