肺炎衣原体感染小鼠肺组织免疫组化表现

目的 :通过研究小鼠肺组织免疫组化 ,对肺炎衣原体肺炎的发病机制进行初步的探讨。　方法 :以肺炎衣原体鼻内或静脉接种Icr小鼠 ,在不同时间点处死动物 ,用免疫组化的方法检测小鼠肺炎衣原体肺炎急性期肺组织的病理改变。　结果 :小鼠吸入肺炎衣原体后第 3、7、14天 ,肺组织中肺炎衣原体的免疫过氧化酶染色呈阳性。炎性肺组织阳性染色呈不均一性 ,为局限性分布。肺炎衣原体抗原阳性表达主要在肺泡巨噬细胞、间质细胞以及支气管周围淋巴组织等部位。静脉接种组引起上述类似改变 ,但程度轻 ,肺炎衣原体抗原阳性表达主要集中在肺泡巨噬细胞及间质细胞中。　结论 :免疫组化法检测小鼠肺炎衣原体肺炎急性期肺组织的病理改变 ,有助于肺炎衣原体肺炎急性期的诊断。肺炎衣原体呼吸道局部感染比血行感染的病理改变更为严重     

肺炎衣原体感染小鼠肺外脏器病理改变研究

目的 探讨肺炎衣原体感染小鼠肺外脏器病理改变，对肺炎衣原体肺炎的发病机制进行初步的探讨。方法 以肺炎衣原体鼻内或静脉接种Icr小鼠，在不同时间点(1、3、7、14、21、28及60d内)处死动物，以HE染色观察小鼠脾脏、肝脏和心脏的病理改变。结果 接种肺炎衣原体后，小鼠脾脏中出现中性粒细胞和巨噬细胞浸润，小鼠肝脏可见到肝细胞坏死。静脉接种实验组的病理改变比鼻内接种实验组明显。各组小鼠的心脏均未见明显异常改变。结论 肺炎衣原体经静脉接种后，肝脏和脾脏均可产生相应的病理改变，且较经鼻腔接种严重。肺炎衣原体主要侵袭肺脏，很少发生全身播散。     

肺炎衣原体肺炎的实验鼠模型

目的：评价以小鼠作为肺炎衣原体感染实验动物模型的价值。方法：以肺炎衣原体鼻内接种Icr小鼠,通过不同时点（60天内）处死动物,观察其肺部的病理改变。结果：鼻内接种衣原体后,Icr小鼠产生肺部感染,特征性病理改变是斑片状间质性肺炎,早期（7天以内）病变较重,以中性粒细胞浸润为主,并伴有泡沫细胞堆积;后期（14天以后）病变开始减轻,以中性粒细胞和淋巴细胞混合浸润为主,并逐渐转为以淋巴细胞浸润为主。结论：给Icr小鼠鼻内接种肺炎衣原体可引发肺部感染,该模型有助于对肺炎衣原体感染发病机制的研究。     

博莱霉素肺损伤和纤维化超微病理分析

目的:观察和分析博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化超微病理过程.方法:经支气管用博莱霉素灌肺诱导大鼠肺纤维化(5 mg/kg),用透射电镜观察肺损伤后第3、7和28天的病理变化.结果:肺损伤第3天病理特点是以中性粒细胞为主的肺泡炎,毛细血管扩张和肺泡上皮细胞破坏;第7天病理特点为:以巨噬细胞浸润为主的肺泡炎和间质炎,肺泡闭合与代偿性扩张共存,肺间质成分开始增加;第28天病理特点为:肺泡数目明显减少,残存肺泡扩张成大泡,Ⅱ型肺上皮细胞破坏与增殖同在,大部分肺组织呈肉牙肿样变.结论:电子显微镜可以显示肺损伤过程中肺泡上皮细胞、毛细血管和炎性细胞动态变化过程,揭示不同时期的肺损伤病理的实变.     

