三种外阴洗液抑菌效果的比较

本文对常用外阴洗液聚维酮碘、高锰酸钾及克菌宁在等同条件下作了体外抑菌实验观察，证实聚维酮碘稀释至４０倍时，对淋病双球菌、白色念珠、阴道毛滴虫，在２ｍｉｎ内均能完全杀灭。三种外阴洗液抗淋病双球菌、白色念珠菌及阴道毛滴虫的效果以聚维酮碘为最佳，抗菌力强，抗菌谱广，高锰酸钾次之，克菌宁逊于高锰酸钾。     

427株深部真菌鉴定结果分析

目的我院患者真菌分离情况。方法回顾分析2009年1～7月间我院门诊及住院患者送检的3436件各类标本,统计出真菌的分离率。结果真菌分离率为28.9%;61岁以上的老年患者真菌分离率占真菌总分离率的80.8%;ICU病区、风湿科、血液科和内分泌科60岁以下患者高于其他科室;呼吸科等科室男性患者多于女性患者。结论应利用真菌耐药监测网络及时发布病原体分布、耐药信息,是抗生素使用＂到位而不越位＂,以降低真菌感染率。     

黄芩提取物体外抗流感病毒的比较研究

目的：探讨黄芩的不同提取物在抗流感病毒方面的差异性。方法：使用流感病毒感染大鼠并造模,1周后观察空白组、感染组、水提取物（水提）组、醇提取物（醇提）组和利巴韦林组的大鼠的死亡情况,计算死亡率,监测大鼠体内病毒,了解感染者是否被治愈。结果：黄芩的水提物和醇提物均表现出不同程度的抗流感病毒作用,且两者在抗流感病毒方面与利巴韦林差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：黄芩的水提物和醇提物均可用于抗流感病毒,并且醇提物要优于水提物。     

六种中草药对深部感染真菌的体外抑菌效果

探讨中草药对白色念珠菌和新生隐球菌的抑制作用。方法：用琼脂平板扩散法,琼脂平板连续稀释法。结果：黄莲,知母,七叶一枝花,黄苓,大黄,五蓓子对上述两菌均具抑菌作用,抑菌圈直径在16－42mm不等,这些药物对白色念珠菌的最低抑菌浓度（MIC,mg/ml)分别为5．0,14．29,10．0,20．0,100．0,100．0;对新型隐球菌的MIC为：3．88,8．33,16．67,10．0,25．0,10．0。结论：黄莲,知母,七叶一枝花等六种中草药对白色念珠菌和新型孢球菌体外试验具有较强的抑菌作用,其中黄莲的抑菌作用最强,抑菌圈最大,MIC最低。     

胡桃楸提取物抗深部感染真菌的活性研究

目的探讨胡桃楸提物对常见深部感染真菌生长的抑制作用。方法以NCCLS方案检测胡桃楸提取物和伊曲康唑(ICZ)、氟康唑(FCZ)、两性霉素B(AMB)和5-氟胞嘧啶(5-FC)对白念珠菌、新生隐球菌和烟曲霉菌体外最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MFC)。结果胡桃楸提取物对深部致病性真菌有较强的抑菌和杀菌作用,其作用强度与ICZ、FCZ相当,但逊色于AMB和5-FC。结论胡桃楸提取物对深部致病性真菌体外生长有较强的抑菌和杀菌作用。     

纸片扩散法检测临床分离深部真菌对氟康唑的敏感性

目的探讨294株临床分离酵母样真菌对氟康唑的体外敏感性,以指导临床用药。方法收集自2004年1月至2007年5月从我院住院患者送检的标本,应用美国临床实验室标准研究院（CLSI）认可的酵母菌纸片扩散法进行敏感实验。结果294株酵母样真菌菌种分布显示,白色念珠菌常见,有214株,占72.8%;光滑念珠菌34株,占11.6%;热带念珠菌32株,占10.9%;克柔念珠菌4株,占1.4%;其它念珠菌属10株,占3.4%;白色念珠菌,光滑念珠菌,热带念珠菌,克柔念珠菌,及其它念珠菌属对氟康唑的耐药率存在差异,耐药率分别为4.2%、17.6%、0.0%、50.0%、33.3%,并呈逐年升高趋势。     

