胸腺素组份5对小鼠造血干细胞的作用

实验采用超滤技术提纯的小牛胸腺素组份5(THF_5),对日龄50～60天、体重22～24g的瑞士纯种正常或照射小鼠,连续腹腔注射50、100、150μg,7和14天后,测造血干细胞(CFU-S)、粒系造血祖系细胞(CFU-C)及骨髓有核细胞。实验证明,THF_5不论对正常或照射小鼠的造血干细胞均有增殖作用,而且在一定范围内,给药剂量和CFU-S、cFU-C呈正相关。THF_5对850rad照射小鼠可提高活存率15～30％,与造血干细胞的变化是一致的。说明THF_5能促进受照射小鼠残存干细胞的增殖分化。     

亚致死剂量X射线照射的小鼠骨髓粒系祖细胞(CFU—C)的辐射敏感性及其数量的恢复

多能造血干细胞(CFU-S)是造血组织中一组未分化的细胞群,它可根据需要而产生不同的血细胞。这些未分化的增殖细胞通常对电离辐射非常敏感,并且这些细胞的枯竭可造成机体的严重辐射损伤。因此很多学者反复研究了造血干细胞在恢复射线损害造血组织方面的作用。近来一些学者广泛注意到CFU-C的自身更新能力,认为受照射动物的CFU-C是由造血组织中原有活存的但非同一细胞群的CFU-S或CFU-C再生的,活存的CFU-S的子代对X射线     

不同来源脾结节生成细胞增殖与分化性能的比较

应用单个脾结节和性染色体作为天然的细胞遗传学标志,证明存在于纯系LACA或C_(57)胎鼠肝脏和成年小鼠骨髓中的脾结节生成细胞(简称CFU-S)大多具有重建照射小鼠髓系与淋巴系细胞的功能。因而,是一类淋巴-髓系干细胞。然而,存在于正常成年小鼠外周血中的CFU-S,虽然它们也可以在照射小鼠脾脏上生成由各系血细胞组成的脾结节,但其中至少有一部分已经失去了重建照射小鼠造血功能的能力,反映了CFU-S在功能上的不均一性。脾结节测试技术是目前测定造血干细胞的一项重要技术,但是,能够生成脾结节的细胞,不一定都具有造血干细胞的基本特性,一些由造血干细胞分化的多向性造血祖细胞也可能在照射的小鼠脾脏上生成脾结节。     

小牛胸腺素F5对小鼠骨髓造血干细胞辐射损伤的防护作用

小鼠受200～100拉德γ线一次全身照射后连续7天注射胸腺素F₅50微克一天,测定多向性造血干细胞(CFU-S),实验组D₀值为300拉德,对照组为150拉德,根据D₃₇求得的剂量递减系数为2,表明胸腺素对CFU-S有保护作用。小鼠一次全身照射100～400拉德后,骨髓细胞经胸腺素1微克/平皿体外培养48小时,其粒系造血干细胞(CFU-S)存活率高于对照组,说明胸腺素对CFU-S有一定保护作用。如在照射上述剂量后,注射胸腺素140微克/天,连续7天,其CFU-S存活率比对照组明显增高,说明胸腺素对CFU-S有促进增殖、分化,即一定的治疗效果。如给小鼠注射胸腺素100微克/天连续7天后,经125拉德照射,CFU-S的活存率比对照组明显提高;但当剂量增人到375及625拉德时,未见有保护作用。     

造血干细胞(CFU)增生状态的研究

用Till和McCulloch(1961)的方法,能定量地测定小鼠的多能造血干细胞(CFUs)。一种方法是移植少量骨髓或脾细胞进入超致死剂量照射的受体鼠,8～10天以后计数脾脏内的集落数(外源性-CFUs)。另一种方法追查亚致死剂量照射     

低剂量率γ线连续照射后造血损伤与恢复的长期观察

小鼠经低剂量率(70拉德/天)γ线连续照射25天后,造血干细胞和造血祖细胞数量大幅度减少。在连续观察的一年期间,虽然骨髓有核细胞数和晚红系祖细胞(CFU-E)很快恢复到了正常水平,但造血干细胞(CFU-S)、祖细胞(BFU-E、CFU-GM)却始终处于低下状态,其水平相当于向年龄正常动物的50～70%.骨髓造血微环境也同时受到不同程度的破坏,停止照射詹半年其CFU-F只恢复至正常的70%.这些结果表明,小鼠经低剂量率γ线连续照射后,造血组织中存在着潜在的损伤,它是产生一系列辐射远后效应的重要原因。     

