人体肺癌端粒酶表达的研究

目的 :研究肺癌端粒酶活性和临床特征的相关性 ,评价端粒酶作为肺癌诊断标记物的可行性 ,初步探讨吸烟和端粒酶激活在肺癌发病机制中的作用。方法 :组织标本取自 2 0 0 0年 6月～ 2 0 0 1年 1月华西医大附一院胸外科住院手术病人 ,其中原发性肺癌 2 7例 ,结核瘤 2例 ,炎性假瘤 1例。用 TRAP- EL ISA法检测端粒酶活性。结果 :2 7例组织病理学确诊的肺癌有 81.4 8% (2 2 / 2 7)端粒酶活性检测阳性。在不同组织病理学分型中 ,阳性率由高到低依次为 SCL C (小细胞肺癌 )、鳞癌、复合性腺鳞癌、细支气管肺泡腺癌、腺癌。肺癌组织端粒酶活性明显高于癌旁 (P=0 .0 0 0 )和良性组织 (P=0 .0 13)。结论 :端粒酶是一种较理想的诊断性肿瘤标志物。吸烟可能通过端粒酶激活途径促发鳞癌。     

卵巢上皮性肿瘤端粒酶活性原位检测与bcl-2和p53蛋白表达的相关性研究

目的探讨卵巢上皮性肿瘤端粒酶活性与bcl-2和p53蛋白表达的相关性及其与卵巢肿瘤发生的关系.方法对88例卵巢上皮性肿瘤组织,采用端粒酶活性原位检测法(ISLT法)检测端粒酶活性,S-P法免疫组化技术检测bcl-2和p53蛋白.结果 1.卵巢囊腺癌,交界性囊腺瘤,囊腺瘤及癌旁组织端粒酶检出率分别为92.3%,42.8%,0,0.囊腺癌组端粒酶阳性率与交界性囊腺瘤,囊腺瘤,囊腺癌癌旁组织间存在显著性差异(P＜0.01).端粒酶活性强度与囊腺癌分化程度无明显相关性(P＞0.05).2.卵巢囊腺癌,交界性囊腺瘤,囊腺瘤,囊腺癌癌旁组织中bcl-2的阳性表达率分别为65.38%,52.38%,26.66%,0.卵巢囊腺癌、交界性囊腺瘤与囊腺瘤、囊腺癌癌旁组织间存在显著性差异(P＜0.05),端粒酶活性程度随bcl-2蛋白表达增强而升高(γ=0.91,P＜0.01).3.卵巢囊腺癌,交界性囊腺瘤,囊腺瘤,囊腺癌癌旁组织中p53的阳性表达率分别为57.69%,14.28%,0,0.卵巢囊腺癌与交界性囊腺瘤、囊腺瘤、囊腺癌癌旁组织间存在显著性差异(P＜0.01).囊腺癌端粒酶活性程度与p53蛋白表达强度无明显相关性(γ=0.12,P＞0.05).结论 bcl-2蛋白的过度表达可能与端粒酶激活有关,bcl-2可能通过激活端粒酶使卵巢上皮细胞恶性转化导致卵巢囊腺癌发生,而p53基因突变似对端粒酶的激活无直接影响.     

肺癌MMP-9和VEGF表达与微血管密度的关系及其意义

[目的]探讨肺癌组织中MMP-9和VEGF的表达与肺癌血管生成的关系及其意义。[方法]采用免疫组织化学S-P法检测84例肺癌组织中MMP-9、VEGF和CD34的表达。[结果]肺癌组织MMP-9和VEGF表达显著高于癌旁正常肺组织(P﹤0.01)。小细胞肺癌和腺癌MMP-9表达高于鳞癌(P﹤0.01)。肺癌MMP-9表达有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者(P﹤0.01),Ⅲ和Ⅳ期高于Ⅰ和Ⅱ期(P﹤0.05)。肺癌MMP-9表达阳性者微血管密度高于MMP-9表达阴性者(P﹤0.01)。肺癌VEGF表达有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者(P﹤0.05),Ⅲ和Ⅳ期高于Ⅰ和Ⅱ期(P﹤0.05)。肺癌VEGF表达阳性者微血管密度高于肺癌VEGF表达阴性者(P﹤0.01)。肺癌MMP-9和VEGF的表达呈正相关(P﹤0.05)。[结论]MMP-9和VEGF促进肺癌血管生成,与肺癌侵袭转移密切相关。     

