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相似文献
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1.
目的 评价微阵列芯片法与BACTEC MGIT 960液体药敏(简称MGIT960药敏)、罗氏比例法药敏(简称罗氏比例法)在结核分枝杆菌(MTB)对异烟肼(INH)、利福平(RFP)药敏试验检测方面的差异,用于指导临床用药。方法 选择医院临床科室2016年3月—2017年11月期间确诊及疑似结核病的住院和门诊患者标本,同时采用微阵列芯片法、MGIT960药敏和罗氏比例法对其进行结核分枝杆菌检测,选择3种方法检测均为阳性的446例患者标本进行异烟肼和利福平药敏检测,比较三者检测结果的差异性。结果 分别以MGIT960药敏结果和罗氏比例法为参照,微阵列芯片法检测MTB对异烟肼耐药性的灵敏度分别为84.8%和83.5%、特异度分别为99.7%和98.5%、Kappa值分别0.885和0.855,对利福平耐药性的灵敏度分别为96.2%和93.7%、特异度分别为93.8%和93.5%、Kappa值分别为0.817和0.796,表明微阵列芯片法和另外两种方法对异烟肼和利福平耐药性的检测具有极好的一致性;此外,MGIT960药敏和罗氏比例法药敏不一致的MTB样本采用微阵列芯片法检测,结果显示,MGIT960药敏和罗氏比例法分别与微阵列芯片法比较,利福平的耐药性符合率分别为77.8%和88.9%,异烟肼的耐药性符合率分别为100.0%和75.0%,表明两种表型药敏不一致的MTB样本可能存在异质性耐药。结论 微阵列芯片法与MGIT960药敏和罗氏比例法药敏比较,对异烟肼和利福平耐药性检测具有极好的一致性,具有快速、精准、较高的灵敏度和特异度,对于表型药敏不一致的临床样本采用微阵列芯片法检测,可对其进行验证并为临床上异质性耐药的治疗提供更好的实验室依据。  相似文献   

2.
目的用DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌耐药基因,为临床诊治提供实验依据。方法收集2013年6月—2015年6月1 005份痰标本,采用直接涂片检测结核分枝杆菌情况,阳性样本分别用改良罗氏培养基培养和DNA微阵列芯片法进行鉴定,分析耐药基因情况。结果 1 005份痰标本的涂阳率为40.3%(405/1 005)。DNA微阵列芯片法的阳性率为98.0%(397/405),明显高于改良罗氏培养基培养法(44.2%,179/405),P0.01。DNA微阵列芯片法结果显示,有90株(24.9%,90/361)结核分枝杆菌发生利福平耐药,其中33株(占36.7%)发生单纯rpo B基因突变,54株(占60.0%)发生rpo B和kat G基因突变,3株(占3.3%)发生rpo B和inh A基因突变;rpo B基因最常见的突变位点依次为531、526、516、511,突变频率分别为44.4%、25.6%、10.0%、5.5%;突变频率最高的三种突变类型依次为:531位点(C-T)占54.0%(29/90),531位点(C-G)占11.1%(10/90)及526位点(C-T)占11.1%(10/90);单位点突变和二位点联合突变分别有81株(占90.0%)和9株(占10.0%)。结论 rpo B基因突变是导致肺结核患者RFP耐药的分子基础,其突变位点呈多样性。  相似文献   

