晚期胃癌ERCC1和BRCA1表达与铂类化疗疗效及预后关系

目的：探讨晚期胃癌癌组织中切除修复交叉互补基因1（excision repair cross-complementing gene 1,ERCC1）和乳腺癌易感基因l（breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1）的表达状况及其与患者临床病理特征、铂类方案化疗疗效及预后之间的关系.方法：采用免疫组化方法检测晚期胃癌癌组织中ERCC1和BRCA1蛋白的表达状况.结果：晚期胃癌癌组织中ERCC1和BRCA1蛋白表达阳性率分别为28.9％和19.0％.ERCC1和BRCA1蛋白的表达与患者的年龄、性别、PS评分及肿瘤分化程度均无关（P＞0.05）,胃癌癌组织中ERCC1蛋白表达与BRCA1蛋白表达呈正相关（r=0.248,P=0.006）.ERCC1和BRCA1蛋白表达阴性患者铂类方案化疗有效率高于表达阳性患者（P＜0.05）.ERCC1和BRCA1蛋白表达阴性患者化疗后,中位生存期高于表达阳性患者（P＜0.05）.COX回归模型分析结果显示ERCC1和BRCA1蛋白的表达状态及肿瘤分化程度是影响胃癌预后的独立因素.结论：晚期胃癌ERCC1和BRCA1蛋白的表达状态可作为化疗方案的选择及预后判断的依据.     

胃癌组织与外周血淋巴细胞ERCC1表达的相关性研究

目的 探讨切除修复交叉互补基因1（ERCC1）在胃癌的癌组织和外周血淋巴细胞（PBLC）中表达的相关性及其与临床病理特征的关系。方法 采用免疫组化法检测53例胃癌术后癌组织和PBLC中ERCC1的表达,另取20例胃肠道良性疾病和正常人的PBLC作为对照。结果 胃癌的癌组织、PBLC和对照组的PBLC 中ERCC1的阳性表达率分别为67.9％、56.6％和10.0％,胃癌的PBLC中ERCC1的阳性表达率显著高于对照组（P＜0.05）。在胃癌的癌组织和PBLC中,ERCC1表达与年龄、性别、病理类型、临床分期、T分期、淋巴结转移和分化程度均无关。胃癌的癌组织与PBLC中ERCC1的表达呈正相关（r=0.475,P=0.000）。结论 通过检测胃癌的PBLC中ERCC1表达可以间接反映癌组织中ERCC1的表达状况。     

切除修复交叉互补基因1在乳腺癌中的表达及意义

目的 探讨切除修复交叉互补基因1（ERCC1）在乳腺癌组织中的表达与临床病理特征及预后的关系。方法 应用实时荧光定量PCR技术检测363例乳腺癌组织中ERCC1 mRNA的相对表达水平,分析其表达与乳腺癌临床病理特征及预后之间的关系。结果 363例乳腺癌组织标本中ERCC1 mRNA的中位表达水平为1.02×10-2,其中ERCC1 mRNA高表达者181例,ERCC1 mRNA低表达者182例。 ERCC1 mRNA表达水平与ER、PR表达有关（P＜0.05）,而与患者的年龄、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、病理类型、组织学分级、HER-2的表达均无关（P＞0.05）。ERCC1 mRNA高表达与低表达者的中位无病生存期（DFS）均为未达到,差异无统计学意义（P＞0.05）。ERCC1 mRNA高表达者的中位无进展生存期（PFS）为34.0个月（95%CI：32.004～35.996个月）,低表达者的中位PFS为未达到,两组差异有统计学意义（P=0.017）。结论 乳腺癌中ERCC1 mRNA的表达可能与患者的雌激素代谢相关,检测ERCC1 mRNA的表达水平可能有助于判断乳腺癌患者的生存和预后。     

