老年人急性白血病T细胞受体VγI-Jγ基因重排分析

OBJECTIVE: To obtain insight into the molecular mechanism of acute leukemia in elderly patients in relation to the clinical features of the disease. METHODS: DNA specimens were obtained from 34 elderly patients with acute nonlymphoblastic leukemia (ANLL), 9 elderly patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL) and 10 healthy blood donors. Polymerase chain reaction (PCR) coupled with single-strand conformation polymorphism (SSCP) was performed to detect T cell receptor (TCR) V gamma I-J gamma gene rearrangement. RESULTS: In the 34 elderly ANLL patients, 47.1% (16/34) were found with TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement, showing a higher rate of the rearrangement than in younger ANLL patients (P<0.025). TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement was identified in 7 (77.8%) of the 9 elderly patients with ALL, and 3 of the identified cases had oligoclonal/ subclonal rearrangement, suggesting a higher rate of oligoclonal/subclonal rearrangement in elderly ALL patients than in younger ALL patients (P<0.01). None of the blood donors was found with TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement. The complete remission rate was lower in the elderly ANLL patient with TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement than in those without (P<0.05). CONCLUSION: The detection of TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement can be of value in assessing the therapeutic effect and making prognostic prediction in elderly patients with acute leukemia.     

STUDY ON SERUM CERULOPLASMIN LEVELS IN VARIOUS CONDITIONS AND TYPES OF LEUKEMIA

Serum ceruloplasmin (CP) was determined by electroimmunodiffusion method in 89 normal persons and 92 leukemic patients. It was found that the serum CP of acute and chronic leukemia was very significantly higher than normal (P<0.01). There were no signifcant difference in elevation of serum CP between various types of leukemia. During remission oJ acute or chronic leukemia, the serum CP decreased significantly (P<0.05), but still higher than normal (P<0.01). In the case of long-term remission, serum CP decreased to normal level. During relapse of acute leukemia or acute blast crisis of chronic leukemia, serum CP raised again significantly (P<0.05). Infection enabled the leukemic patient to further increase serum CP (P<0.01). In acute leukemia, serum CP level correlated positively with the percentage of blast cells in bone marrow (P<0.05).     

急性淋巴细胞白血病化疗及复发后细胞免疫表型变化分析

利用单克隆抗体及ＡＰＡＡＰ技术，发现急性淋巴细胞白血病细胞免疫表型在复发或化疗后有明显变化，表现为某些抗原的获得或丢失。复发１１例中８例细胞表型有变化，分别获得ＣＤ３８、ＣＤ９、ＣＤ７、ＣＤ１０、ＤＲ抗原，其中２例ＣＤ５等抗原丢失。化疗后７例中２例表面抗原标记消失，临床完全缓解，３例分别有ＣＤ１９、ＣＤ５、ＣＤ９抗原的获得或丢失，１例化疗前后无标记，化疗后出现ＣＤ１９、ＣＤ２０。     

染色体原位杂交检测28例急性早幼粒细胞白血病残留病变

目的:应用荧光染色体原位杂交(FISH)方法检测急性早幼粒细胞白血病(acutepromyelocyticleukemia,APL)患者完全缓解(completeremission,CR)期微小残留病变(minimalresidualdisease,MRD),并探讨MRD的动态变化与复发的关系。方法:对28例具有t(15;17)的APL患者在CR期应用中期分裂相FISH方法,进行了监测。结果:11例在CR的不同时期检出了不同比例的t(15;17)细胞,其中3例复发。17例在追踪的标本中均未检出异常细胞,目前均持续缓解。观察时间分别为10～33个月和15～44个月。结论:FISH追踪MRD较传统细胞遗传学更加快速和敏感,并具有可定量的优点,可作为APL患者CR期监测MRD的常规手段。FISH检测到MRD有增长趋势时,更有预示复发的价值。     

急性白血病凝血与纤溶指标的临床观察

本文采用发色多肽底物法及常规出凝血试验方法,测定20例未治疗AL的BPC、TFA、PLG、PK、Fbg,FDP等凝血与纤溶指标,结果:AL组TFA、PLG、PK与正常对照组无显著差别,提示多数AL不伴纤溶系统的激活;但AL组FDP、Fbg升高较正常对照组相差非常显著。重度出血组纤溶活性较无出血组明显增强,提示纤溶亢进可能是重度出血的主要原因之一。3例AL各指标的动态观察结果为,AL病情缓解后,FDP、Fbg均呈下降趋势,提示FDP与Fbg动态测定对临床观察病情有一定帮助。     