3.
目的 探讨线性探针技术在海南省结核病诊断及耐药性检测中临床应用。方法 分别采用结核菌涂片、罗氏培养法、比例法药敏及线性探针技术对海南省疑似结核病患者痰液标本进行检测,并对检测结核分枝杆菌、耐药性及耐药突变特点进行分析。结果 线性探针技术检测结核分枝杆菌阳性率(58.7%)明显高于结核菌涂片(40.2%)和罗氏培养(53.8%),线性探针法与两种传统方法比较差异有统计学意义(P<0.05);以比例法药敏为金标准,线性探针法对结核分枝杆菌耐利福平、异烟肼和耐多药结核分枝杆菌检测的特异性为89.27%、94.95%和91.45%,敏感性为94.38%、75.00%和75.68%,阴性预测值为94.62%、80.34%和5.60%,阳性预测值为85.71%、93.32%和84.85%,符合率为90.05%、85.34%和85.34%,线性探针技术与比例法药敏检测结核分枝杆菌利福平耐药性效果比较差异无统计学意义,且具有较好一致性,检测异烟肼耐药性差异有统计学意义,且两种方法之间一致性一般,检测耐多药结核分枝杆菌两种方法差异无统计学意义,但两种方法之间一致性一般;利福平耐药基因突变类型主要是 rpoB H531L,占57.14%,异烟肼耐药基因突变类型主要是katG S315T1,占91.89%,耐多药结核分枝杆菌耐药基因突变类型主要为rpoB S531L+KatG S315T1,占56.06%。结论 线性探针技术可快速准确地从海南省疑似肺结核临床标本鉴定出结核分枝杆菌及耐多药结核分枝杆菌,并可直接快速检测临床标本耐药性从而指导临床用药。  相似文献   

4.
目的 探讨微阵列芯片技术在耐多药结核病(multidrug resistant tuberculosis,MDR-TB)临床诊断中的应用。方法 收集2020年6月至2021年5月经滨州市中心医院确诊的245例住院肺结核患者的标本(痰液标本125例和痰培养分离菌株120例)。痰液标本同时采用DNA微阵列芯片技术和传统培养法检测其结核杆菌阳性率。痰液标本和分离菌株均采用DNA微阵列芯片技术进行肺结核耐多药检测和分枝杆菌菌种鉴定。结果 125例痰液标本经DNA微阵列芯片技术和痰培养法检测,阳性率分别为58.4%(73/125)和24.8%(31/125),两种方法比较差异有统计学意义(2=14.520,P<0.001)。采用DNA微阵列芯片技术检测125例痰液标本和120例分离菌株,共检出结核分枝杆菌复合群192例,非结核分枝杆菌7例。结核分枝杆菌复合群192例检出耐药者41例,其中耐异烟肼15例,耐利福平19例,同时耐两种药物7例。非结核分枝杆菌包括胞内分枝杆菌4例,堪萨斯分枝杆菌2例,鸟分枝杆菌1例。结论 DNA微阵列芯片技术检测周期短,能同时进行结核分枝杆菌耐多药检测和菌种鉴定,对MDR-TB的早期诊断和治疗有较大的临床应用价值。  相似文献   

5.
宋华峰  赵静  胥萍 《中国热带医学》2019,19(11):1022-1025
目的 探究和分析荧光定量PCR检测技术在结核分枝杆菌耐药性检测方面的价值。方法 随机选取苏州市第五人民医院门诊或者住院病人的痰培养阳性标本菌株,并提取核酸。应用荧光定量PCR扩增试剂盒对菌株标本的链霉素、利福平、异烟肼、乙胺丁醇、阿米卡星以及莫西沙星的耐药情况进行检测分析,并将检测结果与传统的罗氏药敏比例法进行比对分析。结果 与罗氏药敏比例法相比较,荧光定量PCR检测法对链霉素、利福平、异烟肼、乙胺丁醇、阿米卡星以及莫西沙星的耐药检测符合率分别为90.48%、82.14%、83.33%、88.09%、89.29%、89.28%。Kappa检验结果显示,两种方法对链霉素的检测结果一致性较高,Kappa值为0.815;对利福平、异烟肼、乙胺丁醇、莫西沙星的检测结果一致性一般,Kappa值分别为0.637、0.631、0.623、0.578;对阿米卡星的检测结果一致性较差,Kappa值为0.279。结论 荧光定量PCR检测技术对于结核分枝杆菌耐药性的快速检测均有很好的应用价值,对于临床上的精准用药具有一定的指导意义。  相似文献   

