加味四逆散调控抑郁症大鼠海马BDNF、NR1表达及促进海马DG区神经再生的研究

目的研究加味四逆散对抑郁症大鼠海马BDNF、NR1表达的调控及促进海马DG区神经再生的效应及机制。方法建立慢性应激性抑郁症模型。采用荧光标记的免疫组化方法检测海马DG区NeuN、BrdU、脑源性神经营养因子(BDNF)、N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NR1)的表达水平。原位杂交技术检测海马DG区BDNF表达水平。结果慢性应激能抑制海马DG前体细胞的增殖(P<0.01);抑郁症大鼠海马DG区BDNF表达明显下降(P<0.01),NR1的表达明显升高(P<0.01)。JWSNS和氟西汀能明显增加抑郁症大鼠海马DG单位面积中神经元数目和新增殖细胞量(P<0.01),增强海马DG区BDNF的表达(P<0.01)和降低NR1的表达(P<0.01)。结论 JWSNS能够促进抑郁症大鼠海马DG区神经细胞的增殖,并可能通过增强BDNF的表达和降低NR1的表达,促进海马DG区的神经再生。     

NMDA受体及其拮抗剂的研究进展

N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体是一种离子型谷氨酸受体,在中枢神经系统兴奋性的突触传递、可塑性和兴奋毒性中起着关键作用,与机体的记忆、学习和情绪密切相关.本文从结构分布和生理活性这两方面详细总结了N-甲基-D-天冬氨酸受体各亚型的特点,介绍并汇总了目前研究较多的N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂,为N-甲基-D-天...     

NMDA受体的作用位点研究

N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体是离子型谷氨酸受体家族中的重要一员,是神经系统发育以及神经毒性的核心。NMDA受体通道大分子上存在着许多独立的结合位点。(1)谷氨酸(Glu)作用位点:Glu作为NMDA受体经典的激动剂,高浓度Glu的作用于NMDA受体识别部位,使细胞膜去极化,离子通道开放;低浓度的Glu则不能使NMDA门控的离子通道打开,需要甘氨酸(Gly)的参与。(2) Gly作用位点:Gly受体和NMDR有相同的分布,并对NMDA受体激活有增强作用。Gly能增加Glu与NMDA识别位点的亲和力,使通道开放频率增加4～6倍。研究表明NMDA受体被Glu激活前,需要Gly的结合,Gly起着NMDA受体协同激动剂的作用。(3)Mg2+作用位点:Mg2+是兴奋性氨基酸受体NMDA非竞争性阻断剂和Ca2+拮抗剂。NMDA受体通道的开放受配体和膜电位的双重控制。在静息态的膜蛋白条件下,Mg2+等镶嵌在通道深部,阻挡胞内外离子交换,这时即使Glu和Gly结合到NMDA受体,Mg2+也会阻断离子的流出。细胞去极化时Mg2+被电场力移开,离子得以流动,Mg2+的抑制作用逐渐减小并消失,故Mg2+是调节NMDA受体的重要位点。(4) Zn2+作用位点:Zn2+可以非竞争性地拮抗NMDA受体的反应。升高Gly的浓度不能翻转Zn2+的抑制作用,表明Zn2+有单独的结合位点。Zn2+对NMDA受体的抑制作用需要两个结合位点参与,其一是高亲和力、非电压依赖性结合位点,其二是低亲和力呈电压依赖性的结合位点。(5)多胺作用位点:多胺对NMDA的电流有多重影响。多胺的增强效应可分为:非Gly依赖性刺激作用(饱和Glu和Gly会引起全细胞电流增加);Gly依赖性刺激作用(在Gly浓度亚饱和的情况下,精胺能增加NMDA受体与Gly的亲和力,对NMDA电流有刺激效应)。多胺的抑制效应也可分为电压依赖性通道抑制作用,以及Glu受体亲和力降低作用。其中,Gly是Glu为开放受体通道所必需的,多胺对通道开放起正性调节作用,而Zn2+和Mg2+则起负性调节作用。此外,这些位点之间还存在着复杂的交互作用,NMDA受体通道是由复杂多样的因子所调节的。NMDA受体是学习记忆相关神经网络中一个相对中心的关键位点,中枢系统中广泛参与学习记忆、突触可塑性、缺血性脑损伤及神经退行性疾病等多种生理病理过程。本文以NMDA受体的作用位点为切入点,阐明NMDA受体的调节作用,以期为神经系统相关疾病的研究提供理论指导。     

