成年小鼠胸腺内神经肽免疫组织化学研究

目的：探讨成年ＢＡＬＢ／ｃ鼠胸腺内血管活性肠肽（ＶＩＰ），Ｐ物质（ＳＰ），５－羟色胺（５－ＨＴ），生长抑素（ＳＯＭ）以及神经肽Ｙ（ＮＰＹ）免疫反应性的分布及与Ｔ细胞发育的关系。方法：利用免疫组织化学方法在组织原位显示胸腺内的神经肽，结果；各种神经肽的免疫反应性主要位于髓质，均可见到阳性神经纤维，并与胸腺细胞密切接触，除ＳＰ外，其它神经肽在皮，髓质交界区的血管平滑肌上均有表达，这些神经肽也都与肥大细     

成年小鼠胸腺内神经肽免疫组织化学研究

目的：探讨成年ＢＡＬＢ／ｃ鼠胸腺内血管活性肠肽（ＶＩＰ）、Ｐ物质（ＳＰ）、５羟色胺（５ＨＴ）、生长抑素（ＳＯＭ）以及神经肽Ｙ（ＮＰＹ）免疫反应性的分布及与Ｔ细胞发育的关系。方法：利用免疫组织化学方法在组织原位显示胸腺内的神经肽。结果：各神经肽的免疫反应性主要位于髓质，均可见到阳性神经纤维，并与胸腺细胞密切接触。除ＳＰ外，其它神经肽在皮、髓质交界区的血管平滑肌上均有表达。这些神经肽也都与肥大细胞密切相关。结论：ＶＩＰ、ＳＰ、５ＨＴ、ＳＯＭ及ＮＰＹ可能参与成熟Ｔ细胞的功能调节。ＶＩＰ、５ＨＴ、ＳＯＭ、ＮＰＹ可能有控制Ｔ细胞迁移的功能。     

豚鼠小肠EC细胞的免疫细胞化学和银染法的比较研究

本实验利用同一切片标本，在光镜水平上，对豚鼠小肠ＥＣ细胞进行了免疫细胞化学和不同银染法的比较研究。实验结果显示，全部Ｍａｓｓｏｎ－Ｆｏｎｔａｎａ亲银染色阳性细胞均呈ＰＡＰ染色阳性；另一方面，小部分（１５％）Ｇｒｉｍｅｌｉｕｓ嗜银染色阳性细胞却表现为亲银染色和ＰＡＰ染色双阴性。以上结果表明，在显示ＥＣ细胞上，亲银染色具有很高的特异性，因此仍不失为一种经济和实用的方法；嗜银染色显示ＥＣ细胞，尽管其敏感性稍高于亲银染色法，但不具有免疫细胞化学与亲银染色技术那样明显的特异性。     

大鼠胸腺中的5—羟色胺分布研究

目的：探讨大鼠胸腺内5－羟色胺（5－HT）免疫反应性的分布及与T细胞发育的关系。方法：用免疫组织化学ABC法,结果：5－HT的免疫反应性主要位于胸腺皮、髓质交界区和髓质、在皮、髓质交界区和髓质的血管平滑肌上也有表达。结论：大鼠胸腺内确实存在单胺类神经递质,推测5－HT可能参与成熟T细胞的功能调节和局部血循环的调节,从而控制T细胞的迁移。     

小鼠胸腺上皮细胞株MTEC1自发分泌白细胞介素8样化学趋化因子

小鼠胸腺上皮细胞株ＭＴＥＣ１自发分泌白细胞介素８样化学趋化因子北京医科大学免疫学系苗燕玲，曹良弦，刘祝公，陈慰峰在研究胸腺微环境在Ｔ细胞发育过程的选择作用中，发现本室建立的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠胸腺髓质区上皮细胞株ＭＴＥＣ１在体外能自发分泌对嗜中性粒细胞（...     