血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-9在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的研究非小细胞肺癌（NSCLC）组织中血管内皮生长因子（VEGF）及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达情况,探讨VEGF及MMP-9在NSCLC侵袭和转移中的作用。方法应用免疫组织化学SABC法检测23例肺良性病变组织、30例NSCLC癌旁正常肺组织及111例NSCLC组织中VEGF及MMP-9的表达水平。结果NSCLC组织中VEGF及MMP-9的阳性表达率均高于肺良性病变组织和NSCLC癌旁正常肺组织（P〈0.05）。VEGF和MMP-9的表达随组织分化程度的降低而升高（P〈0.05）;在腺癌中MMP-9的阳性表达率高于鳞癌（P〈0.05）。VEGF和MMP-9的阳性表达率随TNM分期增高而升高（P〈0.05）,VEGF的阳性表达率随肿瘤增大而升高（P〈0.05）。有淋巴结转移者VEGF和MMP-9的阳性表达率高于无淋巴结转移者（P〈0.05）;存活1 a以内、1-3 a的患者VEGF和MMP-9的阳性表达率均高于存活3-5 a者（P〈0.05）。结论VEGF和MMP-9可能在NSCLC的侵袭和转移中发挥重要作用,可作为评估NSCLC的侵袭、转移和预后的参考指标。     

端粒酶与p53、C—myc,K—ras在肺癌组织中的表达

目的研究端粒酶活性在肺癌及癌旁组织中的表达,并探讨端粒酶的表达与p53、C-myc、K-ras之间可能存在的关系.方法采用TRAP-SYBRGreen染色法检测36例肺癌和36例癌旁组织,20例肺部良性病变组织和20例正常肺组织及A549肺腺癌细胞株端粒酶活性的表达,并利用免疫组化技术检测肺癌组织p53、C-myc、K-ras表达水平.结果83.3%的肺癌组织25.0%的癌旁组织、15.0%肺部良性病变级织表达端粒酶活性,正常肺组织未检测到端粒酶活性.端粒酶活性的表达与肺癌组织的病理类型、肿瘤大小、临床分期无相关.在30例端粒酶活性阳性的肺癌组织中有24例(80%)表达p53蛋白,18例(60%)表达C-myc蛋白,22例(73%)表达K-ras蛋白.利用Spearman分析方法分析端粒酶活性与p53、C-myc、K-ras蛋白表达水平之间的相关关系,相关系数分别为r=0.60,P＜0.01r=0.335,P＜0.01;r=0.427,P＜0.01.结论端粒酶活性的定性检测可作为肺部恶性肿瘤诊断的辅助指标之一;肺癌组织的端粒酶活性与p53、C-myc、K-ras蛋白表达水平之间存在正相关关系.     

基质金属蛋白酶及其组织抑制因子在非小细胞肺癌组织中的表达

目的 研究基质金属蛋白酶及组织抑制因子中MMP-2、MMP-9、TIMP-1在不同组织学类型与不同分期人非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义.方法 应用免疫组化方法检测60例非小细胞肺癌癌组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1的表达状况,并析其临床病理意义.结果 60例肺癌组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1阳性率分别为58.3%、53.3%、53.3%;肺鳞癌组织中TIMP-1的阳性表达率高于肺腺癌(68.2%、21%),MMP-2、MMP-9在肺鳞癌与肺腺癌中阳性率差异无统计学意义;伴淋巴结转移的肺癌组织中MMP-9表达率高于无淋巴结转移者(76.2%、41.2%),而无淋巴结转移的肺癌组织中TIMP-1阳性率(69.2%)高于淋巴结转移者(23.8%);TIMP-1阳性表达率在Ⅰ、Ⅱ期高于Ⅲ、Ⅳ期(60.8%、28.5%);存活5年或5年以上者TIMP-1阳性表达率高于存活5年以下者(71.8%、32.1%),MMP-9阳性率在Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期差异无统计学意义,存活5年以下者MMP-9阳性表达率则高于存活5年或5年以上者(78.5%、31.2%).结论 TIMP-1与肺癌病理类型、分期及淋巴结转移有关;MMP-9与淋巴结转移有关,与病理类型及分期无关;MMP-9、TIMP-1与肺癌预后相关.     

