心肌肌钙蛋白(cTn)检测的临床评价

在我国 ,随着人民生活水平的不断提高 ,传染病、寄生虫病的不断控制 ,人口的疾病谱已发生显著变化。解放初冠心病、心肌梗死十分少见 ,而如今我国不少地区 ,冠心病、心肌梗死病例大幅增加 ,在部分城市已成为人口死亡的主要原因。心肌肌钙蛋白Ｉ(ｃａｒｄｉａｃｔｒｏｐｏｎｉｎＩ,ｃＴｎＩ)是近年来发展起来的一种高特异、高灵敏反映心肌损伤的血清标志物 ,已越来越多地用于心肌梗死、心绞痛的诊断和鉴别诊断 ,并有逐渐取代心肌酶的趋势。心肌损伤标志物检测是急性心肌梗死 (ａｃｕｔｅｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ ,ＡＭＩ)的…     

人心肌肌钙蛋白Ⅰ酶促化学发光免疫分析方法的建立

目的 建立检测人心肌肌钙蛋白Ⅰ的酶促化学发光免疫分析方法.方法 采用两株抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ的单克隆抗体,一株包被聚苯乙烯化学发光板,一株标记辣根过氧化物酶,采用辣根过氧化物酶/鲁米诺/过硼酸钠体系,建立了测定人血清心肌肌钙蛋白Ⅰ的酶促化学发光免疫分析方法,并进行了方法学鉴定.用该法测定80例正常人血清,确定正常参考值范围;测定临床病理样品27例,与Beckman全自动化学发光试剂测定值进行相关性分析.结果 本方法测定范围0.3 ～ 100μg/L,分析灵敏度0.16μg/L;37℃反应时间30min;回收率76.8％ ～ 111.1％;高浓度cTnI血清样品经系列倍比稀释后测定,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数0.999;批内、批间变异系数分别为3.90％～6.71％,7.66％～10.34％;与心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白C(TnC)、骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ(sKTnI)、骨骼肌肌钙蛋白T(sKTnT)、人心肌脂肪酸结合蛋白(h-FABP)、人心肌肌酸激酶(CK-MB)、人心肌肌红蛋白、C-反应蛋白(CRP)均无交叉;确定临床正常参考值小于0.304μg/L;与Beckman全自动化学发光试剂比较,两者测定值线性相关系数为0.925.结论 该方法反应时间短、特异性强、重复性好,具有应用及推广价值.     

超敏肌钙蛋白Ⅰ检测在糖尿病心肌损伤早期诊断中的价值

目的 探讨在糖尿病心肌损伤的早期诊断中检测血清超敏肌钙蛋白Ⅰ（hs-cTnⅠ）的价值。方法 选取2017年1月~2019年1月本院收治的103例2型糖尿病合并心肌损伤患者为观察组,选取同期行健康体检的100例志愿者为对照组,分别检测两组血清中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、糖化血红蛋白（HbA1c）及hs-cTnⅠ水平并比较。结果 两组AST、CK、CK-MB水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;观察组HbA1c及hs-cTnⅠ水平高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;在观察组患者中,HbA1c≤6.4%组与HbA1c＞6.4%组的患者AST、CK及CK-MB水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,而HbA1c≤6.4%组hs-cTnⅠ水平低于HbA1c＞6.4%组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 针对糖尿病心肌损伤,通过对患者hs-cTnⅠ进行检测,有助于疾病的早期诊断及治疗。     

血清肌钙蛋白Ⅰ用于化疗药物致心肌毒性的检测

近些年来,心肌肌钙蛋白Ⅰ(cNnI)与心肌损伤关系的研究逐步展开,并已在心肌损伤疾病的诊断中得到肯定,是反映心肌损伤的敏感而且特异的生化指标[1-3].     

