三碘甲状腺原氨酸对脑缺血大鼠海马神经祖细胞增殖的作用

目的观察三碘甲状腺原氨酸(T_3)对双侧颈总动脉结扎(2VO)大鼠海马齿状回颗粒细胞下层(SGZ)神经祖细胞增殖的影响。方法取健康成年雄性SD大鼠30只,按数字法随机分为T_3连续干预组和即时干预组,各组再随机分为3个亚组:假手术组、2VO模型组及2VO造模后T_3治疗组(简称T_3治疗组)各5只。对T_3连续干预组大鼠的处理为术后第1天开始对T_3治疗组大鼠经腹腔注射T_3(10 g/30 g体质量),其余两亚组注射等量的等渗盐水,术后第2天开始向大鼠腹腔均注射细胞增殖标记物5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)50 mg/kg,连续5 d,最后一次注射Brd U后24 h处死大鼠。对即时干预组大鼠的处理为术后第7天T_3治疗组处死大鼠前10 h经腹腔注射T_3(10 g/30 g体质量),其余两组注射等量的等渗盐水,8 h后向所有大鼠腹腔均注射Brd U(150 mg/kg),2 h后处死大鼠。采用免疫组织荧光染色观察大鼠海马Brd U阳性细胞数。结果 (1)T_3连续干预组SGZ Brd U阳性细胞数高于2VO模型组及假手术组[Brd U阳性细胞数分别为(457±134)、(286±24)、(175±21)个,均P0.01];2VO模型组与假手术组比较差异亦有统计意义(P=0.047)。(2)T_3即时干预组SGZ Brd U阳性细胞数高于2VO模型组及假手术组[Brd U阳性细胞数分别为(71±17)、(45±14)、(16±12)个,均P0.01];2VO模型组与假手术组比较差异亦有统计意义(P=0.007)。结论脑缺血后补充T_3可促进大鼠海马SGZ神经祖细胞增殖。     

血管内皮生长因子与胎盘生长因子联合对大鼠急性心肌梗死后血管新生及心功能的影响

目的观察血管内皮生长因子(VEGF)、胎盘生长因子(PLGF)单独使用和联合使用对急性心肌梗死大鼠心肌梗死缺血边缘区血管新生和心功能的影响。方法 75只雄性SD大鼠随机分为5组:sham组(假手术组),NS组(250μl生理盐水),VEGF组(1μg重组鼠VEGF溶于250μl生理盐水),PLGF组(1μg重组鼠PLGF溶于250μl生理盐水),VEGF+PLGF组(重组鼠VEGF 0.5μg+重组鼠PLGF 0.5μg溶于250μl生理盐水)。sham组大鼠仅开胸,不结扎左前降支,并且不注射药物,其余所有大鼠均结扎左前降支近端,建立急性心肌梗死模型,并于心肌梗死缺血边缘区注射VEGF和PLGF。术后3周,以超声心动图评估大鼠心脏结构及功能,测定梗死范围,用免疫组织化学方法检测大鼠心肌梗死缺血边缘区Ⅷ因子相关抗原(v WF)染色阳性的内皮细胞评估新生血管数量,α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)染色阳性的平滑肌细胞评估新生小动脉数量。结果冠状动脉结扎3周后,sham组大鼠LVEDD、LVESD、LVEF及LVFS明显优于其余各组,差异均有统计意义(均P0.01);与NS组、VEGF组及PLGF组比较,VEGF+PLGF组LVEF、LVFS显著增高,而LVEDD及LVESD则显著减少(均P0.05)。sham组心肌梗死范围显著小于其余四组,差异均有统计意义(均P0.01);VEGF+PLGF组大鼠梗死范围显著小于NS组[(19.75±3.98)%比(38.70±7.45)%,P0.01]、VEGF组[(19.75±3.98)%比(32.20±6.00)%,P0.05]及PLGF组[(19.75±3.98)%比(25.09±5.52)%,P0.05],差异均有统计学意义。sham组v WF阳性细胞数量和α-SMA阳性细胞数量显著小于其余四组,差异均有统计学意义(均P0.01);其余四组大鼠v WF阳性细胞数量和α-SMA阳性细胞数量比较,差异均有统计学意义(均P0.05);而VEGF+PLGF组v WF阳性细胞数量[(64.08±10.89)个/mm2比(55.09±8.20)个/mm2,P0.05]、α-SMA阳性细胞数量[(11.42±3.15)个/mm2比(9.00±2.19)个/mm2,P0.05]均高于PLGF组,差异均有统计学意义。结论将半剂量的VEGF与PLGF联合应用可使心肌梗死缺血边缘区毛细血管和小动脉生成增多,心肌梗死范围减小,并且明显改善心功能。     

