荧光原位杂交快速检测羊水胎儿染色体非整倍体

目的探讨应用荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization,FISH)技术用于快速产前诊断胎儿染色体非整倍体的临床价值。方法采用13、21和18、X、Y两组染色体探针,对308例未培养的羊水细胞样本进行染色体非整倍体检测。所有样本同时进行羊水细胞的常规G显带核型分析并作为标准,对FISH技术进行评价。结果 308例标本均成功杂交,共检出染色体异常14例,包括21三体10例、18三体2例、XXX 1例及XYY 1例,均与羊水培养细胞核型分析结果一致,另外9例染色体正常变异FISH技术未能检出。结论 FISH技术可以快速、准确地检测出胎儿染色体数目异常,联合羊水细胞培养能够更好的服务于临床,使产前诊断的效能达到最大化。     

用荧光原位杂交技术检测流产绒毛染色体非整倍体畸变

目的　探讨流产病因及评估荧光原位杂交 (FISH)技术在检测流产绒毛染色体非整倍体畸变中的价值。方法　采用18、X和Y染色体着丝粒探针及 13、2 1染色体单一序列探针 ,对 5 8例自然流产绒毛标本同时进行FISH检测和常规染色体核型分析。结果　FISH技术异常核型检出率 2 4 1± 0 12 % ,高于常规染色体核型分析 (15 5 % ) ;常规染色体核型分析检出 2例FISH探针计划检测外的异常核型 4 6 ,XX ,del(2 ) (q2 1)和 4 7,XX , 16。结论　FISH技术能快速、准确地诊断流产绒毛染色体非整倍体畸变 ,与常规染色体核型分析结合运用 ,可为临床流产病因的探讨提供更为准确的依据     

荧光原位杂交快速产前检测非整倍体的临床应用研究

目的探讨使用国产产前诊断探针,应用荧光原位杂交技术(FISH),检测染色体非整倍体的敏感性、特异性及可靠性。分析产前诊断指征与非整倍体发生率之间的关系。方法对329例符合产前诊断指征的患者,抽取羊水25ml,其中20ml用于传统的细胞培养和染色体G显带分析,其余5ml用FISH方法诊断13、18、21、X、Y染色体非整倍体。结果 329例受检样本中,有效样本322例,其中18三体5例,21三体6例,13三体1例,X单体6例。FISH技术检测这五种常见非整倍体的灵敏性为100%,特异性为100%。非整倍体发生率在B超异常组发生率最高为18%,与唐筛高危组比较有显著差异。结论国产FISH探针可以快速准确诊断21,13,18,X和Y 5种非整倍体,国产FISH探针用于羊水细胞常见染色体非整倍体的产前诊断具有临床可行性,超声检查+FISH是产前检测非整倍体的有效途径。     

荧光原位杂交技术在染色体非整倍体产前诊断中的应用研究

目的建立荧光原位杂交技术应用于未培养羊水标本的染色体非整倍体产前诊断。方法对于符合产前诊断指征的孕妇,于孕16-25周抽取羊水25ml,其中20ml用于传统的细胞培养和染色体G显带分析,其余5ml用荧光原位杂交方法诊断13、8、21、X、Y染色体非整倍体。结果100例受检样本中,染色体数目异常3例,其中21三体2例,45,X 1例。FISH方法与传统羊水细胞核型分析符合率100%。结论FISH技术具有快速、简便、特异的特点,可作为部分染色体非整倍体的快速产前诊断方法。     

应用荧光原位杂交技术对精子染色体非整倍体的研究

目的 探讨人类精子染色体数目异常与自然流产的相关性。方法 采用多色荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH)方法，利用CEP（chromesome enumeration DNA probes)X、Y、18及LSI（locus specific identifier DNA probes)13、21两种探针混合液与二硫苏糖醇处理过的自然流产者丈夫的精子核杂交，记数杂交信号，与对照组进行比较。结果 经卡方检验，自然流产组丈夫精子染色体X、Y、18、13、21双体型及其它数目异常明显高于正常对照组（P＜0．005），说明流产者丈夫精子染色体异常是流产的重要原因之一。结论 FISH技术是一种快速、准确、简单、实用性强的检测精子染色体的好方法。     

