番茄萜类生物合成途径研究进展

番茄中的萜类代谢既对植株本身生长产生影响,又对番茄果实的品质和颜色有着巨大的作用.番茄中大部分萜类化合物均属于类胡萝卜素类,都是通过萜类化合物通路合成的包括3个乙酰辅酶A分子缩合成3-甲基-3,5-二甲基戊酸(MVA),MVA在酶的作用下磷酸化形成焦磷酸酯,脱羧后形成异戊二烯焦磷酸(IPP);IPP在IPP异构酶(IPPI)的作用下异构化生成甲叉双丙烯焦磷酸(DMAPP),牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(GGPPS)催化DMAPP与3个IPP分子缩合生成牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸(GGPP).2个GGPP分子在八氢番茄红素合成酶(PSY)的催化下聚合成八氢番茄红素(40碳);八氢番茄红素脱氢酶(PDS)催化八氢番茄红素成ζ-胡萝卜素,ζ-胡萝卜素在ζ-胡萝卜素脱氢酶(ZDS)的作用下生成番茄红素;在番茄红素β环化酶(LCYb)和ε环化酶(LCYe)的作用下进一步发生环化反应,分别合成α胡萝卜素和β胡萝卜素;P450类胡萝卜素对此继续作用,通过2步羟化反应生成叶黄素.就番茄中的萜类代谢途径的关键酶基因进行了详细阐述,并对其最新研究进展进行了概括,同时展望了其发展前景.     

酵母UDP-葡萄糖合成途径的优化及黄酮葡萄糖苷的合成

目的研究在酿酒酵母细胞内高表达大肠杆菌UDP-葡萄糖合成途径的2个关键酶对工程酵母细胞的葡萄糖苷化反应活性的影响。方法利用PCR方法获得大肠杆菌磷酸葡萄糖变位酶(PGM)和UDP-葡萄糖焦磷酸化酶(Gal U)基因,构建整合型表达载体,转化酵母;同时共表达具有催化黄酮葡萄糖苷化的UDP-葡萄糖转移酶,研究摇瓶培养条件下PGM和Gal U基因的表达对工程细胞生物催化黄酮类化合物葡萄糖苷化的影响。结果在酵母细胞内表达大肠杆菌UDP-葡萄糖合成途径的2个关键酶PGM和Gal U,提高了组合表达UDP-葡萄糖转移酶的工程菌生物催化合成野黄芩素-7-O-葡萄糖苷的效率,表明PGM和Gal U基因的高表达能促进UDP-葡萄糖的合成;所构建的工程菌也能催化木犀草素、柚皮素、白杨素、汉黄芩素、木蝴蝶素A、黄芩素、槲皮素以及大豆黄酮等黄酮类化合物的葡萄糖苷化。结论组合表达大肠杆菌PGM和Gal U基因能促进酵母细胞内UDP-葡萄糖的合成,进而提高了工程细胞催化合成黄酮葡萄糖苷的效率。     

星形孢菌素生物合成途径的研究进展

早形孢菌素（Staurosporine,STA）是从Streptomyces Staurosporeus AM-2282分离得到的一种生物碱。X射线晶体结构分析发现它由一个吲哚咔唑核心和通过双C—N键连接的氨基己糖构成。1986年,人们发现它是一种对蛋白激酶C（proteinkinaseC,PKC）非常有效的拮抗剂,     

器官移植供体短缺之解决途径:器官捐献

<正>文章导语:○器官移植供体的现状:没有供体,就没有器官移植,国内器官移植供需矛盾日益突出。○亲属器官移植的利弊:亲属活体供体是最好的器官,但亲属活体移植仍存在诸多困难。○供体短缺的主要原因:伦理道德、医疗技术、立法?○器官移植供体短缺解决途径:减少需     

移植供体的保存

<正>低温保存移植物方法已经得到了广泛应用,如保存哺乳动物的细胞,包括血液细胞、动物胚胎和人的胚胎等,保存异体移植物皮瓣、肌腱、角膜等。而用于器官移植的低温保存技术与普通的保存方法不同,其技术的关键还有降温迅速,待升温后器官仍能恢复活性,采用低温而不是冷     