人脐血干细胞移植促进心肌梗死大鼠血管新生的机制研究

目的:观察人脐血干细胞(hUCBSC)经静脉移植对心肌梗死(MI)大鼠血管新生和血管内皮生长因子(VEGF)、促血管生成素(Ang-1)表达的影响.方法:雄性SD大鼠40只,随机分为3组:①假手术组(10只);②对照组(15只)制备MI模型成功后,经尾静脉注射0.9%氯化钠溶液0.5 ml;③移植组(15只)尾静脉注射hUCBSC 0.5 ml(含干细胞2×107/ml).术后4周行超声心动图和血流动力学检查,并取心脏组织行苏木精-伊红染色、抗Ⅶ因子免疫组化染色,观察心肌病理改变、心肌毛细血管密度(MCD)的变化.同时用免疫组化和RT-PCT的方法检测VEGF、Ang-1及其mRNA的表达.结果:与对照组相比,术后4周时移植组心功能明显改善(P＜0.01),左室舒张末压显著降低[(20.13±5.63)mmHg,(10.56±4.69)mmHg,P＜0.01],而左室压力最大变化率明显增加[(4.25±2.01)mmHg/ms:(6.53±2.38)mmHg/ms,P＜0.053;和[(3.83±2.69)mmHg/ms:(6.25±2.92)mmHg/ms,P＜0.05];移植组MCD明显高于对照组[(4.2±0.5)个/HP:(2.1±0.3)个/HP,P＜0.01];移植组VEGF和Ang-1及其mRNA表达明显高于对照组和假手术组.结论:hUCBSC经静脉移植通过促进VEGF和Ang-1表达而促进MI大鼠血管新生,从而改善MI大鼠心功能.     

辛伐他汀对烟雾暴露大鼠肺泡上皮细胞的作用

目的 探讨辛伐他汀对烟雾暴露大鼠肺气肿肺泡上皮细胞及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 24只12周龄健康雌雄各半Wistar大鼠随机数字表法分为对照组、烟雾组、药物组和烟雾+药物组(烟+药组),每组6只,同步饲养16周,雌雄大鼠同步、分箱饲养16周.分别采用逆转录PCR法测定肺组织中VEGF的mRNA表达,酶联免疫吸附法测定BALF和组织中VEGF含量,免疫组织化学二步法检测VEGF和增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平.多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 烟+药组大鼠肺泡上皮细胞PCNA阳性细胞构成比[(10.3±2.0)%]明显高于烟雾组[(4.8±0.8)%];BALF和组织匀浆中VEGF水平[(187±15)ng/L和(6782±50)ng/L]接近于对照组[(200±20)ng/L和(7558±330)ng/L],明显高于烟雾组[(71±16)ng/L和(4149±110)ng/L];肺泡和支气管上皮细胞中VEGF表达[(67.7±5.0)%和(49.0±3.0)%]近似于对照组[(68.3±3.3)%和(51.3±2.9)%],明显高于烟雾组[(27.0±5.9)%和(16.3±2.7)%].烟+药组与烟雾组比较,差异均有统计学意义(t值为1.117～12.001,均P＜0.01).结论 辛伐他汀可部分促进肺泡上皮细胞增殖,提高肺组织中VEGF含量及肺泡上皮细胞表达,延缓烟雾暴露所致大鼠肺气肿的进展.     

益气活血法对脑出血大鼠脑内血管内皮生长因子蛋白表达的影响

目的观察脑出血大鼠脑组织中血管内皮生长因子（VEGF）表达,探讨益气活血法治疗脑出血的分子生物学机制。方法Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血模型,分别以补阳还五汤及该方的拆方益气方和活血方灌胃,Western印迹法观察出血后1、4、7、14、21、28d鼠脑VEGF蛋白表达。结果模型组、益气组、活血组和益气活血组造模后1d均可检测到VEGF蛋白阳性信号,益气活血组于14d达高峰（P〈0.01）,早于其他3组（21d）;益气活血组第7～28天均高于模型组、益气组、活血组水平（P〈0.01）。结论脑出血大鼠脑VEGF蛋白表达上调;益气活血法能增强脑出血大鼠脑VEGF蛋白表达,促进VEGF峰值提前,并维持在较高水平,以促进脑出血损伤修复。     

益气养阴活血法对2型糖尿病合并急性脑梗死患者血清VEGF表达的影响

目的 观察2型糖尿病合并急性脑梗死(ACI)患者血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)在不同时间段变化及益气养阴活血法对其的影响.方法 将4例2型糖尿病合并ACI患者随机分为治疗组与对照组,各23例.对照组采用常规方法治疗,包括饮食疗法、降糖药物、脱水剂、脑细胞保护剂、改善脑灌注药物以及对症支持治疗.治疗组在常规治疗基础上口服加味补阳还五汤治疗.用双抗体夹心酶联免疫分析(ELISA)测定VEGF于第1天、第7天、第14天血清含量的变化.结果 两组于第1天血清VEGF水平比较无统计学意义(P＞0.05),治疗组于第7天达高峰(P＜0.01),第14天仍高于对照组(P＜0.01).结论 2型糖尿病合并ACI后血清VEGF开始升高,益气养阴活血法能够明显增加VEGF的血清含量,且能使其维持在一个较高的水平,以促进脑梗死损伤的修复.     