荧光原位杂交技术在非整倍体产前诊断中的应用进展

染色体非整倍体是指染色体数目异常,包括三体征和单体征,主要有21、13、18-三体及Turner综合征(45,X0)、XYY综合征及K linefelter综合征(XXY)。在临床染色体异常的产前诊断中21、18、13及性染色体三体异常占80%以上。因此对非整倍体的检测一直是产前诊断的重要部分。荧光原位杂交技术(FISH)能有效检测出间期羊水细胞的非整倍体异常,其敏感性高、特异性强、操作简便、实验周期短,适合于非整倍体的产前诊断。     

用双色荧光原位杂交检测人精子染色体非整倍体率

目的检测人精子染色体非整倍体率。方法采用双色荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）方法,取少量精标本经洗后制片,用二硫苏糖醇（ＤＴＴ）和二碘水杨酸锂（ＬＩＳ）处理,使精子头部染色质去凝集。然后,与生物素标记的α卫星Ｘ染色体特异ＤＮＡ探针（ＤＸＺ１）和地高辛标记的α卫星Ｙ染色体特异ＤＮＡ探针（ＤＹＺ３）进行原位杂交。用ＣＹ３－链亲和素、山羊抗链亲和素检测Ｘ染色体探针杂交信号;用鼠抗地高辛抗体、与荧光素结合的兔抗鼠抗体检测Ｙ染色体探针杂交信号。结果在Ｎｉｋｏｎ荧光显微镜下可以清楚看到精子头部的杂交信号,头部有１个红色荧光杂交信号的精子为Ｘ染色体精子（Ｘ精子）,有１个绿色荧光杂交信号的精子为Ｙ染色体精子（Ｙ精子）。精子头部有２个荧光杂交信号的精子为染色体数目异常精子。若用１条常染色体探针和１条性染色体探针进行ＦＩＳＨ,可以区别头部有２个相同颜色荧光杂交信号的精子属非整倍体精子或二倍体精子。结论双色荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）方法,可以用于测定接触致突变剂和非整倍体诱导剂后,人精子染色体非整倍体率的变化。     

多色荧光原位杂交检测人卵细胞染色体非整倍体方法的建立

目的 建立多色荧光原位杂交技术检测人卵细胞染色体非整倍体的方法。方法 取试管婴儿助孕技术后未能受精成功的卵细胞，于取卵后13d固定，采用多色荧光原位杂交方法检测卵细胞13，16，18。21和22号染色体的情况。结果 正常未受精卵细胞中期染色体显示一个成对的杂交信号，每条染色单体显示一个单个信号；分裂相中多出或缺少一个成对杂交信号表明多余或缺少一条染色体；分裂相中多出或缺少一个单个信号表明多余或缺少一条染色单体；两个单个信号分离表明两条姐妹染色单体分离。结论 采用多色荧光原位杂交方法可以有效检测人卵细胞染色体非整倍体异常。     

新疆地区荧光原位杂交产前诊断非整倍体的应用价值

目的探讨荧光原位杂交（FISH）技术产前诊断常见染色体非整倍体的应用价值。方法采用21、18、13、和Y染色体特异性DNA探针对96例孕18～23周孕妇的未培养羊水细胞进行FISH检测,同时行羊水细胞染色体核型分析。结果 FISH检测98例成功96例（97.9%）,其中染色体数目正常93例（48例为46,XX;45例为46,XY）染色体数目异常3例（2例47,XX,＋21;1例47,XX＋18）。FISH诊断结果与核型分析结果一致,染色体数目异常的3例与传统核型分析结果完全一致。结论 FISH技术用于产前诊断常见染色体非整倍体,具有简便、快速、特异性强敏感性高、所用样本量少等优点。     