异基因骨髓移植治疗急性白血病：骨髓移植成功一例报告

近10多年来,异基因骨髓移植(Allo-BMT)治疗白血病取得了令人满意的效果,经治病人有50%以上获得长期缓解或治愈。移植成功的关键除认真选择病人(急性白血病在     

髓系过氧化物酶基因表达对急性白血病分型的意义

目的：比较基因分型和免疫分型在急性白血病（ＡＬ）诊断分型中的意义。方法：用光敏生物素标记髓系过氧化物酶（ＭＰＯ）ｃＤＮＡ探针,以链亲和素－胶体金细胞原位杂交（ＩＳＨ－ＳＡＧ）研究了５４例ＡＬ ＭＰＯｍＲＮＡ基因表达,并同时分析了ＡＬ的免疫表型。结果：１３例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）有１例表达ＭＰＯ基因;所有髓系均不同程度的表达ＭＰＯ基因,３例急性髓系白血病（ＡＭＬ）－Ｍｏ均表达ＭＰＯ基因。结论：ＭＰＯｍＲＮＡ敏感性强,对确认ＡＭＬ－Ｍｏ有重要意义,将基因分型和免疫分型结合分析,对ＡＬ更精确的诊断分型有重要意义。     

白血病C-MyC癌基因的表达(附10例白血病分析)

本文检测10例白血病C-myC癌基因在蛋白质水平上的表达,发现4例不缓解白血病的C-myC阳性细胞百分比以及C-myC总的表达量明显高于缓解期病人的表达,2例病人临床及骨髓象已达缓解,但C-myC蛋白阳性细胞百分数及C-myC蛋白总表达量仍维持高水平表达,分别于28天及37天复发。这提示,C-myC蛋白的表达水平是预示白血病复发的更敏感的指标。另外,10例白血病病人的C-myC阳性细胞百分数均较骨髓内幼稚细胞百分数为高,提示一部分形态上看来是正常的细胞,仍有C-myC的表达,这部分细胞很可能是白血病细胞。     

白血病bcl-2、P170、CD_(34)表达的临床意义和相关性

目的：探讨白血病ｂｃｌ ２、Ｐ１７０、ＣＤ３４表达的临床意义和相关性,评估其临床预测价值。方法：用ＡＢＣ免疫细胞化学方法检测７７例急性白血病、２３例慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）ｂｃｌ ２、Ｐ１７０、ＣＤ３４的表达。结果：复发／难治的急性白血病ｂｃｌ ２、Ｐ１７０、ＣＤ３４的表达高于初治者。ｂｃｌ ２、Ｐ１７０、ＣＤ３４高表达的急性白血病完全缓解率低,早期复发率高,预后差,ｂｃｌ ２与急性白血病预后的阳性符合率为９０９％,较Ｐ１７０、ＣＤ３４略高。ＣＤ３４在ＣＭＬ慢性期和加速期／急变期的表达有显著性差异。ｂｃｌ ２与Ｐ１７０的表达呈轻度正相关（ｒ＝０３８６,Ｐ＜０００１）。结论：ｂｃｌ ２、Ｐ１７０、ＣＤ３４为急性白血病疗效、预后的指标,ｂｃｌ ２的预测敏感性较高,三者联合检测的预测价值更高。ＣＤ３４为ＣＭＬ病程变化的标志。不同ＭＤＲ机制可能存在联系。     

急性白血病血清中血管内皮生长因子的表达及临床意义

目的：探讨急性白血病患者化疗前血清中血管内皮生长因子(VEGF)水平与白血病发生及复发之间的关系。方法：应用酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测88例急性白血病和30例正常人血清中及白血病细胞培养上清液中VEGF含量。结果：初发白血病及复发白血病患者化疗前血清及细胞上清液VEGF含量明显高于正常人(均P＜O．01)；血清VEGF含量与外周血幼稚细胞数及骨髓中原始细胞数呈显著正相关(r＝0．446，0．421．均P＜0．05)。结论：血清VEGF水平可以作为诊断和预测白血病发生、复发潜能的有效指标。一定程度上可能反映体内白血病细胞的总负荷量和疾病状态。     

