P-选择素单抗抗唾液腺腺样囊性癌细胞裸鼠肺粘附的研究

目的观察P-选择素单克隆抗体(MonoantibodytoP-selectin,PS1)对腺样囊性癌肺高转移细胞肺粘附的抑制作用。方法裸鼠尾静脉注射P-选择素单抗后,经尾静脉注射氚标胸腺嘧啶核苷(3HTdR)标记的ACC-M细胞,分别检测细胞注射后2h、6h、18h的单位重量肺、肝组织每分钟核素脉冲数(CPM)。结果空白对照组单位重量肺组织在2h、6h、18h的CPM值分别是1875.75±11.53、1644.50±27.20和1466.50±125.95;P-选择素单抗组肺组织2h、6h、18h的CPM值分别是941.50±68.47、875.00±47.06和787.25±65.38。相同时间P-选择素单抗组肺组织CPM值明显低于对照组,两组间有显著性差异(P<0.001)。空白对照组单位重量肝组织的CPM值与P-选择素单抗组相比,2h、6h、18h各相同时间两组间无显著性差异(P>0.05)。结论P-选择素单抗静脉应用后,可减少肺组织内ACC-M细胞的粘附数量,但对相同时间肝组织内ACC-M细胞数量无显著影响。P-选择素单抗可能在抑制腺样囊性癌肺转移中发挥作用     

涎腺腺样囊性癌细胞生物学特性的探讨

一、材料和方法1.材料 :将正常涎腺 2 3例和腺样囊性癌 (ａｄｅｎｏｉｄｃｙｓｔｉｃｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＡＣＣ) 2 6例常规 10 %甲醛固定 ,石蜡包埋并切成4μｍ厚 切片以备ＨＥ染色和免疫组化染色。单克隆和多克隆抗体Ｓ 10 0Ａ1、Ｓ 10 0Ａ2、Ｓ 10 0Ａ4、Ｓ 10 0Ａ6和Ｓ 10 0Ｂ均由瑞士的Ｚｕｒｉｃｈ大学的ＣＷＨｅｉｚｍａｎｎ教授馈赠。其余的抗体来源如下 :ＧＦＡＰ6Ｆ 2 (ＭｏＡｂ) ,ＧＦＡＰ(ＰｏＡｂ ) ,ＮＳＥ(ＭｏＡｂ) ,ｖｉｍｅｎｔｉｎ(ＭｏＡｂ) ,ＥＭＡ (ＭｏＡｂ)和ＣＥＡ (ＰｏＡｂ)购自Ｄａｋｏ,Ｄｅｎｍａｒｋ。ＧＦＡ…     

精氨酸-天冬氨酸抗涎腺腺样囊性癌实验性肺转移的研究

目的 研究精氨酸－天冬氨酸（Arg-Asp,RD)抗涎腺腺样囊性癌实验性肺转移（salivary adenoid cystic carcinoma lung metastation,SACC-LM)的作用。方法 观察不同剂量、不同时间RD灌胃对SACC－LM的影响。结果30mg/kg和120mg/kgRD灌胃可抑制SACC－LM的形成；7．5mg/kg、30mg/kg、120mg/kgRD灌胃均可延长SACC－LM鼠的生存期。结论 RD毒性小、可经口给药，具有抗SACC－LM的作用。     

TNP-470抗人涎腺腺样囊性癌裸鼠肺转移作用的实验研究

肿瘤生长需依赖新生血管生成以维持其营养及代谢要求 ,抗肿瘤血管生成可成为控制肿瘤生长和转移新的治疗途径。我们观察血管生成抑制物TNP 4 70不同应用时间对肺高转移性涎腺腺样囊性癌 (ACC M )在裸鼠体内生长和转移的抑制作用 ,探讨其作用机理 ,为临床试验提供参考依据。1 材料与方法 :①动物实验 :ACC M细胞 (上海第二医科大学附属第九人民医院口腔外科肿瘤生物实验室建立并提供 )经裸鼠尾静脉注射形成肿瘤肺转移动物模型。 4 5只裸鼠随机被分成接种后第 1、7、14天用药组及对照组。用药组动物分别给予皮下注射 30mg/kg的TNP 4 70 …     

