长链非编码RNA NEAT1、IL-6和TNF-α在结核感染中的表达水平及诊断价值研究

目的探讨长链非编码RNA NEAT(LncRNA NEAT1)及炎症因子白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α在肺结核中的表达水平及诊断价值。方法根据《WS 288-2017肺结核诊断》标准,纳入活动性肺结核患者15例(活动性结核组),健康对照组22例,收集外周血,分离单个核细胞,利用实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞内LncRNA NEAT1、TNF-α、IL-6的表达水平,并采用Graphpad prism 5进行数据处理和绘制受试者工作特征(ROC)曲线。结果活动性结核组外周血单个核细胞中LncRNA NEAT1表达升高,且与健康对照组比较,差异有统计学意义(P0.001)。细胞因子IL-6表达水平升高,与健康对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);TNF-α在活动性结核组表达水平上调,与健康对照组相比差异有统计学意义(P0.01)。ROC曲线分析表明单项指标评价中,LncRNA NEAT1-1的特异度和灵敏度均为最高,分别为95.45%和93.33%,曲线下面积(AUC)达到0.969 7。结论活动性肺结核患者LncRNA NEAT1、IL-6、TNF-α表达水平升高,LncRNA NEAT1可能通过调控炎症因子表达参与结核的发生、发展过程。     

卵巢癌患者组织中lncRNA NEAT1和CTBP2表达水平及其与临床病理特征的关系

目的探讨卵巢癌患者组织中长链非编码RNA(lncRNA)NEAT1和羧基末端结合蛋白2(CTBP2)表达水平及其与临床病理特征的关系。方法采集2013年1月至2016年1月收治的60例卵巢癌患者的癌组织及其配对的癌旁组织。采用实时荧光定量PCR方法检测lncRNA NEAT1和CTBP2在癌组织及癌旁组织的表达,并分析二者表达与卵巢癌患者临床病理特征及预后的关系。结果 lncRNA NEAT1和CTBP2在卵巢癌组织中的表达量明显高于癌旁组织(P0.05);lncRNA NEAT1和CTBP2表达与年龄、组织学类型、肿瘤直径均无相关性(P0.05);与FIGO分期、肿瘤分级、淋巴结转移密切相关(P0.01);随着癌组织中lncRNA NEAT1表达水平升高,CTBP2表达呈明显升高趋势,lncRNA NEAT1与CTBP2表达呈显著正相关(r=0.562,P=0.001);lncRNA NEAT1高表达组预后2年存活率为55.50%,lncRNA NEAT1低表达组预后2年存活率为70.00%,lncRNA NEAT1高表达组存活率显著低于低表达组存活率,两组比较差异有统计学意义(χ~2=5.00,P=0.025);CTBP2高表达组预后2年存活率为51.70%,CTBP2低表达组预后2年存活率为68.30%,CTBP2高表达组存活率显著低于低表达组存活率,两组比较差异有统计学意义(χ~2=6.106,P=0.013)。结论 lncRNA NEAT1和CTBP2在卵巢癌患者组织中高表达,两者具有相关性,且与FIGO分期、肿瘤分级、淋巴结转移以及预后密切相关,可作为卵巢癌的早期诊断标记与治疗靶点。     

白癜风患者外周血单个核细胞中TLR7、TLR9、NF-κB的表达及意义研究

目的探究白癜风患者外周血单个核细胞(PBMC)中Toll样受体7(TLR7)、Toll样受体9(TLR9)、核因子-κB(NF-κB)的表达情况及其意义。方法前瞻性选取2017年4月至2018年4月沈阳市第七人民医院收治的33例白癜风患者作为观察组,33例同期健康体检者为对照组。使用流式细胞仪检测两组PBMC中的TLR7、TLR9表达情况,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组PBMC中的NF-κB表达情况。结果流式细胞仪结果显示,观察组患者PBMC中的TLR7表达量为(94.65±3.931)%,高于对照组的(92.84±3.52)%,但差异无统计学意义(P0.05);而观察组患者PBMC中的TLR9表达量为(86.68±11.01)%,低于对照组的(90.75±5.74)%,但差异无统计学意义(P 0.05); PCR反应结果显示,观察组患者PBMC中的NF-κB mRNA表达量为(0.96±1.52),高于对照组的(0.24±0.35),差异具有统计学意义(P 0.05)。结论白癜风患者PBMC中TLR7表达过量,TLR9则低表达,但与正常健康者的表达情况未见较大差异,而该信号通路的信号分子NF-κB表达量远高于正常健康者,推测TLR7、TLR9、NF-κB的表达与白癜风可能存在一定的关系,但具体机制需进一步探寻。     