免疫抑制小鼠肺白色念珠菌病病理研究

目的:通过建立免疫抑制小鼠肺白色念珠菌病动物模型,研究肺念珠菌病病理改变,探讨念珠菌致肺部病理改变的机制。方法:从临床重症病人体内分离、鉴定、纯化白色念珠菌,并制备成2.0×109CFU/mL菌液;免疫抑制小鼠后经气道接种法、口饲给菌法、腹腔注射法、尾静脉注射法建立小鼠肺部感染白色念珠菌病模型,观察小鼠临床症状,并用颈椎脱臼法处死小鼠,解剖观察并取材,经病理切片观察肺部病变。结果:白色念球菌感染后小鼠出现异常行为,肉眼观肺脏体积增大、肺切缘呈钝角、颜色苍白、表面多个粟粒状灰白色斑点,镜下可见肺泡壁毛细血管高度扩张充血、肺泡间隔增宽、间质水肿、肺泡腔扩张、肺泡上皮增生和空泡变性、肺泡腔内充满淡红色水肿液。结论:可通过免疫抑制小鼠气道接种白色念珠菌法获取肺白色念珠菌病动物模型,用于研究肺部白色念珠菌致病理改变的机制。     

兔绿脓假单胞菌性肺炎诊断

在夏季人热饲养条件下,从兔群病例肺组织中,检出绿脓假单胞菌(pseudomonas,aeruginosa)。通过临床观察和病理组织学检查,表明绿脓假单胞菌引起的兔肺炎病变严重,接种小鼠后24～48h内死亡,人工感染兔亦可致病,体征与自然病例相似。病兔肺组织呈弥漫性充血、出血,肺的尖叶、心叶、隔叶大部分组织受累,并见灰白色坏死灶,部分肺萎缩。镜下见肺细支气管壁及间质散在性炎症细胞浸润,肺泡壁增厚、淤血,肝细胞浆疏松化等组织学改变。     

沙眼衣原体致小鼠输卵管炎的病理研究

【目的】研究沙眼衣原体阴道内感染引起小鼠输卵管炎症的机理、病理改变。【方法】通过雌性小鼠阴道内接种小鼠肺炎（MoPn）沙眼衣原体，感染后不同时间观察小鼠输卵管病变情况，并通过光镜、免疫组化和电镜研究其病理改变。【结果】感染早期小鼠输卵管出现急性炎症改变，病理表现为黏膜层水肿、脱落和坏死；电镜下，在黏膜上皮细胞中找到沙眼衣原体。感染后期小鼠输卵管出现输卵管阻塞和积水，病理表现为黏膜皱襞减少，黏膜层纤毛柱状上皮细胞成矮柱状，顶部纤毛消失，输卵管壁增厚、纤维组织增生和淋巴细胞浸润，免疫组化显示以CD4^＋T细胞浸润为主。【结论】阴道内沙眼衣原体感染可逆行感染引起输卵管炎症、粘连、阻塞和积水；其病理基础早期为黏膜层急性炎症改变和后期为输卵管壁增厚、纤维组织增生：局部以Th1细胞介导为主的细胞免疫，导致了慢性输卵管炎的病理改变。     

沙眼衣原体致小鼠输卵管炎的病理研究

【: 目的】研究沙眼衣原体阴道内感染引起小鼠输卵管炎症的机理、病理改变。【方法】通过雌性小 鼠阴道内接种小鼠肺炎(MoPn)沙眼衣原体, 感染后不同时间观察小鼠输卵管病变情况, 并通过光镜、免疫组化 和电镜研究其病理改变。【结果】感染早期小鼠输卵管出现急性炎症改变, 病理表现为黏膜层水肿、脱落和坏 死; 电镜下, 在黏膜上皮细胞中找到沙眼衣原体。感染后期小鼠输卵管出现输卵管阻塞和积水, 病理表现为黏 膜皱襞减少, 黏膜层纤毛柱状上皮细胞成矮柱状, 顶部纤毛消失, 输卵管壁增厚、纤维组织增生和淋巴细胞浸 润, 免疫组化显示以CD4+ T 细胞浸润为主。【结论】阴道内沙眼衣原体感染可逆行感染引起输卵管炎症、粘 连、阻塞和积水; 其病理基础早期为黏膜层急性炎症改变和后期为输卵管壁增厚、纤维组织增生;局部以Th1 细胞介导为主的细胞免疫,导致了慢性输卵管炎的病理改变。     

