COX-2、VEGF及TGFβ1在急性白血病的表达及其临床意义

目的:检测不同类型急性白血病(AL)患者在不同阶段的COX-2、VEGF、TGFβ1等指标的表达变化情况,分析各检测指标在AL的诊断、治疗及预后判断中的临床意义.方法:选择90例AL患者为研究对象,以该院体检中心健康体检者40例为正常对照,采用ELISA方法检测血清COX-2、VEGF及TGFβ1水平,并对AL患者进行治疗前、后两个不同阶段的动态检测.结果:(1)初诊时,AL组的血清COX-2及VEGF的表达量较正常对照组明显升高,而TGFβ1表达量较正常对照组明显降低(P＜0.001).(2)治疗前AML组血清VEGF、COX-2及TGFβ1水平与ALL组患者比较,无显著差异.(3)CR(完全缓解)时,与治疗前比较VEGF与COX-2水平明显下降,TGFβ1显著升高(P＜0.001).(4)治疗前血清VEGF及COX-2表达水平与骨髓原始加幼稚细胞数呈正相关,而TGFβ1表达水平与之呈负相关,VEGF、COX-2的水平均与TGFβ1呈负相关.结论:COX-2及VEGF在AL患者血清中含量显著增加,完全缓解后其水平显著下降,而血清TGFβ1明显减低,完全缓解后其水平明显升高,提示血管生成可能在AL的发生、发展中具有一定作用.因此,动态监测AL患者血清COX-2、VEGF及TGFβ1水平,可作为AL病情评估进展的重要参考指标.     

GFI-1在慢性髓细胞白血病患者中的表达及意义*

目的：研究慢性髓细胞白血病(CML)患者中GFI-1的表达情况及其与BCR-ABL定量之间的关系,以探讨GFI-1在CML中的意义。方法：收集82例CML患者的骨髓标本,其中初诊慢性期50例,急变期6例,加速期6例,经伊马替尼治疗后细胞遗传学缓解期20例。以20例正常人的外周血或骨髓标本作为正常对照。应用实时定量PCR、Western blot等方法检测CML患者GFI-1、BCR-ABL的表达情况,分析两者基因表达量之间的关系。结果：（1）CML慢性期、急变期/加速期GFI-1的表达均明显高于正常对照组（P<0.05）;慢性期与急变期/加速期患者GFI-1的表达差异无统计学意义（P>0.05）;慢性期患者的GFI-1较缓解期表达高,差异有统计学意义（P<0.05）。（2）GFI-1与BCR-ABL定量之间成正相关（r2=0.7647,P<0.01）。结论：CML患者GFI-1表达水平异常,可能参与CML的发生发展。     

煤工尘肺患者血清转化生长因子β1、成纤维细胞生长因子含量检测

目的:探讨转化生长因子(TGF-β1)和成纤维细胞生长因子(FGF)在煤工尘肺发生发展中的意义.方法:分别采用双抗体夹心ELISA法、ABC-ELISA法测定50例煤工尘肺患者和50例健康对照人群血清TGF-β1、FGF的含量.结果:煤工尘肺患者血清TGF-β1、FGF的含量分别为(60.24±17.57)μg/L、(209.72±59.71)ng/L,高于对照组的(42.81±11.01)μg/L和(77.58±52.82)ng/L.Ⅰ期煤工尘肺患者2指标血清水平与Ⅱ、Ⅲ期患者比较,差异无统计学意义(P＞0.05).尘肺患者血清TGF-β1与FGF水平呈正相关(r=0.419,P＜0.05).结论:TGFβ1和FGF可能与煤工尘肺的发生发展有关.     

急性白血病患者血清及骨髓TGF-β1及其Ⅰ、Ⅱ型受体水平测定的临床意义

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)及其Ⅰ、Ⅱ型受体(TGFR1,TGFR2)对白血病预后的意义.方法采用SABC免疫组织化学方法观察TGF-β1及TGFR1,TGFR2在急性白血病患者的表达情况,并用ELISA法测定白血病患者血清及骨髓TGF-β1水平.结果白血病细胞TGF-β1表达水平与对照组比较差异无显著性(P>0.05).初诊患者的TGFR1及TGFR2表达水平非常显著低于对照组(P<0.01),急性非淋巴白血病(ANLLL)和急性淋巴白血病(ALL)之间差别无显著性(P>0.05).经治疗达完全缓解(CR)后,这2型受体的表达水平上升至接近正常,病情复发时则又降低.结论 TGF-β1及其Ⅰ、Ⅱ型受体水平的测定有助于判断白血病的预后.     

