增强miR-146b-3p表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨增强miR-146b-3p表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 Real time PCR检测miR-146b-3p在6种人胰腺癌细胞系(MIA PaCa-2、BxPC-3、AsPC-1、PANC-1、SW1990、PC-3)和手术切除的12对胰腺癌/癌旁组织中的表达.将Pre-miR-hsa-miR-146b-3p Precursor 转染MIA PaCa-2 细胞,Real time PCR检测转染后miR-146b-3p的表达变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-8的表达变化.结果 与正常胰腺组织相比,miR-146b-3p在6种胰腺癌细胞系中均呈低表达,以MIA PaCa-2细胞最为明显;12对胰腺组织中,癌组织miR-146b-3p表达水平均低于癌旁组织.同阴性对照组比较,转染前体组的MIA PaCa-2细胞,miR-146b-3p表达增强383.25倍,细胞增殖能力下降,细胞凋亡率增加,蛋白Bcl-2表达降低(50.0%),Bax表达升高(4.29倍).结论 miR-146b-3p在胰腺癌细胞系和癌组织中低表达;上调胰腺癌细胞MIA PaCa-2中 miR-146b-3p的表达,能够抑制增殖和诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2表达,上调Bax的表达有关.     

miR-34b-3p和miR-491-3p在早期诊断儿童脓毒血症中的价值研究

目的：检测并分析微小RNA(miRNA)-34b-3p和miR-491-3p在脓毒血症患儿外周血中的表达及其诊断儿童脓毒血症中的临床价值。方法：选取咸宁市第一人民医院2018年2月～2021年10月疑似脓毒血症患儿130例,根据最终诊断分为脓毒血症组82例和非脓毒血症组48例。检测所有研究对象入院当天的外周血中miR-34b-3p和miR-491-3p的相对表达水平,同时运用受试者工作特征(ROC)曲线计算miR-34b-3p和miR-491-3p在儿童脓毒血症的诊断价值。结果：脓毒血症组外周血中miR-34b-3p和miR-491-3p含量均显著高于非脓毒血症组,差异有统计学意义(P<0.05)。且miR-34b-3p和miR-491-3p在脓毒血症组患儿外周血中的相对表达含量呈显著正相关(r=0.632,P=0.027)。miR-34b-3p、miR-491-3p及联合区分脓毒血症与非脓毒血症的ROC下面积和最佳横断值分别为0.678、3.121(95%CI:0.582～0.774,P<0.05)、0.654、2.050(95%CI:0.318～0.853,P<0...     

miR-146b-5p调控CD82介导食管鳞状细胞癌恶性表型

目的 探究miR-146b-5p促进食管鳞状细胞癌恶性表型的分子机制。方法 选取2020年10月-2021年12月在四川省西南医科大学附属医院行食管癌根治术治疗的38名食管鳞状细胞癌患者的癌组织和癌旁正常组织(NAT)样本,核酸原位杂交法检测miR-146b-5p在食管鳞癌及癌旁正常组织中的表达水平;通过siRNA敲低miR-146b-5p的表达水平,细胞增殖实验、划痕实验检测敲低miR-146b-5p后细胞行为学表型变化;生物信息学分析预测miR-146b-5p的下游靶基因为CD82;免疫印迹法(Western-blot)检测靶基因CD82的表达水平,双荧光素酶报告基因实验确定miR-146b-5p与CD82之间的调控关系。结果 核酸原位杂交法检测结果显示,与NAT组织病理评分比较,miR-146b-5p在ESCC组织中的病理评分较高(P<0.05);EdU细胞增殖实验结果显示,与NC组比较,KD组EdU阳性细胞比例显著降低(P<0.05)。细胞划痕实验结果显示,与NC组比较,KD组划痕愈合比例显著下降(P<0.05)。ENCORI数据库预测CD82是miR-146...     