CD4分子对胸腺细胞发育的影响

本文应用小鼠体内注射抗Ｌ３Ｔ４ＭｃＡｂ封闭Ｔ细胞表现ＣＤ４分子，观察胸腺细胞数量及功能，结果显示：在一定抗Ｌ３Ｔ４ＭｃＡｂ剂量范围内，胸腺细胞总数与功能下降，胸腺双阳性细胞（ＤＰ），ＣＤ４单阳性细胞（ＣＤ４ＳＰ）数量下降，ＣＤ８单阳性细胞（ＣＤ８ＳＰ），数量增多。     

各种嗜酸细胞活化因子对其表面粘附分子的影响

目的：探讨各种嗜酸细胞活化因子对支气管哮喘患者末梢血嗜酸细胞表面粘附分子表达的影响。方法：嗜酸细胞分离采用Ｐｅｒｃｏｌ不连续比重梯度离心法，粘附分子测定采用流式细胞仪ＦＡＣＳｃｎａ。结果：血小板活化因子（ＰＡＦ）、Ｐ物质（ＳＰ）、神经激肽Ａ（ＮＫＡ）、卟啉醇肉豆蔻酸乙酸酯（ＰＭＡ）及粒—巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ—ＣＳＦ）均具有增强嗜酸细胞表面粘附分子ＬＦＡ１β及Ｍａｃｌ表达的作用（Ｐ＜０．０１）；而ＶＬＡ４，ＬＥＣＡＭ—Ｉ于ＰＡＦ、ＧＭ—ＣＳＦ、ＰＭＡ及ｆＭＬＰ刺激后明显降低（Ｐ＜０．０１），ＩＬ－４刺激后无变化。结论：ＰＡＦ、ＳＰ、ＮＫＡ、ＧＭ—ＣＳＦ及ＰＭＡ作为嗜酸细胞活化因子通过增强其表面粘附分子ＬＦＡ１β及Ｍａｃｌ的表达在支气管哮喘病理形成上发挥着重要作用     

核仁组成区嗜银蛋白染色在子宫内膜的定量研究

核仁组成区嗜银蛋白染色在子宫内膜的定量研究第二附属医院病理科（２２６００１）季晓华，滕晓东从Ｇｏｏｄｐａｓｔｕｒｅ等在１９７５年首次介绍银染技术显示核仁组成区相关嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）的方法并应用于细胞遗传学研究后，近来用ＡｇＮＯＲ胶银染色法研究各种...     

大鼠抗小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体的研制与鉴定

采用脾内免疫法，制备出两组大鼠抗小鼠胸腺基质细胞的大一小鼠Ｂ细胞杂交瘤，已获４０个单抗分泌细胞株。小鼠胸腺切片免疫组织化学染色结果：（１）髓质ＴＳＣ反应阳性，皮质ＴＳＣ反应阴性；（２）皮，髓质ＴＳＣ反应均呈阳性且强度相似；（３）髓质ＴＳＣ反应强于皮质ＴＳＣ；（４）皮质ＴＳＣ反应强于髓质ＴＳＣ；（５）胸腺细胞的反应呈弥漫性。本实验结果不仅有利于鉴别ＴＳＣ亚群并且对研究Ｔ细胞发育有重要意义。     

人胎胸腺的组织发生

本文在光镜和电镜下研究50例人胎的胸腺。8(1/2)周胎胸腺尚未分小叶,也不能分辨皮质和髓质。12周胸腺间充质隔分隔小叶,同时髓质内可见胸腺小体。14～16周小叶数量增多,皮质分化出内、外二区。外皮质色浅系T淋巴细胞繁殖区。17～20周胸腺的发育已较完善。胎期胸腺间充质隔及皮髓交界区发现一些非上皮网状细胞和大量嗜酸髓细胞。     