重症肌无力患者外周血单个核细胞中KLF4、RORγt与miR-206水平变化的临床意义

目的检测重症肌无力患者外周血单个核细胞(PBMC)中锌指样转录因子4(KLF4)、孤儿核受体γt(RORγt)、microRNA-206的表达水平,探讨它们在重症肌无力患者发病中的作用。方法采集重症肌无力患者及健康对照者清晨空腹外周血标本,梯度离心得到人PBMC。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测PBMC中KLF4、RORγt mRNA、microRNA-206的相对表达量。结果重症肌无力患者PBMC中KLF4mRNA为0.594±0.181,健康对照者为0.089±0.025;重症肌无力患者PBMC中RORγt mRNA表达水平为0.570±0.266,健康对照者为0.067±0.016,重症肌无力患者均显著高于健康对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。重症肌无力患者PBMC中microRNA-206表达水平为0.053±0.018,健康对照者为0.134±0.056,重症肌无力患者显著低于健康对照组,差异有统计学意义(P0.05)。重症肌无力患者PBMC中KLF4、RORγt相对表达量与microRNA-206表达水平均呈负相关(r=-0.675,P0.05,r=-0.806,P0.05)。结论重症肌无力患者PBMC中KLF4mRNA、RORγtmRNA的表达水平增高及microRNA-206表达水平下降,和疾病的发生和发展有密切的关系。     

核因子κB在多脏器功能障碍综合征发病机制及预后评估中的作用

目的 检测多脏器功能障碍综合征(MODS)患者外周血单核细胞(PBMC)中核因子κB(NF-κB)mRNA及NF-κB抑制因子(IκBα)mRNA的表达.探讨NF-κB的活性在评估MODS患者病情及预后中的作用.方法 收集30例MODS患者,按疾病的转归分为死亡和存活组.同期选取10例健康体检者作为对照组.应用逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测PBMC中NF-κB mRNA及IκBα mRNA的表达.结果 死亡组、存活组和对照组PBMC中NF-κB mRNA相对表达量分别为1.179±0.508、1.247±0.512和0.738±0.238,差异有统计学意义(P＜0.05).死亡组、存活组和对照组PBMC中IκBα mRNA相对表达量分别为0.875±0.451、1.372±0.743和1.966±0.666,差异有统计学意义(P＜0.05或＜0.01).结论 活化的NF-κB参与了MODS的发生发展,而且其活化程度与患者的预后密切相关,NF-κB活性越高,患者预后越差.     

早期脓毒症患者NOD样受体1表达与病情严重程度相关研究

目的 通过前瞻性研究探讨早期脓毒症患者外周血单个核细胞中NLRP1炎性体和NLRP3炎性体相关组分的表达和血浆中相关炎症因子的水平,以及各指标的临床价值.方法 脓毒症患者21例,年龄(67.71±17.17)岁;非感染性SIRS患者20例,年龄(61.35±11.82)岁;健康者20例,年龄(60.38 ±5.61)岁.Real-time PCR检测炎性体复合物各组分以及相关炎症因子mRNA表达水平,ELISA检测血浆IL-1β和IL-18质量浓度.统计方法使用单因素方差分析和Spearman相关性分析.结果 ①NLRP1在早期脓毒症患者和非感染性SIRS患者外周血单个核细胞(PBMC)中的mRNA表达均较健康对照组明显降低(P＜0.01),NLRP3在脓毒症患者PBMC中表达与健康对照组差异无统计学意义(P＞0.05),但其在非感染性SIRS组的表达较脓毒症组和健康对照组明显升高(P ＜0.01);IL-1β在3组人群PBMC中的mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05),IL-18在脓毒症组和非感染性SIRS组中的表达均较健康对照组增高(P＜0.01),其中非感染性SIRS组IL-18表达水平最高.②脓毒症患者血浆中IL-1β的蛋白水平较健康对照组低(P＜0.05),IL-18水平较健康对照组和非感染性SIRS组显著升高(P＜0.01);③NLRP1与SOFA评分呈负相关性(r=-0.44,P＜0.05);与APACHEⅡ评分也具有负相关性(r=-0.52,P＜0.05).结论 NLRP1在早期脓毒症患者PBMC中表达明显降低,且其水平与患者病情严重程度呈负相关,NLRP1水平越低病情越严重.     