食管贲门癌中端粒酶活性表达及其临床意义

目的　探讨食管癌组织中端粒酶活性表达及其临床意义。方法　采用RNA原位杂交方法 ,对 110例食管、贲门癌及 2 0例正常食管、贲门组织及 30例癌旁组织端粒酶活性进行检测 ,并行统计分析。结果　 110例食管、贲门癌中 ,90例端粒酶表达呈阳性 ,阳性率达 81.8% ,癌旁组织中 5例呈阳性 ,阳性率 4 5 % ,正常食管、贲门组织中阴性 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。端粒酶表达与肿块大小、淋巴结转移、病理分级和预后显著相关 (P <0 .0 5 )。结论　端粒酶活性检测可作为食管、贲门癌诊断指标之一 ,与其生存预后有关。     

端粒酶的激活与胃癌进展关系的研究

目的　探讨胃腺癌组织中端粒酶的活性与胃癌进展的关系。方法　采用端粒酶原位分子杂交检测法对 4 5例原发性胃腺癌及 4 0例癌旁正常黏膜组织中端粒酶活性进行原位检测。结果　 4 5例原发性胃腺癌组织中 ,38例端粒酶呈阳性表达 ,其中早期胃癌阳性率为 6 6 6 % ,中晚期为 93 3%。 4 0例癌旁正常黏膜组织中仅 2例呈阳性表达。晚期胃腺癌组织中端粒酶阳性表达率显著高于早期胃腺癌 (P <0 0 5 )。虽然胃腺组织中端粒酶的表达随分化程度的降低与浸润深度的增加而增强 ,但其表达上的差异均无显著性 (P均 >0 0 5 )。结论　虽然胃腺癌组织中端粒酶的表达与肿瘤分化程度及浸润深度无关 ,但中晚期胃腺癌中的表达水平高于早期胃癌的事实 ,提示端粒酶的高表达是胃癌发生发展过程中的中晚期事件     

端粒调控因子及端粒酶逆转录酶相关分析

目的研究端粒调控因子Tankyrase和端粒酶逆转录酶(hTERT)在胃腺癌组织中的表达水平,并进行相关分析.方法应用荧光实时定量PCR(Real-time PCR)技术检测16例胃腺癌组织和离肿瘤边缘5 cm处正常癌旁组织中的Tankyrase和hTERTmRNA表达水平,同时分析Tankyrase表达水平在不同胃腺癌临床分期和组织分化程度各组间的关系.结果胃腺癌中Tankyrase mRNA的表达(1.44×10-2,3.88×10-5～0.4847)高于正常对照(1.013 4×10-2,0～4.933×10-2)(T=31,P＜0.05).hTERT mRNA在胃腺癌中的表达为(1.235×10-4,0～0.13301),显著高于正常对照(0,0～4.38×10-5)(T=0,P＜0.01),两者呈正相关(r=0.553,P＜0.05).但在不同胃腺癌临床分期、组织分化程度各组之间差异均无统计学意义.结论Tankyrase和hTERT在胃腺癌中表达增高,呈正相关,可能是胃腺癌发生过程中的重要因素.     

骨桥蛋白和基质金属蛋白酶-9在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨骨桥蛋白（osteopontin,OPN）和基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase9,MMP-9）在胰腺癌组织及细胞中的表达及临床意义,分析其在胰腺癌浸润转移中的作用.方法 人胰腺癌细胞系MIA PaCa-2体外培养,应用免疫荧光染色法检测OPN蛋白在胰腺癌细胞系内定位.选择100例胰腺癌及40例癌旁正常胰腺组织,应用免疫组化法检测胰腺癌细胞中OPN、MMP-9蛋白表达情况.结果 OPN主要表达于胰腺癌细胞的胞膜和胞浆内,OPN和MMP-9在胰腺癌组织中的表达阳性率分别为73.0%（73/100）和68.0%（68/100）,均高于在癌旁正常胰腺组织（均P＜0.05）;OPN及MMP-9表达与胰腺癌病理分级、淋巴结转移和神经浸润有关（P＜0.05）;二者在胰腺癌组织中的表达呈正相关（rs=0.39,P＜0.01）.结论 OPN、MMP-9可能参与了胰腺癌的发生、浸润及转移,二者在发展过程中起协同作用.     