肺炎衣原体感染对小鼠体内Th1/Th2影响的初步研究

目的通过复制小鼠感染肺炎衣原体的动物模型,检测接种后小鼠体内Th1/Th2平衡改变,对感染后小鼠机体免疫状态进行初步研究。方法96只小鼠随机分为实验组和对照组,实验组采用鼻内接种途径建立肺炎衣原体感染小鼠模型,对照组接种二磷酸蔗糖(2SP)无菌缓冲液。分别在接种后的第1,3,5,7,14,21,28和42d,各处死6只动物,收集标本。观察记录肺组织病理,用ELISA法检测血清中白细胞介素-4(IL-4)和γ干扰素(IFN-γ)表达,用流式细胞术检测小鼠脾淋巴细胞中Th1和Th2细胞,计算Th1/Th2比值。结果感染肺炎衣原体小鼠的肺组织病理表现多为局灶性肺炎,14d后单核细胞和淋巴细胞含量增多,并伴不同程度成纤维细胞增生。与对照组相比,鼻内接种肺炎衣原体后24h,可见小鼠血清IL-4水平升高,第3d时浓度达到最高(24·38±2·52)pg/mL。持续至第7d,而后恢复到基线水平。血清IFN-γ在接种后24h即达到峰值(23·00±5·15)pg/mL,此后浓度逐渐下降。对照组小鼠Th细胞功能上以Th1细胞占优势,接种肺炎衣原体后Th1/Th2比值明显降低,细胞分类向Th2细胞漂移。第3d时,Th1/Th2比值降到最低值。实验组小鼠在感染后所检测42d内,所有Th1/Th2比值均明显低于对照组(P<0·01)。结论小鼠感染肺炎衣原体后,细胞分类向Th2细胞漂移。宿主肺部炎症病变加重与早期Th1细胞免疫活性受到抑制有关。与外周血IFN-γ/IL-4比值相比,流式细胞术检测细胞内IFN-γ/IL-4,更能代表Th1/Th2极化状态。     

衣原体肺炎患者支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6及IL-10的检测及临床意义

目的 探讨肺炎嗜衣原体患者支气管肺泡灌洗液中TNF-α,IL-6和IL-10的产生情况及临床意义.方法 获取肺炎嗜衣原体感染急性患者为研究对象,获取支气管肺泡灌洗液,采用ELISA法检测其TNF-α,IL-6和IL-10的含量,同时选取同期恢复期患者作为对照.结果 衣原体急性期患者支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6和IL-10显著高于正常对照组.在恢复期内,TNF-α和IL-6明显低于急性期,但IL-10依然维持在较高水平.结论 肺炎嗜衣原体感染患者支气管肺泡灌洗液中TNF-α,IL-6和IL-10显著增高,可能与肺炎嗜衣原体的发病有关.     

The pathogenesis of Chlamydia pneumoniae-type pneumonitis in mice

Chlamydiapneumoniae (C pneumoniae )hasbeenrecognizedasthethirdspeciesofchlamydia C pneumoniae,asacommonpathogenofrespiratorytractinfectioninhumans,mainlycausespneumonia Inaworldwideepidemicinvestigationofhumans ,C pneumoniaeantibodywasidentifiedupto 5 0 %inadultsubjects ThepathologicalchangesofpulmonarytissuehavenotbeenspecifiedbecauseclinicalsymptomsafterinfectionwithC pneumoniaetendtobemildandhavesofarcausednoreporteddeath 1,2 　Inthisstudy ,weinvestigatedthepathogenesisofC pneumoniaeinfec…     

TLR2-p38MAPK信号通路在小鼠肺炎衣原体肺炎中的表达及意义

目的通过建立小鼠肺炎衣原体感染的模型,探讨小鼠感染肺炎衣原体后,其信号通路Toll样受体2（TLR2）-p38蛋白激酶（p38MAPK）中TLR2 mRNA和p38MAPK mRNA的表达变化及其信号通路抑制剂对其影响以及炎症介质表达变化的意义。方法使用TLR4基因缺失小鼠（C3H/HeJ）72只,随机分为正常组、肺炎衣原体感染组、肺炎衣原体感染加特异性p38MAPK抑制剂SB203580干预组,分别按接种后1、4、7及14 d各分4组。正常组鼻内接种2SP缓冲液,感染组鼻内接种肺炎衣原体;干预组在感染肺炎衣原体后即在腹腔注射SB203580,分别在预定的时间处死,取肺脏组织应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）半定量方法检测肺组织TLR2 mRNA和p38MAPK mRNA的表达变化,用酶联免疫吸附法（ELISA）测定TNF-α的含量。结果与正常组比较,感染肺炎衣原体后小鼠肺组织TLR2 mRNA和p38MAPK mRNA表达迅速升高,以第4 d和第7 d最明显,其中TLR2mRNA在第7 d表达量明显高于正常组[（7.24±1.78）mg/L比（0.64±0.14）mg/L],p38MAPKmRNA在第4 d表达量明显高于正常组[（9.267±1.813）mg/L比（3.734±0.946）mg/L],14 d以后感染开始减轻。其相应的肺组织TNF-α含量表达也升高,并明显高于正常组,以第4 d为高峰（77.29±9.66）pg/mg。给予SB203580抑制剂后TLR2 mRNA和p38MAPK mRNA表达明显减弱,以第4 d和第7 d明显,其中TLR2 mRNA在第7 d为（0.269±0.09）mg/L,p38 MAPK mRNA在第4 d为（0.002±0.001）mg/L,其相应的肺组织TNF-α含量表达与感染组比较也明显降低,以第4 d（25.76±3.49）pg/mg明显。结论小鼠感染肺炎衣原体后,可引起TLR2-p38 MAPK信号通路的活化,引起细胞因子的释放。SB203580对TLR2-p38 MAPK信号通路有明显的抑制作用,并能抑制炎症介质的释放,表明肺炎衣原体感染与TLR2-p38MAPK的信号通路密切相关。     

