黄芪甲苷对耐药肝癌细胞株HepG2/GCS逆转作用的研究

近年来,葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)在肿瘤多药耐药中的作用逐渐受到重视.我们前期实验已证实GCS基因参与了肝癌细胞HepG2多药耐药的发生,通过基因转染使细胞内GCS基因高表达的肝癌细胞株HepG2/GCS具有多药耐药性[1].本实验观察黄芪甲苷(astragalosideⅣ)对肝癌耐药细胞株HepG2/GCS耐药性的影响,进一步探讨其逆转肿瘤多药耐药的作用机制.     

葡萄糖神经酰胺合成酶在肝癌细胞多药耐药中的作用机制

近年来葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)在肿瘤多药耐药(MDR)中的作用逐渐受到重视.我们在构建GCS基因真核表达质粒pEGFP-GCS的基础上,应用基因转染技术使GCS基因在肝癌细胞HepG2内高表达,观察HepG2细胞内多药耐药基因MDR1的表达,以及细胞耐药性的变化,探讨GCS基因参与肝癌细胞HepG2多药耐药的机制.     

高表达GCS基因对肝癌细胞株HepG2耐药性的影响

多药耐药(multidrug resistance,MDR)是导致肝癌化疗失败的主要原因.近年来,葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)在肿瘤多药耐药中的作用逐渐受到重视.我们通过基因转染使肝癌细胞HepG2内GCS高表达,观察肝癌细胞对5-Fu敏感性的变化,进一步探讨肝癌细胞多药耐药的发生机制.     

GCS、P-gp和MRP在胰腺癌中表达及其临床意义

目前胰腺癌化疗效果不尽人意,引起化疗失败的原因主要是多药耐药(multidrug resistance,MDR).为明确耐药基因蛋白的表达及其与肿瘤临床病理特征的关系,本实验检测糖基化神经酰胺合成酶(GCS)、P-糖蛋白(P-gp)和MDR相关蛋白(MRP)在胰腺癌中的表达并分析其与临床病理学特征的关系.     

GCS、P-gp和MRP在胰腺癌中表达及其临床意义

目前胰腺癌化疗效果不尽人意,引起化疗失败的原因主要是多药耐药(multidrug resistance,MDR).为明确耐药基因蛋白的表达及其与肿瘤临床病理特征的关系,本实验检测糖基化神经酰胺合成酶(GCS)、P-糖蛋白(P-gp)和MDR相关蛋白(MRP)在胰腺癌中的表达并分析其与临床病理学特征的关系.     

GCS、P-gp和MRP在胰腺癌中表达及其临床意义

目前胰腺癌化疗效果不尽人意,引起化疗失败的原因主要是多药耐药(multidrug resistance,MDR).为明确耐药基因蛋白的表达及其与肿瘤临床病理特征的关系,本实验检测糖基化神经酰胺合成酶(GCS)、P-糖蛋白(P-gp)和MDR相关蛋白(MRP)在胰腺癌中的表达并分析其与临床病理学特征的关系.     

肿瘤细胞多药耐药与神经酰胺的糖基化

化疗是治疗恶性肿瘤的主要手段之一,而肿瘤细胞产生多药耐药(multidrug resistance,MDR)是临床化疗的最大障碍.MDR是指肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物出现抗药性的同时,对其他结构不同、作用靶位各异的抗肿瘤药物也产生抗药性.目前对MDR机制的研究较多.近年来,神经酰胺与凋亡的研究日益深入,而糖基化神经酰胺在MDR肿瘤细胞中大量聚集,已经成为MDR表型的标志.神经酰胺糖基化水平的提高是肿瘤细胞MDR的一个新机制.抑制神经酰胺的糖基化,增加细胞内神经酰胺的含量已成为逆转MDR的有效策略.     