小鼠淋巴细胞对受γ线照射的造血干细胞增殖和分化的放大作用

我们过去的工作已经证明,正常的小鼠T淋巴细胞对正常多向性造血干细胞(CFUS)的增殖有放大作用,但对受辐射损伤的干细胞是否仍有调控作用,是个值得探讨的问题,于是我们又研究了淋巴细胞对受不同剂量γ线照射的CFU-S增殖分化的调控作用。材料和方法 1.动物: LACA纯种小鼠。供体小鼠50天日龄雌性;受体小鼠60—70天日龄雌雄均用。     

DHEA对放、化疗损伤造血功能保护作用的实验研究

目的：研究17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯（DHEA）对137Csγ射线和环磷酰胺（CTX）所致小鼠造血及免疫功能损伤的保护作用。方法分别用8．0 Gy 137Csγ射线和CTX建立C57BL/6小鼠动物模型,观察DHEA低、中、高3个剂量对两个模型小鼠的造血干细胞脾结节形成细胞（CFU-S）数、外周血WBC、骨髓有核细胞数、脾脏指数的影响。结果 DHEA各组对小鼠137Csγ射线照射所致的外周血WBC、CFU-S数、骨髓有核细胞数的降低具有保护作用,并增大了脾脏指数。DHEA各组对环磷酰胺引起的小鼠WBC、CFU-S数、骨髓有核细胞数降低有抑制作用。结论 DHEA能减轻辐射和环磷酰胺对小鼠造血系统的损伤。     

照射骨髓基质细胞对辐射损伤小鼠造血重建的影响

采用辐照方法将骨髓基质细胞(BMSC)预先强化,再经体外培养、富集后与骨髓细胞(BMC)一起经尾静脉输注给全身致死剂量照射的小鼠。采用股骨BMC计数,CFU-GM和CFU-S测定及股骨切片组织学观察等方法研究了这种细胞对辐射损伤小鼠造血重建的影响。结果表明输入的BMSC对辐射损伤小鼠造血重建具有促进作用。进一步研究表明,这种细胞对辐射损伤小鼠造血重建的促进作用不是由于其中含有造血干细胞(HSC)所致,而是通过其经血循环迁徒至造血组织后对同时输入BMC中的HSC增殖和向粒系分化发挥支持和刺激作用来实现的。     

骨髓及脾脏干细胞在致死剂量照射小鼠血小板再生中的作用比较

在啮齿动物,移植多能造血干细胞可减轻致死性全身照射所致的造血系统损伤。已证明从不同的造血组织来的干细胞其性能是不同的。移植脾细胞时,CFUs的再生速度比移植骨髓细胞时快;移植脾细胞所产生的脾巨核细胞是移植骨髓时的三倍。为了确定脾脏的干细胞是否可同样提高照射后血小板的修复,本文通过给小鼠输注等量的这两种类型的细胞,比较这种重建后的小鼠血小板的再生情况。另外,通过将脾切除及多血小鼠与正常小鼠作比较,评价了对红细胞需求增加和降低的情况下血小板的再生。将0、0.5、1、2或4×10~6骨髓细胞或10～64×10~6脾细胞由尾静脉注入给受825～950伦γ射线照射的小     

白藜芦醇促进γ射线照射小鼠造血系统损伤修复的作用

目的观察白藜芦醇对60Coγ射线照射小鼠造血系统损伤修复的影响。方法 ICR小鼠随机分成5组,即正常对照组、照射对照组以及白藜芦醇50、100、200 mg.kg-1照射组,照射前3 d灌服给药,每天1次。除正常对照组外,所有小鼠60Co射线全身5.5 Gy辐照1次,照射后第7天小鼠取骨髓细胞和脾脏,对骨髓单个核细胞和脾集落形成单位进行计数,测定骨髓细胞DNA含量和细胞周期。结果与正常对照组比较,照射对照组小鼠骨髓单个核细胞数和骨髓细胞DNA含量显著降低（P〈0.05）,脾集落形成单位数和S和G2/M期细胞百分率显著增多（P〈0.05）;与照射对照组比较,白藜芦醇100、200 mg.kg-1照射组小鼠照射骨髓单个核细胞数、骨髓细胞DNA含量、脾集落形成单位数和S和G2/M期细胞百分率显著增多（P〈0.05）,白藜芦醇50 mg.kg-1照射组有增多趋势。结论白藜芦醇可以促进60Coγ射线照射小鼠造血系统损伤的恢复,防护效果与给药剂量相关。     