肺癌细胞与血液细胞ERCC1基因的表达及其临床意义

目的 探讨铂类药物相关的切除修复交叉互补基因1（ERCC1） mRNA在不同病理组织学类型肺癌细胞及其对应患者血液细胞中的表达水平和临床意义。方法 收集105例肺癌标本石蜡组织及其对应的血液样本,其中腺癌73例,鳞状细胞癌22例,小细胞癌10例,利用实时荧光定量PCR技术检测肺癌石蜡组织和对应血液样本中ERCC1 mRNA的表达水平,分析其在肺癌不同病理组织学类型中的表达差异。结果105例肺癌石蜡组织中ERCC1 mRNA表达为4.579±1.926,对应的血样中为8.324±1.280,差异有统计学意义（P＜0.05）。ERCC1 mRNA在鳞状细胞癌、腺癌、小细胞癌中的表达分别为4.366±1.822、4.724±1.434和4.366±1.822,差异无统计学意义;在对应的血液细胞中表达分别为8.146±1.501、8.336±1.928和8.664±1.848,差异亦无统计学意义。3种病理组织学类型肺癌细胞ERCC1 mRNA表达水平与对应血液细胞相比,差异均有统计学意义（P＜0.05）。肺癌细胞和血液细胞中ERCC1 mRNA表达水平无相关性（r=0.329,P＞0.05）。结论 根据肺癌病理组织学类型选择铂类化疗并无指导意义,需要进一步进行ERCC1 mRNA的个体化检测,目前尚不能用血液细胞代替肿瘤组织细胞检测ERCC1 mRNA表达水平以评价铂类药物的疗效及毒副反应。     

乳腺癌组织中核仁纺缍体相关蛋白1表达与腋窝淋巴结转移的关系

摘 要：［目的］ 探讨乳腺癌组织中核仁纺缍体相关蛋白1（nucleolus spinosa-related protein 1,NuSAP1）的表达与腋窝淋巴结转移的关系。［方法］ 采用免疫组织化学染色法检测100例乳腺癌组织（浸润性导管癌）及其配对的癌旁组织（距离肿瘤边缘＞3cm）中NuSAP1、Hedgehog信号通路相关蛋白（Smo和Gli-1）表达水平。采用Logistic多因素分析影响乳腺癌腋窝淋巴结转移的影响因素。［结果］ 乳腺癌组织中NuSAP1高表达率为65%（65/100）,明显高于癌旁组织的18%（18/100）（χ2=45.945,P＜0.001）。NuSAP1高表达组中WHO分级Ⅲ级、TNM Ⅲ期、腋窝淋巴结转移率均高于低表达组（P＜0.05）。WHO分级Ⅲ级（OR=1.689,95%CI：1.240~3.333）、TNM Ⅲ期（OR=1.543,95%CI：1.345~3.602）、三阴性乳腺癌（OR=2.786,95%CI：1.764~4.002）和NuSAP1高表达（OR=2.507,95%CI：1.684~3.971）是乳腺癌患者腋窝淋巴结转移的独立影响因素（P＜0.05）。NuSAP1表达水平与腋窝淋巴结转移数目呈正相关（r=0.561,P＜0.001）。NuSAP1表达与Smo、Gli-1表达水平呈正相关（r分别为0.748和0.528,P均＜0.001）。［结论］ NuSAP1可能通过激活Hedgehog信号通路参与腋窝淋巴结的转移。     

胃癌组织中Notch1、Jagged1、Hes1的表达及临床意义

摘 要：［目的］ 探讨胃癌组织及其相应癌旁组织中Notch1及其配体Jagged1、下游信号Hes1的表达情况,并分析其临床意义。［方法］ 采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测胃癌组织及其相应的癌旁组织（距癌组织＞5cm）中Notch1、Jagged1、Hes1 mRNA的表达,免疫组织化学染色法检测Notch1、Jagged1、Hes1蛋白的表达,并分析三种蛋白的表达与胃癌临床病理特征的关系。［结果］ 免疫组织化学染色、qRT-PCR结果均显示Notch1、Jagged1在癌旁组织中的表达高于胃癌组织（P＜0.05）,Hes1在癌旁组织中的表达低于胃癌组织（P＜0.05）。Notch1、Jagged1、Hes1的表达与肿瘤脉管浸润、分化程度、浸润深度相关（P＜0.05）,而与年龄、性别、TNM分期、淋巴结转移无关（P＞0.05）。胃癌组织中Notch1与Jagged1的表达呈正相关（r=0.032,P＜0.05）,而Jagged1与Hes1的表达呈负相关（r=-0.862,P<0.001）。［结论］ Notch信号通路中Notch1受体及其配体Jagged1在胃癌组织中低表达,Hes1在胃癌组织中高表达,提示Notch1、Jagged1、Hes1的表达有望为胃癌诊断提供理论依据。     