抗NMDA受体脑炎2例报告并文献复习

<正>抗N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体脑炎是一种抗NMDA受体抗体介导的,主要侵犯边缘系统的脑炎。目前国外报道较多,而国内报道却较少。笔者所在科2012年04月—11月共收治2例,现报告总结如下。1病例资料1.1例1女,56岁。因记忆力减退17 d,发作性精神行为异常10 d,加重伴意识障碍5 d于2012年04月入院。院前检验甲状腺功能正常,乙肝、丙肝、艾滋病、梅毒抗体阴性。腰     

抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎

抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(anti-N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)脑炎是与NMDAR的亚单位NR1相关的一种脑炎,其特点为病程呈多阶段性,主要表现为精神异常、记忆障碍、癫痫发作、意识水平降低等,常伴有运动障碍、自主神经功能紊乱和呼吸节律异常。     

N-甲基-D-天冬氨酸受体与抑郁障碍

越来越多研究表明,除单胺神经递质外,谷氨酸及相关受体在抑郁症病因中也扮演了重要的角色,特别是N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体,有证据表明NMDA受体的过度激活是抑郁障碍的病理生理机制之一。本文总结了谷氨酸及相关受体与抑郁障碍的关系,对NMDA受体成为潜在抗抑郁药靶点做一简要讨论。     

加味四逆散分时给药对慢性应激大鼠生物节律的影响

目的研究中药复方加味四逆散(JWSNS)分时给药对慢性应激大鼠生物节律的影响。方法采用慢性不可预知轻度应激建立慢性应激大鼠模型。运用余弦节律分析法观察分析慢性应激大鼠昼夜体温节律、血清5-羟色胺(5-hydroxy tryptamine,5-HT)、褪黑素(melatonin,MT)、皮质酮(corticosterone,CORT)分泌及其节律的变化以及JWSNS的影响。血清5-HT、MT、CORT含量测定采用酶联免疫吸附试验。结果 JWSNS 3个给药组对模型大鼠体重增长缓慢现象没有抑制作用,但可以提高模型大鼠糖水偏爱度(P<0.01),表明JWSNS具有抗抑郁的效应。慢性应激使大鼠昼夜体温波动加剧,白昼体温更低,夜间体温更高,并且这种现象在谷值方面表现得更为明显。JWSNS酉时、卯酉分时给药对此现象具有抑制作用(P<0.05,P<0.01),且酉时给药表现为对峰值、谷值的双相调节作用,而卯酉分时给药则主要是作用于光时相,即对谷值(白昼)进行调节。慢性应激大鼠的体温节律出现延迟现象,主要表现为时相的推后,只有JWSNS卯时给药可以对体温节律延迟有抑制作用。慢性应激大鼠昼夜血清5-HT、MT、CORT含量波动幅度减小,分泌节律紊乱,主要表现为时相的大幅提前。JWSNS酉时和卯酉分时给药对大鼠血清5-HT水平低下具有抑制作用(P<0.01);JWSNS酉时给药对血清MT含量波动幅度的减小具有抑制作用(P<0.01),而JWSNS卯时给药和卯酉分时给药则对MT分泌节律紊乱具有抑制作用(P<0.01);JWSNS酉时和卯酉时给药可抑制CORT的升高,对血清CORT含量波动幅度的减小具有抑制作用(P<0.01)。结论 JWSNS卯时给药抗抑郁主要通过调节体温、激素以及神经递质分泌的节律,酉时给药抗抑郁主要通过调节激素和神经递质的分泌量,而卯酉分时给药则具有以上两方面的综合效应。     

NMDA受体NR2A,NR2B亚基对大鼠脑缺血再灌注海马CA1区神经细胞损伤的作用

目的 观察N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA)NR2A,NR2B亚基对脑缺血-再灌注后海马CA1区神经细胞存活的不同影响.方法 采用Pulsinelli-Brierley四动脉阻塞(4-VO)大鼠全脑缺血模型,缺血前连续3天脑室注射NR2A,NR2B反义寡核苷酸(AS ODN)后缺血15 min,复灌5 d,石蜡切片,以焦油紫染色,图像分析测定单位面积内焦油紫染色细胞面积总和,与缺血组及错义寡核仟酸组(MS ODN)进行形态学分析.结果 NR2A、NR2B反义寡核苷酸对脑缺血再灌注后海马 CA1神经细胞均有明显保护作用,以NR2A AS ODN保护作用更明显,与缺血组比较约有50%细胞仃活(P＜0.05).结论 NR2A,NR2B亚基的含量降低对脑缺血再灌注后海马神经细胞有明显保护作用.     