miR-21对1型糖尿病患者外周血单个核细胞分泌IFN-γ与IL-17的影响

目的:探讨mi R-21在1型糖尿病患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌干扰素-γ(IFN-γ)与白介素-17(IL-17)的影响。方法:采集60例1型糖尿病患者及60例正常健康人外周血,分离外周血单个核细胞(PBMC),用q RT-PCR检测两组PBMC中mi R-21的表达;向PBMC中转染mi R-21,ELISA检测PBMC分泌IFN-γ与IL-17情况。结果:1型糖尿病患者PBMC中mi R-21表达低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);增加1型糖尿病患者PBMC中mi R-21的表达,IFN-γ与IL-17的分泌均减少,差异有统计学意义(P值分别<0.05或<0.01)。结论:mi R-21在1型糖尿病患者PBMC中的表达下降,并可抑制PBMC中IFN-γ与IL-17的分泌。     

支气管哮喘患者外周血单个核细胞中IL-9 mRNA检测及临床意义

目的检测支气管哮喘患者外周血单个核细胞(PBMC)中IL-9mRNA水平,探讨IL-9在支气管哮喘发生、发展中的意义。方法收集支气管哮喘患者和健康对照者外周血标本,分离PBMC,经佛波酯和离子霉素刺激活化后提取总RNA并逆转录成cDNA。采用实时定量PCR(qRT-PCR)方法检测IL-9mRNA的表达水平。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中总IgE浓度。结果建立人IL-9的SYBRGreenⅠ检测方法。支气管哮喘急性发作期患者PBMC中IL-9mRNA水平显著高于健康对照组(P0.05),而临床缓解组和健康对照组间差异无统计学意义(P0.05)。支气管哮喘急性发作期患者PBMC中IL-9mRNA水平与总IgE浓度呈正相关。结论支气管哮喘患者PBMC中IL-9mRNA水平升高,与疾病的发生、发展关系密切。     

过敏性紫癜患者外周血细胞间黏附分子2、3与黑色素瘤细胞黏附分子表达的初探

目的 检测细胞间黏附分子2(ICAM-2)、ICAM-3、黑色素瘤细胞黏附分子(MCAM)在过敏性紫癜(HSP)患者外周血的表达,并探讨其在本病发病机制中的意义.方法 采用双抗体夹心法(ELISA)检测60例HSP患者组与50例正常对照组血清中ICAM-2、ICAM-3水平.采用实时荧光定量RT-PCR法检测HSP患者及对照组外周血单个核细胞(PBMC)中MCAM mRNA的相对表达.结果 HSP患者血清ICAM-2、ICAM-3水平明显高于正常对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05),患者各组间两两比较,血清中ICAM-2、ICAM-3水平差异无统计学意义(P≥0.05).患者组PBMC中MCAM mRNA的相对表达量明显高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),患者各组间两两比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 ICAM-2、ICAM-3、MCAM可能在HSP的发病中起重要作用.     

肺结核患者血清OPN、IFN-γ、sIL-2R、sTIM-3的水平变化特点及意义

目的探讨血清骨桥蛋白(OPN)、γ-干扰素(IFN-γ)、可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)及可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(sTIM-3)在肺结核患者中的变化及其意义。方法选取我院2015年1月至2017年12月收治的90例确诊肺结核患者(肺结核组)、同期的90例健康体检对象作为对照组,检测两组血清OPN、IFN-γ、sIL-2R及sTIM-3水平,并根据痰涂片结果、有无空洞对肺结核组进行分层分析。结果肺结核组患者的血清OPN、IFN-γ、sIL-2R、sTIM-3水平均高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);空洞型肺结核组患者的血清OPN、IsTIM-3水平均高于非空洞型组,差异具有统计学意义(P0.05);空洞型与非空洞型肺结核患者的IFN-γ、sIL-2R水平差异不具有统计学意义(P0.05);痰涂片阳性的肺结核组患者的血清OPN、IFN-γ、sIL-2R、sTIM-3水平均高于痰涂片阴性的肺结核患者,差异具有统计学意义(P0.05)。结论肺结核患者的血清OPN、IFN-γ、sIL-2R、sTIM-3水平较健康人群显著升高,并且与肺结核患者结核杆菌活动程度、患者病情有一定的关系。