人胆囊癌细胞系GBC-SD的多药耐药机制

目的 探讨人胆囊癌细胞系GBG-SD耐药性产生的机制,建立先天性耐药的人胆囊癌细胞模型。方法 用逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测GBC-SD细胞多药耐药相关蛋白(MDR1)、多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药蛋白(LRP)基因扩增;免疫细胞化学染色检测该细胞系P-糖蛋白(P-gp)、MRP和LRP蛋白表达;流式细胞术测定P-gp、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)和DNA拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)表达水平;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测该细胞对8种抗癌药物的敏感性。结果 人胆囊癌GBC-SD细胞中MDR1、MRP和L,RP基因呈阳性扩增,P-gp、MRP、LRP蛋白表达阳性;GST-π和TOPOⅡ的表达水平与对照组细胞差异无显著性。四唑盐比色结果显示,GBC-SD细胞对8种抗肿瘤药物均有程度不同的耐受性。耐药倍数从5．3倍到42倍不等。结论 人胆囊癌细胞系GBC-SD是一株先天性耐药的恶性肿瘤细胞系,其耐药性的产生与MDR1、MRP、LRP基因扩增有关。     

葡萄糖神经酰胺合成酶基因在人胰腺癌细胞SW1990及其耐药亚株中的表达和意义

目的探讨葡萄糖神经酰胺合成酶（glucosylceramide synthase,GCS）基因在人胰腺癌细胞SW1990及其耐药亚株中的表达和意义。方法体外培养人胰腺癌细胞SW1990和其耐药亚株SW1990／FU、SW1990／ADM、SW1990／GEM,以细胞活性测定（CCK-8法）检测耐药亚株的耐药指数,相对定量荧光实时PCR（RT—PCR）法检测GCS mRNA的表达,免疫印迹法检测GCS蛋白表达水平。结果与亲本株相比,SW1990／FU、SW1990／ADM、SW1990／GEM的耐药指数分别为339．7、11．9、56．6。RT—PCR和免疫印迹检测结果显示亲本株和耐药亚株均有GCS mRNA和蛋白的表达,GCS mRNA在3株耐药亚株中的表达均比亲本株有增高趋势,且SW1990／ADM、SW1990／GEM的GCS蛋白表达水平较亲本株升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论GCS基因在人胰腺癌细胞株SW1990和其3株耐药亚株中表达阳性,GCS蛋白在SW1990／ADM、SW1990／GEM中呈高表达,表明GCS可能参与胰腺癌耐药株细胞对ADM、GEM的耐药。     

人乳腺癌细胞中葡萄糖神经酰胺合成酶基因的表达和意义

目的：探讨葡萄糖神经酰胺合成酶（glucosylceramide synthase，GCS）基因在人乳腺癌细胞的表达及意义。方法：体外培养人耐阿霉素乳腺癌细胞MCF-7／ADR和人敏感乳腺癌细胞MCF-7，MTT法检测MCF-7／ADR细胞耐药倍数，RT-PCR法检测两种细胞GCSmRNA的表达，免疫细胞化学法检测GCS蛋白表达水平。结果：MCF-7／ADR细胞耐药倍数为53倍，RT—PCR检测结果显示两种细胞均有GCSmRNA表达，且MCF-7／ADR细胞GCSmRNA表达水平较MCF-7细胞有显著升高（P〈0．05），免疫细胞化学结果显示二者GCS蛋白均有表达且表达水平有显著差异（P〈0．05）。结论：GCS基因在乳腺癌细胞中表达，GCS对于乳腺癌的发生发展具有重要作用，GCS在耐药乳腺癌细胞的高表达证明GCS与肿瘤耐药密切相关，为肿瘤耐药的逆转治疗提供了新的方向。     

胆囊、胆管癌组织中多药耐药基因产物的表达及其意义

目的 探讨多药耐药(MDR)基因产物多药耐药相关蛋白1/2(MRP1,MRP2)、谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)、肺耐药相关蛋白(LRP)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)在胆囊癌和胆管癌中的表达及其与耐药的关系.方法 采用免疫组织化学方法(IHC)检测18例胆囊癌和36例胆管癌的上述五个指标的表达情况.结果 在胆囊癌MRPl、MRP2、GST-π、LRP、Topo Ⅱ的表达的阳性率分别72.2%、72.2%、77.8%、61.1%、83.3%,在胆管癌中表达的阳性率为86.1%、80.6%、75.0%、69.4%、91.7%,显著高于对照组的23.1%、15.4%、23.1%、15.4%、30.8%(P＜0.05).LRP的表达在胆管癌年龄＞60岁组显著高于＜60岁组(P＜0.05).之外上述指标与性别、年龄、病理分期、病理类型、分化程度、淋巴结转移无关(P＞0.05);MRP1和GST-π、MRP2在胆囊癌和胆管癌的表达具有相关性(P＜0.05).结论 MRP1、MRP2、LRP、GST-π、TopoⅡ在胆囊癌和胆管癌组织中均有不同程度的高表达,胆囊癌和胆管癌的原发性多药耐药由多个因素共同诱导.     

