应用二核苷酸重复多态DMD产前基因诊断研究

目的：应用二核苷酸重复多态Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型肌营养不良症（ＤＭＤ）基因诊断,探讨ＤＭＤ产前基因诊断方案及其可行性。方法：在应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）初步分析Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因内含子４９和４５的（ＣＡ）ｎ多态分布的基础上,以Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因５′端（ＣＡ）ｎ多态和内含子４５,４９,５０以及３′端（ＣＡ）ｎ多态为遗传标记,单体型连锁分析的同时直接检测缺失相结合的方法。结果：Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因内含子４９和４５的（ＣＡ）ｎ多态共检测到７个和６个等位片段,实际检出的杂合子率为８６．６％和７３％;在东北地区首次成功地完成了８个家系９例ＤＭＤ产前基因诊断。结论：该方法不分缺失型和非缺失型一步完成诊断,是临床产前基因诊断较理想的方案。     

假肥大型肌营养不良的分子生物学和基因诊断

假肥大型肌营养不良（Ｄ／ＢＭＤ）是一种等位基因Ｘ－连锁隐性遗传病,本文综述了Ｄ／ＢＭＤ基因的定位、结构、突变 和致病机理,并重点阐述了目前对Ｄ／ＢＭＤ携带者检测和产前诊断几种基因诊断方法的适用范围和各自的优缺点。     

DMD的产前基因诊断小结

ＤＭＤ(假性肥大型进行性肌营养不良症 )是具严重危害的Ｘ染色体连锁隐性遗传病 ,男性活产婴儿的发病率为 1/ 35 0 0 ,一般 3～ 6岁发病 ,进行性加重 ,12岁左右即不能行走 ,约 2 0岁夭折 ,无有效治疗方法 ,其防治的基本措施是对ＤＭＤ高危孕妇进行胎儿产前基因诊断 ,不让有病患儿出生。目前通用的产前基因诊断步骤为 :用ｍＰＣＲ(多重聚合酶链反应 )筛测先证者患儿的基因变异类型 ,对缺失型家系可用ｍＰＣＲ分析羊水ＤＮＡ是否缺失与先证者同样的基因片段 ;而对非缺失家系 ,则采用ＳＴＲ(短串联重复系列 )多态的单体型连锁分析。现将笔者对3…     

Amp-FLP连锁分析对DMD基因诊断的价值

①目的　探讨扩增片段长度多态性（Ａｍ ｐ－ＦＬＰ）连锁分析对杜氏进行性肌营养不良（ＤＭＤ）基因诊断中的价值。②方法　运用多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）、聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法,对１０ 个ＤＭＤ家系成员的抗肌营养不良蛋白基因内９个基因区进行了Ａｍ ｐ－ＦＬＰ连锁分析。③结果　１０ 个ＤＭＤ家系中的９ 个先证者,６ 例为外显子缺失,１ 例为内含子缺失,２ 例为非缺失型。④结论　Ａｍ ｐ－ＦＬＰ连锁分析是对ＤＭＤ进行基因诊断的实用方法。     

一个BMD家族基因短串联重复顺序多态性分析

目的：在一个一代发病的Ｂｅｃｋｅｒ型肌营养不良稼系中进行等位片段长度多态性分析,识别患者,携带者及正常后代不同的单体型。方法：用多重聚合酶链反应方法扩增Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因外显子,检测有无外显子缺失,用聚合酶链反应方法扩增位于Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因内含子的短串联重复顺序（ＳＴＲ４４,ＳＴＲ４５,ＳＴＲ４９,ＳＴＲ５０）,所得产物进行等位估算长度多态性。结果：先证者第１７,１９及４５号外显子缺     

Duchenne型肌营养不良症患者32例基因缺失分析及产前诊断

目的:探讨Duchenne型肌营养不良症(DMD)基因缺失突变的类型,建立基因诊断技术平台.方法:应用寡核苷酸引物扩增DMD基因18个外显子区域,对27例家系32例DMD患者进行基因缺失分析,用4对二核苷酸重复序列多态引物对DMD家系进行扩增片段长度多态性连锁分析.并对10例先证者有DMD基因缺失的家系进行产前诊断.结果:27例DMD家系中19例(70.4%)有至少1个外显子缺失,且缺失热点区域集中在外显子12、13、45、47、48、49和50,所有携带者至少有1个或1个以上多态性位点为杂合态,缺失诊断结合多态分析进行诊断,10例男性胎儿中2例具有外显子缺失.结论:基因缺失诊断结合连锁分析可快速、准确地进行DMD的产前诊断.     

