Th9细胞对非小细胞肺癌患者CD_8~+T 细胞抗肿瘤活性的调控作用

目的:观察并分析Th9细胞及其分泌的白细胞介素-9(IL-9)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者CD_8~+T细胞抗肿瘤活性的影响。方法:选择32例NSCLC患者(肺癌组)和11例健康对照者(对照组)。分离肺癌组血浆、外周血单个核细胞(PBMCs)、肿瘤部位和非肿瘤部位的支气管肺泡灌洗液(BALF)及对照组血浆和PBMCs,检测Th9细胞比例、IL-9水平和转录因子PU.1 mRNA相对表达量。纯化肺癌组Th9细胞、CD_8~+T细胞和原代NSCLC细胞,使用重组IL-9刺激CD_8~+T细胞,观察细胞增殖和分泌穿孔素、颗粒酶B水平。建立Th9细胞、CD_8~+T细胞与原代NSCLC细胞的共培养细胞,观察IL-9对CD_8~+T细胞的细胞杀伤功能和非细胞杀伤功能的影响。组间比较采用t检验、配对t检验或Wilcoxon配对检验。结果:肺癌组外周血Th9细胞比例、IL-9水平和PU.1 mRNA相对表达量低于对照组(均P<0.0001),肺癌组肿瘤部位分离的BALF中Th9细胞比例、IL-9水平和PU.1 mRNA相对表达量低于非肿瘤部位(均P<0.0001)。IL-9刺激可增加肺癌组CD_8~+T细胞增殖和穿孔素、颗粒酶B分泌,IL-9刺激还可提升肺癌组CD_8~+T细胞对原代NSCLC细胞的细胞杀伤和非细胞杀伤功能,主要表现为细胞死亡比率增加、干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌升高。Th9细胞也可提升肺癌组CD_8~+T细胞对原代NSCLC细胞的细胞杀伤和非细胞杀伤功能,抗IL-9中和抗体可抑制Th9细胞对CD_8~+T细胞功能的调控作用。结论:Th9细胞可能通过分泌IL-9在体外增强NSCLC患者CD_8~+T细胞的抗肿瘤功能。     

单纯性肾病综合征血T细胞亚群变化及对体液免疫功能的影响

对39例初发和复发单纯性肾病综合征病儿外周血T细胞亚群,IgG,IgA,IgM进行检测.结果表明,无论初发或复发病例外周血中CD_3~+和CD_4~+细胞水平无明显变化,CD_8~+和CD_(10)~+细胞均明显高于对照组,CD_4~+/CD_8~+细胞比值均明显低于对照组,而初发组和复发组间无明显差异;85.3%的病儿伴血清IgG降低,29.4%的病儿伴血清IgM增高,CD_4~+/CD_8~+细胞比值与血清IgG水平呈显著正相关,而与IgM水平呈明显负相关.提示单纯性肾病综合征病儿存在T细胞功能紊乱,且与病儿体液免疫功能紊乱的关系密切.     

慢性血吸虫感染患者自发性抑制性T细胞功能和T细胞亚群的改变及其相互关系

检测了14例慢性血吸虫病(下称慢血)和25例晚期血吸虫病(下称晚血)患者外周血自发性抑制性T细胞(STs)功能,对所有慢血患者和15例晚血患者同时检测外周血T细胞亚群。结果慢血和晚血患者STs功能均显著增高,CD~+_3(全T细胞)百分比和CD~+_4(辅助性T细胞)/CD~+_8(抑制性/细胞毒T细胞)比值明显降低,CD~+_8细胞百分比升高,CD~+_8细胞百分比和CD~+_4/CD~+_8比值分别与STs功能呈正相关和负相关。对STs功能和T细胞亚群在慢性血吸虫感染免疫调控中的作用进行了讨论。     