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子对大鼠急性心肌损伤血管新生的作用

目的 观察粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)预处理对异丙肾上腺素(Iso)所致大鼠急性心肌损伤后新生血管密度的影响.方法 雄性、成年Wistar大鼠60只,体质量约190 g.按体质量将大鼠随机分成3组:对照组,GM-CSF预处理组(GM-CSF组),Iso损伤组,每组20只.GM-CSF组提前给予注射用人重组(rh)GM-CSF 5.0μg/kg,1次/d,尾静脉注射,连续3 d.在注射后的第3天,GM-CSF组和Iso损伤组同时给予Iso,按15.0 mg/kg腹腔注射,1次/d,连续3 d;对照组给予等量次生理盐水.注射后第10天.观察各组大鼠心肌损伤的病理改变和坏死灶面积;免疫组化方法测量、等大鼠心肌组织中新生血管密度指数:RT-PCR法检测大鼠心肌组织中多肽抗原(CD34)、血管内皮生长因子(VEGF)及VEGF受体(KDR/flk-1)的表达.结果 大鼠心肌坏死面积组问比较差异有统计学意义(F=10.07,P<0.01),其中GM-CSF组[(37.37 ±12.98)%]明显少于Iso损伤组[(45.51±14.96)%,P<0.05].大鼠心肌组织中新生血管密度指数组间比较差异有统计学意义(F=25.54,P<0.05),其中GM-CSF组[(3980.05±477.22)个/mm2]显著高于Iso损伤组[(2605.93 ±361.49)个/mm2,P<0.01].大鼠心肌CD34、VEGF、KDR/flk-1 mRNA表达组间比较差异有统计学意义(F值分别为17.83、4.29、4.10,P均<0.01);GM-CSF组[CD34(44.04±10.13).VEGF(49.40±11.59),KDR/flk-1(46.49 ±7.90)]均高于Iso损伤组[CD34(23.85±6.06),VEGF(31.80±8.05),KDR/flk-1(30.16±8.01).P均<0.01].大鼠心肌VEGF mRNA表达与其受体KDR/flk-1 mRNA表达呈正相关(r=0.725,R2=0.526,P<0.01).结论 GM-CSF预处理可增加大鼠心肌中新生血管密度.减轻Iso所致的大鼠心肌损伤.

Abstract：

Objective To study the effect of granulocyte-macrophage colony-stimulating factor(GM-CSF)on angiogenesis of rat with acute myocardial injury induced by isoproterenol(Iso). Methods A total of 60 adult male Wistar rats were randomly divided into 3 groups: normal control group, GM-CSF pretreatment group (GM-CSF group), and lso injury group, 20 rats in each group. GM-CSF group was administered recombinant human(rh)GM-CSF(5.0 μg/kg), through tail intravenous injection once a day for three days. Then the GM-CSF group and the Iso injury group were anesthetized by intraperitoneal injection of lso( 15.0 mg/kg) once a day for three days. The same dose of saline was administered in the same way to the control rats. Ten days after injection, pathological changes of myocardial damage and infarct area were examined by immunohistochemistry. The mRNA expression levels of polypeptide antigen (CD34), vascular endothelial growth factor (VEGF) and its receptor KDR/flk- 1 were measured by RT-PCR. Results The difference of myocardial necrosis area between groups was statistically significant(F=10.07, P < 0.01), in which GM-CSF group[(37.37 ± 12.98)%] was significantly less than Iso injury group[(45.51 ±14.96)%, P < 0.05]. The difference of myocardial neovascularization density index of rats between groups was statistically significant ( F = 25.54, P < 0.05 ), in which GM-CSF group [(3980.05 ± 477.22) No/mm2] was significantly higher than Iso injury group((2605.93±361.49)No/mm2,P<0.01).The differences of myocardial CD34,VEGF,KDR/flk-1 mRNA expression between groups were statistically significant(F=17.83,4.29,4.10,all P<0.01).Compared to Iso mjury group[CD34(23.85±6.06),VEGF(31.80±8.05),KDR/flk-1(30.16±8.01)]were higher in the GM-CSF group[CD34(44.04±10.13),VEGF(49A±11.59),and KDR/flk-1(46A9±7.90),all P<0.01].The expressions of myocardiM VEGF mRNA and its receptor KDR/flk-1 mRNA was positively correlated(r=0.725,R2=0.526,P<0.01).Conclusions GM-CSF prelreatmcnt increases the density ofnew blood vessels in myocardium,and reduces the Iso-induced myocardial injury in rats.     

启膈散及其拆方对人食管癌Eca109细胞裸鼠移植瘤血管生成的抑制作用

目的:探讨启膈散及其拆方抑制肿瘤血管生成的作用和机制.方法:取对数生长期的人食管癌EC9706细胞.接种于裸鼠右胁皮下制备荷瘤裸鼠模型.自接种后第2天开始,每天用40倍成人剂量的启膈散全方及其活血和化痰两个拆方水煎液灌胃给药,连续60 d.用免疫组化方法检测移植瘤中Fac-Ⅷ因子相关抗原标记的微血管密度(MVO)和VEGF的表达,Western blot方法检测肿瘤组织EGFR、PDGFR、VEGF及PLC-γ1蛋白表达.结果:各用药组肿瘤MVD与模型组相比明显降低(36.43±4.16,40.29±2.87 42.43±3.04 vessels/ram2 vs 48.57±7.45 vessels/mm2.P<0.05或0.01).各组肿瘤MVD值与VEGF表达量呈正相关(r=0.712.P=0.0005).各用药组肿瘤EGFR、PDGFR、VEGF、PLC-γ1蛋白表达与模型组相比明显降低.启膈散及其拆方抑制裸鼠移植瘤MVD及EGFR、PDGFR、VEGF、PLC-γ1蛋白表达的作用以全方组最好,活血组次之.结论:启膈散及其拆方能够抑制肿瘤血管生成.其作用机制与抑制EGFR、PDGFR、VEGF及LPLC=γ1蛋白表达相关.     