6.
目的:分析百色市地区结核分枝杆菌异烟肼耐药相关基因 KatG 、inhA 的突变特征。方法收集128例结核病患者痰液标本,采用改良罗氏培养基分离培养结核分枝杆菌,绝对浓度法检测异烟肼耐药性,提取耐药菌株 DNA ,PCR 扩增耐药结核分枝杆菌 katG 、inhA 基因序列并分析异烟肼耐药相关基因突变特征。结果分离培养出98例结核分枝杆菌,34株对异烟肼耐药,耐药率为36.7%,耐药菌株 KatG 基因突变率为44.1%(15/34),其中315位点突变率为66.7%(10/15),出现两个新的突变位点为279(4/15)和427(1/15)。 inhA 5位点突变率为13.3%(2/15),inhA 16位点突变率为6.7%(1/15),3株均为 katG 和inhA 联合突变。结论百色地区耐异烟肼结核分枝杆菌耐药性产生与 katG 和 inhA 基因突变相关,检测本地区结核分枝杆菌katG 和 inhA 基因突变可预测结核分枝杆菌对异烟肼的耐药性。  相似文献   

7.
目的 了解广西百色地区利福平、异烟肼耐药基因的分布情况。评价线性探针杂交技术(LPA)检测耐药结核分枝杆菌的应用价值。方法 利用LPA技术与传统比例药敏试验分别检测496例结核分枝杆菌感染患者痰标本,统计出利福平、异烟肼各个耐药基因的分布情况并与传统比例药敏试验作比较。结果 LPA技术对结核病患者耐多药的检出率和传统比例药敏试验相比较差异无统计学意义(P>0.05) 。LPA技术检测耐利福平和异烟肼的灵敏度、特异度分别为97.0%、99.1%和77.8%、 99.5%,耐多药结核病的灵敏度和特异度分别为82.8%和99.8%。本地区利福平耐药基因突变频率最高的是rpoB WT8 占32.4%,其次是ropB MUT3占29.7%;异烟肼耐药基因最常见的突变是 katG WT 占46.8%,其次是katG MUT1 占43.6%。kappa一致性检验评价两种药物耐药性检测方法的kappa值分别为0.965和0.904。结论 广西百色地区结核分枝杆菌利福平的耐药基因以rpoB WT8和ropB MUT3两个位点突变为主,而结核分枝杆菌异烟肼的耐药基因则以katG WT和katG MUT1位点突变多见。LPA技术能快速、准确诊断结核分枝杆菌利福平、异烟肼的耐药性及多药耐药性,LPA技术检测结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药性与传统比例药敏试验具有高度的一致性,LPA检测技术可以大大地缩短检测的时限,辅助临床快速诊断出多耐药的结核菌。  相似文献   

8.
目的高分辨率熔解曲线(High resolution melting,HRM)技术检测结核菌耐药的结果评价。方法收集自2011年1月至2012年12月期间在深圳市第三人民医院住院进行抗痨治疗的结核病患者的痰标本134例,应用全自动快速分枝杆菌培养鉴定药敏系统BACTC-MGIT 960进行快速检测,获得所需要的结核菌培养药敏结果。针对利福平耐药相关rpo B基因的利福平耐药决定区区域和异烟肼耐药相关基因kat G315位点和inh A-15位点分别进行HRM扩增分析,从而获得利福平耐药决定区、kat G315、inh A-15的基因突变信息,进而判断各菌株是否存在利福平和异烟肼的耐药。结果 134株结核菌临床分离株经结核菌药敏实验判定,有28株对利福平耐药,27株对异烟肼耐药,23株同时对利福平和异烟肼耐药。以结核菌药敏结果为金标准,HRM检测利福平耐药敏感性为96.4%(27/28),特异性为97.2%(103/106),阳性预测值为90.0%(27/30),阴性预测值为99.0%(103/104);异烟肼耐药敏感性为88.9%(23/27),特异性为97.6%(101/107),阳性预测值为79.3%(23/29),阴性预测值为96.2%(101/105)。结论 HRM快速检测结核菌耐药,具有较高的特异性、灵敏度、阳性预测值和阴性预测值,能够满足临床需求。  相似文献   