大肠杆菌生物合成中心代谢途径的改造及其对工程菌色氨酸产量的影响

目的改造大肠杆菌色氨酸生物合成的中心代谢途径，以进一步提高色氨酸产量。 方法根据ppsA和tktA基因序列分别合成引物行PCR扩增，将PCR扩增所得PLacO1-tktA-T1片段和pZA31质粒连接，经筛选鉴定正确的pZA31-tktA重组质粒和PCR扩增所得PLacO1-ppsA-T1片段连接，构建pZA31-ppsA-tktA重组质粒，并进行测序鉴定。将鉴定正确的pZA31-ppsA-tktA和pZE12-aroG^fbr-trpED^fbr重组质粒共转化至E.coli MG1655ΔRT-R，获得的重组菌株命名为E.coli MG1655ΔRT-R[pZA31-ppsA-tktA/pZE12-aroG^fbr-trpED^fbr]（工程菌）；以pZE12-aroG^fbr-trpED^fbr重组质粒转化至E.coli MG1655ΔRT-R得到的重组菌株E.coli MG1655ΔRT-R[pZE12-aroG^fbr-trpED^fbr]作为对照菌株，加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达，3h后收集部分菌体行ppsA、tktA酶活性测定，其余发酵液继续培养4～5h后，监测调整培养基中葡萄糖浓度和pH值保持不变，48h后检测色氨酸产量。 结果PCR扩增所得片段均与预期DNA表达片段大小一致；pZA31-ppsA-tktA重组质粒测序显示，克隆的tktA和ppsA基因序列与报告序列完全相同。工程菌ppsA和tktA酶活性（U）与对照菌株比较，分别提高了3和3.5倍（分别为0.25±0.04vs.0.08±0.02，P〈0.05；0.21±0.03vs.0.06±0.02，P〈0.05）；色氨酸产量（g/L）与对照菌株比较，提高了1.3倍（1.10±0.05vs.0.80±0.05，P〈0.05）。 结论成功改造了大肠杆菌色氨酸生物合成的中心代谢途径，进一步提高了色氨酸产量，为构建高产色氨酸基因工程菌打下了基础。     

异种供体移植物与受体体内抗供体抗体共存机理的初探

为探索大鼠→兔异种造血嵌合体模型中， 大鼠造血细胞与受体兔抗大鼠单个核细胞抗体长期共存的机理， 作者通过直接、间接免疫荧光染色技术及补体介导的细胞毒试验等方法， 发现嵌合体中大鼠 Ｍ Ｈ ＣⅠ类分子阳性细胞比例为３１０ ％ ～６１９ ％ ， 但能结合兔抗大鼠 Ｉｇ Ｇ 的细胞比例仅为２０ ％ ～７９ ％ 。表明大多数大鼠单个核细胞表面未结合兔抗大鼠单个核细胞抗体。据此， 提出大鼠细胞表面的某些抗原“缺失”的见解， 但 “缺失” 的抗原中不包括 Ｍ Ｈ ＣⅠ类分子， 且这些抗原的“缺失”不影响大鼠细胞的体液免疫功能。在此基础上进一步讨论了 Ｍ Ｈ Ｃ 分子在异种移植中的作用和分子“丢失” 与异种移植耐受产生的关系。     

前列腺素生物合成的调节

用改进的物质分离和鉴定技术等方法,现已查明thromboxane(TXA_2)和prostacyclin(PGI_2)衍生物在某些组织中含量更为丰富,且作用比PGE_2和PGF_2β更强。这此autacoids的迅速出现和消失能够在酶学途径的许多位点上受到调节。影响整个前     

有心搏肾供体与尸体肾供体肾移植的病例对照研究

近年来 ,传统的有心搏“脑死亡”供体 (HBD)的数目极度缺乏 ,而等待肾移植的患者数目不断增多 ,这一矛盾促使人们研究利用其他有效的供肾来源。尽管活体亲属肾移植比例越来越高 ,但应用尸体供肾 (NHBD)可以减少使用活体肾移植 ,并将大大地减少活体的肾损伤 ,从而缓解供肾来源的短缺与等待肾移植的患者数目不断增多的矛盾。本文所列述的是 L eicester中心 1992～ 1998年间进行的 72例尸体供肾 (NHBD)和 192例有心搏供肾 (HBD)的肾移植对照研究。结果表明 :两组供肾来源不同的肾移植术 ,移植肾远期存活率相同。因此推断临床上可以使用 …     