Neuropilin-1及VEGF在胃癌组织中的表达与微血管生成的关系

  目的  探讨胃癌组织中神经纤毛蛋白-1（Neuropilin-1,NRP-1）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达与微血管生成及胃癌生物学行为的关系和意义。  方法  应用RT-PCR法检测自2011年5月至2013年5月天津医科大学肿瘤医院72例手术切除的胃癌组织及癌旁正常组织中NRP-1 mRNA和VEGF mRNA的表达,免疫组织化学SP法检测组织中CD105标记的新生血管内皮细胞并测定微血管密度（MVD）,统计分析胃癌组织中NRP-1 mRNA、VEGF mRNA的表达与临床病理因素及MVD之间的关系。  结果  胃癌组织中NRP-1 mRNA、VEGF mRNA的表达及MVD计数均高于正常组织（P＜0.05）,且与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移密切相关（P＜0.05）;胃癌组织中NRP-1 mRNA表达和VEGF mRNA表达呈正相关（r=0.58,P＜0.01）,NRP-1 mRNA的表达与MVD呈正相关（r= 0.52,P＜0.01）,VEGF mRNA的表达与MVD呈正相关（r=0.74,P＜0.01）。  结论  Neuropilin-1及VEGF的高表达促进了肿瘤微血管生成且与胃癌的进展密切相关,表达存在协同作用,两者的联合检测可在一定程度上判断胃癌侵袭性及进展,并对指导肿瘤抗血管治疗具有一定的价值。      

肝癌缺失-1基因表达与结肠癌分期相关性研究

目的 探讨肝癌缺失-1（DLC-1）基因mRNA表达与结肠癌分期及淋巴结转移的相关性.方法 收集2009年9月至2011年9月手术切除结肠癌标本共60例,以外伤、结肠憩室、结肠炎手术治疗留取的正常组织10例为对照.采用反转录PCR定量检测结肠癌组织、癌旁组织、正常组织DLC-1基因mRNA的表达.依据TNM分期进行分期,采用直线相关分析DLC-1基因表达与结肠癌分期及淋巴结转移的相关性.结果 结肠癌组织DLC-1基因mRNA的表达水平（0.085±0.004）明显低于癌旁组织（0.562±0.063）,癌旁组织低于正常组织（1.000±0.003）.DLC-1基因mRNA表达水平与结肠癌分期呈负相关（r=0.51,P＜ 0.01）,DLC-1基因mRNA表达水平与淋巴结转移呈负相关（r=0.46,P＜ 0.05）.结论 DLC-1基因mRNA表达与病理学分期、淋巴结转移率呈负相关,DLC-1基因在结肠癌发生、发展中扮演重要角色,可能是研究结肠癌新的突破口.     

EGR1在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的:探究早期生长反应基因1（early growth response 1,EGR1）在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法:下载并提取TCGA数据库中EGR1的表达数据;购买乳腺癌组织芯片（HBreD090CS01）,并采用免疫组织化学法检测EGR1在乳腺癌中的表达;利用Kaplan-Meier Plotter数据库分析EGR1在乳腺癌中的预后价值;利用TIMER数据库分析乳腺癌中EGR1表达与免疫细胞浸润的关系。结果:相较于癌旁组织,EGR1 mRNA在乳腺癌中的表达显著下调（P＜0.001）;EGR1蛋白在45例乳腺癌组织中有18例呈低表达,27例呈高表达,在45例癌旁组织中有9例呈低表达,36例呈高表达,差异具有统计学意义（P=0.038）;EGR1表达与乳腺癌分化程度相关（P=0.003）,与患者年龄、肿瘤大小、N分期、临床分期等无关（P＞0.05）;EGR1低表达的乳腺癌患者,其无复发生存率显著低于EGR1高表达的患者（P＜0.001）,但EGR1表达与乳腺癌患者的总生存率无明显相关性（P＞0.05）;乳腺癌组织中EGR1表达与B细胞浸润水平呈负相关（P＜0.001）,与CD8+T细胞、CD4+T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞浸润水平呈正相关（P＜0.001）。结论:EGR1在乳腺癌组织中的表达较癌旁组织低,且与肿瘤分化程度、预后及免疫浸润有关,有望成为乳腺癌预后评估的分子标志物及治疗的潜在靶点。     

食管鳞状细胞癌患者外周血和肿瘤组织中ERCC1及ERCC2表达的相关性研究

目的:探讨检测食管鳞状细胞癌患者外周血替代肿瘤组织中切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complementing 1,ERCC1)及ERCC2表达的可行性.方法:收集39例食管癌患者的术前外周血、肿瘤组织及癌旁正常组织,应用RT-PCR法检测ERCC1和ERCC2 mRNA的表达,应用ELISA法检测血清蛋白中ERCC1和ERCC2的含量,以10名健康志愿者外周血作为对照.结果: ERCC1和ERCC2 mRNA以及蛋白在健康志愿者外周血中的表达高于食管癌患者外周血(P<0.05);食管癌患者外周血中ERCC1和ERCC2 mRNA的表达水平与其在肿瘤组织中的表达水平呈明显的正相关关系(P<0.01).结论:食管鳞状细胞癌患者外周血中ERCC1和ERCC2 mRNA的表达水平能在一定程度上间接反映其在肿瘤组织中的表达水平.     