泛素及大鼠蛋白酶体第三亚基在大鼠颈总动脉球囊损伤后的表达

目的 研究泛素(ubiquitin)、大鼠蛋白酶体第三亚基(rat component 3 of proteasome,Re3)在大鼠颈总动脉球囊损伤后的动态表达及在内膜增生中的作用.方法 雄性SD大鼠56只,随机分为假手术组(8只)、单纯球囊损伤组(48只,包括1、4、7、14、21、28 d组),建立大鼠颈总动脉球囊损伤模型,苏木素-伊红(HE)染色光镜下观察血管内膜增生情况;应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)观察泛紊、RC3 mRNA表达情况,免疫组化方法 观察泛素蛋白表达情况.结果 球囊损伤后血管内膜增生明显,第28天内膜与中膜(Intima/Media,I/M)厚度比值最高[(2.31 ±0.43)比对照组(0.02±0.005),P＜0.01];泛素、RC3 mRNA表达升高,泛紊第7天达高峰[(1.33±0.26)比对照组(0.21±0.04),P＜0.01],RC3第14天达高峰[(1.35±0.26)比对照组0.31 ±0.06,P＜0.01];球囊损伤后泛素蛋白表达升高,第14天达高峰[(21.53±4.09)比对照组(4.21±0.78),P＜0.01].相关分析显示泛素蛋白表达与血管内膜增生呈正相关(r=0.827,P＜0.05).结论 大鼠颈总动脉球囊损伤后内膜增生明显,泛素、RC3 mRNA及泛素蛋白表达增高,球囊损伤后泛素蛋白表达与血管内膜增生呈正相关.     

中药复方合剂减轻大鼠心肌梗死后心肌纤维化

目的探讨中药复方合剂能否减轻心肌梗死后心肌纤维化。方法通过结扎冠状动脉前降支制造大鼠心肌梗死模型。将60只SD大鼠分为六组:14天和56天非治疗组,14天和56天治疗组,14天和56天假手术组。模型制作24h后,14天和56天治疗组开始灌胃给药。结果假手术组、非治疗组、治疗组在第14天及第56天时,体重差异无显著性(P>0.05)。14天非治疗组全心重、左心室重量、全心重/体重、左心室重量/体重与14天假手术组差异均无显著性(P>0.05),而56天非治疗组上述各项指标(分别为1054±22mg,850±21mg,2.77±0.08,2.23±0.04)均显著高于56天假手术组(分别为990±14mg,786±14mg,2.58±0.04,2.05±0.03)(P<0.01)。14天治疗组上述各项指标(分别为778±13mg,607±11mg,2.54±0.04,1.98±0.03)显著低于14天非治疗组(分别为802±14mg,630±16mg,2.69±0.07,2.10±0.06)(P<0.01),56天治疗组上述各项指标(分别为1031±14mg,822±14mg,2.65±0.04,2.11±0.02)显著低于56天非治疗组(P<0.01),但高于56天假手术组(P<0.01)。治疗组第14天及第56天心肌胶原含量(分别为4.37±0.57mg/g,6.04±0.69mg/g)均显著低于非治疗组(分别为5.22±0.52mg/g,4.37±0.57mg/g)(P<0.01),但仍高于假手术组(分别为3.65±0.41mg/g,4.33±0.51mg/g)(P<0.01)。心肌组织病理学检查发现治疗组心肌间质纤维化明显减少。结论中药复方合剂有明显的抑制心肌胶原增生的作用,可减轻心肌梗死后心肌纤维化程度。     

