聚合酶链反应及其应用

聚合酶链反应及其应用微生物学教研室（０４６０００）康润田聚合酶链反应（ＰＣＲ）是一种选择性核酸体外扩增技术［１、７、８、８、９、１０］。它是由美国ＰＥ公司ｋａｒｙＢＭｕｌｌｉｓ于１９８４年发明的，继而ＰＥｃｅｔｕｓ公司推出了第一台ＰＣＲ热循环仪。目前...     

不经抽提DNA的PCR模板快速制备法研究

不经抽提ＤＮＡ的ＰＣＲ模板快速制备法研究石奇珍，吕联煌，张学敏关键词多聚酶链反应，脱氧核糖核酸，模板多聚酶链反应（ＰＣＲ），对脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）质量要求不高［１］，可源于单个淋巴细胞或精子，单根头发等［２］。曾溢涛等用于血提取ＤＮＡ进行基因扩增［...     

聚合酶链反应在HBV检测中的应用

聚合酶链反应在ＨＢＶ检测中的应用本院附院检验科王凤超，吕美荣，钱宛馨，钱明珍，汤依群聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）是一种ＤＮＡ体外扩增技术，自１９８８年应用于检测乙肝病毒［１］．我们采用该技术，检测６８例乙肝患...     

DNA聚合酶链反应对结脑的诊断价值

ＤＮＡ聚合酶链反应对结脑的诊断价值王伟，王文汇，曲仪庆山东医科大学附属医院（２５００１２）ＤＮＡ聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术是在基因水平上检测结核菌的有效方法［１］。本文对ＰＣＲ技术对结核性脑膜炎（结脑）...     

孕妇外周血中胎儿细胞基因扩增及核酸序列分析鉴定

目前对性连锁遗传病采取遗传咨询、产前胎儿性别鉴定、选择性流产为主要预防方法,传统的细胞遗传学方法存在费时、费力的缺点。本研究利用半巢式ＰＣＲ技术扩增Ｙ染色体上锌指结构基因（ｚｉｎｃ－ｆｉｎｇｅｒ－Ｙｇｅｎｅ,ＺＦＹ）［１］,并进行核酸测序判定胎儿性别...     

PCR技术的临床应用进展

ＰＣＲ技术的临床应用进展附院检验科韦建能聚合酶链反应（简称ＰＣＲ）是一种在体外扩增特异性ＤＮＡ序列的技术，１９８５年由Ｍｕｌｌｉｓ发明，Ｓａｉｋｉ等首先应用于临床￣［１］。由于它在很短时间内可使靶ＤＮＡ序列扩增２×１０￣５～１０￣６倍，具有快速、简便...     

大肠杆菌asd基因PCR引物设计及其长模板PCR扩增

目的 获得大肠杆菌全长ａｓｄ基因，方法 采用计算机引物设计软件，长模板ＰＣＲ扩增法及限制性内切酶切分析。结果 设计一对Ｅ．ｃｏｌｉａｓｄ基因ＰＣＲ引物，经长模板ＰＣＲ扩增获得１５１０ｂｐＰＣＲ扩增片段，经限制性内切酶酶切分析，证明该片段与电脑查询的Ｅ．ｃｏｌｉａｓｄ基因酶切谱相同。结论 本文设计的引物用长模板ＰＣＲ扩增法得到的片段初步确认为Ｅ．ｃｏｌｉａｓｄ基因。     

RT-PCR检测HCV的应用与问题

自１９９０年Ｗｅｉｎｅｒ等［１］首次将逆转录—聚合酶链反应（ＲｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐａｔｉｏｎｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎＲＴ－ＰＣＲ）用于丙肝病毒（ＨＣＶ）的检测以来,该技术不断革新,日臻完善,现已广泛应用于ＨＣＶ分子生物...     

半巢式PCR检测多发性骨髓瘤外周血肿瘤相关B细胞

半巢式ＰＣＲ检测多发性骨髓瘤外周血肿瘤相关Ｂ细胞［吕鸣等．解放军医学杂志，１９９７；２２（４）∶２４４］以克隆性免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排为骨髓瘤细胞基因标志，应用半巢式ＰＣＲ基因扩增技术检测多发性骨髓瘤（ＭＭ）患者外周血肿瘤相关Ｂ细胞。结果２...     

PCR检测脑脊液中的结核菌

１９８５年Ｍｉｌｉｓｓ创立了聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术,成为Ｓｏｕｔｈｅｒ印迹技术和基因克隆技术后的第三次技术革命的开端［１］。实践证明在临床标本病原体的检测中,ＰＣＲ扩增法较细菌培养、ＥＬＩＳＡ等方法敏感性高、特异性好。但在临床实验中,对一些含靶基...     