重组人心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备重组人心肌肌钙蛋白I（rhcTnI）的单克隆抗体,并对其单克隆抗体的特性进行鉴定。方法利用纯化后的rhcTn I作为免疫原,常规免疫Balb／c小鼠．取其脾细胞与同系骨髓瘤细胞Sp2／0进行常规融合。用甲基纤维素半固体培养基法获得单克隆抗体杂交瘤细胞株,利用ELISA、Western blot等方法对单克隆抗体的特性进行鉴定。结果筛选出3株稳定分泌抗rhcTnI的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为4B3、7D5和3E6。 3株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类分别为IgGl（4B3、7D5）和IgG2b（3E6）。3株单克隆抗体与rhcTnI发生特异性结合,而与大肠杆菌菌体蛋白、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）无特异性交叉反应,3株单克隆抗体的亲和力常数分别为1．76×10^9L／mol、1．43×10^9L/mol和1．04×10^9L/mol。结论获得了效价高、特异性好的抗rhcTnI的单克隆抗体,为cTnI诊断试剂盒的研制奠定了基础。     

血清人心肌肌钙蛋白I快速测定方法的建立

目的：建立一种简便、快速、准确检测人心肌肌钙蛋白Ｉ（ｃＴｎＩ）的胶体金免疫层析法。方法;应用ｃＴｎＩ抗体细胞株６株。其中３Ｆ１０作为金标抗体,３Ａ７作为生物素化抗体,链霉亲合素结合于硝酸纤维素膜、制成免疫层析测试条,依据测试条上出现肉眼可见的红色线条判定结果。结果：检测灵敏度可达０．４ｎｇ／ｍｌ。测定３０例急性心肌梗塞（ＡＭＩ）患者血清ｃＴｎＩ,并与国外同类产品比较,两者符合率为９３．６％。结论：     

一种检测血清心肌肌钙蛋白Ⅰ的生物传感器

目的：建立一种新的血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)定量检测法。方法：用亲和层析法提纯cTnI，免疫BALB／C鼠及新西兰兔，并用杂交瘤技术及膜渗滤亲和层析法，制备了特异性抗cTnI单克隆抗体和多克隆抗体。以葡萄球菌蛋白A作基底膜，特异性多克隆抗体作捕捉抗体，单抗9F5作第二抗体，制成了表面等离子体共振生物传感器。比较了直接法和夹心免疫法检测血清cTnI的性能。结果：夹心免疫法的最低检测限(0．8μg／L)是直接法的5倍(4μg／L)，检测范围为(0．8～20)μg／L，批内及批间精密度分别达3．8％～5．1％，6．3％～8．1％。用该夹心法及国外试剂盒分别检测40名健康献血队员和28例急性心肌梗死患者血清cTnI水平，两者符合率分别为97．5％和94．6％。结论：所建立的夹心免疫法操作简单，特异性强，灵敏度高，符合临床诊断要求。     

脐血心肌肌钙蛋白Ⅰ及其与急性宫内窘迫的关系研究

目的探讨急性宫内窘迫对脐动脉血CTnl的影响.方法利用化学发光免疫分析法测定正常新生儿和发生过急性宫内窘迫及产时窒息新生儿脐动脉血中CTnl浓度.结果急性宫内窘迫组脐动脉血CTnl(x±s=0.728±2.998ng/m1),显著高于正常儿组(x±s=0.024±0.183ng/ml)P＜0.01.产时窒息组(x±s=0.049±0.08ng/ml)与正常组之间差异不显著P＞0.05.结论;急性宫内窘迫症可造成胎儿心肌受损,脐血CTnl是胎儿心肌受损的可靠指标.     

血清高心肌肌钙蛋白-Ⅰ预测高血压患者心脑血管事件

目的:血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponin Ⅰ,cTnI)水平在发生进行性心肌损伤时增高,预示心肌事件的高风险.本文旨在研究是否血清高cTnI水平与无左心室(left ventricular,LV)收缩功能紊乱的高血压(hypertension,HT)患者不良转归相关.方法:收集检测170例无LV收缩功...     

新生儿缺氧缺血性脑病血清心肌肌钙蛋白Ⅰ及肌酸激酶检测的研究

目的　探讨血清心肌肌钙蛋白Ⅰ (cTnI)在新生儿缺氧缺血性脑病 (HIE)时心肌损伤的诊断价值。方法　检测4 5例HIE患儿的血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)和肌酸激酶同工酶 (CK MB) ,并同时检测 30例健康儿童作为对照组。结果　HIE患儿血清cTnI和CK MB明显高于正常对照组 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,血清cTnI在诊断HIE患儿心肌损伤时较血清CK MB更为敏感 (P <0 .0 5 ) ;结论　HIE患儿血清cTnI和CK MB明显高于正常小儿 ,说明HIE患儿存在心肌损伤 ,血清cTnI在诊断心肌损伤时较血清CK MB更为敏感。     

抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体制备中免疫抗原的选取

目的　获得与人骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ没有交叉反应的抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ (HcTnⅠ )特殊位点的单克隆抗体。方法　选择了包括牛心肌肌钙蛋白Ⅰ (BcTnⅠ )、根据HcTnⅠ氨基酸序列的亲水性设计的 4个钥孔虫戚血蓝蛋白 (KLH)偶联肽段和一个八倍体多肽分子 (MAP)等 6种代用抗原 ,通过免疫、杂交和筛选 ,获得了能分泌抗 (HcTnⅠ )的IgG型抗体的杂交瘤细胞株 ,并对得到的抗体进行了特异性鉴定。结果　用其中 4种抗原免疫得到了抗HcTnⅠ的IgG型单抗的细胞株 ,其中的 3种合成肽可以得到分泌抗HcTnⅠ特殊位点的IgG型单抗细胞株。结论　为临床上检测cTnⅠ以诊断急性心肌梗塞 ,提供了可能抗体     

人心肌肌钙蛋白玉鲁米诺化学发光酶免疫分析法的建立

目的:制备两株抗人心肌肌钙蛋白玉(human cardiac troponin Ⅰ,cTnⅠ)单克隆抗体,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法。方法:制备腹水型单抗、饱和硫酸铵沉淀法和亲和层析柱Protein G 纯化抗体,并通过SDS-PAGE 和ELISA 对抗体特异性进行鉴定,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法,并对30 份临床血清样本进行检测。结果:本实验制备的两株单抗(分别命名为Ab1、Ab3;亚型都是IgG1)能够识别以cTnⅠ单体、cTnⅠ-C 复合物和cTnⅠ-T-C 复合物不同形式存在的cTnⅠ。Ab1、Ab3 的效价分别为1 :80 万和1 :40 万,亲和力常数分别为1.62×10⁹L/ mol、2.60×10⁸ L/ mol。利用2 株单抗建立的鲁米诺化学发光酶免疫分析法检测范围为:6.25 ~ 400 ng/ ml。对30 份临床样本进行检测,阳性检出率为77.3%,阴性检出率为100%。结论:建立了可以检测以cTn玉单体、cTnⅠ-C 和cTnⅠ-T-C 复合物形式存在的cTnⅠ的鲁米诺化学发光酶免疫分析法,具有更高的实用性。     

Ⅰ型登革病毒NS1抗原捕获ELISA的建立和初步临床诊断应用

目的以登革病毒特异性非结构蛋白1（NS1）单克隆抗体为基础建立Ⅰ型登革病毒（DEN1）抗原检测的酶联免疫吸附（ELISA）法，并探索从病人早期血清样品中检测DEN1-NS1的可行性。方法利用已制备的抗DEN1-NS1单克隆抗体（单抗），进行多种抗体组合配对优化模式的分析，建立双抗体夹心抗原捕获ELISA，以469份健康人血清样品确定cut off值，检测DEN1感染患者急性期血清样品。结果对多种抗体组合反复筛选，最终确立了最佳的包被单抗和酶标测定单抗，建立了抗体夹心捕获DEN1-NS1抗原的酶联免疫测定方法，能特异检测DEN1，与其他血清型登革病毒不发生交叉反应。检测16例临床确诊DEN1感染病人急性期血清样品，15例呈特异的抗原反应阳性。结论成功建立了DEN1-NS1抗原捕获ELISA并应用于临床血清样品的检测，为登革热的早期实验室诊断提供技术方法。     

人心肌肌钙蛋白Ⅰ胶体金免疫层析试纸条的研制

目的建立一种简便实用胶体金免疫层析检测方法．用于人心肌肌钙蛋白I（cTnI）的快速检测。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,以鼠源抗cTnI单克隆抗体进行胶体金标记,以兔源抗cTnI多克隆抗体固定于硝酸纤维素膜作为捕获抗体,采用免疫层析技术制备快速检测cThI胶体金免疫层析检测试纸条。并与国外生产的胶体金试剂盒作对比。结果该试纸条检测范围质量浓度为5ng／mL～1μg／mL;灵敏度质量浓度为5ng／mL：特异性：与肌红蛋白、肌酸磷酸激酶同工酶、cTnT、cTnC无交叉反应：与国外胶体金试纸条检测结果比较阳性符合率为96．4％,阴性符合率为100．0％。结论成功建立cTnI胶体金免疫层析检测方法,该方法灵敏度高,特异性强,检测速度快,适于急性心肌梗死的早期诊断及科研工作需要．     