抗结肠癌和抗癌胚抗原的单克隆抗体识别大肠良恶性病变的对比研究

应用抗癌胚抗原(CEA)和抗结肠癌单克隆抗体(MC_3)对大肠癌以及腺瘤等良性病变的结肠粘膜进行了免疫组织化学(PAP法)研究.结果CEA在大肠癌和重度不典型增生的腺瘤组织中阳性率为100％,在正常结肠组织和其它非腺瘤的良性病变组织中良性率为33.33—60.00％,在轻、中度不典型增生腺瘤组织中分别为74.58％和84.62％.MC_3相应抗原在大肠癌中阳性率为100％,在轻、中、重度不典型增生腺瘤组织中阳性率分别为44.07％、69.23％、100％,在正常结肠粘膜及良性非腺瘤性病变组织中阳性率为0—22.22％.以上结果表明MC_3和抗CEA两种单克隆抗体在识别恶性肿瘤方面的敏感性均佳,但MC_3特异性远优于抗CEA单克隆抗体.     

丹皮酚对ox-LDL诱导的大鼠血管内皮细胞黏附功能的抑制作用

目的:研究氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对体外培养的大鼠单核细胞(MC)与大鼠主动脉内皮细胞(RAECs)黏附的影响及丹皮酚(Pae)含药血清对其的抑制作用.方法:制备Pae含药血清并用RP-HPLC测定血清中Pae含量;改良沉淀法分离大鼠血清低密度脂蛋白(LDL),Cu2 氧化制备ox-LDL;组织块预消化贴壁法培养RAECs;大鼠淋巴细胞分离液分离单核细胞;孟加拉玫瑰红活细胞染色法测定MC与RAECs的黏附功能.结果:ox-LDL在25～400 mg/L时呈剂量依赖性地诱导MC与RAECs的黏附,100 mg/L时促MC与RAECs黏附达最大值;ox-LDL与RAECs共育1 h即可明显促进黏附作用,3 h时达最大诱导效应.Pae含药血清在浓度为1.8～4.2 mg/L时,呈剂量依赖性地抑制ox-LDL诱导的黏附作用;4.2 mg/L孵育24 h时抑制作用最明显.结论:Pae对ox-LDL诱导的大鼠MC与RAECs黏附功能有抑制效应,Pae对ox-LDL介导的血管内皮细胞炎症环节的影响是其抗AS的作用机制之一.     

三七提取物对MNNG转化后GES-1细胞的促凋亡作用

目的:应用流式细胞测定法研究灌服三七提取物后的犬血清对胃癌前细胞的促凋亡作用.方法:采用被N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitroso-guanidine, MNNG)进一步转化后的永生化人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞(以下简称MC细胞)作为胃癌前病变细胞的体外研究模型;以三七水提物给彼格犬一次性灌胃,取给药前的血清、给药后2 h和6 h的血清作为实验药物血清.以流式细胞测定法分别检测2 h和6 h两个采血时间点上不同浓度的药物血清对MC细胞作用72 h后的促凋亡作用.结果:这两个时间点的含药血清能明显促进MC细胞的凋亡,与同样条件下用空白血清培养的MC细胞相比其凋亡率显著增加(P<0.05).在两个时间点的药物血清作用下的MC细胞,其G0/G1期细胞比例明显下降(P<0.05),而G2/M期细胞比例显著增加(P<0.05),但S期细胞比例并没有一致性的变化.结论:两个时间点的药物血清对MC细胞都有显著的促凋亡作用,且能显著降低G0/G1期的MC细胞比例及显著增加G2/M期的MC细胞比例,这可能是其抑制MC细胞增殖及促凋亡的原因之一.     