肺耐药蛋白和拓扑异构酶Ⅱ在胆囊癌和胆管癌组织中的表达

目的 探讨多药耐药(MDR)基因产物肺耐药蛋白(LRP)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)在胆囊癌和胆管癌中的表达及其与耐药的关系.方法 采用免疫组化的方法 (IHC)检测18例胆囊癌和36例胆管癌的上述两个指标的表达情况.结果 在胆囊癌LRP、TopoⅡ的表达的阳性率分别为77.8%、83.3%,在胆管癌中表达的阳性率为75.0%和91.7%,显著高于对照组的23.1%和30.8%(P<0.05).除LRP、Topo Ⅱ的表达在胆管癌年龄>60岁组显著高于≤60岁组(P<0.05)之外,LRP、TopoⅡ与性别、年龄、病理分期、病理类型、分化程度、淋巴结转移无关(P>0.05).结论 LRP、TopoⅡ在未经化疗的胆囊癌和胆管癌组织中均有不同程度的高表达;胆囊癌和胆管癌的原发性多药耐药与LRP有关,应用TopoⅡ抑制剂治疗可能提高胆道癌的化疗效果.     

多药耐药相关蛋白与骨肉瘤化疗耐药相关性

多药耐药是导致骨肉瘤患者化疗失败的重要原因之一,而多药耐药相关蛋白(MRP)表达增加是介导多药耐药重要机制之一。MRP是一类三磷酸腺苷能量依赖型跨膜转运蛋白,可有选择性和特异性地将细胞内药物外排至细胞外。作为药物排出泵,MRP导致细胞内化疗药物浓度降低,使肿瘤细胞对多种抗肿瘤药物产生耐药。研究发现骨肉瘤一线化疗药物阿霉素、顺铂、甲氨蝶呤、异环磷酰胺及部分二线化疗药物均为MRP的药物底物。深入研究MRP与肿瘤化疗耐药的关系,可为防止骨肉瘤及其他肿瘤化疗耐药开辟新途径。该文就MRP与骨肉瘤化疗耐药相关性研究进展作一综述。     

中药逆转肝癌多药耐药的研究进展

1943年,耶鲁大学的Gilman等首次将氮芥用于淋巴瘤的治疗,揭开了现代肿瘤化疗的序幕。近年来随着新的化疗药物和剂型的不断问世,化疗已成为肿瘤治疗的主要方法之一。然而化疗在肝癌治疗中的作用十分有限,主要原因之一就是多药耐药（multi-drug resistance,MDR）。MDR是指肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物产生抗药性的同时对其他结构和作用机理不同的抗肿瘤药物也产生交叉抗药性。多药耐药的形成机制相当复杂,主要同P-糖蛋白（P-gP）、多药耐药相关蛋白（MRP）、肺耐药相关蛋白（LRP）、     

胆囊癌与mdr1基因的临床相关性研究

目的　研究多药耐药基因mdr1编码P 糖蛋白 (Pgp)和mRNA在原发性胆囊癌组织中的表达 ,分析其临床意义。方法　采用S P免疫组织化学方法和原位多聚酶链反应 (PCR)对 53例未化疗原发性胆囊癌和 1 2例胆囊炎存档石蜡包埋切片组织中Pgp、mdrlmRNA的表达进行检测。结果　 53例胆囊癌、1 2例胆囊炎组织中Pgp和mdrlmRNA阳性表达率分别为 60 .38%、71 .69%和 2 5 .0 0 %、33 .33 %。两组mdrl基因表达差异有显著性 (P <0 .0 5)。胆囊癌组织中的Pgp和mdrlmRNA阳性率在胆囊癌Nevin分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期中为 69.44%和 83 .33 % ,Ⅳ、Ⅴ期为41 .1 8%和 47.0 6 % ;高、中分化为 69.2 3 %和 79.49% ,低、未分化为 35 .71 %和 50 .0 0 %。胆囊癌Nevin分期Ⅰ～Ⅲ和高中分化mdrl基因表达明显高于Nevin分期Ⅳ、Ⅴ及低未分化胆囊癌组织 (P<0 .0 5)。结论　胆囊癌多药耐药性与其内源性耐药密切相关 ,检测mdrl基因为逆转耐药提供依据。mdrl基因表达与胆囊癌部分生物学特性相关 ,mdrl基因可能参与癌肿的发生 ,mdrl基因有望作为胆囊癌独立预后的生物学指标     