化学发光法测定519例心肌肌钙蛋白Ⅰ水平

心肌肌钙蛋白Ⅰ（CTnⅠ）作为心肌损伤标志物,在临床上已应用了多年,由于其高度的心肌特异性,对于心肌损伤的高度敏感性及较长的窗口期,CTnⅠ已被临床医生及检验人员广泛接受,已取代肌酸激酶同工酶（CK-MB）,不仅成为判断心肌损伤,特别是诊断急性心梗（AMI）的标准。而且已成为判断冠脉综合征患者处于心肌损伤风险的最合适的标志物,CTnⅠ的升高还可支持临床医生及早做出抗血栓、抗血小板凝集及介入性治疗。     

人心肌肌钙蛋白Ⅰ基因的人工合成及高效表达

目的人工设计合成完整的人心肌肌钙蛋白I(hcTnI)基因,克隆并在大肠杆菌中获得高效表达。方法根据大肠杆菌遗传密码的偏爱性,人工设计合成hcTnI基因,测序正确后通过DNA重组技术将其插入温控型表达载体pBV220,转化大肠杆菌(E.coli)DH5α,构建cTnI基因的非融合表达菌hcTnI-pBV220/DH5α,热激后诱导非融合蛋白的表达,用单克隆抗体检测特异性hcTnI蛋白表达。结果序列分析表明克隆载体中的cTnI人工基因与设计相符,双酶切电泳结果证明表达载体构建成功,经SDS-PAGE证实重组蛋白的相对分子质量(Mr)约24000,凝胶密度扫描约占菌体总蛋白的25%,能与cTnI单克隆抗体特异性结合。结论成功获得cTnI人工基因,构建了cTnI基因原核表达载体并获得了高效表达,为制备高特异性的抗体及临床检测应用奠定了基础。     

急性冠脉综合征患者血清肌钙蛋白Ⅰ、心肌酶谱的变化

急性冠脉综合征（ACS）已成为致死、致残的主要疾病，早Ⅰ期、准确、快速诊断ACS，及时溶栓或经皮冠状动脉介入治疗（PCI）是减少该病致残率、致死率的主要措施。心肌酶谱、肌钙蛋白Ⅰ（TnⅠ）作为心肌损伤的血清标志物，其敏感性、特异性均较高，是临床很有价值的诊断和观察指标。本文回顾性总结我院心内科和急诊科近几年收治的ACS病例上述指标的阳性率变化，结果报告如下。     

手足口病患儿心肌酶谱、肌钙蛋白Ⅰ和脑电图、心电图改变的临床分析

目的观察手足口病（HFMD）患儿心肌酶谱和脑电图、心电图改变,评价其改变的临床意义。方法收集本院已确诊的96例HFMD住院患儿,检测激酸激酶（CK）、激酸激酶同工酶（CKMB）、乳酸脱氢酶（LD H）、谷草转氨酶（AST）、肌钙蛋白Ⅰ（TnI）;同时做常规12导联心电图及脑电图分析。对心肌酶异常及心电图,脑电图异常的例数进行统计。结果HFMD组CK、CKMB、LD H、AST、TPI活性明显高于正常对照组（P〈0.05）,HFMD组心电图异常率明显高于对照组（P〈0.01）;脑电图异常率明显高于对照组（P〈0.01）。结论部分HFMD患儿可存在心肌损害及中枢神经系统损害,对手足口病患儿应及时进行心肌酶谱和脑电图、心电图的观察,以便能够采取积极有效的治疗措施。     

心肌肌钙蛋白Ⅰ床边定性测定对急性心肌梗死的快速诊断

为了观察急性心肌梗塞(AMI)患者血中心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)的动态变化, 采用一步法免疫色谱干膜层析活性卡, 快速检测了20例AMI患者的cTnⅠ并与CK-MB作对照. 结果发现cTnⅠ和CK-MB的阳性率分别为90%、60%, 两者之间有显著差异; 两者特异性分别为92.9%、85.7%, 无统计学显著差异; 心脏病患者CK-MB也有升高, 而cTnⅠ阴性. 结论: cTnⅠ活性卡操作简便, 灵敏性高, 可用于床边检测.