儿童抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎19例临床分析

目的:总结儿童抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)脑炎临床特点,以提高临床医师对该病的认识。方法:回顾性分析2015年12月至2017年3月于江西省儿童医院神经内科就诊的19例抗NMDAR脑炎患儿的临床表现、辅助检查、治疗、预后。结果:临床主要表现为精神行为异常、抽搐、运动障碍、睡眠障碍;10例头颅MRI异常;17例脑电图异常,主要表现为背景活动慢;5例脑脊液常规异常,淋巴细胞增高为主;2例血清抗NMDAR抗体IgG阴性,17例血清抗NMDAR抗体阳性及19例脑脊液抗体阳性;17例予一线免疫治疗,15例好转;随访16例,15例均好转,其中2例复发。结论:儿童抗NMDAR脑炎无明显性别差异,临床主要表现为精神异常、抽搐、运动障碍、睡眠障碍,出现中枢性通气障碍及合并肿瘤较少见,约半数头颅MRI表现异常,主要为颞叶受损;脑电图主要表现为背景活动慢,脑脊液无明显特异改变,少部分血清免疫抗体可为阴性;多数一线免疫治疗有效,大部分预后良好,复发率低于成人。     

NMDA受体功能降低而非增强参与皮质酮诱发的海马长时程增强减弱

目的 研究皮质酮(CORT)致长时程增强(LTP)减弱时,N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体功能的变化.方法 取C57BL/6J小鼠的海马制备300μm的脑片,分别采用含不同药物的人工脑脊液循环灌流75 min;以0.033 Hz单脉冲刺激诱发场兴奋性突触后电位(fEPSP),以单次高频刺激(HFS,100 Hz,...     

石杉碱甲对血管性痴呆小鼠海马NMDA受体及mRNA表达的影响

目的:观测石杉碱甲对血管性痴呆小鼠海马神经元N-甲基D-天门冬氨酸(NMDA)受体免疫组化和原位杂交变化的影响,探讨石杉碱甲干预作用的机制.方法:双侧颈总动脉线结,反复缺血-再灌注法制备模型,药物组用石杉碱甲溶液灌胃,跳台试验和水迷宫试验观测其行为学改变,采用免疫组化和原位杂交技术观测小鼠海马神经元NMDA受体及其mRNA的表达变化.结果:在跳台试验中,模型组小鼠学习阶段的反应时间延长、错误次数增加,记忆阶段的潜伏时间缩短、错误次数增加;水迷宫试验中,其学习阶段的游全程时间延长和错误次数增加,记忆阶段的游全程时间延长和错误次数增加(与假手术组相比,P＜0.01).石杉碱甲明显改善了模型小鼠上述学习、记忆成绩(P＜0.01).同时,药物组海马的NMDA受体及其mRNA表达也较模型组的表达明显增高(P＜0.01),且海马两者的表达在药物组与假手术组间差异无显著性.结论:石杉碱甲改善血管性痴呆小鼠学习、记忆成绩与其恢复海马低水平的NMDA受体及其mRNA有关.     

N-甲基-D-天冬氨酸受体与全身麻醉药对发育期大脑的神经毒性

N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体是一类对Ca2+高度通透性配体门控离子通道。NMDA受体在脑发育突触可塑性、学习记忆方面都起到重要作用,也是全身麻醉药作用的主要靶点之一。全身麻醉药诱导发育期大脑神经毒性,进而影响成年期认知功能发育,这是否由NMDA受体介导,尚待进一步研究予以证实。     

N-甲基-D-天冬氨酸型谷氨酸受体的调节与氰化物中枢毒作用

氰化物可通过间接与直接两条途径激活(N-甲基-D-天冬氨酸型)NMDA受体，首先氰化物引起的能量障碍能通过促使细胞外谷氨酸(Glu)浓度增高和细胞内Ca^2 稳态失调，间接地激活NMDA受体，其次氰化物可能作为NMDA受体直接的调节剂，通过调节NMDA受体中NR1或NR2亚型等半胱氨酸残基的氧化还原位点，提高NMDA受体的活性，随着间接和直接NMDA受体的激活，产生一系列由NMDA受体介导的中枢毒作用，最终导致神经元细胞损伤、凋亡及死亡。由此认为NMDA受体的激活在氰化物诱导的神经损伤机制中可能起关键的作用。     