白血病细胞的精胺免疫细胞化学研究

采用精胺免疫细胞化学方法对30例白血病患者骨髓片进行细胞内定位观察,其结果急粒14/14,慢粒2/2,急单2/2例阳性。急淋11/11,浆细胞白血病1/1阴性。结果表明:(1)精胺主要分布在急粒、慢粒、急单的白血病细胞中,有量的增加,存在于大量的白血病细胞中,亦可散在出现。(2)在急淋及浆细胞白血病中,其白血病细胞呈阴性反应。精胺免疫细胞化学染色可做为粒细胞及淋巴细胞白血病鉴别的重要辅助指标。为探讨精胺与细胞分化,以及白血病分类提供了新的形态学研究基础。     

急性白血病血清中血管内皮生长因子的表达及临床意义

目的 :探讨急性白血病患者化疗前血清中血管内皮生长因子 (VEGF)水平与白血病发生及复发之间的关系。方法 :应用酶联免疫吸附法 (ELISA)定量检测 88例急性白血病和 30例正常人血清中及白血病细胞培养上清液中VEGF含量。结果 :初发白血病及复发白血病患者化疗前血清及细胞上清液VEGF含量明显高于正常人 (均P <0 .0 1) ;血清VEGF含量与外周血幼稚细胞数及骨髓中原始细胞数呈显著正相关 (r =0 .44 6 ,0 .42 1.均P <0 .0 5 ,)。结论 :血清VEGF水平可以作为诊断和预测白血病发生、复发潜能的有效指标。一定程度上可能反映体内白血病细胞的总负荷量和疾病状态。     

抑癌基因Mxi1在白血病细胞中表达的研究

目的分析抑癌基因Mxil在白血病发病中的作用。方法利用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)检测初治急性白血病(AL)患者26例骨髓单个核细胞,经治疗达完全缓解的AL(AL-CR)患者23例、健康对照者30名外周血单个核细胞和2种髓系白血病细胞株(KG1、K562)Mxil基因表达情况。结果所有标本中均可检测到Mxi1基因的表达,Mxi1 mRNA在初治AL患者的表达水平平均为0.531±0.205,在K562和KG1细胞株中的表达水平平均为0.613±0.223和0.628±0.239,均明显低于健康对照组的0.923±0.187,差异有统计学意义(P<0.05);而AL-CR患者的表达水平为0.812±0.243,明显高于初治AL患者(P<0.05),接近健康对照组(P>0.05)。结论白血病患者细胞中Mxi1基因表达水平下降,提示其可能与白血病的发病有关。     

用电镜原位杂交法定位急性白血病免疫球蛋白重链基因重排

采用电镜原位杂交法，观察６例急性白血病免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排，结果发现，５例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）阳性，表明均为Ｂ－ＡＬＬ；１例急性粒单细胞白血病（ＡＭＬ－Ｍ４）阴性。在阳性细胞核内，代表ＩｇＨ基因重排的胶体金颗粒成群分布，该技术把核酸探针杂交与超微形态学相结合，在基因水平确定白血病细胞类型，尤其对缺乏特异免疫表型的白血病更有应用价值。     

急性白血病端粒酶和乳酸脱氢酶活性检测的临床意义

目的探讨急性白血病端粒酶和乳酸脱氢酶活性的变化及其临床意义。方法选取38例急性白血病和14例非恶性血液系统疾病患者,采用端粒重复序列聚合酶链反应扩增免疫酶标法检测骨髓细胞端粒酶活性,同时用连续动态监测法测定血清乳酸脱氢酶浓度。结果急性白血病患者端粒酶活性和乳酸脱氢酶活性高于对照组非恶性血液系统疾病患者(P<0.01)。急性白血病初发及复发期患者高于完全缓解期患者(P<0.01及P<0.05)。结论观察急性白血病患者端粒酶和乳酸脱氢酶活性的变化有助于判定白血病疗效、预后及监测疾病的进展。     