鼻肠管肠内营养在重型颅脑损伤患者中的作用

目的探讨经鼻肠管肠内营养在重型颅脑损伤患者中的应用效果。方法回顾性分析2012年6月至2014年12月中山大学附属第三医院重症医学科收治的54例重型颅脑损伤患者的资料。按照肠内营养方式的不同,分为鼻肠管肠内营养支持组(鼻肠组,26例)和鼻胃管肠内营养支持组(鼻胃组,28例)。在两组患者均于入住重症监护室(ICU)第2天开始给予鼻饲整蛋白制剂(瑞代),观察两组患者达到肠内营养支持目标的时间、肠外营养支持时间、营养指标(白蛋白、血红蛋白等)、入住ICU时间、感染及胃肠道并发症等的发生率。结果 (1)按照体质量计算热卡需求量,鼻肠组较鼻胃组更快达到肠内营养支持目标的时间,分别为(3.0±0.8)d和(7.7±2.5)d,两组差异有统计学意义(P0.01)。鼻肠组较鼻胃组联合肠外营养支持的时间明显缩短,分别为(2.0±0.8)d和(6.7±2.5)d,两组差异有统计学意义(P0.01)。(2)治疗第30天时,鼻肠组的血清总蛋白和血红蛋白水平均高于鼻胃组,分别为(64±6)g/L和(61±6)g/L,(120±17)g/L和(106±16)g/L,差异有统计学意义(P0.05)。(4)鼻肠组较鼻胃组平均ICU住院时间明显缩短,分别为(11±5)d和(14±6)d,两组差异有统计学意义(P0.05)。(4)两组患者肺部感染、高血糖、腹泻等发生率差异均无统计学意义(P0.05)。结论经鼻肠管肠内营养支持能更快达到肠内营养支持目标,缩短入住ICU时间。     

下肢康复机器人联合任务导向训练对卒中后步行能力的康复作用

目的探讨下肢康复机器人联合任务导向训练对卒中后步行能力的康复作用。方法前瞻性连续收集2014年2月至2015年8月首都医科大学宣武医院康复科住院及门诊进行康复治疗且符合纳入标准的卒中患者74例,均为发病1~12个月的初发卒中,根据患者是否接受下肢康复机器人治疗分为观察组(39例)和对照组(35例)。两组患者均接受任务导向训练,2次/d,2 0 m in/次,5 d/周,共1 2周。观察组另给予1 2周的下肢康复机器人治疗,1次/d,3 0 m in/次,5 d/周。疗效评定采用Berg平衡量表、Fugl-Meyer运动功能量表(FMA)、站起-行走计时(TUG)测试、膝关节屈曲的主动关节活动度评测(KFAROM)。结果 (1)治疗后,观察组与对照组Berg量表和FMA量表评分均较治疗提高,差异均有统计学意义[Berg量表:(28±9)分比(22±9)分,(29±9)分比(24±9)分;FMA评分:(47±8)分比(36±8)分,(40±6)分比(36±7)分;均P0.01],但组间Berg评分比较差异无统计学意义(P0.05),而组间FMA量表评分的差异有统计学意义(P0.01)。观察组与对照组治疗前后Berg量表评分的差值分别为(10.75±0.30)、(4.71±0.14)分,组间差异无统计学意义(t=0.95,P=0.345);观察组与对照组治疗前后FMA量表评分的差值分别为(5.8±0.6)、(4.9±0.8)分,组间差异有统计学意义(t=5.16,P0.01)。(2)治疗后,观察组与对照组TUG测试及KFAROM均较治疗前改善,差异均有统计学意义[TUG测试:(35±13)s比(56±18)s,(53±17)s比(58±18)s;KFAROM:(82±24)°比(60±23)°,(63±23)°比(57±26)°;均P0.01],且组间差异均有统计学意义(均P0.01)。观察组与对照组治疗前后TUG测试的差值分别为(21.5±5.0)、(4.6±0.6)s,组间差异有统计学意义(t=9.55,P0.01);观察组与对照组治疗前后KFAROM的差值分别为(5.8±0.6)、(4.9±0.8)°,组间差异有统计学意义(t=4.17,P0.01)。结论任务导向性联合下肢康复机器人训练可改善卒中后患者下肢运动功能、行走能力、膝关节屈曲的关节活动度,但对下肢平衡改善效果不明显。     