催产素对甲基苯丙胺引起的小鼠前额叶皮层和海马内N-甲基-D-天冬氨酸受体亚型1蛋白表达变化的影响

目的研究脑室注射催产素对甲基苯丙胺引起的小鼠前额叶皮层和海马内谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸受体亚型1(NMDAR1)蛋白表达变化的影响,为探讨催产素拮抗甲基苯丙胺精神依赖作用的中枢机制提供实验依据。方法分别取经急性和慢性甲基苯丙胺处理的小鼠的前额叶皮层和海马,采用Western Blot分析方法检测催产素对NMDAR1蛋白表达的影响。结果催产素可以显著拮抗急性给予甲基苯丙胺及复吸甲基苯丙胺引起的小鼠前额叶皮层NMDAR1蛋白表达的增高;可以显著抑制甲基苯丙胺戒断时引起的小鼠前额叶皮层NMDAR1蛋白表达的降低;急性及慢性甲基苯丙胺处理对小鼠海马内NMDAR1蛋白表达没有显著性影响。结论用甲基苯丙胺处理对小鼠前额叶皮层部位NMDAR1蛋白表达的影响较大;催产素可以拮抗甲基苯丙胺引起的前额叶皮层部位NMDAR1蛋白表达的变化。     

用放射自显影术研究人参总皂甙对大鼠海马NMDA受体的影响

采用〔３Ｈ〕ＴＣＰ放射配基作海马ＮＭＤＡ受体的自显影，研究人参总皂甙在海马齿状回颗粒细胞层诱发ＬＴＰ效应和促进大鼠记忆保持能力时，海马内此受体的变化。给人参总皂甙的大鼠海马ＣＡ１、ＣＡ３和ＤＧ（ｄｅｎｔａｔｅｇｙｒｕｓ齿状回）的ＮＭＤＡ受体银粒数较给生理盐水大鼠的平均分别增多４２．８４％±２．４％，３８．５７％±３．１３％，３５．８１％±１．４６％（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１），表明人参总皂甙在诱发海马ＬＴＰ和促进大鼠记忆行为时，可增加海马的ＮＭＤＡ受体数目和活性。     

人参皂苷Rg1对慢性应激抑郁模型大鼠谷氨酸及其受体表达的影响

目的：观察人参皂苷Rg1对慢性应激抑郁模型大鼠脑内海马、前额叶皮质区谷氨酸及其不同类型受体表达的影响，探讨其潜在的抗抑郁机制。方法：将SD大鼠随机分为5组：正常组、模型组、氟西汀组（10 mg·kg^-1）、人参皂苷Rg1低、高剂量组（25、50 mg·kg^-1）。采用慢性不可预见性温和应激的方法建立抑郁大鼠模型，于造模同时灌胃给药，共21天。造模结束后采用Morris水迷宫和旷场实验评价大鼠的抑郁样行为，HE染色观察大鼠海马、前额叶皮质区病理改变情况，HPLC法检测谷氨酸含量，Western-blotting法检测离子型谷氨酸受体NMDAR1、代谢型谷氨酸受体mGluR1的蛋白表达情况。结果：与正常组比较，模型组大鼠抑郁样行为显著，海马、前额叶皮质区均存在较为明显的损伤，谷氨酸含量显著升高，NMDAR1、mGluR1蛋白表达均显著上调；在给予人参皂苷Rg1干预后，模型大鼠的抑郁样行为得到缓解，海马、前额叶皮质区损伤减轻，谷氨酸含量下降，NMDAR1、mGluR1蛋白表达水平明显逆转。结论：人参皂苷Rg1对大鼠抑郁症状有明显的改善作用，并能减轻海马和前额叶皮质损伤，其机制可能与调节脑内谷氨酸含量，并抑制其受体表达有关。     