用荧光原位杂交技术研究人类未受精卵细胞的染色体非整倍体

目的　探讨人类未受精卵细胞非整倍体的产生机制。方法　取未受精卵细胞固定后行多色荧光原位杂交 ,分析卵细胞中 13、16、18、2 1和 2 2号染色体的核型情况。结果　 4 7%的卵细胞核型正常 ,5 3%的卵细胞为异常核型 ,其中 18%为同源染色体不分离 ,12 %为姐妹染色单体非平衡性过早分离 ,36 %为姐妹染色单体平衡性过早分离 ;在体外培养 >2 4小时的卵细胞中 ,姐妹染色单体平衡性过早分离的发生率明显高于体外培养≤ 2 4小时的卵细胞 ( P<0 .0 1)。结论　同源染色体不分离和姐妹染色单体平衡性及非平衡性过早分离这三种机制均参与了卵细胞非整倍体的产生。姐妹染色单体平衡性过早分离与体外培养时间具有相关性     

荧光原位杂交技术在羊水细胞染色体非整倍体产前诊断中的应用

目的探讨荧光原位杂交(FISH)技术在羊水胎儿染色体非整倍体产前诊断中的应用。方法对188例孕18-23周有产前诊断指征的孕妇选用13、18、21、X、Y特异性探针进行羊水间期细胞分析,并与羊水细胞中期细胞培养结果进行对照。结果在188例羊水FISH检测中均检测成功,其中正常核型175例,数目异常核型3例,与中期羊水染色体细胞培养结果一致,另有5例正常变异,5例结构异常FISH技术未能检出。结论荧光原位杂交(FISH)技术检测羊水胎儿染色体数目异常过程简单、快速、灵敏度较高、特异性较强,对于非整倍体产前诊断具有重要意义。     

荧光原位杂交法检测严重少精子症患者精子染色体非整倍体

目的检测严重少精子症患者精子染色体非整倍体。方法收集10名严重少精子症患者和5名正常患者精液,三色荧光原位方法检测精子非整倍体。结果同正常精液患者相比,严重少精子症患者有显著高的X,Y,18非整倍体精子。     

应用荧光原位杂交产前诊断未培养羊水细胞非整倍体

目的探讨荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization,FISH)诊断未培养羊水细胞非整倍体的临床应用价值。方法对55例孕16～32周未培养羊水细胞进行FISH快速产前诊断,应用多色FISH对另4条染色体(X、Y、13号和18号)进行检测。以经母腹穿刺取胎血常规核型分析作为FISH检测结果对照。结果被检55例羊水未培养细胞均获得诊断结果,发现两例异常胎儿。1例为标准型21三体;另1例为21三体嵌合体。FISH检测与常规核型分析结果一致。结论FISH检测未培养羊水细胞非整倍体具有快速、简便、所用样本量少的优势,结果准确可靠,可达到产前诊断要求,有较大临床应用价值。     

荧光原位杂交技术研究人类体外未受精卵的17号染色体非整倍体

目的 对比两种不同间期核制备方法的效果，并比较25－30岁和31－35岁这两个女性年龄组、不同的体外受精－胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET）指征、不同超排方案等与17号染色体非整倍体率之间的关系。方法 采用0.1% Tween 20/0.01 mol/L HCl和3：1的甲醇：冰醋酸两种方法制备人类未受精卵间期核，选用人类17号染色体端粒探针（17qter），按说明书步骤进行荧光原位杂交并在方法上稍作改进。结果 36个未受精卵中，正常17号单体24枚，二体7枚，三体5枚，非整倍体出现率为33.3%（12／36）；25－30岁和31－35岁这两个女性年龄组、不同IVF指征、不同超排方案的患者的17号染色体非整倍体发生率差异无显著性。结论 两种方法信号检出率均为100％，但前者间期核制备效果较好，易于操作，避免甲醇冰醋酸刺激性气味对环境的污染，卵母细胞17号染色体的非整倍性是造成体外受精失败的重要原因之一。     

应用优化荧光原位杂交技术诊断110例羊水间期细胞常见非整倍体

目的 优化现有荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术,探讨FISH快速产前诊断多种染色体异常的临床应用.方法 改良FISH操作过程中的滴片和杂交液用量,对110例孕妇羊水样本同时进行FISH快速产前诊断和常规细胞培养核型分析.结果 110例羊水样本中,FISH检测出了4例21三体、1例18三体、58例46,XX、47例46,XY,与染色体核型分析的结果一致,符合率100%.结论 国产FISH试剂能快速、准确检测常见的5种染色体数日异常,使用样本量少、价廉.FISH技术可作为经典染色体核型分析的辅助方法,能应用于唐氏血清学高风险孕妇的快速产前诊断.     