前列腺癌患者T淋巴细胞亚群及NK细胞的变化

目的 了解前列腺癌患者T淋巴细胞亚群及NK细胞的变化规律,探讨前列腺癌与细胞免疫变化的关系与临床意义.方法 取前列腺癌患者外周血,流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群(CD_3~+、CD_4~+及CD_8~+)及NK细胞(CD_(16+56)~+)水平.结果 与对照组比较,前列腺癌CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+水平显著下降(P<0.01),CD_(16+56)~+水平明显下降(P<0.05).并发多个骨转移灶患者CD_3~+水平较无骨转移灶患者组显著下降(P<0.01),CD_(16+56)~+水平亦明显下降(P<0.05),而CD_4~+、CD_8~+无明显变化.结论 前列腺癌患者存在细胞免疫功能紊乱和抑制,监测其细胞免疫水平变化对判断病情及指导治疗有重要临床意义.     

Ⅰ型变态反应性疾病中T细胞亚群的数量变化

作者对一组Ⅰ型变态反应性疾病患者外周血T细胞亚群和血浆IgE水平进行了分析。患者组IgE水平明显升高。患者组CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+各T细胞亚群数量与正常对照组相比没有明显差异。该结果与Kochmen等人的研究相一致。     

丙泊酚静脉麻醉对原发性肝癌患者围术期T细胞亚群的影响

目的:观察丙泊酚静脉麻醉对原发性肝癌围术期患者T细胞亚群的影响,旨在寻找该类患者围术期影响较轻的麻醉方案。方法:选取中国人民解放军第251医院2014年1月~2015年12月间行手术治疗的原发性肝癌患者各70例,将采用七氟烷吸入麻醉的患者35例设为A组,采用丙泊酚静脉麻醉患者35例设为B组,观察两组患者在围术期T细胞亚群的变化。结果:2组患者T 1、T2时外周血CD_3~+、CD_4~+、CD_4~+/CD_8~+水平均明显低于T0时(P<0.05);B组T1、T2时外周血CD_3~+、CD_4~+、CD_4~+/CD_8~+水平均明显高于同期A组,组间比较差异显著(P<0.05);B组患者T2、T3血浆IL-4、IL-10、HMGB1及VEGF-1水平均明显高于A组(P<0.05);B组患者T1、T2、T3时血浆IL-6水平均明显高于A组(P<0.05)。结论:原发性肝癌采用丙泊酚静脉麻醉可明显降低手术对患者机体T淋巴细胞亚群的抑制,应优先选用。     

SLE患者外周血T细胞亚群和B细胞改变及与IL—6关系的研究

采用免疫酶标技术(APAAP)法检测不同病期SLE患者的T淋巴细胞亚群和B细胞。结果显示,与正常人比较,活动期SLE患者CD_3~+细胞、CD_3~+细胞百分率下降(P<0.01);而B细胞、CD_4~+细胞百分率和CD_4~+/CD_8~+比值升高(P<0.01);在非活动期SLE患者,这些变化不明显。分析CD_3~+细胞和B细胞百分率与相应血浆中的IL—6活性水平之间的关系。发现CD_3~+细胞与IL—6活性水平呈负相关,B细胞与其呈正相关,提示在该病中IL-6与T细胞亚群及B细胞的变化关系密切。     

双歧杆菌三联活菌散辅助治疗溃疡性结肠炎对炎症因子及T淋巴细胞亚群的影响

目的:探讨双歧杆菌三联活菌散辅助治疗溃疡性结肠炎对炎症因子及T淋巴细胞亚群的影响。方法:选择溃疡性结肠炎患者80例,随机分为观察组与对照组(各40例),其中对照组给予饮食指导、美沙拉嗪、维生素C等综合治疗;观察组在常规治疗基础上给予双歧杆菌三联活菌散辅助治疗,比较两组患者治疗前(T0)、治疗1个月(T1)、3个月(T2)后炎症因子IL-6、CRP、TNF-α及T淋巴细胞亚群水平。结果:两组T1血清IL-6、CRP及TNF-α水平低于T0,T2血清IL-6、CRP及TNF-α水平低于T0、T1,各时间点血清IL-6、CRP及TNF-α水平差异均有统计学意义(P<0.05);观察组T1、T2时血清IL-6、CRP及TNF-α水平显著低于对照组T1、T2时,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05);两组T1血CD_3~+,、CD_4~+、CD_4~+/CD_8~+水平高于T0,T2血CD_3~+,、CD_4~+、CD_4~+/CD_8~+水平高于T0、T1,两组T1血CD_8~+水平低于T0,T2血CD_8~+低于T0、T1,各时间点血CD_3~+,、CD_4~+、CD_8~+、CD_4~+/CD_8~+水平差异均有统计学意义(P<0.05);观察组T1、T2时血CD_3~+,、CD_4~+、CD_4~+/CD_8~+水平显著高于对照组T1、T2时,CD_8~+水平显著低于对照组T1、T2时,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:双歧杆菌三联活菌散辅助治疗溃疡性结肠炎有助于抑制机体炎症反应,提高免疫功能。     