小鼠骨髓基质细胞移植对急性辐射造血损伤的影响

目的：探讨小鼠骨髓基质细胞（marrow stromal cell,MSC）同种异体移植对接受全身大剂量辐射小鼠造血修复的影响。方法：在体外对小鼠骨髓基质细胞进行培养、扩增,并将第三代细胞通过尾静脉移植到同种接受全身大剂量射线照射的小鼠,测定移植后不同时期小鼠外周血白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血小板（PLT）、血红蛋白（HGB）值,观测各组脾集落形成单位（colony forming unit,CFU-S）,探讨同种异体骨髓基质细胞移植对急性辐射造血损伤修复的影响。结果：经骨髓基质细胞移植的小鼠,其WBC、RBC、PLT、HGB在移植后15-20 d较对照组明显增高（WBC、PLT、HGB：P〈0.01;RBC：P〈0.05）,移植组CFU-S明显高于对照组（P〈0.01）。结论：同种异体小鼠骨髓基质细胞移植,能促进小鼠造血干细胞在脾脏定居,增强造血干细胞形成集落的能力,并能显著提高外周血细胞数量,促进损伤后早期造血功能重建。     

人基因工程重组超氧化物歧化酶对骨髓造血干细胞的辐射防护作用

用照射小鼠的骨髓造血干细胞(CFU-S)外源性脾结节形成法,评价人基因工程重组SOD(rhSOD),聚乙二醇(PEG)修饰的长半衰期重组SOD(PEG-SOD)对CFU-S的辐射防护作用.结果显示:rhSOD和PEG-SOD均能明显提高CFU-S产率,其中rh SOD在照射前1h给药效果好,而PEG-SOD在照射前2～3h给药作用更为明显,化学修饰后SOD血浆半衰期延长,将使给药时机及药物作用持续时间得到改善.     

单次注射聚乙二醇化重组人巨核细胞生长发育因子促进骨髓抑制小鼠多系造血功能恢复

目的:观察一次静脉注射聚乙二醇化重组人巨核细胞生长发育因子(PEG-rHuMGDF)对亚致死剂量全身照射小鼠造血恢复的影响。方法:8周龄雄性BALB/c小鼠,用3.5GyX射线照射后1小时静脉分别一次注射PEG-rHuMGDF1、8、80和640μg/kg,基因重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)10、50、250和1000μg/kg或赋形剂,观察其外周血象和照后5天内造血干/祖细胞及照射后12天脾集落生成单位(CFU-S)的变化。结果:照射后第8天,赋形剂组小鼠外周血小板数达最低值,此后开始上升,但第18天仍未恢复到正常值水平。PEG-rHuMGDF8μg/kg治疗小鼠的血小板最低…     

厌氧棒菌菌苗对造血干细胞增殖的影响——巨噬细胞调控造血的初步探索

本实验表明注射厌氧棒菌菌苗(简称CP菌苗)对正常小鼠多向造血干细胞(CFU-S)和粒巨噬系祖细胞(CFU-GM)的增殖均有明显的促进作用,此外CP菌苗对受750rad照射小鼠的骨髓干细胞也有明显的保护作用。实验中又观察到注射CP菌苗组腹腔巨噬细胞吞噬功能明显增高。     