人细胞周期蛋白C在儿童急性淋巴细胞性白血病中的表达及对白血病细胞增殖的影响

目的：探讨人细胞周期蛋白C(Human cyclin C,CCNC)在儿童急性淋巴细胞性白血病（Acute Lymphocyte Leukemia, ALL）中的表达,并初步研究CCNC在体外对白血病细胞增殖的影响。方法：实时荧光定量PCR法检测CCNC在初治ALL、白血病细胞系及正常对照组中的表达,利用基因重组技术构建含有CCNC的全长的真核表达载体PCMV-2B-CCNC,用脂质体Lifefectamine2000将真核表达载体转染至人急淋细胞系6T-CEM细胞株中,Western-blot检测转染后的细胞CCNC蛋白的表达量,流式细胞分析CCNC对白血病细胞增殖的作用。结果：CCNC在对照组小儿、初治小儿ALL骨髓及6T-CEM细胞系中均有表达,在初治ALL中表达强度降低（P<0.05）。基因测序及重组质粒酶切后鉴定成功构建了PCMV-2B-CCNC真核表达载体,将其转染至6T-CEM细胞中,Western-blot检测到转染后的白血病细胞CCNC蛋白表达量增高,流式细胞结果表明在转染了CCNC基因的白血病细胞中,在细胞的Go/G1峰前出现一个亚二倍体峰,细胞凋亡指数有所增高（P<0.05）。结论: CCNC在初治小儿ALL中出现较低的表达强度,在转染人白血病细胞后,具有诱导白血病细胞凋亡作用,有可能与儿童ALL的发病相关。 关键词：儿童急性淋巴细胞性白血病,细胞周期蛋白C     

多药耐药相关蛋白基因在急性白血病中的表达

（1）目的 探讨多药耐药相关蛋白基因（MRP）在急性白血病中表达的意义。（2）方法 应用半定量逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）。检测了48例不同病期的急性白血病病人骨髓及10例正常人外周血单个核细胞MRP信使RNA（mRNA)的表达。（3）结果 正常人外周血单个核细胞存在MRP的低水平表达;复发的急性白血病病人MRPmRNA表达明显增高,其对预后及复发的预测作用有待进一步研究。     

白血病相关新基因克隆的研究进展

白血病的发生、发展与其相关基因的结构及功能异常密切相关,克隆白血病相关新基因有助于深入阐述白血病发生、发展的分子生物学机制,为白血病的诊断和治疗奠定基础。目前克隆新基因全长的方法主要有cDNA文库筛选法、cDNA末端快速扩增法、反向PCR和锅柄PCR、基于表达序列标签的全长cDNA电子克隆,用这些方法克隆的新的白血病相关新基因有ZFP91、HV126、白血病复发相关候选基因、急性白血病预后风险因子1、混合性白血病融合基因。     

Recombinant human G-CSF and retinoic acid in synergistically inducing granulocyte differentiation of human promyelocytic leukemic cells.

The effects of recombinant human G-CSF (rhG-CSF) and retinoic acid (RA) were studied on the proliferation and differentiation of HL-60 cells and human acute myeloid leukemic cells. Synergistic effect on granulocyte differentiation was observed when HL-60 cells and primary acute promyelocytic leukemic cells were cocultured with RA plus rhG-CSF. rhG-CSF combined with RA increased more significantly the percentage of mature cells than RA alone and greatly increased NBT reduction activity (P < 0.001). These results suggested that proliferated effect of rhG-CSF on leukemic cells may be important for inducing differentiation of myeloid leukemic cells. But this effect might expose the patients to the risk of acute myeloblastic leukemia if G-CSF was used alone. However, RA could not only rule out the latter situation but retain former merit as well. The authors suggest that the combined use of G-CSF with RA is probably a new approach to the treatment of leukemia.

     

PML-RAR_α融合基因检测方法学的建立

应用筑巢式逆转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测２３例急性早幼粒白血病（ＡＰＬ），早幼粒白血病基因ＰＭＬ维甲酸受体α融合基因（ＰＭＬ－ＲＡＲα），肯定了２例与急非淋白血病Ｍ２不易鉴别的不典型ＡＰＬ。１５例缓解在２年以内ＡＰＬ此融合基因均阳性，其中Ｌ型８例，Ｓ型７例，Ｌ型中尚发现一个变异型。８例缓解在３年以上ＡＰＬ，此融合基因４例阳性，其中Ｌ型３例，Ｓ型１例，Ｌ型１例已有复发倾向，而缓解超过４年ＡＰＬ此融合基因均为阴性。