肿瘤多药耐药蛋白MRP1、LRP和GST-π在胆囊和胆管癌组织中的表达

目的 探讨多药耐药(MDR)基因产物多药耐药相关蛋白(MRP1)、肺耐药蛋白(LRP)和谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)在胆囊癌和胆管癌中的表达及其与耐药的关系.方法 采用免疫组化的方法(IHC)检测实验组18例胆囊癌、36例胆管癌及对照组13例胆囊胆管炎症组织中MRP1、LRP及GST-π的表达情况,采用x2检验和Spearman检验. 结果 MRP.、LRP和GST-π在胆囊癌组织中的表达阳性率分别72%(13/18)、78%(14/18)和61%(11/18),在胆管癌组织中的表达阳性率为86%(31/36)、75%(27/36)和69%(25/36),显著高于对照组的23%(3/13)、23%(3/13)和23%(3/13)(x2=4.5,P＜0.05).LRP在胆管癌年龄大于60岁组的表达阳性率93%(13/14)显著高于小于60岁组的64%(14/22)(X2=3.9,P＜0.05).上述指标与性别、年龄、病理分期、病理类型、分化程度和淋巴结转移均无明显相关(P>0.05);MRP,和GST-π在胆囊癌和胆管癌的表达具有相关性,Spearman系数=0.569(P＜0.05).结论 MRP.、LRP、GST-π在未经过化疗的胆囊癌和胆管癌组织中均有不同程度的高表达;胆囊癌和胆管癌的原发性多药耐药可能与MRP1、LRP、GST-π有关.     

多药耐药膀胱癌细胞株构建的研究现状及展望

多药耐药（multidrug resistance,MDR）是最重要、最常见的肿瘤耐药现象,是近年来肿瘤临床和基础研究中的热点,多药耐药细胞株是研究MDR现象的主要工具之一,但建立合适的耐药细胞模型却很困难。目前主要采用两类方法来构建多药耐药细胞株：即药物诱导法及转基因法。本文就目前多药耐药膀胱癌细胞株如何构建的研究现状作一综述,并讨论目前多药耐药膀胱痛细胞株构建的利弊、展望未来将如何以更优越的方法构建一高效、稳定的膀胱癌多药耐药模型。     

多药耐药膀胱癌细胞株构建的研究现状及展望

多药耐药(multidrug resiatance,MDR)是最重要、最常见的肿瘤耐药现象,是近年来肿瘤临床和基础研究中的热点,多药耐药细胞株是研究MDR现象的主要工具之一,但建立合适的耐药细胞模型却很困难.目前主要采用两类方法来构建多药耐药细胞株:即药物诱导法及转基因法.本文就目前多药耐药膀胱癌细胞株如何构建的研究现状作一综述,并讨论目前多药耐药膀胱癌细胞株构建的利弊、展望未来将如何以更优越的方法构建一高效、稳定的膀胱癌多药耐药模型.     

POH1基因表达与特发性肾病综合征多药耐药的关系

特发性肾病综合征（INS）是儿科最常见的泌尿系统疾病之一，其治疗主要是应用糖皮质激素，以及环磷酰胺等免疫抑制剂。部分INS患儿对泼尼松等多种免疫抑制剂耐药，即多药耐药，从而反复发作，迁延不愈，最终发展为终末期肾病。本研究初步探讨新型多药耐药基因POHl（Pad one homologue）与INS多药耐药的关系，为阐明INS发生多药耐药的机制和解决INS的多药耐药问题提供新的思路。     

人胆管癌细胞多药耐药性逆转的研究

多药耐药(MDR)是肿瘤细胞产生耐药的重要机制[1].我们以阿霉素(ADM)诱导人胆管癌细胞QBC939产生多药耐药性,并以红霉素(EM)逆转之.