TNF-α对放射所致造血损伤的保护效应

研究ＴＮＦ－α对放射所致造血损伤的保护效应及其机理。方法采用骨髓粒－单系祖细胞体外琼脂培养技术，研究ＴＮＦ－α对致死剂量６０Ｃｏγ射线全身照射小鼠的防护效果；对亚致死剂量照射后小鼠造血重建的作用，采用流式细胞技术，分析ＴＮＦ－α对小鼠骨髓细胞周期分布的影响。结果ＴＮＦ－α照射前给药能提高受致死剂量照射小鼠３０天存活率至４６．６７％，照射后１３～１９天外周血白细胞、第３天骨髓有核细胞、造血干细胞以及第３，５天粒－单系祖细胞均显著高于照射对照组（Ｐ＜０．０１），同时发现ＴＮＦ－α能阻止静止期骨髓细胞进入增殖周期。结论肿瘤坏死因子促进照射后小鼠骨髓造血的恢复，可能是ＴＮＦ－α抗放作用的重要机理之一。     

人巨噬细胞集落刺激因子(hM-CSF)对60C0γ射线照射后小鼠血细胞生成的影响

本文研究了人巨噬细胞集落刺激因子(hM-CSF)对经亚致死剂量⁶⁰COγ射线照射后小鼠血细胞生成的影响。细胞生成的影响。结果显示hM-CSF可刺激照射后小鼠CFU-M和CFU-S的形成,并增加BMC的数量。hM-CSF还可以增加照射小鼠外周血白细胞的总数,且增加的白细胞主要为单核细胞和中性粒细胞。hM-CSF对外周血红细胞和血红蛋白的影响无显著意义.上述结果提示hM-CSF可促进⁶⁰Coγ射线照射小鼠造血功能的恢复。     

裂变中子和γ射线照射小鼠骨髓增殖能力的比较

近年来利用~(125)碘-脱氧尿嘧啶核苷(~(125)IUdR)掺入测定造血系统功能已有不少报道,例如测定造血干细胞周期的不同参数,造血干细胞及祖细胞的增殖能力以及γ线照射小鼠造血系统残余损伤等。实践证明这种测试手段可以作为研究造血功能的一种工具。 Huber等给受致死剂量照射的受体小鼠输注适量小鼠骨髓细胞,在照后3—6天,每天测定增殖活力(脾中~(125)IUdR掺入量)。在一定限度内,输入骨髓细胞数与~(125)IUdR呈线性相关。作者认为本法可以用于测试造血     

造血干细胞的竞争性分化在照后白细胞减少中的作用

LACA小鼠经5 Gyγ线全身照射后l～4天腹腔注射经分离,洗涤和浓集的红细胞(供血鼠预先照射8.5Gyγ线)。其血红蛋白含量上升到正常对照的140.4%。照后20天骨髓CFU-E含量比照射对照组低4倍。虽然其红系造血受到明显抑制,但其骨髓CFU-S,CFU-GM及外周血粒细胞数分别比照射对照组高28、80.3和97.6‰。结果表明,小鼠受照后,存在造血干细胞的竞争性分化,向红系统分化占优势。多血通过反馈机制改变了干细胞的分化方向,使之多向粒系统分化.从而增加了外周血粒细胞数置。本文报告的结果表明照后造血干细胞的竞争性分化及向红系分化占优势是外周血白细胞数量减少的原因之一。     

真皮多能干细胞促进大鼠急性放射损伤造血恢复的研究

目的 观察真皮多能干细胞移植对大鼠急性放射损伤后造血恢复的作用。方法 分离新生大鼠真皮多能干细胞体外培养至第10代用于研究，观察干细胞层体外对正常大鼠骨髓粒-巨噬系祖细胞和红系祖细胞集落生长的影响；进一步将真皮多能干细胞经尾静脉输入5Gyγ射线全身照射的大鼠体内，检测移植后骨髓有核细胞、粒-巨噬系祖细胞集落CFU—GM、红系祖细胞集落CFU—E和外周血白细胞数量、血红蛋白含量等指标的恢复情况，观察4周后动物的存活率。结果 真皮多能干细胞层体外可促进正常大鼠CFU—GM和CFU—E集落的生长；全身输入干细胞促进了5Gyγ射线全身照射动物的外周血白细胞和骨髓有核细胞、CFU-GM和CFU—E集落数的恢复。实验组动物4周后的存活率也明显高于对照组。结论 真皮多能干细胞具有一定支持造血的功能，可促进急性放射损伤大鼠的造血恢复，为造血损伤相关疾病的干细胞治疗提供新的细胞来源途径。