基于慢性粒细胞白血病（CML）中血管内皮生长因子（VEGF）的高表达探讨大黄蛰虫丸对CML K562细胞VEGF表达的影响

【目的】通过观察大黄蛰虫丸对慢性粒细胞白血病(CML) K562细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探索应用抗血管新生药物治疗CML的新途径。【方法】采用酶联免疫吸附（ELISA）法,检测CML慢性期（38例）、急变期（11例）患者及正常人（9例）血清中VEGF的含量;并用SD大鼠制备大黄蛰虫丸含药血清,用ELISA法检测K562细胞的VEGF含量。【结果】与正常对照组比较, CML慢性期、急变期患者血清VEGF含量显著升高(P<0.05或P<0.01);与正常对照组比较,大黄蛰虫丸含药血清预处理K562细胞的VEGF蛋白分泌量显著下降（P<0.01）,而且VEGF表达随着作用药物浓度的增大而递减。【结论】 VEGF在CML慢性期、急变期的含量增高,可能与CML的发病、进展及预后有关;大黄蛰虫丸可抑制慢性粒细胞白血病K562细胞VEGF的表达,使蛋白表达量下降,且呈浓度依赖性。     

慢性髓系白血病粘附相关分子整合素β1及局部粘附激酶的研究

目的研究整合素β1及局部粘附激酶(FAK)在慢性髓系白血病(CML)进展过程中的变化及干扰素治疗对FAK的可能作用。方法(1)应用流式细胞仪检测正常对照组、CML慢性期组及CML急变组骨髓CD34 细胞的胞膜表面CD29及胞质FAK表达量;(2)将正常对照及CML慢性期骨髓单个核细胞分为IFN处理组及非处理组培养48 h后提取总蛋白,应用Western blotting检测FAK含量变化。结果(1)CML慢性期骨髓CD34 细胞表面CD29的表达与对照组无显著差异,而胞内FAK含量则下降;(2)CML急变期骨髓CD34 细胞表面CD29的表达较慢性期明显升高而胞内FAK含量则较慢性期进一步下降;(3)IFN处理前后正常骨髓单个核细胞FAK的含量无明显差异;(4)IFN处理后CML骨髓单个核细胞FAK含量较未处理组明显上升。结论整合素β1及FAK表达变化可能是CML进展恶化的原因之一,而IFN-α可能通过恢复FAK含量来改善β1受体介导的粘附信号通路的缺陷。     

慢性粒细胞白血病患者VEGF及p53抗体的表达研究

目的:研究慢性粒细胞白血病(CML)患者血清中血管内皮生长因子(VEcF)及抑癌基因p53蛋白抗体的表达,分析两者间关系及与对cML疾病临床分期和预后评价的价值.方法:采用酶联免疫吸附试验ELISA法,分别检测20例CML患者血清中VEGF及p53抗体的含量,并观察两者与CML的临床分期和治疗效果的关系.结果:CML患者血清中的VEGF为(326.6±127.15)pg/ml、p53抗体为(0.467±0.09)pg/ml,两者含量均较正常人明显升高(P<0.001);同时CML慢性期患者的血清VEGF和p53抗体水平明显低于急变期患者(P<0.05).结论:血管生成的调控因子VEGF和抑癌基因p53蛋白抗体的表达与CML的疾病进程有关,两者之间存在一定的协同性,提示p53蛋白可能参与调节VEGF通路,两者高表达可预示CML疾病进展及不良预后.     

骨髓增生异常综合征和急性髓细胞白血病患者血清转化生长因子-β1的检测

目的:探讨骨髓增生异常综合征(MDS)和急性髓细胞白血病(AML)患者血清转化生长因子-β1(TGF-β1)水平及意义。方法:采用定量双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测MDS 32例、AML 21例及16例正常对照者血清中TGF-β1水平。结果:初诊AML患者与MDS患者血清TGF-β1水平均显著低于正常对照组(均P<0.01)。AML患者达完全缓解时TGF-β1水平恢复正常,未缓解和复发患者TGF-β1水平与初诊患者无显著性差异(P﹥0.05)。MDS低危型患者血清TGF-β1水平与高危型及初治AML患者相比为高,但三者间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:检测AML和MDS患者血清TGF-β1水平变化有助于判断病情,评价疗效,估计预后。     