三氧化二砷诱导涎腺腺样囊性癌细胞凋亡的研究

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对人涎腺腺样囊性(SACC)细胞的作用机制,寻找治疗SACC的新途径.方法 应用As2O3对SACC细胞株作用,以 MTT、软琼脂集落形成和形态学分析法观察细胞的变化.结果 三氧化二砷作用后,癌细胞异形性逐渐消失,细胞凋亡现象明显,可见凋亡小体.结论 As2O3对SACC细胞株具有显著的抑制增殖、诱导分化和促进凋亡作用.     

细胞粘附蛋白在涎腺腺样囊性癌细胞中的表达

目的　探讨具有不同转移能力的涎腺腺样囊性癌（ａｄｅｎｏｉｄ ｃｙｓｔｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍ ａ; Ａ Ｃ Ｃ）细胞系中粘附分子表达的差异。方法　采用免疫组化方法对两株人腺样囊性癌细胞系（ Ａ Ｃ Ｃ２ 和 Ａ Ｃ Ｃ Ｍ）培养细胞及其 Ｓ Ｃ Ｉ Ｄ 小鼠移植瘤模型进行粘附分子 Ｃ Ｄ４４ｓ（标准型）、 Ｃ Ｄ４４ｖ６（变异型）、 Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ（ Ｅｃａｄ）、αｃａｔｅｎｉｎ（αｃａｔ）、βｃａｔｅｎｉｎ（βｃａｔ）的检测。结果　（１） Ａ Ｃ Ｃ肺转移灶的肿瘤细胞中粘附分子的表达普遍高于其皮下移植瘤细胞;（２） Ａ Ｃ Ｃ Ｍ 肺转移灶肿瘤生长缓慢,细胞分化相对较好,而其皮下移植瘤和腹腔种植瘤肿块生长迅速,细胞分化差;（３） Ｃ Ｄ４４ｖ６ 在 Ａ Ｃ Ｃ Ｍ 和 Ａ Ｃ Ｃ２ 体外培养细胞中均有弱阳性表达,而在异体移植瘤中包括皮下移植瘤和肺部转移灶均无表达。结论　 Ａ Ｃ Ｃ细胞中 Ｃ Ｄ４４ｓ 的表达受细胞分化程度影响,并影响了肿瘤细胞本身的生长状况; Ｅｃａｄ／ｃａｔ复合体的表达与否或表达强度与肿瘤细胞的分化成正比; Ｃ Ｄ４４ｖ６ 在涎腺 Ａ Ｃ Ｃ中的表达和转移能力可能无关。     

涎腺腺样囊性癌细胞凋亡的动物实验

目的　检测不同剂量的重组人肿瘤坏死因子α(rhTNF -α)对涎腺腺样囊性癌细胞凋亡的体内诱导。方法　利用人涎腺腺样囊性癌细胞株 (SACC - 83)建立裸鼠移植瘤动物模型 ,局部肿瘤内直接注射rhTNF -α,选用两个不同剂量 (1 0 0× 1 0 4 IU/kg和 1 0× 1 0 4 IU/kg) ,观察对肿瘤的抑制作用 ,并采用流式细胞术定量检测体内细胞凋亡及细胞周期的变化情况。结果　①A实验组的抑瘤率为 52 .1 6 % ,B实验组的抑瘤率为 73 .0 1 %。②用药后三组瘤体体积的变化有显著性差异。③三组流式细胞周期的变化及凋亡率有显著性差异。结论　①rhTNF -α可抑制裸鼠SACC移植瘤生长 ,使细胞增殖在G1 期发生阻滞。这种抑制主要通过细胞凋亡来实现的。②本文低剂量的rhTNF -α诱导凋亡的效果优于高剂量的rhTNF -α ,为临床SACC治疗提供了参考剂量     