血清外泌体miR-20b-5p miR-107水平检测在非小细胞肺腺癌诊断及预后评估中的应用

目的 探究血清外泌体miR-20b-5p、miR-107水平检测在非小细胞肺腺癌诊断及预后评估中的应用价值。方法 选取2015年12月至2018年12月河南科技大学第一附属医院胸外科收治的124例非小细胞肺腺癌患者为观察组，另选取120例同期于本院接受体检的健康体检者为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链法(qRT-PCR)检测血清外泌体miR-20b-5p、miR-107表达水平，受试者工作特征曲线(ROC)评估miR-20b-5p、miR-107水平检测对非小细胞肺腺癌的早期诊断价值，Kaplan-Meier生存分析研究miR-20b-5p、miR-107水平与患者预后的关系。结果 观察组的血清外泌体miR-20b-5p、miR-107水平高于对照组(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示，血清外泌体miR-20b-5p、miR-107检测诊断非小细胞肺腺癌的AUC值分别为0.766、0.821,最佳截断值分别为1.81、1.27。观察组患者中，117例完成随访，7例失访。随访3年后，64例患者死亡，53例患者存活。根据患者的生存状态绘制ROC曲线，确定miR-20b-5p、mi...     

血清外泌体miR-205-5p/miR-152-5p对早期非小细胞肺癌的诊断价值

目的 探索血清外泌体miR-205-5p/miR-152-5p联合相对表达量在早期非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中的水平及诊断价值。 方法 纳入TNM分期为0-II期的NSCLC患者(NSCLC组)83例(包括腺癌组55例和鳞癌组28例)和健康对照(对照组)50例,采集血清标本,提取并检测血清外泌体miR-205-5p/miR-152-5p联合相对表达量。比较NSCLC组和对照组的表达量,比较腺癌组、鳞癌组和对照组的表达量,使用多重线性回归分析表达量与性别、年龄、吸烟史、肿瘤大小、淋巴结转移的关联性,采用ROC曲线评价血清外泌体miR-205-5p/miR-152-5p联合相对表达量的诊断效能。 结果 对照组、NSCLC组、腺癌组、鳞癌组的miR-205-5p/miR-152-5p相对表达量分别为17.76±4.27、20.52±5.51、21.79±5.12、18.02±5.48;NSCLC组高于对照组(t=3.027,P=0.003),腺癌组、鳞癌组、对照组3组间比较差异有统计学意义(F=10.412,P<0.001),腺癌组高于鳞癌组(P=0.001)和对照组(P<0.001),鳞癌组与对照组间差异无统计学意义(P=0.823)。多元线性回归分析结果显示,淋巴结转移情况与相对表达量存在关联性(P=0.037)。对NSCLC的诊断效能评估,曲线下面积为0.671(95%CI:0.579~0.764),截断值为18.493,灵敏度为73.3%,特异度为64.0%。对肺腺癌的诊断效能评估,曲线下面积为0.738(95%CI:0.642~0.883),截断值为18.495,灵敏度为78.2%,特异度为64.0%。对肺鳞癌的诊断效能评估,曲线下面积为0.541(95%CI:0.399~0.684),无统计学意义。 结论 血清外泌体miR-205-5p/miR-152-5p联合相对表达量在早期NSCLC(主要为早期肺腺癌)患者中升高,对早期NSCLC诊断具有辅助价值。     