两种抑菌剂抑菌效果的实验室观察

近年来,由于人们对传染病防护意识的增强,高效、低毒、安全、方便的新型抑菌产品逐渐成为人们的生活必需品之一,目前市面上抑菌产品的种类很多,其抑菌效果及相关性能各有不同,常出现使用不当的现象。而从植物中提取的抑菌产品备受人们的喜爱。本研究对某复配型中草药抑菌产品和有效成分为5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮单剂型抑菌剂进行了实验室观察比较,以便指导人们合理使用抑菌产品。     

两种方法对2类消毒剂杀菌效果的比较

目的为了解不同版次“消毒技术规范”规定的试验方法与判定依据对评价消毒剂杀菌效果的差异。方法按照第3版规范的载体浸泡定量杀菌试验和2002年版（第4版）规定的悬液定量杀菌试验方法对含氯、含碘二类消毒剂杀菌效果进行了比较。结果用第3版规范的载体法达到消毒合格所需剂量，含氯消毒剂对枯草杆菌黑色变种芽胞为有效氯1000—2000mg／L，作用30—60min；含碘消毒剂对白色念珠菌为400—500mg／L，作用10—40min；而按照2002年版规范悬液法达到消毒合格所需剂量，含氯消毒剂对枯草杆菌黑色变种芽胞为有效氯4000—5000mg／L，作用30—60min；含碘消毒剂对白色念珠菌有效碘〈300mg／L分别作用1．5min-3．0min。结论两种方法所得的合格剂量有较大差异，2002年版规范悬液法含氯消毒剂所需剂量增加，对含碘消毒剂剂量降低，作用时间明显缩短。     

黄芩中黄芩甙不同提取方法的比较

黄芩中黄芩甙不同提取方法的比较＊赵越平雷其云苏永芝苏士银蒋永培（第四军医大学西京医院药品制剂科西安７１００３３）关键词黄芩黄芩甙紫外分光光度法中图号Ｒ２８４．２黄芩的主要有效成分为黄芩甙．测定黄芩甙的含量，是控制有黄芩中药复方制剂的质量指标之一．我们...     

微量热法检测两种药物对白色念珠菌的抑制效果

目的:应用微量热法检测两种药物对白色念珠菌的抑制效果。方法:挑取白色念珠菌单菌落接种于沙氏培养基中,37℃恒温摇床培养,然后将菌液稀释至108 CFU/ml备用。再将稀释后的细胞贮备液、培养基及不同浓度的药物加入安瓿瓶中,密封、擦净安瓿瓶后将其放入TAM量热仪测量通道中,记录反应过程的热输出功率曲线。结果:获得了白色念珠菌在不同药物作用下的热谱曲线,这两种药物对白色念珠菌的生长都有明显抑制作用。结论:根据药物浓度与抑制率的关系求出了两种药物的半抑制浓度,说明抑菌效果氯已定强于益康唑。氯已定的有效杀菌浓度为5.3μmol/L。     

Comparison of cell wall proteins in putative Candida albicans & Candida dubliniensis by using modified staining method & SDS-PAGE

Background

Candida species are among the most common causes of opportunistic fungal diseases. Among Candida species, Candida albicans is responsible for most infections. Having many strains, C. albicans is very polymorph. C. dubliniensis is very similar to albicans species both morphologically and physiologically. For an infection to occur, cell wall proteins play an important role as they enable yeast to adhere to host cells and begin pathogenesis. Therefore, we decided to extract these proteins and examine them through common molecular methods of protein analysis including SDS-PAGE.