静脉用丙种球蛋白治疗新生儿重症感染对细胞免疫功能的影响

应用静脉注丙球(IVIG),配合抗生素(An)治疗重症感染新生儿12例,在观察疗效及不良反应的同时,通过检测患儿治疗前后T细胞亚群及白细胞介素Ⅱ(IL-2)产生水平的变化,观察IVIG对细胞免疫功能的影响。结果显示:患儿CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+细胞及IL-2产生水平均明显低于正常同龄新生儿。经IVIG+An及单用An治疗后,T细胞各亚群及IL-2水平均明显增高。IVIG组与An组比较,诒疗后IVIG组CD_4~+细胞明显高于An组,IL-2水平也较An组为高,但无统计学意义。疗效观察,中毒症状及原发病体征好转消失时间IVIG组较An组明显缩短。本文还就IVIG对细胞免疫功能影响的可能机制进行了讨论。     

HBV转基因小鼠CD4+CD25+调节性T细胞免疫抑制功能的研究

目的 通过对HBV转基因小鼠CD4+、CD4+CD25+调节性T细胞数量和免疫抑制功能的研究,探讨CD4+CD25+调节性T细胞在乙肝免疫耐受中的作用.方法 用流式细胞术对12只HBV转基因小鼠和12只正常小鼠外周血CD4+、CD4+CD25+调节性T细胞的频率进行检测;磁珠分选小鼠脾CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25+T细胞,分为HBsAg刺激组和ConA刺激组体外单独和共培养,ELISA方法检测诱生的细胞因子IL-2.结果 与正常小鼠比较,HBV转基因小鼠外周血CD4+、CD4+CD25+调节性T细胞数量差异无统计学意义(P＞0.05).HBsAg刺激组,CD4+CD25-T细胞单独或共培养,HBV转基因小鼠CD4+CD25-T细胞诱生IL-2水平显著低于正常小鼠(P＜0.01);ConA刺激组,HBV转基因小鼠CD4+CD25-T细胞诱生IL-2水平与正常小鼠相比则差异无统计学意义(P＞0.05);两组小鼠CD4+CD25-T细胞单独培养时诱生IL-2水平均显著高于共培养(P＜0.01).结论 与正常小鼠比较,HBV转基因小鼠CD4+、CD4+CD25+调节性T细胞数量和免疫抑制功能差异无统计学意义,但T细胞水平对乙肝病毒存在特异性免疫耐受.CD4+CD25+调节性T细胞可抑制CD4+、CD8+T细胞.     

Changes in the level of IL-2, T cell subsets and the function of T suppressor cells in patients with schistosomiasis japonica

Summary The level of interleukin-2 (IL-2) produced by peripheral blood mononuclear cells in vitro, T cell subsets and the function of T suppressor cells (Ts) in patients with schistosomiasis japonica were investigated. It was found that the level of IL-2 induced by schistosomal antigens was significantly high and positively related to the percentage of CD4⁺ cells. In the groups of chronic and advanced schistosomiasis japonica, the level of IL-2 induced by schistosomal antigens was markedly lower than that in the group of acute schistosomiasis japonica, but significantly higher than that in the group of normal controls. The IL-2 level was negatively related to the percentage of CD8⁺ T cells and the ratio of CD4⁺/CD8⁺. The level of IL-2 induced by PHA was greatly reduced in the group of advanced schistosomiasis japonica. The changes in the level of IL-2 and its relationship with T cell subsets and the function of Ts are also discussed.     