p63蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 :研究p6 3蛋白的表达与非小细胞肺癌临床病理学特征的关系。方法 :随机收集非小细胞肺癌标本 4 0例 (其中鳞癌 18例、腺癌 2 2例 ;15例伴淋巴结转移 ,2 0例无淋巴结转移 )及 7例肺癌患者正常肺组织标本 ,采用免疫组织化学S P法检测p6 3蛋白的表达并结合肺癌的临床病理学特征进行分析。结果 :p6 3蛋白的表达在非小细胞肺癌细胞和正常支气管粘膜上皮细胞中定位于细胞核 ,呈棕黄色。在肺鳞癌、肺腺癌、正常支气管粘膜上皮细胞中 ,p6 3阳性表达率分别为 77.8% (14 18)、2 7.3% (6 2 2 )、2 8.6 % (2 7) ,肺鳞癌分别与肺腺癌和正常支气管粘膜上皮相比较差异均有高度显著性 (P <0 .0 1) ;而肺腺癌和正常支气管粘膜上皮比较差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;p6 3蛋白表达与非小细胞肺癌分化程度、临床分期、淋巴结转移无统计学意义。结论 :p6 3蛋白在肺鳞癌中表达明显上调。     

细胞增殖周期调控基因p16在非小细胞肺癌中的表达和意义

目的 探讨Ｐ１６对非小细胞肺癌增殖的作用及临床诊断应用的价值。方法 运用枸橼酸－ＡＢＣ－微波免疫组化技术检测Ｐ１６在７３例原发性非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）,６例肺炎性假瘤和５例癌旁正常肺组织中的表达情况。结果 Ｐ１６阳性率为２５％,明显代于下沉肺组织及肺炎性假瘤（８２％）;Ｐ１６的表达与肺门淋巴结转移和组织学分级有关;Ｐ１６的表达,肺门淋巴结转移和组织学分级有关;Ｐ１６的表达、肺门淋巴结转移和组织     

非小细胞肺癌p16基因突变与表达的研究

目的 观察ｐ１６基因在非小细胞肺癌（Ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ,ＮＳＣＬＣ）中的表达与突变情况与ＮＳＣＬＣ发生发展的关系。方法 应用免疫组织化学、ＰＣＲ、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术对５２例非小细胞肺癌石蜡标本进行ｐ１６蛋白及ｐ１６蛋白表达阳性,ｐ１６蛋白在良、恶性细胞中均有表达,肿瘤细胞中ｐ１６表达呈现异质性。各肿瘤类型中鳞癌和大细胞癌阳性率高于腺癌,但无显著差异。高分化腺癌阳     

MALAT1调控 miR-19b-3p/HIF-1α分子轴参与非小细胞肺癌的发生发展

摘要:目的 探讨 MALAT1调控 miR-19b-3p/HIF-1α影响非小细胞肺癌(NSCLC)的发病机制。方法 采用实时 荧光定量 PCR(qRT-PCR)检测 MALAT1、miR-19b-3p在 NSCLC 肺癌组织和 NSCLC 细胞系中的表达水平。过表达 miR-19b-3p和敲除 MALAT1后,采用qRT-PCR和 Westernblot检测 A549细胞中 MALAT1、miR-19b-3p、缺氧诱导因 子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的变化。采用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)和流式细胞术检 测细胞增殖、细 胞 周 期 和 凋 亡 情 况。采 用 Transwell实 验 检 测 细 胞 迁 移 及 侵 袭 能 力。结 果 在 NSCLC 癌 组 织 及 NSCLC细胞系中 MALAT1表达升高、miR-19b-3p表达降低,并且 MALAT1与 miR-19b-3p表达水平呈负相关(r= -0.8969,P<0.01);过表达 miR-19b-3p及敲除 MALAT1可使 A549细胞中 miR-19b-3p基因表达升高,MALAT1、 HIF-1α及 VEGF基因表达下降。过表达 miR-19b-3p使 A549细胞增殖能力、分裂能力、侵袭迁移能力下降,凋亡率增 加。结论 MALAT1可能靶向 miR-19b-3p调节 HIF-1α/VEGF参与非小细胞肺癌发生发展。     

Inhibitory effects of miR-146b-5p on cell migration and invasion of pancreatic cancer by targeting MMP16