涎腺腺样囊性癌预后因素的探讨

目的 探讨影响涎腺腺样囊性癌（ａｄｅｎｏｉｄ ｃｙｓｔｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＡＣＣ）预后的各因素。方法 对１９６０～１９８５年间收治并随诊１０年以上的ＡＣＣ１２例进行临床病理分析,对各项指标采用乘限法（ｐｒｏｄｕｃｔ ｌｉｍｉｔ）,估计各时点的生存率,并绘制Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ生存曲线,同时序检验（ｌｏｇ ｒａｎｋ ｔｅｓｔ）各组间差异。全部资料用生存分析软件完成。结果 １０年随诊临床与病     

阿斯匹林对腺样囊性癌细胞粘附能力影响的实验观察

目的观察阿斯匹林对血小板与腺样囊性癌细胞（ＡＣＣ－Ｍ细胞）粘附能力的影响。方法采用体外实验观察测定不同条件下ＡＣＣ－Ｍ细胞的粘附率。结果加入富血小板血浆（ＰＲＰ）后ＡＣＣ－Ｍ细胞的粘附率明显提高（Ｐ＜０．００１）;ＰＲＰ先经阿斯匹林处理,再作用于ＡＣＣ－Ｍ细胞,则ＡＣＣ－Ｍ细胞的粘附性改变不显著（Ｐ＞０．０５）;阿斯匹林抑制血小板对ＡＣＣ－Ｍ细胞粘附性的影响在０．０１～０．２５ｇ／Ｌ浓度范围内呈非剂量依赖性。结论血小板能提高ＡＣＣ－Ｍ细胞粘附性,阿斯匹林对血小板促进ＡＣＣ－Ｍ细胞粘附性有明显抑制作用。     

腹膜腔注射肝素对ACC-M细胞在裸鼠肺、肝组织分布的影响

目的　通过观察腹膜腔注射肝素对ACC-M细胞在裸鼠肺、肝组织的分布特点,研究其对腺样囊性癌肺高转移细胞肺粘附的抑制作用。方法　实验裸鼠腹腔注射肝素后,经尾静脉注入氚标胸腺嘧啶核苷(3HTdR)标记 ACC-M细胞,分别检测注射后2 h、6 h、18 h肺、肝组织单位重量的每分钟同位素脉冲数(CPM)。结果　裸鼠单位重量肺组织3H-ACC-M在不同时间由高到低依次是空白对照组2 h、6 h、18 h,肝素组6 h、2 h、18 h。相同时段肝素组明显低于对照组,两组间有显著性差异(P<0·001)。单位重量肝组织3H-ACC-M在不同时间由高到低依次是空白对照组为2 h、6 h、18 h,肝素组为2 h、6 h、18 h,相同时段两组间无显著性差异(P>0·05)。结论　肝素腹腔注射后可减少肺组织内ACC-M细胞数量,但对相同时段肝组织内ACC-M细胞数量无显著影响,肝素可能在抑制腺样囊性癌肺转移中发挥作用。     

As_2O_3对ACC-M细胞增殖及VEGF和bFGF表达的影响

目的:研究三氧化二砷(As2O3)对人类腺样囊性癌ACC-M细胞体外增殖及表达VEGF和bFGF的影响。探讨As2O3对ACC-M细胞表达VEGF和bFGF的影响。方法:倒置相差显微镜下观察ACC-M细胞生长情况,采用MTT法检测不同浓度As2O3作用不同时间对ACC-M的抑制效应;以RT-PCR、Western blot方法检测As2O3作用后ACC-M细胞的两种血管生成相关因子VEGF和bFGF表达的变化。结果:As2O3抑制ACC-M细胞呈时间-剂量依赖关系。RT-PCR检测显示,As2O3作用后ACC-M细胞VEGF和bFGF基因表达无明显变化。Western blot检测显示,As2O3明显抑制ACC-M细胞VEGF和bFGF蛋白表达,呈时间-剂量依赖关系。结论:As2O3在体外明显抑制ACC-M细胞;As2O3明显抑制ACC-M细胞VEGF和bFGF基因的蛋白产物,其作用机制可能为抗腺样囊性癌的血管形成。     