不同发育期大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体3A亚基的表达及其抗缺血缺氧能力

目的 观察不同发育时期海马神经元N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体3A亚基(NR3A)的表达及其抗缺血缺氧能力与其NR3A表达量的关系。方法 取鼠龄1, 5, 10, 15, 20, 30和90 d大鼠海马,采用Western印迹法检测海马神经元NR3A表达;制备鼠龄10, 15, 20和30 d大鼠海马切片,免疫组化法检测NR3A表达。取鼠龄10, 15, 20和30 d海马脑片,体外制备氧糖剥夺损伤模型(OGD),采用PI染料标记和荧光方法检测观察神经元坏死情况。结果 Western印迹和免疫组化结果显示,大鼠海马NR3A亚基的表达以10 d鼠龄时最高,此后逐渐下降,直至成年都一直维持较低的水平。对海马脑片进行OGD处理后,鼠龄10 d的海马脑片受损细胞数明显少于其他组,5 d,20 d组PI阳性细胞数多于10 d,鼠龄30 d的海马脑片损伤细胞数最多。结论 鼠出生后海马神经元NR3A亚基表达呈现先高后低的状态,成年鼠NR3A亚基的表达量维持在较低水平。NR3A亚基的高表达有利于神经元对抗OGD造成的损伤。     

γ-羟丁酸钠对缺氧缺血后新生大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基mRNA表达的影响

目的　探讨γ羟丁酸钠(GHB Na)对缺氧缺血后脑损伤新生大鼠有无保护作用及N 甲基 D 天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)与脑损伤的关系。方法180只7日龄SD乳大鼠,随机分为5组(每组36只) ,分别为假手术(Sham)对照组、生理盐水(NS)对照组、GHB Na 5 0 ,10 0和2 0 0mg·kg- 1组。按Rice法制备缺氧缺血模型。Sham组仅分离颈总动脉,不结扎,不缺氧。GHB Na组动物于缺氧缺血后立即腹腔注射GHB Na。Sham组和NS组动物注射相同体积的生理盐水。以后每8h一次。在术后2 ,6 ,12 ,2 4h ,3和7d每组处死6只乳大鼠。应用逆转录 聚合酶链反应技术测定左侧海马组织中NR2BmRNA的表达,并进行半定量分析。结果　与Sham组相比,NS组术后2h ,NR2BmRNA的表达明显减少(约2 0 % ) ;在术后6 ,12 ,2 4h和3d ,NR2BmRNA的表达没有明显变化;术后7d ,NR2BmRNA的表达显著升高(约94 % )。与NS组相比,GHB Na 10 0mg·kg- 1组在术后6 ,12 ,2 4h ,3和7d ,NR2BmRNA的表达明显减少(分别减少约2 7% ,4 5 % ,19% ,31%和37% ) ;而GHB Na 5 0 ,2 0 0mg·kg- 1组的NR2BmRNA在这些时间点虽然也较NS组有不同程度的减少,但差异多无显著意义。结论　GHB Na能有效抑制新生大鼠缺氧缺血后海马NR2BmRNA的表达,特别是10 0mg·kg- 1组的抑制作用好于5 0和2 0 0mg·kg- 1组     

逍遥丸对抑郁模型大鼠海马突触素mRNA表达的影响

目的研究逍遥丸(舒肝解郁中药方剂)抗抑郁作用的分子机制。方法以原位杂交和RT-PCR方法,研究慢性应激抑郁模型大鼠的海马突触素mRNA表达以及逍遥丸对其影响。结果模型组大鼠海马突触素mRNA表达量明显上升,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);氟西汀组、逍遥丸组大鼠海马突触素mRNA表达量显著下降,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论模型大鼠海马神经元内突触素表达上调,逍遥丸能下调其表达。     

应用膜片钳技术对缺氧和非缺氧两种状态下NMDA受体特性研究

目的 通过对正常和缺氧条件下N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体特性进行研究,探讨下丘脑神经元缺氧损伤的机理,为临床防治脑缺血/缺氧损伤提供实验依据.方法 取材于新生SD大鼠下丘脑视前区/下丘脑前区(PO/AH)神经元应用膜片钳单通道记录技术对缺氧和非缺氧两种状态下NMDA受体特性进行研究,观察其在缺氧和非缺氧条件下的翻转电位、电流幅度、电导特性的变化.结果 神经元缺氧后其通道内向电流幅值由平均(4.501&#177;0.980)pA(n=20,40 mV)上升为(6.000&#177;1.750)pA(n=16,40 mV),优势电导由非缺氧组的(45.693&#177;1.850)pS(n=16)上升为(60.206&#177;1.750)pS(n=10),而翻电位极为接近.结论 缺氧是使NMDA受体通道过度激活和Ca2+大量内流的一外因条件,神经元缺氧时,同一钳制电压下其内向电流幅度明显高于对照组,优势电导也有明显上升,可以解释为缺氧引起了神经元Ca2+超载,从而介导了细胞的损伤和死亡.