晚期血吸虫病患者肝内T细胞亚群的免疫组织化学检测

采用免疫组织化学技术检测了22例晚期血吸虫病（下称晚血）患者肝内T细胞亚群。发现晚血患者肝内T细胞可集中分布于虫卵肉芽肿外层或者散在分布于非肉芽肿部位的虫卵附近，广泛纤维化的区域无T细胞浸润。肉芽肿和非肉芽肿部位的T细胞均以CD8 T细胞（抑制性／细胞毒T细胞）为主。晚血患者肝脏病变以汇管区纤维化为主，浸润细胞不多，仅27．27％（6／22）患者肝内存在已被免疫调节了的慢性虫卵肉芽肿。提示晚血患者肝内细胞免疫反应很弱，肝内的CD 8T细胞可能主要是抑制性T细胞（Ts）。     

Changes in T cell subsets and T suppressor cell function and their relationship in human schistosomiasis japonica

Summary The function of spontaneous T suppressor cell (STs) of peripheral blood was examined in 56 patients with schistosomiasis japonica at various stages. The subsets of T cell were simultaneously phenotyped in 46 cases. The percentages of CD₃ ⁺(pan T cell), CD₄ ⁺ (helper/inducer T cell) and CD₈ ⁺ (suppressor/cytotoxic T cell) in patients with acute schistosomiasis japonica were significantly higher than those in the normal controls. In patients with chronic and advanced schistosomiasis japonica, the percentage of CD₈ ⁺ T cell and the function of STs were greatly increased, but the percentage of CD₃ ⁺ T cell and the ratio of CD₄ ⁺/CD₈ ⁺ were obviously reduced. All of these markers changed more significantly in patients with advanced schistosomiasis japonica. The percentage of CD₈ ⁺ T cell in patients with acute schistosomiasis japonica was negatively correlated with the function of STs. In patients with chronic and advanced schistosomiasis japonica the percentage of CD₈ ⁺ T cell was correlated positively and the ratio of CD₄ ⁺/CD₈ ⁺ negatively with the function of STs. The results indicated that the cellular immunity was significantly increased in cases of acute schistosomiasis japonica and decreased in those with chronic or advanced schistosomiasis japonica. The increased CD₈ ⁺ T cell may be principally cytotoxic T cells in patients with acute schistosomiasis japonica, but suppressor T cells in patients with chronic and advanced schistosomiasis japonica. The subsets of T cells and the function of T suppressor cells may play an important role in the immunoregulation of schistosomiasis japonica.     

终末期肾病患者氧化应激与辅助性T淋巴细胞的关联研究

目的 观察终末期肾病（ESRD）患者外周血辅助性T淋巴细胞和氧化应激指标的变化,探讨患者免疫功能与其氧化应激状态的关系.方法 40例ESRD患者分为血液透析治疗组（HD组）和非血液透析治疗组（NHD组）,每组20例;以同期接受体检的20名健康志愿者作为正常对照组（NC组）.采集各组静脉全血,运用流式细胞仪进行T淋巴细胞计数及亚群分选,计算外周血T淋巴细胞（CD3＋T细胞）、辅助性T淋巴细胞（CD4＋ T细胞）百分比及其与其他T细胞亚群（CD8＋T细胞）的比值（CD4＋/CD8＋）;检测CD4＋T细胞的增殖率和凋亡率.ELISA法检测细胞培养液中细胞因子γ干扰素（IFN-γ）和白介素4（IL-4）含量;黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸分光光度法分别测定氧化应激指标血清超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平.分析各项指标间的相关性.结果 与NC组比较,HD组和NHD组的CD3＋、CD4＋ T细胞百分比及CD4＋/CD8＋比值均显著降低;CD4＋ T细胞凋亡率上升,增殖率下降;IL-4含量增加,IFN-γ含量减少;血清SOD活性降低,MDA水平升高;且差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）.HD组与NHD组CD3＋、CD4＋ T细胞百分比、CD4＋ T细胞凋亡率和IL-4、 IFN-γ含量比较,差异有统计学意义（P〈0.05）.相关性分析表明,在ESRD患者中,外周血CD4＋T细胞百分比与其细胞凋亡率呈显著负相关（r=-0.87,P＜0.01）,与细胞增殖率呈显著正相关（r=0.73,P＜0.01）;CD4＋T细胞凋亡率与血清MDA水平呈显著正相关（r=0.58,P＜0.01）,与血清SOD活性呈显著负相关（r=-0.51,P＜0.01）;细胞培养上清液中IL-4含量与血清MDA水平呈显著正相关（r=0.47,P＜0.01）.结论 ESRD患者（尤其是未接受血液透析治疗者）外周血辅助性T淋巴细胞数量减少且相关细胞因子分泌异常;同时,患者处于氧化应激状态,可能是通过诱导CD4＋T细胞过度凋亡和Th1/Th2细胞因子失衡使机体免疫功能缺陷进一步加重.     