肝素对大鼠下切牙釉原蛋白水平及细胞凋亡的影响

目的建立肝素诱导骨质疏松大鼠模型,观察肝素的应用对大鼠下切牙釉原蛋白水平及其细胞凋亡的影响。方法取24只4周龄清洁级Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为两组,实验组每日于腹部皮下注射肝素1U/g,对照组于相同部位注射等体积0.9%氯化钠溶液。4周后取大鼠右侧股骨测骨密度值。同时取下颌骨,沿正中联合分为两份,一侧颌骨及下切牙脱钙后制作石蜡切片,行釉原蛋白免疫荧光染色;另一侧脱钙后制作石蜡切片,行原位末端标记(TUNEL)染色,观察下切牙细胞的凋亡情况。实验数据采用SPSS17.0统计软件包进行统计学分析。结果实验组大鼠股骨的骨密度值为(0.185±0.006)g/cm2,低于对照组的(0.196±0.011)g/cm2;实验组下切牙釉原蛋白免疫荧光染色强度为(0.0432±0.0043),低于对照组的(0.0570±0.0096);两组骨密度及荧光强度差异均具有统计学意义(P<0.05)。实验组未见细胞凋亡发生,对照组可见个别成牙本质细胞及中间层细胞凋亡阳性着色。结论肝素可诱导大鼠骨质疏松,降低下切牙釉原蛋白表达及抑制细胞凋亡的发生。     

TIP30蛋白在ACC-M细胞中的表达鉴定及作用

目的 :筛选含有TIP3 0的涎腺腺样囊性癌高转移细胞 ,检测TIP3 0蛋白在涎腺腺样囊性癌高转移细胞中的表达 ,检测携带外源性TIP3 0细胞的细胞周期分布变化。方法 :应用脂质体转染方法将TIP3 0导入ACC M细胞中 ,G418筛选阳性克隆 ,用免疫印记杂交法 (Westernblot)检测转染细胞中TIP3 0蛋白的表达 ;流式细胞仪测定细胞周期分布。结果 :筛选 14d后 ,含有TIP3 0的ACC M克隆形成 ,TIP3 0蛋白在ACC M中表达稳定 ;携带外源性TIP3 0的细胞G0 G1期比例增高 ,G2 M、S期细胞比例降低。结论 :ACC M细胞能稳定表达外源基因TIP3 0 ,携带外源性TIP3 0的细胞G0 G1期细胞比例增高 ,G2 M、S期细胞比例降低 ,从而影响ACC M细胞的生长 ,是TIP3 0抑制涎腺腺样囊性癌细胞生长的可能机制之一。     

TIP30蛋白在涎腺腺样囊性癌高转移细胞中的表达鉴定及作用

目的筛选含有Tip30的涎腺腺样囊性癌高转移细胞，检测TIP30蛋白在涎腺腺样囊性癌高转移细胞中的表达，检测携带外源性TIP30细胞的细胞周期分布变化。方法应用脂质体转染方法将TIP30导入ACC-M细胞中，G418筛选阳性克隆，用免疫印记杂交法(Western blot)检测转染细胞中TIP30蛋白的表达；流式细胞仪测定细胞周期分布。结果筛选14天后，含有TIP30的ACC-M单克隆形成，TIP30蛋白在ACC-M中表达稳定；携带外源性TIP30的细胞G0-G1期比例增高，G2-M、S期细胞比例降低。结论ACC-M细胞能稳定表达外源基因TIP30，携带外源性TIP30的细胞G0-G1期细胞比例增高，G2-M、S期细胞比例降低，从而影响ACC-M细胞的生长，是TIP30抑制涎腺腺样囊性癌细胞生长的可能机制之一。     