Methods

Initially cell wall proteins of two C. albicans strains (CBS 562 and PTCC6027) and one C. dubliniensis strain (CBS7987) were extracted by using a solution of beta-mercaptoethanol and ammonium carbonate. After dialysis against Tris-HCL buffer, SDS gel electrophoresis was performed on the proteins extract. Bands were then visualized by using three different staining methods among which one method provided improved detection.

Results

By using Coomassie Brilliant Blue staining method, proteins with molecular weight of 42, 66.2 and 200 kDa were detected. By using Silver staining method, proteins with molecular weight of 21.5, 28.5 and 37 kDa were detected. However, using combined Coomassie Brilliant Blue & Sliver staining method visualized more bands resulting in improved detection.

Conclusion

To answer many existing questions about fungal diseases, fungi cell wall proteins are necessary to be examined. To commence such examinations, a simple step may be an SDS-PAGE performance on as many strains as possible. A combined staining method can enhance bands detection.     

敏感和耐药白念珠菌磷脂酶活力与其毒力关系的研究

目的：探讨白念珠菌氟康唑耐药和敏感菌株磷脂酶活力与菌株毒力之间的关系。方法：根据美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）制订的M27-A方案筛选临床分离的白念珠菌氟康唑耐药（MIC＞64μg/ml）及敏感菌株（MIC＜8μg/ml）各15株。用蛋黄平板法培养氟康唑耐药及敏感菌株,测量其产生沉淀圈的大小,计算菌落直径与沉淀圈直径的比值(PZ值),比较两组间磷脂酶活力的不同。从敏感和耐药菌株中分别选取磷脂酶活力不同的菌株,通过尾静脉注射感染小鼠,以小鼠平均存活时间比较耐药和敏感菌株毒力的不同。结果：15株耐药菌中12株产生特异沉淀圈,PZ值为0.786±0.055;敏感菌株中8株无特异沉淀圈,PZ值为0.913±0.078。耐药组和敏感组小鼠平均存活天数分别为(10.22±2.44)d和(12.83±1.51)d。耐药和敏感菌株磷脂酶活力差异有统计学意义（P＜0.01）;两组小鼠平均存活期差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：耐药菌株磷脂酶活力及毒力高于敏感菌株,白念珠菌分泌的细胞外磷脂酶活力及菌株致病性与白念珠菌耐药发生有一定关系。     

15种中草药对小鼠吞噬细胞吞噬白假丝酵母菌的影响

目的：探讨黄芩等中草药50%乙醇提取物对小鼠中性粒细胞吞噬白假丝酵母菌的影响.方法：采用BALB/c小鼠体内吞噬实验法,设立对照组与试验组,对比观察实验组与对照组小鼠中性粒细胞对白假丝酵母菌的吞噬百分数及吞噬指数.结果：（1）吞噬百分数均值及P值：黄芩85.1%、P〈0.01,牡丹皮87.6%、P〈0.01,羌活51.7%、P〈0.05,大黄53.8%、P〈0.05,千里光66.3%、P〈0.05;（2）吞噬指数均值及P值：黄芩2.09、P〈0.05,牡丹皮1.523、P〈0.05;（3）知母、五蓓子、大蒜、茵陈、白花蛇舌草、黄精、补骨脂、金银花、桑枝、海金沙吞噬百分数及吞噬指数的P值均大于0.05.结论：黄芩、牡丹皮、羌活、大黄、千里光具有增强中性粒细胞对白假丝酵母菌的吞噬作用,知母、五蓓子、大蒜、茵陈、白花蛇舌草、黄精、补骨脂、金银花、、桑枝、海金沙对中性粒细胞吞噬作用无明显影响.     