面神经缺损修复供体的研究进展

面神经损伤常见的原因有：腮腺肿瘤手术损伤、肿瘤侵及神经必须同时切除者、面部严重外伤、先天性面瘫等。面神经损伤不仅给病人带来生活上不便，更为严重的是造成极大的精神创伤。60余年前，1例成功的面神经颞骨内修复术，开创了面神经生理功能性的外科修复术。目前，对各种原因引起的面神经损伤修复术有：面神经直接吻合术、神经替换     

亲属活体肾移植供体的麻醉处理

目的 总结分析40例素属活体肾移植供体的麻醉处理方法,为临床麻醉提供参考.方法 40例亲属活体肾移植供体,男22例,女18例,年龄38～68岁,随机分成两组,每组20例.两组患者均静注咪达唑仑0.05mg/kg,芬太尼5ug/kg,阿曲库铵0.5mg/kg,丙泊酚30～50mg诱导,插入气管导管行机械通气.A组患者采用丙泊酚4～6mg/kg/h,瑞芬太尼0.2～0.4ug/kg/min持续泵入,阿曲库铵间断静注维持麻醉;B组患者采用丙泊酚4～6mg/kg/h持续泵入,芬太尼和阿曲库铵间断静注,七氟醚1%～2%吸入维持麻醉,调整麻醉深度,使平均动脉压始终维持在麻醉前±10%,精确记录每小时尿量,术后均行静脉镇痛泵进行术后镇痛.结果 两组患者年龄,体重,麻醉时间,手术时间差畀无统计学意义(P>0.05);两组患者均安全取肾成功;两组患者拔管时间,完全清醒时间差异无统计学意叉(P>0.05).结论 两种麻醉方法都可安全有效用于该类手术.     

脑死亡供体肾损伤的相关分子研究进展

脑死亡供体(DBD)捐献供肾作为一种特殊供体,用此供体行肾移植过程前后肾脏所受损伤的程度、机制、通路等势必与活体及尸体供体肾移植有不同之处。在分子水平,如补体成分、Toll样受体等的表达,对再灌注损伤有举足轻重的作用。文章就近年来DBD肾损伤中涉及的分子机制的研究进展作一综述。     

无心跳供体供肺的低温保存

背景：目前无心跳供体供肺原位低温保护实现的途径主要有2种,一种是胸腔内表面降温技术,这种方法已经被临床成功的移植证实有效,一种是气管内通气降温技术。 目的：探讨大鼠无心跳供肺移植模型中原位支气管内通气降温和胸腔内表面降温技术结合实现低温保存供肺的可行性。 方法：将无心跳供肺移植Wistar大鼠模型随机分为：通气组以低温气体吹入气管降温,表面组双侧胸腔置管连续注入低温生理盐水,结合组同时行低温气体通气和低温盐水胸腔内降温。  结果与结论：结合组降温效果强于表面组和通气组(P < 0.05),可在60 min内将气管内、肺实质和胸腔内温度降到保存温度。初步证明原位支气管内通气降温和胸腔内表面降温技术结合降温的方式在肺移植中应用的可行性。     

肺移植中供体肺的保存

由于近年来肺移植的广泛研究和应用，研究肺保存的方法日趋多样化、复杂化。尖端科技的应用已使研究进入分子水平。但与此同时，大量病例已进入临床，成功的经验日趋定型。肺保存的温度已基本控制在１０℃左右，亦有部分学者认为４℃～８℃为最佳。肺缺血保存时间在２４ｈ内最好，最长不应超过４８ｈ。另外大量实验和临床经验证实低Ｋ＋灌洗液（ＬＰＤ、ＬＰＵＷ等）可能是肺动脉灌注中能够最佳保护肺组织的灌洗液。在未来的研究中，各种细胞因子、组织因子及缺血损伤机制在肺保存中的作用将成为主攻方向     

亲属活体肾移植供体的麻醉处理

目的总结分析40例亲属活体肾移植供体的麻醉处理方法,为临床麻醉提供参考。方法 40例亲属活体肾移植供体,男22例,女18例,年龄38～68岁,随机分成两组,每组20例。两组患者均静注咪达唑仑0.05mg/kg,芬太尼5ug/kg,阿曲库铵0.5mg/kg,丙泊酚30～50mg诱导,插入气管导管行机械通气。A组患者采用丙泊酚4～6mg/kg/h,瑞芬太尼0.2～0.4ug/kg/min持续泵入,阿曲库铵间断静注维持麻醉;B组患者采用丙泊酚4～6mg/kg/h持续泵入,芬太尼和阿曲库铵间断静注,七氟醚1%～2%吸入维持麻醉,调整麻醉深度,使平均动脉压始终维持在麻醉前&#177;10%,精确记录每小时尿量,术后均行静脉镇痛泵进行术后镇痛。结果两组患者年龄,体重,麻醉时间,手术时间差异无统计学意义（P﹥0.05）;两组患者均安全取肾成功;两组患者拔管时间,完全清醒时间差异无统计学意义（P﹥0.05）。结论两种麻醉方法都可安全有效用于该类手术。     