9.
目的:分析基因芯片技术检测结核分枝杆菌( MTB)对异烟肼耐药性的结果,评价该技术的临床应用价值。方法同时采用罗氏固体培养法及基因芯片技术对57例疑似耐多药结核涂阳患者的痰标本进行MTB对异烟肼的敏感性检测,分析菌株耐药及突变情况结果,并以罗氏固体培养法为金标准,对基因芯片技术的检测效果进行评价。结果57份痰标本中,罗氏固体培养法及药敏试验结果显示,8例为非结核分枝杆菌,49例为MTB,其中对异烟肼耐药13株,耐药率为26.53%(13/49);49株MTB基因芯片技术检测结果显示,野生型37例,突变株12例,突变率为24.49%(12/49),突变株中KatG315突变11株,inhA-15突变仅1株。以罗氏固体培养法的药敏结果为金标准,基因芯片法检测的准确率为89.80%,敏感度为94.44%,特异度为76.92%,阳性预测值为91.89%,阴性预测值为83.33%。结论 MTB对异烟肼的耐药突变率较高,突变位点主要是KatG315。采用基因芯片技术检测MTB 对异烟肼的敏感性具有快速、灵敏、准确的特点。  相似文献   

10.
目的探讨噬菌体生物扩增技术(PhaB)在结核分枝杆菌(MTB)耐药研究中的应用价值。方法应用PhaB法同时测定233株结核分枝杆菌分离株对异烟肼(INH)、链霉素(SM)、利福平(RFP)及左旋氧氟沙星(LEV)的耐药性,并用改良罗氏培养法(LJ)做对照,比较两种方法的检测结果。结果PhaB法检测INH、SM、RFP、LEV的药敏结果与改良罗氏培养法药敏结果相比符合率分别为97.4%、96.6%、95.3%、96.9%。同时检出耐多药菌株26株,占11.1%。结论PhaB法能快速进行结核分枝杆菌的药敏检测并与金标法LJ符合率高,可作为基层结防单位MTB耐药性的快速筛选方法。  相似文献   

11.
目的 探讨耐异烟肼结核分枝杆菌及其katG与inhA基因突变的特征,为临床选择抗结核药物治疗提供实验室参考。方法 回顾性分析2015年1月1日-2017年1月1日在上海交通大学附属同仁医院海南分院的260例患者标本,对213例进行结核分枝杆菌分离培养,对47例进行博奥芯片法检测,再对213例培养所得菌株进行博奥芯片检测,对博奥芯片检测的47例痰标本进行结核分枝杆菌分离培养;对101株结核分杆菌进行katG与inhA基因检测。结果 培养法和博奥芯片结核分枝杆菌检出率分别为36.6%(78/213)和48.9%(23/47);培养法和博奥芯片耐多药结核分枝杆菌检出率分别为41.0%(32/78)和47.8%(11/23);博奥芯片法和比例法耐异烟肼符合率98.7%(77/78);男性结核分枝杆菌阳性率45.9%高于女性阳性率29.2%;检测katG基因和inhA基因,3个基因区域都发生突变,突变发生率大小依次为katG315(AGC→ACC)密码子(32株,54.2%)、katG315(AGC→AAC)密码子(16株,27.1%)、inhA-15(C→T)(10株,16.9%)。24株(23.8%,24/101)对异烟肼无突变但对利福平发生突变;43株也同时耐利福平(42.6%,43/101)。突变频率较高的突变位点是315,突变频率为81.4%(48/59),1株(1.7%,1/59)为双位点联合突变且突变频率最低。结论 结核分枝杆菌katG和inhA基因突变与耐INH相关,这为临床及时准确诊断、及早使用抗结核药物联合治疗提供了帮助。  相似文献   

12.
目的评价反向膜杂交技术对于肺结核病患者的结核分枝杆菌耐药基因检测的临床应用价值。方法利用反向膜杂交技术检测了40株耐药结核分枝杆菌培养分离株、10株非结核分枝杆菌培养分离株、240例肺结核患者痰标本的rpoB、katG,、inhA突变基因。240例痰标本同时进行结核菌培养。106株膜芯片检测阳性样本测序验证。结果特异性方面:膜芯片检测40株结核分枝杆菌培养分离株,均为阳性;10株非结核分枝杆菌培养分离株,均为阴性。灵敏度方面:膜芯片检测240例临床痰标本中,66例结核分枝杆菌阳性,占27.5%。耐药基因准确性方面:106例膜芯片检测阳性的样本进行测序验证,两者结果完全一致。结论反向膜杂交技术可快速检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药突变基因,与常规结核分枝杆菌培养、测序检测耐药基因的结果相符,可应用于临床。  相似文献   