血清MMP-2、MMP-9水平与非小细胞肺癌转移关系的研究

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清MMP-2、MMP-9水平与非小细胞肺癌的关系。方法采用ELISA法检测70例非小细胞肺癌患者及26例健康志愿者血清MMP-2和MMP-9水平。结果NSCLC患者血清MMP-2和MMP-9含量显著高于正常对照组。NSCLC有转移组血清MMP-2和MMP-9水平显著高于NSCLC无转移组。结论血清MMP-2和MMP-9的水平可作为预测非小细胞肺癌转移的指标。     

血清基质金属蛋白酶-9、CEA等对非小细胞肺癌诊断的临床意义

目的综合评价血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）与其他肿瘤标记物对非小细胞肺癌诊断及预测疾病状态的临床意义。方法利用ELISA方法和快速发光免疫分析法分别测定70例非小细胞肺癌患者、22例良性肺疾病患者以及16例健康人体血清中MMP-9、癌胚抗原（CEA）、糖类抗原125（CA125）和糖类抗原19-9（CA19-9）的水平。结果非小细胞肺癌患者血清中MMP-9、CEA、CA125和CA19-9的水平均显著高于良性肺疾病组和健康组（P〈0.01）。另外,MMP-9的水平随肿瘤体积增大、淋巴结转移以及临床分期进展而显著升高（P〈0.01）。结论血清MMP-9与CEA、CA125和CA19-9对非小细胞肺癌诊断都具有一定的临床价值,血清MMP-9还是一项预测非小细胞肺癌侵袭、转移等疾病状态的良好指标。     

Redox state of adipose tissue for patients with gastric cancer and its connection with the body mass index and distance from the tumor

Excess body weight has been causally linked to an increased risk of different cancer types, including gastric cancer but the mechanisms underlying this relationship are not well understood. Superoxide generation rate, activity of complex I in electron transport chain of mitochondria, activity of matrix metalloproteinase (MMP-2 and 9) of adipose tissues (AT) of patients with gastric cancer in AT located adjacent to tumor (ATAT) and at a distance of 3 cm (ATD) are measured to follow the connection of the redox state with some of the microenvironment indicators (HIF-1α, CD68, Plin5), body mass index (BMI) and cancer metastasis.Superoxide generation rate in ATAT positively correlates with BMI (r = 0.59, p < 0.05) being 4 times higher than in control (p < 0.05). MMP-2, 9 activities in ATAT positively correlate with BMI (r = 0.67, p < 0.05) being 3.3-4.0 higher than in control (p < 0.05). In ATD a statistically significant increase of MMP-2 activity is found. In ATAT for the group of patients with distant metastasis (M1) the superoxide generation rate, MMP-2, 9 activities are about 2 times higher (p < 0.05) than in the subgroup without distant metastases (M0). M1 is also characterized by the increased values of HIF-1α+ (factor 1.25), CD68+ (factor 1.4) and Plin5+ (factor 2.1) compared to M0 category in tumor tissues (p < 0.05). The results can be used for better understanding the mechanism(s) of symbiosis of tumor and adipose tissues as well as serve as a basis for new therapeutic approaches.     

乳腺癌组织中PPAR-gamma和MMP-9表达及临床意义

目的:探讨乳腺癌组织中PPAR-γ和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达及临床意义。方法:应用免疫组化SP法检测乳腺癌组织中PPAR-γ和MMP-9表达,并对两者相关性及其与临床病理特征关系进行χ2检验和Spearman等级相关分析。结果:97例乳腺癌组织与癌旁组织相比PPAR-γ表达较低,阳性率为57.7%,其表达与组织学分级、临床分期和淋巴结转移有关,与患者年龄、肿瘤大小、ER、PR、Her-2表达无关。乳腺癌中高度表达的MMP-9与肿瘤大小、临床分期和淋巴结转移、组织学分级均有关。乳腺癌中PPAR-γ与MMP-9表达呈负相关关系。结论:乳腺癌中PPAR-γ与MMP-9表达有关,PPAR-γ在乳腺癌的进展和淋巴结转移中起着重要的作用。     