从钙离子调控改变探讨兔肾素血管紧张素系统阻断剂逆转甲状腺素促心肌肥厚的机制

目的 研究甲状腺素诱导的肥厚心肌细胞内钙调控变化及其机制,探讨肾素血管紧张素系统(RAS)阻断剂逆转甲状腺素促心肌肥厚的机制.方法 腹腔注射左旋甲状腺素(L-Thy)建立兔甲状腺素性心肌肥厚模型,经胸二维超声心动图测定室间隔厚度(IVS)、左心室内径(LV)及左心室后壁厚度(LVPW)后收集心肌标本,光镜及透射电镜下观察心肌细胞结构改变,Fluo3/AM荷载共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度,逆转录聚合酶链半定量检测L型Ca2+通道(LCC)、兰尼碱受体(RyR)、肌浆网钙泵(SERCA)mRNA表达,对硝基苯磷酸酯(P-nitrophenyl phosphate,P-NPP)法检测SERCA活性,免疫组织化学法检测IP3R蛋白表达.结果 甲状腺素可诱导心肌肥厚、心肌细胞结构改变及纤维组织增生,甲状腺素组细胞内钙离子浓度明显高于对照组,分别为(576.2±41.7)nmol/L比(314.6±35.6)nmol/L(P<0.01);甲状腺素组RyR mRNA、SERCA mRNA及IP3R蛋白较对照组表达上调,分别为1.19±0.21比0.73±0.15(P<0.01)、1.01±0.08比0.76±0.09(P<0.01)、65.3±13.7比47.9±10.2(P<0.01);LCC mRNA表达和SERCA活力降低,分别为0.48±0.11比0.75±0.16(P<0.01)、(0.062±0.013)μmol·min-1·g-1比(0.133±0.022)μmol·min-1·g-1(P<0.01).咪达普利和缬沙坦干预可显著抑制甲状腺素诱导的心肌细胞肥厚,降低细胞内钙离子浓度,咪达普利组和缬沙坦组细胞内钙离子浓度分别为(376.4±32.5)nmol/L和(392.6±41.2)nmol/L均显著低于甲状腺素组(576.2±41.7)nmol/L(P<0.01);咪达普利和缬沙坦干预后LCC mRNA表达高于甲状腺素组,分别为0.68±0.14比0.48±0.11(P<0.01)、0.64±0.13比0.48±0.11(P<0.01);咪达普利和缬沙坦干预增加SERCA的活力,分别为(0.115±0.019)μmol·min-1·g-1比甲状腺素组(0.062±0.013)μmol·min-1·g-1(P<0.01)、(0.109±0.015)μmol·min-1·g-1比甲状腺素组(0.052±0.013)μmol·min-1·g-1(P<0.01),但对RyR mRNA、SERCA mRNA及IP3R蛋白表达无影响.结论 RAS和细胞内钙超载可能参与甲状腺索性心肌肥厚的发病机制,SERCA活力降低可能是导致甲状腺素性肥厚心肌细胞内钙超载的重要因素.咪达普利和缬沙坦可以改善L-Thy诱导的心肌重构和细胞内钙超载并对SERCA活力具有保护作用.     

脂联素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察脂联素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其机制.方法 32只8周龄雄性大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、地尔硫革组和脂联素组,每组8只.(1)假手术组:只穿线,旷置90 min.(2)缺血再灌注组:先阻断血流30 min,再灌注60 min.(3)地尔硫(革)组和脂联素组:先阻断血流30 min,于再灌注开始时,从鼠尾静脉分别注射地尔硫(革)(3.5 μg·g~(-1)min~(-1))或脂联素(60 ng·g~(-1)·min~(-1)),注射2 min,再灌注60 min.各模型组于再灌注60 min后处死大鼠.测定心肌组织一氧化氮(NO),心肌组织半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)活性,心肌组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)活性,过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的含量,同时用透射电镜观察大鼠心肌线粒体结构.结果 (1)缺血再灌注组心肌组织中Caspase 3活性显著高于假手术组[(168.50±30.08)μmol/L比(53.25±11.41)μmol/L,P<0.01],AMPK活性、PPARγ含量均显著低于假手术组[(0.74±0.59)IU/ml比(25.63±4.61)IU/ml,P<0.01;0.1894比0.7949,P<0.01],心肌组织中NO含量显著低于假手术组[(6.359±1.355)μmol/L比(10.396±1.901)μmol.L,P<0.01].(2)脂联素组心肌组织中Caspase 3活性显著低于缺血再灌注组[(88.75±6.92)μmol/L比(168.50±30.08)μmol/L,P<0.01],AMPK活性、PPARγ含量均显著高于缺血再灌注组[(27.22 ±4.76)IU/ml比(0.74±0.59)IU/ml,P<0.01;0.8613比0.1894,P<0.01],心肌组织中NO含量显著高于缺血再灌注组[(15.755±1.045)μmol/L比(6.359±1.355)μmol/L,P<0.01].脂联素可保护急性心肌缺血再灌注过程中大鼠心肌细胞线粒体结构的完整性,上述作用优于地尔硫(革).结论 脂联素对缺血再灌注造成的心肌损伤有一定的保护作用,机制可能与其增加心肌细胞AMPK、PPARγ表达,以及抗心肌细胞凋亡作用有关.     

心肌梗死患者右心房基质金属蛋白酶表达水平的变化

目的 研究冠心病心肌梗死(MI)患者右心房组织基质金属蛋白酶(MMP)及其抑制剂(TIMP)的基因表达,探讨其与右心房结构重构的关系.方法 选取因冠心病接受冠状动脉旁路移植术(CABG)的患者40例,其中MI 22例,不稳定性心绞痛(UA)组18例,术前进行超声心动图检查.于开胸手术时取右心耳标本,分别进行免疫组织化学染色检查、荧光定量PCR方法检测标本中MMP-1、MMP-3、MMP-7、MMP-9及TIMP-1表达.结果 MI组左右心房内径及左心室内径均大于UA组[左心房内径:(40.8±4.2)mm比(33.1±5.1)mm,P<0.01;右心房内径:(44.1±6.8)mm比(28.8±6.0)mm,P<0.01;左心室内径:(48.9±6.0)mm比(39.7±7.1)mm,P<0.01],心房组织中MMP-3、MMP-9及TIMP-1基因表达高于UA组(MMP-3:0.39±0.18比0.28±0.07,P<0.05:MMP-9:0.81±0.21比0.55±0.20,P<0.01;TIMP-1:1.79±0.89比0.94±0.47,P<0.01),MMP-1、MMP-7基因表达有增加趋势,但差异无统计学意义.结论 冠心病心肌梗死患者右心房组织MMP及TIMP表达水平的升高与右心房重构相关.     