系统性红斑狼疮患者外周血T细胞CTLA-4表达及其临床意义的研究#

目的：研究系统性红斑狼疮（Systemic Lupus Erythematosus, SLE）T细胞中CTLA-4的表达及临床意义。 方法：分离正常人和SLE患者的外周血单个核细胞（PBMCs）,以抗-CD3、抗-CD28刺激培养48h,刺激培养前后收取细胞,以流式细胞术（FCM）检测CD4+和CD8+T细胞中CTLA-4+细胞比例,并分析其与SLE疾病活动性指数（SLE Disease Activity Index,SLEDAI）和肾损害的关系。再以ELISA法检测培养上清中游离的CTLA-4水平。 结果：SLE患者刺激前的CD4+和CD8+T细胞中、主要是CD25+T细胞中CTLA-4+细胞的比例较正常人显著增高,且与SLEDAI呈正相关;而其CD8+CD28- T细胞中CTLA-4+细胞比例也显著高于正常人,但与SLEDAI之间无显著相关性;经抗-CD3、抗-CD28抗体刺激后,其CD4+CD25+T细胞、CD8+CD25+T细胞或CD8+CD28- T细胞中CTLA-4+细胞的比例却显著低于正常人,但与SLEDAI之间无显著相关性,仅在活动性SLE患者中有肾损组的CD8+CD28- T细胞中CTLA-4+细胞的比例显著低于非肾损组;而且经刺激培养后SLE患者PBMC上清中游离的CTLA-4水平也显著低于正常人。结论：SLE患者新鲜分离的T细胞（CD4+及CD8+）中CTLA-4表达异常增高,反映T细胞异常活化和疾病活动;另一方面,SLE患者T细胞又存在CTLA-4诱导性表达障碍,可能与SLE T细胞体外再活化的能力减弱有关。     

卵巢癌患者外周血调节性T细胞的表达水平分析

目的:分析调节性T细胞在卵巢癌患者外周血的表达情况.方法:利用流式细胞仪检测24例卵巢癌患者及12例健康对照组外周血单个核细胞中CD3+ CD4+T细胞/CD4+T细胞、C'D3+ CD8+T细胞/CD4+T细胞、CD4+T细胞/CD8+T细胞比率以及CD4+ CD25+ CD127- Treg/CD4+T细胞所占的比例.结果:外周血CD3+ CD4+T细胞/CD4+T细胞、CD3+ CD8+T细胞/CD4+T细胞及CD4+T细胞/CD8+T细胞与健康者对照组比较,差异均无显著性;而CD4+ CD25+ CD127- Treg/CD4+T细胞的比例显著高于健康者对照组,且差异有统计学意义(P＜0.05).结论:卵巢癌患者全身免疫状态与健康者对照组相比没有明显改变,而外周血中调节性T细胞的数量增高.     