病毒性心肌炎小鼠细胞外信号调节激酶表达变化及其意义

目的：探讨病毒性心肌炎小鼠细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK）的表达变化及其意义。方法：105只清洁级近交系4～6周龄雄性Balb/C小鼠,随机分为两组,正常对照组40只和心肌炎组65只。心肌炎组小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3复制心肌炎动物模型。在病毒接种后第1、第3、第5、第7和第14天,每组各取8只,留取血清及心脏标本。采用HE染色及电镜观察心肌组织学改变,化学发光免疫法测定血清心肌肌钙蛋白-I（cardiac troponin,cTn-I）含量,Western-blot及免疫组化法检测心肌组织中磷酸化ERK含量,Pearson等级相关分析磷酸化ERK和心肌组织炎症积分、血清cTn-I含量之间的关系。结果：心肌炎组小鼠在病毒接种后第3天出现炎症细胞浸润,炎症积分于第7天达到高峰;心肌损伤标志物血清cTn-I在病毒接种后第3天出现升高,于第5天达到峰值,然后逐渐下降;小鼠在病毒接种后第1、第3、第5天磷酸化ERK含量明显增加,伴核转位,第7天减弱至接近正常对照组水平,第14天磷酸化ERK含量又复增加,表现为早期和晚期2次活化;相关分析结果显示,磷酸化ERK水平和血清cTn-I含量成正相关,和炎症积分之间则无明显相关性。结论：病毒性心肌炎小鼠心肌组织的ERK表现为早、晚期两个活化阶段,这可能和病毒早期所致的心肌损伤及晚期疾病进展有关。     

IL-17在沙眼衣原体呼吸道感染早期表达及与衣原体复制的关系

目的 探讨炎症性细胞因子IL-17在沙眼衣原体呼吸道感染中的早期表达及与衣原体复制的关系.方法 128只小鼠按随机数字表法分为实验组和对照组,实验组用4 000包涵体形成单位(IFU)沙眼衣原体小鼠肺炎株(MoPn)通过鼻腔感染小鼠,对照组则给予等量蔗糖磷酸盐缓冲液(SPG),分别在感染后0、1、1.5、2、3、4、8、12 d处死小鼠,用免疫荧光检测(IFA)衣原体在肺组织中的生长情况,通过ELISA检测小鼠肺组织IL-17表达.24只小鼠分为3组,分别用160、800、4 000 IFU MoPn通过鼻腔感染小鼠,于感染后第2天测定肺组织中衣原体生长及IL-17表达.16只小鼠随机分为2组,用4 000 IFU MoPn通过鼻腔感染小鼠,实验组肌肉注射利福平和氯霉素,对照组则给予等量PBS,于感染后第2天测定肺组织中衣原体生长及IL-17表达.结果 MoPn感染后第1天,肺组织有衣原体生长,于感染后第8天达高峰.感染后第2天,IL-17在小鼠肺组织中的表达达峰值,并很快下降.仅剂量为4 000 IFU MoPn感染小鼠2 d后,肺组织中同时有衣原体生长和IL-17的表达.经抗生素处理后衣原体生长被抑制,同时也检测不到IL-17的表达.结论 IL-17在衣原体呼吸道感染早期出现,其表达情况与衣原体感染剂量和早期复制有关.     