慢性髓系白血病粘附相关分子整合素β1及局部粘附激酶的研究

目的 研究整合素β1及局部粘附激酶(FAK)在慢性髓系白血病(CML)进展过程中的变化及干扰素治疗对FAK的可能作用。方法 (1)应用流式细胞仪检测正常对照组、CML慢性期组及CML急变组骨髓CD34^ 细胞的胞膜表面CD29及胞质FAK表达量；(2)将正常对照及CML慢性期骨髓单个核细胞分为IFN处理组及非处理组培养48h后提取总蛋白，应用Western blotting检测FAK含量变化。结果 (1)CML慢性期骨髓CD34^ 细胞表面CD29的表达与对照组无显著差异，而胞内FAK含量则下降；(2)CML急变期骨髓CD34^ 细胞表面CD29的表达较慢性期明显升高而胞内FAK含量则较慢性期进一步下降；(3)IFN处理前后正常骨髓单个核细胞FAK的含量无明显差异；(4)IFN处理后CML骨髓单个核细胞FAK含量较未处理组明显上升。结论 整合素β1及FAK表达变化可能是CML进展恶化的原因之一，而IFN-α可能通过恢复FAK含量来改善β1受体介导的粘附信号通路的缺陷。     

Cyr61基因与慢性粒细胞白血病的相关性研究

目的探讨慢性粒细胞白血病（CML）患者骨髓单个核细胞(BMMNC)中富半胱氨酸61基因（Cyr61）的表达水平及其临床意义。方法应用半定量RT PCR和免疫组化技术分别检测38例CML患者和10例正常对照者（正常对照组）骨髓单个核细胞中Cyr61mRNA和蛋白水平的表达情况,CML患者中慢性期20例（慢性期组）,加速期11例（加速期组）,急变期7例（急变期组）。结果38例CML患者中,慢性期组、加速期组、急变期组Cyr61mRNA的表达明显高于正常对照组(P＜0.05)。Cyr61基因在加速期及急变期的表达高于慢性期(P<0．05),Cyr61基因在加速期和急变期的表达虽升高,但两者差异无统计学意义(P>0．05)。Cyr61蛋白在CML中的表达明显高于正常对照组,CML加速期和急变期中Cyr61蛋白的表达高于慢性期（P均<0．05）。结论Cyr61基因参与了CML的发生、发展过程,且与CML的急变有关,可作为预示CML急变的实验依据。     

慢性粒细胞白血病染色体核型与血清碱性磷酸酶水平的相关性

慢性粒细胞白血病（chronic myelocytic leukemia,CML）为一种起源于造血干细胞的恶性疾病,临床分为慢性期、加速期和急变期三个过程,在加速期和急变期过程中疾病本质发生变化,患者临床表现和治疗效果均有差异。我们对不同时期CML患者血清碱性磷酸酶（alkaliphosphatase,ALP）及骨髓细胞染色体核型进行了研究,旨在探讨血清ALP水平与CML临床分期及染色体核型变化的关系。现报告如下。     

BCR/ABL融合基因及细胞免疫表型检测在慢性粒细胞白血病病期演变中的意义

[目的]通过检测BCR/ABL融合基因及表面抗原在31例CML患者外周血单个核细胞中的表达,以寻找其与CML病程进展的相关性.[方法]收集31例CML患者外周血:①逆转录聚合酶链反应:检测BCR/ABL融合基因;②应用流式细胞仪检测外周血单个核细胞CD33、CD34、CD117及HLA-DR的表达.[结果]①CML患者31例,BCR/ABL融合基因检出总阳性率为83.9%;其转录本有两种:b3a2(165 bp)和b2a2(90bp).BCR/ABL融合基因的检出率在慢性期、加速期与急变期患者间差异无显著性意义,但缓解期检出阳性率与其他各期比较明显降低(P＜0.05).②CD33阳性检出率在各期之间比较无统计学意义(P＞0.05);CD34、CD117及HLA-DR阳性检出率在加速期及急变期明显高于慢性期(P＜0.05).[结论]①CML患者外周血单个核细胞BCR/ABL融合基因转录本有两种,即b3a2(165 bp)和b2a2(90bp).②b2a2转录本单独出现及b3a2和b2a2两种转录本同时出现的病例多发生在加速期和急变期,提示出现b2a2型转录本或两种转录本同时存在可能成为CML患者预后较差的标志.③CD34、CD117及HLA-DR的过度表达可提示CML患者病情不稳定及可能出现恶化.     