MC38-luc稳转细胞株的构建及在小鼠结肠癌肝转移模型中的应用

筛选稳定表达荧光素酶基因(luc)的MC38细胞株,在免疫功能正常小鼠体内构建结肠癌肝转移模型。 方法 将带荧光素酶基因的质粒pGL4.50转染MC38小鼠结肠癌细胞,通过抗生素初筛和有限稀释亚克隆化,获取MC38-luc稳定细胞株; 采用脾内注射MC38-luc细胞构建C57BL/6小鼠结肠癌肝转移模型,利用小动物活体成像系统,监测肿瘤在体内的生长及转移过程。 结果 获得了多株表达荧光素酶基因的单克隆细胞株(MC38-luc); 高表达luc的27号细胞克隆在体内生长良好,可用于构建结肠癌肝转移模型。 结论 成功构建了MC38-luc稳定细胞株并将其应用于小鼠结肠癌肝转移模型。     

神经干细胞移植对脊髓全横断大鼠运动行为和大脑运动皮质Caspase-3表达的影响

目的 探讨神经干细胞移植对脊髓全横断大鼠运动行为和大脑运动皮质Caspase-3表达的影响.方法 建立成年SD大鼠脊髓全横断(SCT,T9)模型.分假手术组、SCT组、NSC移植组,每组13只动物.其中每组8只动物于NSC移植后7d时用蛋白免疫印迹法检测MC内Caspase-3蛋白的表达变化(β-actin作内参照).另5只动物于NSC移植后16周时进行后肢运动功能(BBB)评分,处死动物用免疫组织化学技术检测Caspase-3在MC的细胞定位分布.结果 与假手术组比较[(21±0)分],大鼠SCT 16周时后肢运动功能BBB评分为[(5.16±1.19)分];而脊髓内NSC移植组BBB评分为[(7.58±0.99)分],组间比较有统计学意义(P＜0.05);Caspase-3蛋白在MC运动神经元表达,免疫阳性反应物分布于细胞浆.SCT导致MC区Caspsse-3蛋白表达(0.89+0.12)较假手术组(0.61+0.10)明显上调(P＜0.05),而NSC移植明显降低MC区Caspase-3表达水平(0.76+0.11)(P＜0.05).结论 NSC脊髓内移植能有效下调皮质运动区Caspase-3表达水平,并促进SCT大鼠后肢运动功能改善.     

Rolle der Mastzellen in der Entwicklung der Leberfibrose während experimenteller Hepatokarzinogenese bei Ratten

The role of mast cells (MC) in the development of liver fibrosis during experimental hepatocarcinogenesis in rats has been studied light microscopically, histochemically and electron microscopically. An increase in the number of MC in the proliferated connective tissue was found. The histochemical examination showed that tht increased MC almost exclusively were connective tissue mast cells (CTMC), whilst mucosa mast cells (MMC) were only rarely seen. The electron microscopical observation revealed a close topographical relationship between MC and fibroblasts sending out pseudopodia, which encircled granula released from MC and phagocytized them. The fibroblasts with phagocytized MC granules were markedly activated showing enhanced formation of collagenous fibrils. Finally, the role of MC in the development of liver fibrosis is discussed.     

脂肪细胞谷氨酰胺合成酶抑制结肠癌细胞的肝、肺转移

目的 探讨脂肪细胞谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)对结肠癌细胞迁移及转移的调控作用.方法 分别用野生型(WT)小鼠和脂肪细胞GS转基因(TgGS)小鼠的脂肪细胞条件培养基处理结肠癌MC38及CT26细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力;通过尾静脉注射结肠癌MC38细胞建立肿瘤血行转移小鼠模型,病理切片观察肝、肺组织的转移情况.结果 CCK-8检测发现脂肪细胞条件培养基对结肠癌MC38及CT26细胞的增殖无明显影响(P＞0.05);流式细胞仪检测发现脂肪细胞条件培养基对结肠癌MC38及CT26细胞的凋亡无明显影响(P＞0.05);划痕实验和Transwell实验结果显示TgGS小鼠脂肪细胞条件培养基可以抑制结肠癌MC38及CT26细胞的迁移能力(P＜0.05);尾静脉注射结肠癌MC38细胞后,与WT小鼠比较,TgGS小鼠肺转移瘤的大小及数量明显减少(P＜0.01),且TgGS小鼠较WT小鼠更不易发生肝转移(P＜0.0l).结论 脂肪细胞GS可以抑制结肠癌细胞的迁移及转移.     