生长激素对脑出血大鼠血清白蛋白含量和小肠黏膜形态学的影响

目的 评价重组人生长激素(recombinant human growth hormom,rhGH)对脑出血大鼠血清白蛋白水平和小肠黏膜形态学的影响.方法 采用自体血注射法制作大鼠脑出血模型.56只SD大鼠分为假手术组(n=8),rhGH组(n=24;腹腔注射rhGH,1 U/kg,1次/d)和生理盐水对照组(n=24;腹腔注射等量生理盐水,1次/d),后两组均分别再分为术后1、7和14 d组(每组n=8).检测各组大鼠不同时问点血清白蛋白浓度,HE染色和图像分析观察小肠黏膜形态学改变.结果 脑出血各时间点,生理盐水对照组血清白蛋白水平均较假手术组显著降低(P均<0.01);rhGH组血清白蛋白水平随治疗进程逐渐增高,但仅在14 d时显著高于生理盐水对照组[(39.93±1.98)g,L对(37.93±1.57)g,L,P<0.01].脑出血后1 d和7 d时,rhGH组小肠绒毛高度和黏膜厚度与生理盐水对照组无显著差异,但14 d时显著增高(P<0.01).脑出血后1、7和14 d小肠绒毛面积进行性缩小,且rhGH组较生理盐水对照组随治疗进程进行性增高(P<0.01).脑出血后1 d和7 d.rhGH组肠腺深度较生理盐水对照组增高(P<0.01),但14 d时无显著差异;脑出血1 d,rhGH组组肠腺密度较生理盐水对照组显著增高(P<0.01),7 d时增高不显著,14 d时不仅不增反而稍有降低.结论 脑出血大鼠血清白蛋白水平较假手术组显著下降;脑出血可引起小肠黏膜损害.rhGH可提高脑出血大鼠血清白蛋白水平,不论在脑出血早期还是后期均可不同程度减轻小肠黏膜损伤,后期改善更为显著.rhGH对小肠黏膜损伤的改善程度与血清白蛋白水平的升高程度呈正相关.     

老年人肠道菌群与肠道黏膜免疫相关性分析

目的 探讨老年人肠道菌群的特点及对粪便中肠道分泌型免疫球蛋白A(SIgA)含量的影响. 方法 60岁以下健康成年人36例为对照组,60岁及以上老年人68例为老年组,分别取新鲜粪便,选择肠道菌群中7种具有代表性的细菌,包括4种厌氧菌、两种需氧和酵母样真菌,进行细菌培养和计数;计算出反映肠道定植抗力的指标双歧杆菌与肠杆菌比值(B/E).取新鲜粪便测定SIgA含量. 结果 老年组与对照组比较,肠道菌群中双歧杆菌数量减少,分别为(9.1±1.1)lgCFU/g和(10.2±0.8)lgCFU/g(t=-2.948,P<0.01);肠杆菌分别为(9.2±1.3)lgCFU/g和(8.2±0.7)lgCFU/g,差异有统计学意义(t=2.171,P<0.05);肠球菌分别为(8.5±1.4)lgCFU/g和(7.1±1.6)lgCFU/g,差异有统计学意义(t=2.564,P<0.05);肠道定植抗力分别为1.02±0.14和1.24±0.18,差异有统计学意义(t=-3.459,P<0.01),粪便中SIgA分别为(652.9±184.3)μg/ml和(793.5±150.3)μg/ml,差异有统计学意义(t=-2.178,P<0.05).双歧杆菌数量变化与粪便中SIgA水平相关(r=0.562,P<0.01). 结论 老年人肠道菌群中双歧杆菌数量减少,肠杆菌、肠球菌数量增加;老年人肠道定植抗力下降、肠黏膜免疫功能降低,与老年人肠道菌群改变相关.     

连续气道正压通气对急性脑梗死合并阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者氧化应激及神经功能的影响

目的观察连续气道正压通气(CPAP)治疗急性脑梗死合并阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)患者的效果,探讨CPAP治疗对患者神经功能恢复的影响。方法回顾性连续纳入2014年4月至2015年9月在皖北煤电集团总医院神经内科住院的急性前循环脑梗死合并OSAS患者68例,根据是否接受CPAP治疗分为观察组(31例)和对照组(37例)。对照组接受常规治疗,观察组在对照组治疗方案基础上联合CPAP,均治疗14 d。记录两组患者治疗前后氧减饱和指数(ODI)和最低血氧饱和度(LS_aO_2),氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)及超氧化物歧化酶(SOD)浓度,美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、日常生活能力(BI)及3个月后改良Rankin量表(mRS)评分,评估总有效率。结果 (1)观察组和对照组治疗后ODI和LS_aO_2均较治疗前好转,差异均有统计学意义[ODI:(16±6)%比(35±21)%,(26±15)%比(36±21)%;LS_aO_2:(88±6)%比(75±11)%,(80±8)%比(74±11)%;均P0.05],且治疗后观察组ODI和LS_aO_2均优于对照组,组间差异均有统计学意义(均P0.01)。(2)治疗后,观察组ox-LDL低于对照组,SOD高于对照组,组间差异均有统计学意义[ox-LDL:(487±90)μg/L比(548±77)μg/L,SOD:(111±10)k U/L比(94±15)k U/L,均P0.01]。(3)治疗后,观察组和对照组NHISS、BI评分均较治疗前好转,差异有统计学意义[NHISS评分:(5.2±2.2)分比(12.9±3.9)分;(7.6±3.1)分比(12.5±4.2)分;BI评分:(88±10)分比(52±30)分;(81±4)分比(58±30)分;均P0.01];观察组NIHSS、BI评分优于对照组,差异均有统计学意义(均P0.01)。随访3个月,观察组mRS评分(1.3±0.4)分低于对照组(2.0±1.1)分,组间差异有统计学意义(t=3.362,P0.01)。(4)观察组和对照组总有效率分别为74.2%(23/31)和48.6%(18/37),组间差异有统计学意义(χ~2=4.598,P0.05)。结论 CPAP治疗短期内可减轻急性脑梗死合并OSAS患者的氧化应激水平,改善患者的神经功能。     