过氧亚硝酸阴离子供体通过蛋白激酶C途径抑制CA1区神经元延迟整流钾电流

目的: 过氧亚硝酸阴离子(ONOO^-)是一种性质活泼的自由基,可引起强的氧化性损伤,介导了一氧化氮(NO)的大部分毒性作用。本研究探讨ONOO^-对脑片海马神经元延迟整流钾电流(I_K)和动作电位时程(APD)的影响及其作用机制。方法: 应用全细胞脑片膜片钳技术记录I_K和动作电位。结果: ONOO^-供体SIN-1可抑制I_K电流峰值,使其激活曲线向超极化方向移动,并可延长APD。脑片预处理PKC抑制剂chelerythrine (2.5 μmol/L)可抑制SIN-1对I_K的作用。PKC激动剂PDBu (6 μmol/L)不仅加强而且模拟SIN-1对I_K的影响。然而,鸟苷酸环化酶(GC)抑制剂ODQ对SIN-1的作用无影响。结论: ONOO^-可能通过PKC-I_K-动作电位信号级联反应作用于海马神经元,并不依赖环磷鸟苷(cGMP)通路,这可能是ONOO^-神经毒性的机制之一。     

一例Bw亚型的糖基转移酶等位基因鉴定及蛋白结构分析

目的:对1例Bw亚型个体进行分子遗传学及蛋白结构分析。方法:采用血清学技术进行红细胞表面抗原和血清中抗体的测定,并用PCR-基于序列的分型(PCR-sequence-based typing,PCR-SBT)方法进行 ABO基因的全编码区序列和第1内含子区红系特异性调控元件的分析。进一步对存在突变位点的第5...     

一个类孟买血型家系的α1,2岩藻糖基转移酶基因突变分析

目的 研究1个中国人类孟买型血型家系的分子遗传背景.方法 以血型血清学方法鉴定先证者及其家系的红细胞ABO和H表型,应用聚合酶链反应扩增类孟买表型家系的ABO基因第6、7外显子和α1,2岩藻糖基转移酶基因(α-1,2-fucosyltransferase,FUT1)编码区,PCR产物直接测序分析,并通过克隆测序法对存在FUT1基因复合杂合的样本进行单倍体序列分析.结果 通过血清学技术在9个家系成员中鉴定了3个类孟买型,直接测序发现先证者FUT1基因存在35C/T、235G/C和682A/G复合杂合.单倍体序列分析表明先证者的FUT1基因型为h235c/h35T+628G.其中h235C等位基因引起α1,2岩藻糖基转移酶G79R替换,h35+628G等位基因引起α1,2岩藻糖基转移酶A12V和M228V替换.结论 在中国人群中发现一种新的类孟买表型相关的FUT1基因突变235G>C.     

碳水化合物糖基表位模拟肽的研究

蛋白质与糖基的相互作用在许多生理和病理过程中起重要作用 ,特异性阻断多糖或碳水化合物 ,能对病原体感染、肿瘤发生以及某些自身免疫病起到防治作用。由于糖化合物的合成、纯化困难及其胸腺非依赖抗原的性质 ,制约了这一类药物和疫苗的研制与应用。抗独特型抗体可模拟糖基表位的事实和肽库技术的建立 ,使得用小分子多肽模拟糖复合物成为可能 ,为新型疫苗和拟糖类药物的研制开发提供了新的思路。本文对近年碳水化合物糖基表位模拟肽方面的研究现状做一简要综述。     

对人工受精供体(AID)的遗传筛选——676名精子供体的研究结果

人工受精的供体对后代的遗传状况,从医学上讲是极其重要的。作者报告了在人类精液研究与保存中心(巴黎)十年(1973～1983年)对AID遗传筛选的经验和结果。对