13.
Objective To evaluate multidrug resistant loop-mediated isothermal amplification (MDR-LAMP) assay for the early diagnosis of multidrug-resistant tuberculosis and to compare the mutation patterns associated with the rpoB, katG, and inhA genes at the Chinese Center for Disease Control and Prevention.Methods MDR-LAMP assay was evaluated using 100 Mycobacterium tuberculosis (Mtb) isolates obtained from the National Reference Laboratory for Tuberculosis in China. Phenotypic resistance to isoniazid and rifampicin and whole-genome sequencing served as reference standards. Results The sensitivity, specificity, positive predictive value (PPV), and negative predictive value (NPV) of MDR-LAMP were 85.5%, 93.6%, 96.7%, and 74.4% for the detection of resistance to isoniazid and rifampicin, respectively, and 80.5%, 92.3%, 98.6%, and 41.4% for the detection of Mtb cultured from smear-positive sputum samples, respectively. When DNA sequencing was used as the reference standard, the sensitivity, specificity, PPV, and NPV of MDR-LAMP were 93.1%, 92.3%, 97.2%, and 82.8%for the detection of katG and inhA gene mutations, respectively, and 89.1%, 88.9%, 93.4%, and 81.1%for the detection of rpoB gene mutation, respectively.Conclusion MDR-LAMP is a rapid and accessible assay for the laboratory identification of rifampicin and isoniazid resistance of Mtb isolates.  相似文献   

14.
目的:探讨基因芯片快速检测分枝杆菌技术在辅助诊断小儿结核病方面的临床研究。方法方便选取2014年7月-2015年7月住于该院的经临床、放射线疑诊0~14岁肺结核77例为观察对象,采用晶芯@结核病分子诊断系统对观察对象痰标本进行检测,将检测结果与最终诊断相比较,并与罗氏痰培养结核菌法、痰涂片找结核菌、DNA检测、PPD试验、结核抗体、对INH\RFP耐药性及对非结核分枝杆菌菌种鉴定结果进行对比,分别计算各检测方法的灵敏度和特异度,从而判断基因芯片技术在诊断儿童结核病可行性、敏感、快速。结果重症结核感染17例,其中有9例(11.69%)为血行播散型肺结核,7例(9.09%)合并有结核性脑膜炎,1例(1.3%)合并骨结核。检测异烟肼耐药相关基因,基因芯片法和罗氏培养法比较χ2=2.286,P=0.515,Kappa=0.604,检测利福平耐药相关基因,基因芯片法和罗氏培养法比较χ2=58.77,P<0.05,Kappa=0.587。基因芯片法与罗氏培养法、PPD试验、结核DNA、结核抗体、痰涂片多重比较,χ2=64.91,P<0.05。结果基因芯片法可以快速检测结核分枝杆菌,与罗氏培养法检测结核分枝杆菌拥有中等一致性,其快速、无创,可以用于辅助诊断小儿结核病。  相似文献   

15.
目的 探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)/获得性免疫缺陷综合征(AIDS)合并结核病患者结核分枝杆菌菌株的耐药情况.方法 收集成都市公共卫生临床医疗中心2012年1月至2015年12月住院治疗的HIV/AIDS合并结核病初治患者196例,分析AIDS合并活动性结核病(包括肺结核及肺外结核)患者的痰液/组织液/纤冲液及病理组织送检分枝杆菌培养出的结核分枝杆菌菌株的耐药情况,采用BACTEC MGIT960鉴定系统进行菌型鉴定,960分枝杆菌培养系统进行药敏实验.结果 共培养出结核分枝杆菌菌株196株,发生结核分枝杆菌总体耐药率为26.02%;将196例AIDS合并结核病患者按CD4+T淋巴细胞计数不同分为大于100个/μL、≤100个/μL两组,比较两组患者结核分枝杆菌菌株对4种一线抗结核药物的耐药状况,发现两组患者结核分枝杆菌菌株对一线抗结核药物耐药率比较,差异无统计学意义(P>0.05),一线抗结核药耐药发生率由高到低依次为:异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇.两组患者结核分枝杆菌菌株对5类耐药结核耐药率比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 AIDS合并结核病初始患者耐药率与我国结核平均初始耐药水平一致,HIV/AIDS合并结核病患者的结核耐药性与CD4+T淋巴细胞计数水平高低无相关性.  相似文献   