肺癌ＥＲＣＣ１调控区基因多态性与ｍＲＮＡ定量表达关联分析

目的：探讨非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）组织ＥＲＣＣ１调控区基因ＳＮＰ位点与正常对照胚系相应基因的分布状态,以及肺癌组织ＥＲＣＣ１基因ｍＲＮＡ表达与其基因分型的关系。方法：ＮＳＣＬＣ石蜡组织５０例,１０例正常对照组血液样本,采用ＴａｑＭａｎ-ＰＣＲ方法检测ＥＲＣＣ１基因ＳＮＰ（ｒｓ７４３５７１、ｒｓ３２１２９８６、ｒｓ３２１２９４８）基因型与等位基因频率和Ｒｅａｌ-ｔｉｍｅＰＣＲ法检测ＥＲＣＣ１ｍＲＮＡ定量表达,进行关联研究。结果：荧光实时定量ＰＣＲ结果显示ＥＲＣＣ１基因ｍＲＮＡ在７０％的ＮＳＣＬＣ组织中呈低水平表达;肺癌组和正常对照组在位点ｒｓ３２１２９８６上基因型和等位基因频率组间分布无显著性差异,而在位点ｒｓ３２１２９４８上的等位基因频率分布有显著性差异（Ｐ＜０.０５）;肺癌组ＥＲＣＣ１调控区上述基因型与ｍＲＮＡ定量表达无显著关联。结论：ＥＲＣＣ１基因ＳＮＰｒｓ３２１２９４８基因型多态性与ＮＳＣＬＣ的发病相关,其ｍＲＮＡ表达水平与基因分型无显著关联。     

ERCC1、BAG-1 及 BRCA1 基因在非小细胞肺癌中的表达及其与预后的关系

目的 探讨ERCC1、BAG-1和BRCA1基因mRNA在接受以铂类为基础辅助化疗的非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者中的表达情况及其与预后的关系。方法 85例NSCLC患者中74例给予以铂类为基础的术后辅助化疗,采集全组患者的肿瘤组织和其中34例患者的癌旁组织,应用半定量RT-PCR法,检测其ERCC1、BAG-1和BRCA1基因mRNA的表达情况,回顾性分析患者的临床病理资料,探讨3个基因的表达与患者总生存期（OS）之间的关系。结果 ①ERCC1、BAG-1阴性表达的患者OS显著长于阳性表达的患者（P均=0.001）。ERCC1、BAG-1阴性表达的患者接受铂类化疗的疗效显著优于阳性表达的患者（P=0.002、P=0.001）。②BRCA1阴性表达的患者OS长于阳性表达的患者,但差异无统计学意义（P=0.057）。③多因素分析显示ERCC1、BAG-1可作为NSCLC患者接受铂类化疗的预后指标（P=0.027、P=0.022）。结论 检测ERCC1和BAG-1的表达可作为指导NSCLC患者术后接受铂类化疗及预后评估的指标。     

胃癌患者外周血人端粒酶逆转录酶mRNA表达及其临床意义

目的研究胃癌患者外周血人端粒酶逆转录酶（hTERT） mRNA的表达,并探讨其临床意义。方法应用TaqMan 实时定量RT-PCR法检测58例患者、20名健康对照者外周血hTERT mRNA的表达,随访2年。结果胃癌患者外周血hTERT mRNA阳性率为55.17%,显著高于健康对照组（P＜0.001）;hTERT mRNA表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、远处转移和临床分期相关,其中淋巴结转移和远处转移是影响hTERT mRNA 表达的独立因素;近期疗效无效的患者hTERT mRNA 的阳性率显著高于近期疗效有效的患者（P=0.003）。化疗前hTERT mRNA阳性与阴性患者的1年生存率分别是28.13%和76.92%。结论外周血hTERT mRNA可作为检测胃癌患者微转移的分子标志,定期监测有助于评估化疗疗效和预测预后。淋巴结转移和远处转移与hTERT mRNA 表达密切相关。     