慢性粒细胞性白血病P-gp和Bcl-2表达及与病情进展的关系

目的 对多药耐药基因mdr-1基因产物P-糖蛋白(P-gp)和抑凋亡基因Bel-2产物Bel-2蛋白及与慢性粒细胞性白血病(CML)病情之间的关系进行分析。方法 用流式细胞仪检测慢粒白血病患者Pogp和Bel-2蛋白的表达，并分析其与CML病情的关系。结果 CML加速期／急变期Bel-2阳性率(77．78％)明显高于慢性期(41．17％)，有显著性差异(P＜0．05)；在加速期／急变期P-gp阳性率(44．44％)高于慢性期(29．14％)，但无显著差异(P＞0．05)。结论 Bel-2参与CML急变过程，高表达的Bc1-2可作为预示CML急变的实验依据。     

凋亡促进分子TFAR19在成人慢性髓性白血病骨髓细胞的异常表达

目的:研究成人慢性髓性白血病(chronic myeloid leukemia ,CML)骨髓细胞凋亡促进分子--TFAR19的表达,以探讨TFAR19在CML发病及疾病进展中的作用.方法:利用15种不同荧光标记的单克隆抗体标记骨髓细胞,通过流式细胞术检测未治CML慢性期病人、CML加速/急变期病人、及正常人骨髓不同细胞群细胞内TFAR19的表达.结果:20例未治CML慢性期及13例加速/急变期病人骨髓总的有核细胞内TFAR19平均荧光强度明显低于10例正常人组骨髓总的有核细胞,分别为5 793±1 536,7 260±781,P＜0.01及4 293±1 082,7 260±781,P＜0.01,其中未治CML慢性期及加速/急变期病人骨髓粒细胞内TFAR19平均荧光强度低于正常人组骨髓粒细胞,分别为6 240±1 734,8 317±726,P＜0.01,及5 759±1 487,8 317±726,P＜0.01;未治CML慢性期及加速/急变期病人骨髓淋巴细胞内TFAR19平均荧光强度低于正常人组骨髓淋巴细胞,分别为1 292±639,2 271±820,P＜0.01,及1 231±281,2 271±820,P＜0.01.CML加速/急变期病人总的有核细胞与未治CML慢性期病人相比,TFAR19表达进一步降低,分别为4 293±1 082,5 793±1 536,P＜0.01.结论:未治CML慢性期病人、CML加速/急变期病人骨髓总的有核细胞与正常人相比TFAR19表达降低,未治CML慢性期病人、加速/急变期病人骨髓粒细胞及淋巴细胞TFAR19表达均低于正常人组骨髓,CML加速/急变期病人总的有核细胞与未治CML慢性期病人相比,TFAR19表达进一步降低.TFAR19的异常表达可能在CML疾病进展中起一定作用.     

X连锁凋亡抑制蛋白及其相关因子1在慢性粒细胞白血病中的表达研究

目的 观察X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及XIAP相关因子1(XAF1)在慢性粒细胞白血病(CML)中的表达情况,评估其在CML诊断及预后分析中的应用价值.方法 选取CML患者42例,其中慢性期24例(CML慢性期组),进展期18例(CML进展期组,其中加速期7例,急变期11例).应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测患者骨髓细胞XIAP及XAF1 mRNA表达水平.对照组为非恶性血液病患者21例(非恶性血液病组)及急性白血病(AL)患者28例(AL组).结果 CML进展期组患者骨髓中XIAP mRNA表达水平高于CML慢性期组(P＜0.01)和非恶性血液病组(P＜0.01);而CML进展期患者骨髓中XAF1 mRNA表达水平低于CML慢性期(P＜0.05)和非恶性血液病组(P＜0.01);化疗后获得骨髓缓解的CML患者骨髓中XIAP mRNA的表达水平显著低于化疗前,而XAF1 mRNA的表达水平显著高于化疗前;XIAP mRNA及XAF1 mRNA表达水平之间呈负相关.结论 CML患者进展期XIAP及XAF1的联合检测及动态观察可作为CML临床辅助诊断、分期及预后判断的指标之一.     