PCNA和E-cad在非小细胞肺癌中的表达及与淋巴结转移的关系

目的 检测增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）、上皮钙依赖黏附蛋白（E-cadherin,E-cad）在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）中的表达,并探讨其与淋巴结转移的关系.方法 采用免疫组织化学方法联合检测100例非小细胞肺癌和16例癌旁组织中PCNA、E-cad的表达及与NSCLC转移的关系.结果 PCNA在非小细胞肺癌中的表达阳性率显著高于癌旁组织（P〈0.05）,且与NSCLC的分化程度、TNM分期及淋巴结转移明显相关（P〈0.05）;E-cad在非小细胞肺癌中表达的阳性率显著低于癌旁组织（P〈0.05）,与肿瘤的TNM分期和淋巴结转移有统计学意义（P〈0.05）,与肿瘤的分化程度无明显相关（P〉0.05）.E-cad与PCNA的表达呈显著性负相关（P〈0.05）.结论 PCNA高表达、E-cad低表达与NSCLC的淋巴结转移密切相关,可能促进了NSCLC的转移.     

Ghrelin和MMP-9在直肠癌组织中的表达及其与淋巴结转移的关系

目的：探讨直肠癌组织中生长激素释放肽（Ghrelin）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达与淋巴结转移的关系。方法：应用免疫组织化学方法及Westernblot检测Ghrelin和MMP-9在21例无淋巴结转移及35例有淋巴结转移直肠癌组织中的表达水平的表达,分析Ghrelin和MMP-9与直肠癌淋巴结转移中的关系及两者的相关性。结果：Ghrelin和MMP-9在直肠癌组织中的阳性表达率分别为53．57％和80．36％,明显高于癌旁正常组织（P〈0．05）;Ghrelin和MMP-9蛋白表达与肿瘤淋巴结转移比率联系密切,并且在直肠癌组织中的阳性表达随着淋巴结转移个数增加而增加（P〈0．05）;Ghrelin与MMP-9的阳性表达呈正相关（x=0．832,P〈0．001）。结论：Ghrelin和MMP-9表达升高与直肠癌的淋巴结转移呈正相关,联合检测Ghrelin和MMP-9可能对直肠癌患者淋巴结转移及预后评估具有重要临床价值。     

NF-κBp65在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的探讨核转录因子NF-κBp65在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床病理意义。方法采用免疫组织化学的方法检测95例NSCLC和27例癌旁正常肺组织(对照组)中NF-κBp65蛋白的表达水平,并分析其临床意义。结果 NF-kBp65蛋白在NSCLC癌组织中的阳性表达率(44.2%)高于癌旁正常肺组织(22.2%),差异有统计学意义(χ2=4.26,P0.05)。NF-κBp65在非转移组中表达低于转移组(χ2=12.537,P0.01)。NF-κBp65蛋白在不同组织学分型、分化程度、TNM分期患者表达差异均有统计学意义(P0.05或P0.01),而不同年龄、性别及肿瘤大小患者NF-κBp65蛋白表达率差异均无统计学意义(P0.05)。结论 NF-κBp65的高表达可能与NSCLC的转移有关。     

NF-Kappa B p65与CD68在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 通过检测非小细胞肺癌(NSCLC)中核转录因子κb p65 (NF-κB p65)蛋白、CD68阳性细胞的表达,探讨它们在肺癌发生发展中的作用以及两者的关系.方法 免疫组化SP法检测67例人NSCLC标本(每个标本取癌组织、癌旁组织、正常组织)中NF-κB p65和CD68的表达,多组间比较运用单因素方差分析,并采用Pearson相关分析NF-κB p65蛋白表达与CD68阳性细胞数量的相关性.结果 肺癌组织、癌旁组织、正常组织中NF-κB p65的平均光密度值分别为0.174±0.034,0.139±0.016,0.090±0.01;CD68阳性细胞数分别为11.779±1.368,97.486±2.538,52.140±1.853,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).CD68的表达与TNM分期、淋巴节转移、是否侵及胸膜有关(P＜0.05).NF-κB p65蛋白在NSCLC中的表达与癌组织分化程度、TNM分期、淋巴节转移及是否侵及胸膜有关(P＜0.05).CD68阳性细胞数量和NF-κB p65蛋白的表达呈正相关(r=0.416,P＜ 0.05).结论 NF-κB p65蛋白的表达和CD68+巨噬细胞的浸润与NSCLC的发生发展转移相关,提示CD68+巨噬细胞可能通过激活NF-κB促进非小细胞肺癌的发生发展.