甲基丙烯酸甲酯单体对小鼠肝、肺、肾功能的影响

目的:研究口腔义齿修复常用材料甲基丙烯酸甲酯单体对小鼠肺、肝、肾组织的影响.方法:雄鼠50只分成2组,实验组和对照组.实验组小鼠强迫吸入挥发的甲基丙烯酸甲酯单体,对照组吸入空气,分别活体眼球后取血,血清检测ALP、GPT、GOT反映对肝功影响.颈椎脱臼处死法处死后取肝、肺、肾组织,包埋切片,观察其病理改变.结果:经统计学分析,血清中碱性磷酸酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶的含量实验组与对照组比较,有显著性差异(P<0.05);组织病理切片可直接观察到:实验组小鼠肺组织出现炎细胞浸润、纤维样变、肺泡破裂的现象.肾组织中肾小球萎缩、玻璃样变,及肾小囊、肾小管内纤维素样渗出.结论:甲基丙烯酸甲酯引起了小鼠肝功的变化及肺肾组织的病理学改变,提示甲基丙烯酸甲酯对小鼠肝、肺、肾都有毒性作用.     

Effect of irradiation on lung metastasis of VX2 carcinoma in maxillary sinus of rabbit

Summary Effects of local single irradiation on lung metastasis of VX2 carcinoma transplanted in maxillary sinus of rabbits were evaluated. When an inadequate irradiation for complete regression was given, the rate of pulmonary metastases in irradiated groups was remarkably increased compared with non-irradiated one, although tumor growths in irradiated ones were apt to be inhibited corresponding to the given dose. Three parameters detected in the study related to general conditions were not so significantly different among the groups although those in irradiated groups were apt to be worse than those in control. Histologically most remarkable difference between in control and irradiated groups was stromal respose. However, on the question of whether stromal response could react as a diffensive or promotive mechanisms against tumor metastases, further studies would be needed including analysis of infiltrative cells.     

The effect of immobilization of heparin and bone morphogenic protein-2 to bovine bone substitute on osteoblast-like cell's function

PURPOSE

This study was performed to investigate the ability of recombinant human-bone morphogenic protein-2 immobilized on a heparin-grafted bone substrate to enhance the osteoblastic functions.

MATERIALS AND METHODS

The Bio-Oss®, not coated with any material, was used as a control group. In rhBMP-2-Bio-Oss® group, rhBMP-2 was coated with Bio-Oss® using only deep and dry methods (50 ng/mL, 24 h). In heparinized rhBMP-2-Bio-Oss® group, dopamine was anchored to the surface of Bio-Oss®, and coated with heparin. rhBMP-2 was immobilized onto the heparinized- Bio-Oss® surface. The release kinetics of the rhBMP-2-Bio-Oss® and heparinized rhBMP-2-Bio-Oss® were analyzed using an enzyme-linked immunosorbent assay. The biological activities of the MG63 cells on the three groups were investigated via cytotoxicity assay, cell proliferation assay, alkaline phosphatase (ALP) measurement, and calcium deposition determination. Statistical comparisons were carried out by one-way ANOVA test. Differences were considered statistically significant at ^*P<.05 and ^**P<.001.

RESULTS

The heparinized rhBMP-2-Bio-Oss® showed more sustained release compared to the rhBMP-2-Bio-Oss® over an extended time. In the measurement of the ALP activity, the heparinized group showed a significantly higher ALP activity when compared with the non-heparinized groups (P<.05). The MG63 cells cultivated in the group with rhBMP-2 showed increased calcium deposition, and the MG63 cells from the heparinized group increased more than those that were cultivated in the non-heparinized groups.

CONCLUSION

Heparin increased the rhBMP-2 release amount and made sustained release possible, and heparinized Bio-Oss® with rhBMP-2 successfully improved the osteoblastic functions.