急性白血病患者血清及骨髓TGF-β_1水平测定的临床意义

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在急性白血病中的临床意义。方法采用酶联免疫法(ELISA)测定68例急性白血病患者血清及骨髓中TGF-β1水平。结果急性白血病初诊患者血清及骨髓TGF-β1水平明显低于正常对照组(P<0.05),完全缓解期TGF-β1水平恢复正常,未缓解和复发患者TGF-β1水平与初诊患者无明显差异(P>0.05)。结论检测TGF-β1水平变化有助于急性白血病病情判断,可作为疗效观察的辅助指标。     

转化生长因子β1在充血性心力衰竭中的变化及其意义

目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)在充血性心力衰竭(CHF)患者中的变化及其临床意义.方法用酶免法测定49例基础疾病为缺血性心脏病、扩张型心肌病及高血压性心脏病的CHF患者和30例健康体查者的血清TGF-β1浓度,并进行比较分析.结果CHF患者血清TGF-β1水平明显低于正常对照组(P＜0.001),并与左室射血分值(LVEF)呈显著正相关(r=0.814,P＜0.001).心衰程度越重,TGF-β1降低越明显.结论CHF时血清TGF-β1浓度明显降低,并与CHF严重程度相关,TGF-β1可作为判断心衰严重程度的客观指标之一.     

动态观察慢性髓性白血病患者β-catenin 变化与细胞遗传学疗效的关系

目的 检测β-catenin在慢性髓性白血病(CML)各期中的表达情况,并动态观察CML患者β-catenin变化与细胞遗传学疗效的关系,为临床更合理制定个体化治疗方案提供依据.方法 采用RT-PCR和Western blotting,检测β-catenin在99例CML患者骨髓单个核细胞中mRNA和蛋白质水平的表达;94例CML患者服用伊马替尼前及后一年内每3月FISH检测bcr/abl融合基因及蛋白质水平的表达,分析β-catenin变化与细胞遗传学疗效的关系.结果 CML急变期、加速期患者β-catenin的表达明显增高(P＜0.001),而慢性期与正常人无明显差别(P＞0.05);β-catenin持续阴性患者主要细胞遗传学缓解率明显高于β-catenin持续阳性或转为阳性的患者(P＜0.001).结论 CML疾病进展阶段β-catenin的表达明显升高,β-catenin表达持续增高或转为阳性提示伊马替尼疗效可能不佳,应尽早采取其他治疗措施以提高缓解率.     

染色体核型动态监测在慢性粒细胞白血病中的应用

目的探讨染色体核型分析在慢性粒细胞白血病(CML)病程中的动态变化及意义。方法采用骨髓直接法和短期培养法制备染色体,应用R显带技术对92例CML患者进行动态染色体核型分析。结果 92例患者初诊时均为Ph染色体阳性(Ph+),在监测过程中,有18例(19.7%)患者发生核型演变,出现了额外的染色体。慢性期、加速期和急变期患者出现新的染色体核型异常的发生率分别为2.9%(2/69)、50.0%(1/2)和71.4%(15/21)。8例急变期病人进行了积极化疗,其中2例附加单纯的结构或数目的患者获得完全缓解(CR),附加3条以上染色体复杂异常的6例患者只有1例获得CR,3例无效,2例在半年内死亡。结论 Ph+CML出现额外染色体异常,提示病情进展,尤其是附加的染色体越复杂,预后越差。在CML病程中密切监测染色体核型动态变化有助于临床疗效观察、预后判断及指导临床及时调整治疗。     

糖尿病足溃疡患者血清和组织TGF-β水平与细菌感染程度的关系

目的 检测糖尿病足溃疡(DFU)患者血清和组织转化生长因子β(TGF-β)水平,分析其与细菌感染程度关系。方法 选取海南医学院第一附属医院诊治的DFU患者110例为观察组,选取同期2型糖尿病但未发生足部溃疡的患者110例为对照组。观察组检测血清及组织TGF-β水平,对照组检测血清TGF-β水平。分析血清和组织TGF-β水平与DFU患者细菌感染程度的相关性,分析患者细菌感染程度的影响因素,对比不同细菌感染程度的愈合率。结果 观察组血清TGF-β水平(52.34±18.45)ng/L低于对照组(87.02±20.61)ng/L,差异有统计学意义(t=13.149,P<0.001)。血清和组织TGF-β水平与细菌感染程度均成负相关(r=-0.601、-0.572,P均<0.001)。DFU病程、糖化血红蛋白、血清降钙素原、C反应蛋白、血清及组织TGF-β水平为细菌感染程度的风险因素,当控制DFU病程、糖化血红蛋白、血清降钙素原、C反应蛋白不变时,血清TGF-β水平每降低一个单位,细菌感染程度增加1级的风险增加3.417倍,组织TGF-β水平每降低一个单位,细菌感染程度增加1级的风...