Amp—FLP连锁分析对DMD基因诊断的价值

①目的 探讨扩增片段长度多态性（Ａmp-ＦＬＰ）连锁分析对村氏进行性肌养不良（ＤＭＤ）基因诊断中的价值。②方法运用多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）、聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法,对１０个ＤＭＤ家系成员的抗肌营养不良蛋白基因内９个基因区进行了Ａmp-ＦＬＰ连锁分析。③结果１０个ＤＭＤ家系中的９个先证者,６例为外显子缺失,１例为内含子缺失,２例为非缺失型。④结论 Ａmp-ＦＬＰ连锁分析是对ＤＭＤ进行基因诊 实用方法。     

多重聚合酶链反应快速诊断基因缺失型假肥大型肌营养不良症

应用９对寡核苷酸引物先５对后４对分２套分别扩增Ｄｕｃｈｈｅｎｎｅ型肌营养不良症（ＤＭＤ）基因９个不同的外显子区域，对９个ＤＭＤ型肌营养不良症（ＤＭＤ）家系和１个ＢＭＤ家系共１３例ＤＭＤ／ＢＭＤ患者进行筛查，发现７例ＤＭＤ患者的ＤＭＤ基因存在一个或数个外显子所在的区域的缺失，从而不但明确了这些家系ＤＭＤ基因突变的分子基础，而且为这些家系的遗传咨询和产前诊断提供了科学依据。     

散发型DMD/BMD家系突变分析及产前诊断研究

目的 分析散发型DMD/BMD家系中患者的致病突变,为部分家系的胎儿进行产前基因诊断,明确该类家庭中女性成员是否致病突变携带者,分析该类家系新发突变的比例.方法 共收集30个散发DMD/BMD家系,应用传统mPCR方法 分析DMD基因缺失热区中的18个外显子;应用MLPA方法,对家系中的30例患者及23个家系中的28位女性成员,进行DMD基因全部79个外显子的定量分析,并为其中19个家系进行20例产前诊断.结果 mPCR检测到19例缺失突变;MLPA检测到21例缺失突变和3例重复突变,并明确缺失突变范围.在检测到突变的家系中,10例母亲为缺失突变携带者,2例为重复突变携带者,9例母亲不是携带者,新发突变比例为37.5%.7例患者的姐妹中5例为携带者(3例缺失,2例莺复),2例不是携带者.经产前诊断,12例男性胎儿中5例为患者,8例女性胎儿中2例为携带者.结论 MLPA方法 可全面检测DMD基因缺失及重复突变、明确女性携带者,为产前诊断提供准确信息.     

散发型DMD/BMD家系突变分析及产前诊断研究

目的 分析散发型DMD/BMD家系中患者的致病突变,为部分家系的胎儿进行产前基因诊断,明确该类家庭中女性成员是否致病突变携带者,分析该类家系新发突变的比例.方法 共收集30个散发DMD/BMD家系,应用传统mPCR方法 分析DMD基因缺失热区中的18个外显子;应用MLPA方法,对家系中的30例患者及23个家系中的28位女性成员,进行DMD基因全部79个外显子的定量分析,并为其中19个家系进行20例产前诊断.结果 mPCR检测到19例缺失突变;MLPA检测到21例缺失突变和3例重复突变,并明确缺失突变范围.在检测到突变的家系中,10例母亲为缺失突变携带者,2例为重复突变携带者,9例母亲不是携带者,新发突变比例为37.5%.7例患者的姐妹中5例为携带者(3例缺失,2例莺复),2例不是携带者.经产前诊断,12例男性胎儿中5例为患者,8例女性胎儿中2例为携带者.结论 MLPA方法 可全面检测DMD基因缺失及重复突变、明确女性携带者,为产前诊断提供准确信息.