激素和外植体对黄芩短枝生根和愈伤诱导的影响

目的研究不同激素组合和外植体对黄芩短枝生根和愈伤诱导的影响,筛选出最佳的短枝生根和愈伤诱导及继代培养基。方法以1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的萘乙酸(NAA),配制成5种短枝生根培养基;以MS为基本培养基,添加不同浓度BA和NAA或2,4-D,配制成5种培养基。将剪下的枝条用清水冲洗2~3 h,再用2%次氯酸钠溶液浸泡15 min,最后用无菌水冲洗4~5次,将带1个腋芽或不带腋芽的茎段和叶片接种到培养基中。结果1/2MS培养基是最佳的1年生和2年生短枝生长和生根培养基,生根率达100%,腋芽的增殖倍数高达3.1和3.4;诱导愈伤组织的最适培养基及愈伤最佳的继代培养基均为MS+BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L。结论高浓度的生长素对黄芩短枝生长势和生根有抑制作用,高浓度BA配比较低浓度NAA适于愈伤诱导,1年生和2年生短枝生根时对生长素的反应有一定差异。     

白假丝酵母菌分离和鉴定方法的探讨

目的:建立一种白假丝酵母菌培养和鉴定的方法。方法:选用经改良沙氏培养基培养白假丝酵母菌,观察假菌丝、厚膜孢子,芽管形成,并结合糖发酵和其他生化试验给以初步鉴定,新法提取DNA作最后鉴定。结果:形态学观察和生化反应证实菌种为Candida albicans1型。DNA提取表明菌种与标准株DNA带型完全相同,提取DNA浓度(1.06±0.29)μg/μl,纯度好(OD260/OD280>1.7)。结论:本法制备的培养基适合白假丝酵母菌的生长和鉴定。     

黄芩茎叶水溶物中枢抑制作用的实验研究

[目的 ]观察黄芩茎叶水溶物对小鼠中枢神经系统的抑制作用。 [方法 ]记录小鼠走动时间、前肢上举次数以及小鼠条件反射消失数。[结果 ]黄芩茎叶水溶物 (按生药计算 30 g·kg- 1)灌胃 ,可明显减少小鼠走动时间、前肢上举次数、对抗苯甲酸钠咖啡因的中枢兴奋作用以及加强戊巴比妥钠与氯丙嗪的镇静作用。 [结论 ]黄芩茎叶水溶物对小鼠中枢神经系统有明显的抑制作用 ,与中枢抑制药有协同作用     

一种四步法提取分离白念珠菌总蛋白质方法的建立

目的:建立白念珠菌总蛋白质分步提取分离的方法.方法:利用四种溶解能力不同的溶液分步提取白念珠菌总蛋白,定量后,分别进行一维等电聚焦分离和二维聚丙烯酰胺凝胶电泳分离.结果:成功分步提取获得白念珠菌不同溶解度的蛋白,得到各步提取蛋白的二维凝胶电泳图谱.结论:四步法提取白念珠菌总蛋白质是研究白念珠菌蛋白质组的有效方法,为进一步研究白念珠菌耐药机制以及抗真菌药物作用机制奠定基础.     

白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶活性与其毒力的关系

目的： 探讨临床白色念珠菌感染者不同标本中分离的白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶活性与其毒力的关系。方法： 分别采用牛奶平板和卵黄培养基法检测白色念珠菌感染者不同标本（痰、血液、鹅口疮、伤口、阴道分泌物）中分离的190株白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶的活力，分别将产酶株的菌丝相和孢子相菌悬液（5×10⁶ CFU•mL^-1）注射小鼠尾静脉，1个月内观察小鼠死亡率及平均存活时间，以平均存活时间评价菌株毒力。结果：190株白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶阳性检出率分别为83.68%和85.26%。动物实验结果表明，菌丝相白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶的活力均显著高于孢子相(P<0.01，P＜0.05)；注射菌丝相白色念珠菌的小鼠死亡率高于注射孢子相的小鼠(P<0.05)，且平均存活期短于注射孢子相的小鼠(P<0.01)。结论：分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶是白色念珠菌重要毒力因子，酶活力可直接地反映其毒力和致病性。