骨髓间充质干细胞移植对局灶性脑缺血大鼠缺血皮质神经元核抗原和神经元素1表达的影响

目的探讨骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cell,BMSC）移植对局灶性脑缺血大鼠缺血皮质神经元核抗原（neuronal nuclei,NeuN）和神经元素l（neurogeninl,Ngnl）的影响。方法64只健康雄性成年Sprague—Dawley大鼠随机分为正常对照（normal,N）±磷酸盐缓冲液（phosphate buffered solution,PBS）组、大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）±PBS组、正常对照＋BMSC组和MCAO＋BMSC组,每组16只。线栓法制作大鼠MCAO模型。体外培养BMSC,在模型制作后24h进行脑内移植。采用MRI活体检测脑梗死体积,NeuN／DAPI和Ngn1／DAPI免疫荧光双标法以及蛋白印迹法检测缺血周围脑组织NeuN和Ngnl表达。结果移植后14d,MCAO组大鼠T1和T2加权成像均可见大脑皮质和纹状体存在异常信号区,MCAO＋BMSC组脑梗死体积显著性小于MCAO＋PBS组（32．5％±4．2％对47．9％±7．9％;P〈0．001）。免疫荧光双标染色显示,MCAO±PBS组NeuN^＋／DAPI^＋[（976．2±87．5）个／mm^2对（1908．3±127．8）个／mm^2;P〈0．01]和Ngn1^＋／DAPI^＋[（251．6±23．1）个／mm^2对（285．1±25．2）个／mm^3;P〈0．01]细胞数量均显著性少于N±PBS组,但MCAO±BMSC组NeuN’／DAPI^＋[（1439．9±101．7）个／mm^2;P〈0．01]和Ngn1^＋／DAPI^＋[（356．3±35．6）个／mm^2;P〈0．01]显著性多于MCAO±PBS组。蛋白质印迹分析显示,MCAO±PBS组NeuN（0．69±0．06对0．91±0．09;P〈0．01）和Ngn1（0．53±0．05对0．62±0．07;P〈0．01）蛋白表达水平显著性低于N＋PBS组,但MCAO±BMSC组NeuN（0．82±0．07;P〈0．01）和Ngn1（0．77±0．09;P〈0．01）蛋白表达水平显著性高于MCAO＋PBS组。结论BMSC移植可促进NeuN和Ngnl表达,减轻MCAO脑损伤。     

吸烟和戒烟对2型糖尿病大鼠IKK-β磷酸化的影响

目的 探讨吸烟和戒烟对2型糖尿病大鼠IKK-β磷酸化的影响.方法 6周龄Wistar大鼠42只,随机分为4组:正常对照组(NC,7只)、糖尿病对照组(DC,7只)、糖尿病吸烟组(DS,14只)、糖尿病戒烟组(SC,14只).糖尿病吸烟组分为吸烟8周组(DS8,7只)和12周组(DS12,7只),糖尿病戒烟组分为吸烟8周戒烟组(SC8,7只)和吸烟12周戒烟组(SC12,7只).吸烟组进行8周或12周被动吸烟,戒烟组在8周或12周的被动吸烟后停止吸烟4周.Western blot方法检测各组大鼠骨骼肌中IKK-β磷酸化的程度.结果 与NC组比较,DC组IKK-β磷酸化程度增强(0.16±0.05 vs 0.30±0.08,P<0.01);与DC组和SC8组比较,DS8组IKK-β磷酸化程度有增强趋势,但差异无统计学意义(0.30±0.08,0.36±0.10 vs 0.40±0.09,P>0.05);DS12组IKK-β磷酸化程度明显增强,显著高于DC组和SC12组(0.74±0.11 vs 0.30±0.08,0.35±0.07,P<0.01).结论 随吸烟时间延长2型糖尿病大鼠IKK-β磷酸化程度增强,戒烟后IKK-β磷酸化程度减弱,提示IKK-β磷酸化水平与吸烟致2型糖尿病的发生发展机制有关.