SMG 1、mTOR和Raptor在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨磷脂酰肌醇-3-激酶相关激酶（PIKK）家族成员生殖器形成抑制基因1（SMG 1）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）及mTOR调节相关蛋白（Raptor）在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法 收集2014年1月至2015年7月乳腺癌组织68例及配对癌旁组织40例和乳腺纤维腺瘤组织40例,采用免疫组化SP法检测以上组织中SMG 1的表达情况,实时定量PCR（QPCR）检测mTOR和Raptor的表达水平,分析3者表达与乳腺癌临床病理特征的关系,并采用Spearman法分析3者表达的相关性。结果 乳腺癌组织中SMG 1的阳性表达率为27.9％（19／68）,低于癌旁组织的77.5％（31／40）和乳腺纤维腺瘤组织的82.5％（33／40）,差异有统计学意义（P＜0.05）;乳腺癌组织中mTOR和Raptor的相对表达量分别为2.754±0.213和4.137±0.626,均高于癌旁组织和乳腺纤维腺瘤组织（P＜0.05）。SMG 1表达与乳腺癌的肿瘤大小、淋巴结转移及组织学分级均有关（P＜0.05）,mTOR表达与乳腺癌的肿瘤大小、TNM分期及组织学分级均有关（P＜0.05）,Raptor表达与乳腺癌的肿瘤大小、淋巴结转移及组织学分级均有关（P＜0.05）;SMG 1表达与mTOR和Raptor表达呈负相关（r=-0.547、r=-0.415, P＜0.05）,mTOR和Raptor表达呈正相关（r=0.664, P＜0.05）。结论 乳腺癌组织中mTOR、Raptor呈高表达而SMG 1呈低表达,3者表达均与乳腺癌的肿瘤大小、组织学分级有关,提示PIKK家族成员SMG 1、mTOR和Raptor可能在乳腺癌发生、发展中具有重要意义。     

恶性胸腔和腹腔积液中ERCC1和BRCA1 mRNA的表达水平与顺铂敏感性的关系

目的:本研究旨在探讨肿瘤特殊转移灶恶性胸腔/腹腔积液中核苷酸切除修复交叉互补组1(excision repair cross-complementing group 1, ERCC1)基因和乳腺癌易感基因1(breast cancer 1, BRCA1)的表达水平与顺铂体外药物敏感性之间的关系.方法:前瞻性收集46例Ⅳ期恶性肿瘤患者的恶性胸腔/腹腔积液,分离出肿瘤细胞后,采用体外药敏试验三磷酸腺苷生物荧光法检测(adenosine triphosphate-bioluminescence assay, ATP-TCA)法检测肿瘤细胞对顺铂的药物敏感性,实时荧光定量PCR检测ERCC1和BRCA1 mRNA的相对表达水平.结果: 在非小细胞肺癌患者的恶性胸腔/腹腔积液中,肿瘤细胞的ERCC1 mRNA相对表达水平与顺铂抗药性呈正相关(P=0.001,r=0.685).非小细胞肺癌患者(P=0.014,r=0.541)和胃癌患者(P=0.002,r=0.625)恶性胸腔/腹腔积液中肿瘤细胞的BRCA 1 mRNA相对表达水平与顺铂抗药性呈正相关.ERCC1和BRCA1对顺铂药物敏感性的影响存在交互作用(所有患者P=0.010;胃癌患者P=0.027).结论:恶性胸腔/腹腔积液中肿瘤细胞的ERCC1和BRCA1 mRNA的相对表达水平与顺铂体外药物敏感性相关.联合检测ERCC1和BRCA1这2种基因较只采用其中一种基因在预测顺铂药物敏感性方面的价值更大.     

非小细胞肺癌组织中ERCCl及TUBB3基因mRNA的表达及其临床意义

目的：探讨ERCC1及TUBB3基因mRNA在非小细胞肺癌（NSCLC）组织、癌旁组织和良性组织中的表达,两者的关系及其与肺癌患者临床、病理等特征的关系。方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测82例非小细胞肺癌组织、36例癌旁组织及15例良性组织中ERCC1及TUBB3基因mRNA的表达。结果：ERCC1和TUBB3基因在NSCLC患者癌、癌旁及良性组织中均有表达,ERCC1在这三种组织中阳性表达率分别为54．9％（45／82）、44．4％（16／36）及73．3％（11／15）,差异元统计学意义（P=0．165）;而TUBB3阳性表达率分别为18．3％（15／82）、2．8％（1／36）及93．3％（14／15）,三者差异有统计学意义（P=0．000）,癌组织表达率18．3％高于癌旁组织2．8％（P=0．048）。ERCC1基因在腺癌表达率63．O％（34／54）高于鳞癌39．3％（11／28）（P=0．041）。TUBB3基因在腺癌表达率25．9％（14／54）高于鳞癌3．6％（1／28）（P=0．013）。但是二者在其余临床和病理等特征方面的表达均无统计学意义。癌组织中ERCC1及TUBB3表达呈中度正相关（r=0．429,P=0．000）。结论：ERCC1及TUBB3基因mRNA在NSCLC中腺癌表达均高于鳞癌,并且二者在癌组织中表达有密切的关系。