16.
目的评价Genotype MTBDR plus快速检测耐多药结核病的临床应用价值。方法对涂阳肺结核患者痰标本和临床分离菌株分别用传统比例法药敏试验和Genotype MTBDR plus进行异烟肼和利福平耐药性检测,以比例法药敏试验为金标准对Genotype MTBDR plus检测结果进行比较分析。结果在368例涂阳痰标本中,比例法药敏试验与Genotype MTBDR plus检测异烟肼、利福平耐药率比较,差异均无统计学意义(P均0.05);两种方法检测异烟肼和利福平的一致率分别为95.38%(351/368)和97.55%(359/368)。在85例临床分离菌株中,比例法药敏试验与Genotype MTB-DR plus检测异烟肼、利福平耐药率比较,差异均无统计学意义(P均0.05)。两种方法检测异烟肼和利福平一致率分别为92.94%(79/85)和96.47%(82/85)。与比例法药敏试验比较,Genotype MTBDR plus检测涂阳痰标本和菌株中异烟肼的灵敏度分别为76.32%(29/38)、78.57%(11/14),特异性分别为97.58%(322/330)、95.77%(68/71));检测利福平的灵敏度分别为93.55%(29/31)、91.67%(11/12),特异性分别为97.92%(330/337)、97.26%(71/73)。结论 Genotype MTBDRplus能快速检测结核分枝杆菌对异烟肼、利福平的耐药性,和传统药敏试验比较具有较高的一致性和特异性,是目前快速诊断耐多药结核病的一种较为理想的检测方法,适宜在有条件的实验室开展。  相似文献   

17.
目的:了解从分离自肺结核患者的结核分枝杆菌耐药基因突变率及耐药情况,以利抗结核治疗中药物的合理选用。方法:对痰涂片阳性的新发初治和复治肺结核患者进行痰结核分枝杆菌培养,阳性菌株采用高、低两种药物浓度,四种抗结核药物耐药性测试,同时用实时PCR法对结核分枝杆菌的耐药基因和突变进行检测。结果:127例痰培养阳性菌株总耐药率为14.2%,其中初治耐药率8.1%,复治耐药率35.7%,对四种抗结核药物的耐药率依次为异烟肼8.7%,利福平2.4%,链霉素2.4%,乙胺丁醇0.8%。耐药基因检测结果,在初治组中rpoB和katG的突变率为12.1%(12/99)和10.1%(10/99);复治组中rpoB和katG的突变率为32.1%(9/28)和21.4%(6/28)。结论:分离自肺结核患者的结核分枝杆菌在初始治疗时已存在耐药性,而药物治疗有可能使其耐药性增加。结果表明抗结核治疗前及在治疗过程中对结核分枝杆菌进行耐药性及耐药基因检测对指导临床抗结核治疗很有实际意义。  相似文献   

18.
目的 了解三亚市结核分支杆菌耐药情况,为今后结核病防治策略提供参考依据.方法 对三亚市2013年11月-2015年12月确诊登记的涂阳肺结核患者痰标本进行分离培养,对经鉴定为结核分支杆菌的菌株进行异烟肼(H)、利福平(R)、乙胺丁醇(E)、链霉素(S)、氧氟沙星(Ofx)和卡那霉素(Km)等6种抗结核药物敏感性试验. 结果 276例肺结核患者痰标本培养阳性252例,经菌型鉴定249株(初治216例,复治33例)为结核分枝杆菌,其中耐药51株,总耐药率为20.48%,初治及复治患者总耐药率分别为18.06%、36.36%;耐多药14株,耐多药率为5.62%,初治及复治患者耐多药率分别为4.63%、12.12%.单耐药29例,单耐药率为11.65%,多耐药8例,多耐药率为3.21%;任何耐药顺位是S(11.24%)、H(10.04%)、R(7.63%)、Ofx(5.22%)、E(0%)、Km(0%);初、复治患者耐药率差异有统计学意义(P<0.05).结论 三亚市结核病耐药情况低于全国平均水平,但需要进一步加强初治和复治肺结核患者治疗管理,以减少耐药结核病的发生.  相似文献   

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