多发性骨髓瘤患者CD4+IL-17A+辅助性T细胞/CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞及相关细胞因子的研究

目的检测多发性骨髓瘤(MM)患者外周血CD4+IL-17A+辅助性T细胞(Th17细胞)/CD4+CD2+5Foxp3+调节性T细胞(Treg细胞)比率及相关细胞因子,分析其相关性。方法采用流式细胞术检测MM组初诊患者外周血Th17、Treg细胞占CD4+T细胞比例,ELISA法检测MM组初诊患者血清IL-17、IL-6、IL-23、TGF-β、IL-10水平。结果 MM患者外周血Th17细胞比率升高,Treg细胞比率降低,血清IL-6、IL-17与IL-23水平明显升高;MM患者外周血Th17细胞与Treg细胞含量呈负相关,Th17细胞含量与血清IL-6、IL-17、IL-23水平均呈正相关,Treg细胞含量与血清中IL-6、IL-17、IL-23水平均呈负相关。结论 MM患者存在Th17/Treg细胞失衡,IL-6、IL-17、IL-23影响两者表达,在MM发生发展中起重要作用。     

CD4+CD25+Treg细胞调节T细胞作用机制的实验研究

目的 :通过检测Treg细胞表达介导抑制性共刺激分子CTLA4和分泌抑制性细胞因子 ,并设置Treg细胞与效应性T细胞共培养和分隔培养实验模型 ,分析Treg细胞对效应性T细胞形成抑制作用的可能机制及各机制的主次要关系。方法 :对比分析Treg细胞与效应性T细胞膜分子CTLA4、CD2 8表达和细胞因子IL 10、TGF β1 分泌水平 ;以TransWellMillicell PCF分隔培养槽分隔培养Treg细胞与不同淋巴细胞组成的反应体系 ,采用向共培养及分隔培养体系加入与不加入IL 10、TGF β1 抗体的阻断方法 ,检测Treg细胞对不同组混合淋巴细胞反应的抑制效率。结果 :Treg细胞分泌IL 10和TGF β1 的浓度水平明显高于效应性T细胞 ,Treg细胞培养上清中IL 10和TGF β1 水平分别达到(380 0± 36 3)pg ml和 (790 0± 5 6 8)pg ml,Treg细胞分泌IL 10和TGF β1 的浓度水平与效应性T细胞比较 ,均有显著性差异 (P <0 0 1)。共刺激分子CTLA4、CD2 8在Treg细胞和效应性T细胞膜表面的表达水平存在明显差异 ,Treg细胞以表达CTLA4为主。Treg细胞对共培养体系混合淋巴细胞反应的抑制效率明显高于分隔培养 ,通过分泌IL 10对效应性T细胞的抑制作用亦明显强于通过TGF β1 。结论 :细胞接触机制是Treg细胞抑制效应性T细胞的主要作用机制 ,而细胞因子机制中     

T细胞免疫功能变化对严重烧伤病人的影响及调节机制

目的研究T淋巴细胞免疫功能的变化对严重烧伤病人的影响及机制。方法选择35例严重烧伤病人,分为脓毒症组（20例）和非脓毒症组（15例）。分别于两组患者伤后1d、5d、10d、15d、20d、25d采集外周静脉血分离T淋巴细胞。方法采用放射免疫法检测白细胞介素2、4、6、8（IL-2、IL-4、IL-6、IL-8）、TNF-α的水平,通过流式细胞仪检测CD4＋／CD8＋T淋巴细胞的百分率及其凋亡率。结果与非脓毒症组比较,脓毒症组患者伤后1d、5d、10d、15d、20d、25dT淋巴细胞的TNF和IL-2、IL-4、IL-6、IL-8的分泌水平均显著升高（P〈0．05或P〈0．01）,两指标呈显著正相关（r=0．78,P〈0．01）。伤后1d、5d、10d、15d、20d、25d,脓毒症组患者CD4＋／CD8＋T淋巴细胞的百分率明显低于非脓毒症组,而其凋亡率呈相反趋势（P〈0．05或P〈0．01）,两指标呈显著负相关（r=0．73,P〈0．05）。结论严重烧伤后,T淋巴细胞免疫功能持续处于抑制状态;T淋巴细胞凋亡参与了脓毒症细胞免疫素乱的病理生理过程。