应用双链DNA循环测序技术检测Dystrophin基因内点突变

应用双链ＤＮＡ循环测序技术检测Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因内点突变吴志英，王柠，邓余，余龙，慕容慎行关键词：ＰＣＲ，ＤＮＡ测序，点突变本研究采用ＰＣＲ扩增产物直接测序方法──双链ＤＮＡ循环测序技术［１］。检测基因内点突变，操作简单，费时短，只需１～２天即...     

多重等位基因特异性PCR—HLA—Ⅱ DNA分型

目的：对人类组织相容性抗原（Ｈｕｍａｎ Ｌｅｕｃｏｃｙｔｅ Ａｎｔｉｇｅｎ Ｓｙｓｔｅｍ）Ⅱ类进行高分辨基因分析。方法：用多重ＰＣＲ和等位基因特异性ＰＣＲ技术相结合＾［１,２］,建立多重等位基因特异性。结果：２４对引物成功在分辨４３份ＤＮＡ的ＨＬＡ－ＤＲＢ１、Ｂ３、Ｂ４、Ｂ５＾＊５１个等位基因和ＱＤＢ１＾＊１５个等位基因的４位数字特异性,识别基因片段长度为２８１ｂｐｏ。结论：多重等位基因特异性ＰＣ     

应用PCR联合检测尿道炎三种病原体

应用ＰＣＲ联合检测尿道炎三种病原体邢艳赖明唐中（川北医学院附属医院检验科）近年来，沙眼衣原体（ｃｔ）、解脲支原体（ＵＵ）感染日益增多，已成为西方国家最常见的性传播疾病之一［１］，我国此类病的发病率也呈上升趋势。卜少庸［２］研究发现，Ｃｔ引起的非淋菌...     

用PCR突变技术克隆艾滋病病毒蛋白酶基因

用ＰＣＲ突变技术克隆艾滋病病毒蛋白酶基因｜｜［阎小君，苏成芝，吉昌华．中国病毒学，１９９３；８：１５４～１５９］作者设计并合成了一对用于ＰＣＲ技术的突变引物ＨＩＶ－１Ｐｒ１和ＨＩＶ－１Ｐｒ２，分别在两引物中设计了两个突变点，使突变后基因含有ＥｃｏＲＩ...     

乳腺癌增殖细胞核抗原同AgNOR和病理学特性的关系

乳腺癌增殖细胞核抗原同ＡｇＮＯＲ和病理学特性的关系［郑唯强，等．实用癌症杂志，１９９４；９（１）：５］对１０２例乳腺肿瘤（包括８７例乳腺癌）进行单克隆抗增殖细胞核抗原（Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ；简称ＰＣＮＡ）抗体...     

反转录—聚合酶链反应在呼吸道合胞病毒感染检测的应用

为呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）感染的临床诊断寻求敏感，特异的检测方法，采用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增毒培养液和急性呼吸道感染患者鼻咽分泌物中的ＲＳＶ基因，并应用地高辛标记ｃＤＮＡ探针对扩增产物进行鉴定。结果成功地提取了ＲＳＶｍＲＮＡ，反转录合成ｃＤＮＡ，经扩增得到４７１ｂｐ左右ｃＤＮＡ区带。流感病毒Ｂ，副流感病毒２型，腺病毒７对照无扩增带，ＲＳＶ培养液１０倍连续稀释至１：１０００，经ＲＴ－ＰＣＲ扩增仍可见４     

PCR扩增抗乙酰胆碱受体单克隆抗体重链可变区基因的反应条件

应用多聚酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）扩增抗乙酰胆碱受体单抗重链可变区的基因，探讨了ＰＣＲ的反应条件和影响因素。     

用聚合酶链反应技术制备地高辛素标记的人巨细胞病毒探针

用聚合酶链反应技术制备地高辛素标记的人巨细胞病毒探针史金阳，刘兰青，吕绳敏，任舒月，刘庆（第二临床学院病毒室）关键词聚合酶链反应，核酸杂交，人巨细胞病毒核酸杂交￣［１］及聚合酶链反应￣［２］（ＰＣＲ）技术是近代分子生物学诊断技术发展的结果。而ＰＣＲ技...     

聚合酶链反应

聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ,ＰＣＲ）是一种模拟ＤＮＡ复制的特定核酸序列体外扩增技术。在ＰＣＲ扩增的首轮循环中,待扩增的ＤＮＡ在高温下变性成为单链模板,在复性温度下,人工合成的两个寡核苷酸引物与目标片段两侧的两条链互补...     

改良差示PCR技术在肿瘤转移研究中的应用

０引言肿瘤转移是恶性肿瘤最基本的生物学特征．为在基因水平揭示肿瘤转移的本质，研究者均把重点放在筛选和鉴定转移相关基因上．继差示文库或减数杂交技术［１］后，出现了分离差异表达基因的新方法差示ＰＣＲ（ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｄｉｓｐｌａｙＰＣＲ）［２］．我...