荧光原位杂交技术检测双非整倍体48，XXX，＋21一例北大核心CSCD

患儿 女,19天,系第2胎第1产,以“胎儿宫内窘迫”行剖宫产,出生体重2700g。因“发热,疑似唐氏综合征”收住我院。查体：眼距宽,眼裂小,颈蹼,双手第5指指节短小,草鞋足,具有典型的唐氏综合征体征（图1）;外生殖器为女性。患儿双亲非近亲婚配,智力及表型均正常。生育年龄分别为29岁、30岁,否认家族遗传病史。     

荧光原位杂交技术检测非小细胞肺癌EGFR基因扩增

目的探讨荧光原位杂交(FISH)技术检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)表皮生长因子受体(epider-mal growth factor receptor,EGFR)基因扩增的临床应用价值。方法采用FISH技术检测57例人NSCLC石蜡组织标本中EG-FR基因扩增水平。对于EGFR基因扩增阳性的患者采用酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)药物进行治疗,其余患者采用传统化疗进行治疗。结果 57例NSCLC患者中有18例EGFR基因扩增阳性(31.58%),其中12例为高多体性扩增(66.67%),5例为成簇扩增(27.78%),以肺腺癌为主(72.22%)。TKIs靶向药物治疗有效率(RR)、中位生存时间(MST)和1年生存率分别为61.11%1、3.5个月和55.56%,对照组分别为35.89%、7.6个月和33.33%,差异均有显著性(P<0.05),前者的疾病控制率(DCR)高于后者,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论使用FISH技术检测NSCLC患者EG-FR基因扩增水平可以为临床采用TKIs药物治疗提...     

用荧光原位杂交技术检测流产绒毛染色体非整倍畸变

目的探讨流产病因及评估荧光原位杂交(FISH)技术在检测流产绒毛染色体非整倍体畸变中的价值.方法采用18、x和Y染色体着丝粒探针及13、21染色体单一序列探针,对58例自然流产绒毛标本同时进行FISH检测和常规染色体核型分析.结果FISH技术异常核型检出率24.1±O.12%,高于常规染色体核型分析(15.5%);常规染色体核型分析检出2例FISH探针计划检测外的异常核型46,xx,Ddel(2)(q21)和47,xx,+16.结论FISH技术能快速、准确地诊断流产绒毛染色体非整倍体畸变,与常规染色体核型分析结合运用,可为临床流产病因的探讨提供更为准确的依据.     

用荧光原位杂交技术检测人精子核的非整倍性

用荧光原位杂交技术检测人精子核的非整倍性黄建民黄天华方小武庄天罡刘鸿禧染色体数目异常是最普遍的一类人类染色体异常，导致极端严重的染色体遗传病，在新生儿中占０．３％，自然流产多达５０％是由于染色体数目异常引起的［１］。人们对母亲因素，如高龄妊娠往往导致...     

荧光原位杂交技术检测多发性骨髓瘤复杂核型异常

目的探讨多重荧光原位杂交(multiplex fluorescence in situ hybridization,M-FISH)技术联合荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术在检测多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)染色体异常中的应用价值及13q14缺失、IgH相关易位和17p13缺失的发生率。方法联合应用常规细胞遗传学(conventional cytogenetics,CC)方法及M-FISH和一组包括13q14(D13S319),14q32(IgH基因)和17p13(p53基因)探针的FISH技术分析了7例伴有复杂染色体异常的MM患者骨髓标本。结果M-FISH明确了CC分析中没有明确的异常,共检出12种染色体数目异常和29种结构异常,其中,1号染色体异常、13号染色体缺失和与14q32相关的易位最为多见。FISH检出6例伴有13q14缺失;4例伴有17p13缺失;5例伴有一个14q32相关易位,两例还伴有涉及两个14q32的易位。结论M-FISH联合FISH技术可以明确CC分析中复杂染色体异常,并发现和纠正CC分析中漏检及误检的异常,为MM染色体异常的研究提供了一种理想的