扶正解毒化瘀颗粒对多器官损伤小鼠血清细胞因子的影响

目的 观察扶正解毒化瘀颗粒对克雷伯杆菌肺炎所致多器官损伤小鼠不同感染时相血清TNF-α、IL-1β、IFN-γ、IL-6及IL-10水平的动态变化,探讨其对促炎/抗炎细胞因子表达的影响。方法 将128只小鼠随机分为对照组、模型组、西药组和中药组,每组32只。采用气管插管法直接注入肺炎克雷伯杆菌制备多器官损伤模型,分别于造模后第1、3、5、7天每组各取8只小鼠,摘眼球采集血液,分离血清。采用ELISA法,检测不同感染时相小鼠血清中细胞因子TNF-α、IL-1β、IFN-γ、IL-6及IL-10水平。结果 与对照组比较,模型组小鼠在感染后第1天血清TNF-α、IL-1β、IFN-γ和IL-6含量分别为（202.07±22.82）、（502.11±29.44）、（186.50±10.32）、（204.98±8.15）pg/mL,其含量水平显著增高,差异有统计学意义（P<0.05）。IL-10在感染后第1、3、5天含量有所增高,但差异无统计学意义（P>0.05）,在感染后第7天含量为（134.34±0.46）pg/mL,差异有统计学意义（P<0.05）;中药组小鼠在感染后第1天血清TNF-α、IL-1β、IFN-γ和IL-6含量分别为（147.18±22.67）、（262.09±43.44）、（142.00±0.84）、（177.29±8.03）pg/mL,均显著低于模型组,差异有统计学意义（P<0.05）,在感染第3天后有所下降,但差异无统计学意义（P>0.05）。感染后第1、7天血清IL-10含量为（140.46±4.07）pg/mL和（136.48±0.10）pg/mL均显著增高,有统计学意义（P<0.05）;西药组小鼠在感染后第1天血清IL-6的含量（180.97±8.86）pg/mL、IFN-γ含量（144.39±14.67）pg/mL较模型组均显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 扶正解毒化瘀颗粒能够降低促炎细胞因子的表达,提高抗炎细胞因子的表达,通过调节促炎/抗炎细胞因子的表达,抑制机体炎症反应可能是其治疗多器官损伤的主要机制之一。     

TLR3和IRF3在华支睾吸虫感染C3H／HeN小鼠中表达的初步分析

目的 建立华支睾吸虫感染小鼠模型,初步分析TLR3、IRF3基因在小鼠肝脏中的表达情况.方法 随机选用健康雌性C3H/HeN小鼠感染华支睾吸虫建立感染模型,分别在感染第0、1、7、14、28、56、84天颈椎脱臼处死小鼠,取肝脏组织进行病理学观察,收集粪便检查华支睾吸虫虫卵.同时,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测肝脏中Toll样受体（TLRs）中的TLR3和IRF3的mRNA的表达情况.结果 自感染后第20~30天检查出华支睾吸虫虫卵;肝脏病理学结果显示,与正常组小鼠相比,随着时间的增加,感染组小鼠肝脏汇管区由少量炎症细胞浸润、胆管上皮反应性增生发展到在该区域出现大量纤维组织增生伴有炎症细胞浸润,表明华支睾吸虫感染C3H/HeN小鼠模型成功建立.与正常组相比,感染组自感染后第1天起TLR3和IRF3的mRNA表达均升高（P〈0.01）,均在第84天开始下降.结论 华支睾吸虫感染C3H/HeN小鼠后可激活TLR3-TRIF途径,提示TLR3-TRIF途径可能在华支睾吸虫致病过程中起了一定的作用.     

病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡及心肌病变的电子显微镜观察

目的研究病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌超微结构改变及细胞凋亡的形态学变化。方法本实验在接种柯萨奇病毒B3(CVB3)建立VMC动物模型的基础上,用光学显微镜及电子显微镜观察心肌细胞的病变及心肌细胞凋亡。结果研究发现实验组小鼠在接种病毒5d后光镜或电镜下可见心肌病变及炎细胞浸润,7-9天病变达高峰,35天时病变基本恢复。VMC小鼠在接种病毒后7-9天,电镜下可见心肌细胞呈凋亡样改变,并可见凋亡小体。结论实验组小鼠在接种CVB3后可引起VMC,VMC中存在异常的心肌细胞凋亡现象。