人腭扁桃体隐窝上皮结构的研究

采用扫描电镜、透射电镜及光镜免疫金银法观察了31例慢性扁桃体炎患者和8例胎儿的扁桃体隐窝上皮结构及其中细胞的分布。电镜观察发现隐窝上皮表面存在三种类型微隐窝开口,其腔内有浸润细胞、异物及细菌。有三种特化上皮细胞(M细胞)覆盖于Ⅲ型微隐窝开口处,其结构与肠道M细胞相似,其数量随扁桃体炎的反复发作而减少。形态表明微隐窝是浸润细胞和外来抗原的出入口。M细胞与抗原的摄取及传递有关。光镜免疫金银法观察证明上皮浸润细胞中多数为OKT_s~+细胞,其中OKT_4~+者又占多数而OKT_s~+细胞较少,这些细胞是隐窝上皮参于免疫应答的结构基础。     

葡萄糖酸锌碳点在细胞成像和体外促进成骨分化中的作用

目的：通过一步水热法合成葡萄糖酸锌碳点（Zn-CDs）,探讨Zn-CDs的细胞成像及其对小鼠前成骨细胞向成骨方向分化的促进作用。方法：一步水热法合成Zn-CDs,采用透射电子显微镜（TEM）、荧光光谱仪和傅里叶变换红外光谱仪（FT-IR）观察检测Zn-CDs的表征。将不同浓度（0.01、0.10、1.00、10.00、100.00和1 000.00 mg· L^-1） Zn-CDs浸提液与小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1共培养作为实验组,空白对照组仅加入细胞培养液。采用MTT法检测各组MC3T-E1细胞相对增殖率（RGR）;采用激光共聚焦成像观察MC3T3-E1细胞的成像特点;采用qRT-PCR法检测各组MC3T3-E1细胞中Runt相关转录因子2基因（Runx2）、碱性磷酸酶基因（ALP）和骨钙素（OC） mRNA相对表达水平;茜素红染色检测各组细胞中钙化结节数。结果：TEM检测,成功合成粒径为5.25 nm的Zn-CDs。荧光光谱,Zn-CDs具有360 nm紫外光激发和450 nm蓝光发射的荧光性质,并表现激发波长依赖特性。FT-IR检测,Zn-CDs表面主要由羧基和羟基基团构成。与空白对照组比较,共培养24 h时1 000.00 mg·L^-1Zn-CDs组MC3T3-E1细胞的RGR明显降低（P<0.01）。荧光成像,Zn-CDs与MC3T3-E1细胞共培养后,细胞呈现蓝色、绿色和红色的荧光图像,形态轮廓清楚且荧光强度细胞质比细胞核强。qRT-PCR检测,随着Zn-CDs浓度的增加,MC3T3-E1细胞中Runx2、ALP和OCmRNA相对表达水平逐渐升高。茜素红染色,诱导21 d后不同浓度Zn-CDs组MC3T3-E1细胞中钙结节数多于空白对照组。结论：Zn-CDs可以有效地进行MC3T3-E1细胞荧光成像,且Zn-CDs具有一定的促MC3T3-E1细胞向成骨方向分化的作用。     

荧光染色技术检测宫颈沙眼衣原体

采用荧光染色技术对１９２例临床患有宫颈炎的病例进行宫颈涂片检查，检出宫颈上皮细胞内和中性粒细胞内衣原体包涵体３２例（阳性率为１６．６％），这些阳性标本分别进一步用姬姆萨和苏木精－伊红（ＨＥ）染色进行研究。结果表明，衣原体包涵体在姬姆萨染色的标本上得到证实；在ＨＢ染色的涂片上则不易发现；然而，在荧光方法染色的标本上，衣原体包涵体所发荧光的颜色明显不同于细胞结构发出的荧光颜色，在低倍荧光镜下就能识别．而且，该染色法对滴虫和癌细胞的识别亦具有一定的优越性。