Previous studies have shown that miRNAs participate in a wide range of biological functions and play important roles in various human diseases including cancer.We found miR-146b-5p significantly dysregulated in human pancreatic cancer cells by qRT-PCR.To demonstrate its function and regulation mechanism,we overexpressed miR-146-5p by transfecting the mimics.Our data showed that miR-146b-5p overexpression significantly reduced the abilities of migration and invasion of MIA PaCa-2 pancreatic cancer cells.Furthermore,we found that matrix metalloproteinase 16(MMP16) was a downstream target of miR-146b-5p by dual-luciferase reporter assay.Altogether,our findings suggest that miR-146b-5p may be involved in pancreatic cancer cell migration and invasion by targeting MMP16,and miR-146b-5p may be a potential therapeutic target for the pancreatic cancer.     

肝癌组织miR-146b-5p和miR-134的表达下调及临床意义

目的 探讨微小RNA(miR)-146b-5p和miR-134在肝癌组织中的表达及其临床病理意义.方法 选取2017年6月～2018年12月我院收治的原发性肝癌患者73例,取患者的原发肿瘤组织为观察组,同时选取相对应的癌旁正常组织标本为对照组.采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测癌组织和癌旁正常组织中miR-...     

血清神经元特异烯醇化酶临界值在鉴别小细胞肺癌与非小细胞肺癌中的作用

目的 通过较大样本血清神经元特异烯醇化酶（NSE）的检测,确定鉴别小细胞肺癌（SCLC）与非小细胞肺癌（NSCLC）NSE血清水平临界值。方法 酶联免疫吸附法检测137例经病理证实的肺癌患者NSE血清水平,应用ROC曲线确定鉴别SCLC与NSCLC的最佳临界值。结果 SCLC组血清NSE阳性率显著高于NSCLC组（P〈0．01）,应用ROC曲线确定NSE的最佳临界值为15．45μg／L;在此临界值下,NSE鉴别SCLC与NSCLC的敏感性为66．7％,特异性为65．7％。结论 检测血清NSE水平可以作为鉴别SCLC与NSCLC的指标之一,具有一定的临床应用价值。     

血清miR-378和miR-216b对早期非小细胞肺癌的诊断价值分析

目的：探讨早期非小细胞肺癌患者血清中miR-378和miR-216b表达水平及其诊断预后价值。方法：前瞻性选择2017年4月至2018年10月我院收治的非小细胞肺癌患者86例（观察组）以及健康体检人员86例（对照组）作为研究对象。采用RT-qPCR检测两组血清中miR-378和miR-216b表达水平。采用ROC曲线评价血清miR-378和miR-216b对早期非小细胞肺癌的诊断价值,Cox回归分析探讨miR-378和miR-216b表达水平是否是早期非小细胞肺癌患者预后的相关因素。结果：观察组血清miR-378表达水平显著高于对照组,miR-216b显著低于对照组（P＜0.05）。手术后,早期非小细胞肺癌患者miR-378水平显著降低,miR-216b水平显著升高（P＜0.05）。ROC曲线结果显示：血清miR-378和miR-216b诊断早期非小细胞肺癌的曲线下面积分别为0.874、0.845,最佳截断值为5.28和4.96,敏感度为81.39%、79.07%,特异度为84.88%、87.20%。血清miR-378高表达和miR-216b低表达患者肿瘤II期、发生淋巴结转移和肿瘤≥3cm）概率显著升高（P＜0.05）。miR-378低表达和miR-216b高表达患者生存率分别大于miR-378高表达和miR-216b低表达患者（P＜0.05）。多因素Cox回归分析显示,肿瘤分期为II期（HR=2.07, 95%CI: 1.28～3.35）、有淋巴转移（HR=3.33, 95%CI:1.55～7.16）、肿瘤大小≥3cm（HR=1.90, 95%CI: 1.11～3.24）、miR-378＞8.13（HR=2.51, 95%CI:1.16～5.44）、miR-216b＜3.61（HR=3.05, 95%CI:1.47～6.32）是影响肺癌患者预后危险因素（P＜0.05）。结论：早期非小细胞肺癌患者血清中miR-378表达水平异常升高、miR-216b表达降低,miR-378异常高表达和miR-216b异常低表达患者预后不良风险增加,miR-378和miR-216b有望作为非小细胞肺癌临床诊治的有效生物标志物     

miR-30a-5p对肺癌细胞增殖与迁移的影响及其机制

研究miR-30a-5p 对非小细胞肺癌（NSCLC）增殖和迁移的影响,并探讨其调控机制。方法NSCLC A549细胞系分成两组,miR-30a-5p组和对照组,分别转染miR-30a-5p mimics和microRNA scramble,MTT实验及细胞划痕实验分别测定两组细胞增殖和迁移能力,实时聚合酶链反应（real time-PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别测定两组泛素蛋白连接酶（UBE3C）mRNA 和蛋白质表达水平。结果培养48 h后,miR-30a-5p 组相对活细胞百分比低于对照组[（203.7±16.8）% vs（330.4±20.7）%（p =0.000）];培养72 h后,miR-30a-5p组相对活细胞百分比（258±30.2）%,对照组相对活细胞百分比（403.4±28.4）%,miR-30a-5p组相对活细胞百分比低于对照组（p =0.001）。细胞划痕实验示：miR-30a-5p组划痕愈合率为（23.2±2.7）%,对照组划痕愈合率为（89.2±4.8）%,miR-30a-5p 组划痕愈合率低于对照组（p =0.000）。real time-PCR显示,miR-30a-5p 组UBE3C mRNA 表达水平为（0.15±0.02）,对照组UBE3C mRNA 表达水平为（1.03±0.09）,miR-30a-5p组UBE3C mRNA表达水平低于对照组（p =0.000）;Western blot显示,miR-30a-5p组UBE3C 蛋白表达水平为（1.57±0.26）,对照组UBE3C 蛋白表达水平为（5.32±0.42）,miR-30a-5p 组UBE3C 蛋白表达水平低于对照组（p =0.000）。结论miR-30a-5p抑制NSCLC 增殖和迁移,其机制与下调UBE3C表达有关。     

非小细胞肺癌E-钙粘蛋白基因异常的研究

目的 观察非小细胞肺癌组织中E—钙粘蛋白(E—cadherin）的基因异常。方法 采用PCR—SSCP及序列分析，研究了24例非小细胞患者肺癌组织中E—cadherin基因外显子6、7、8、9的基因突变。结果 24例非小细胞肺癌中发现2例存在E—cadhetrin exon9的基因插入、缺失及突变。结论 E—cadherin在非小细胞肺癌中存在基因异常改变，尤其集中在E—cadherin的细胞外区域，主要表现为插入及缺失，细胞外区域的某因异常改变可能是赞成上皮细胞粘附力下降的主要原因。     

miR-17-5p在非小细胞肺癌患者中的表达及其与临床病理特征的相关性

目的探讨miR-17-5p在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的表达差异及其与临床病理特征的相关性。 方法利用数据库分析miR-17-5p在NSCLC肿瘤组织与正常组织中的表达差异。分析60例NSCLC患者和60例健康受试者血清miR-17-5p表达,并结合临床资料分析其表达差异的临床意义;分析miR-17-5p、CEA、CYFRA21-1和CA125与临床病理特征的相关性。 结果数据库和临床分析发现,miR-17-5p在NSCLC组织和血清中的表达均显著高于健康对照组(P＜0.05),并且高表达患者的预后要比低表达患者差。通过AUC曲线测量的miR-17-5p诊断准确性为0.746,大于CEA、CYFRA21-1和CA125。临床分析发现,血清miR-17-5p高表达与患者的淋巴结转移相关。 结论血清miR-17-5p可作为潜在的NSCLC诊断和预后评价的分子标志物。NSCLC患者血清miR-17-5p表达升高,且与患者的预后关系密切。