自发性高血压大鼠在应激状态下心肌凋亡蛋白表达的特点

目的探讨应激导致的交感神经激活对自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡的影响.方法8周雄性自发性高血压大鼠24只(A)组分为应激组A1(n=12)及非应激组A2(n=12),并以8周Wistar24只(B)组作为对照,也分为应激组B1(n=12)及非应激组B1(n=12),每组各取4只测量血压,称重后麻醉、断头处死行称重;余每组8只,应激组采用束缚应激模型各自8周观察至32周,后称体重、麻醉、处死,取心脏称重,Westem blot检测心肌bcl-2及bax蛋白表达,并以bax/bcl-2比值作为心肌细胞凋亡指标.取血测定儿茶酚胺及血管紧张素Ⅱ.结果A1组束缚应激后32周龄鼠血压及心脏重量指数较8周龄明显增加P＜0.01,A2组非应激鼠随着周龄的延长(32周)血压及心脏重量指数显著高于B1、B2组的Wistar鼠及A1组的8周龄鼠.本研究所采用应激模型能够成功激活中枢交感神经系统.A2组非应激组32周龄鼠心肌bcl-2蛋白表达较8周龄时有增高趋势,但无统计学意义;而A1应激组32周龄时bcl-2较8周时显著降低,P＜0.01.心肌bax蛋白随周龄有显著的增高趋势,P＜0.05,束缚应激使该趋势进一步突出.代表凋亡程度的bax/bcl-2比值随周龄而升高,在应激组较非应激组显著增高,P＜0.05.自发性高血压大鼠非应激A2组随周龄的增长,血浆去甲肾上腺素、肾上腺素及血管紧张素Ⅱ均呈上升趋势,但无显著差异.束缚应激A1组,上述血浆活性物质均显著升高P＜0.05.结论束缚应激模型能够有效激活交感神经系统,从而模拟心力衰竭时的神经内分泌状态.自发性高血压大鼠自8周至32周龄较Wistar鼠心肌细胞凋亡增加,应激所致的交感神经激活能够使凋亡过程加剧,因而加速了心力衰竭的进程.     

缬沙坦对自发性高血压大鼠心肌凋亡及bcl-2、bax蛋白的表达的影响

目的　探讨自发性高血压大鼠 (SHR) ,左心室肥厚过程中 ,心肌组织凋亡情况及凋亡调节蛋白bcl 2、bax表达的变化 ,AT1受体拮抗剂缬沙坦对心肌细胞凋亡的影响。方法　实验动物为 8周龄分为缬沙坦治疗组和非治疗组(SHR无药组 ) ,以Wistar鼠作为正常血压对照组 ,观察期限为 8周。采用TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)判定心肌细胞凋亡 ,并行免疫组化、Western印迹等方法检测实验动物心肌组织凋亡调节蛋白bcl- 2、bax的表达情况。结果　SHR心肌组织中存在细胞凋亡现象 ,并有bax高表达。缬沙坦治疗 8周后 ,SHR心肌组织bax蛋白表达显著降低至接近Wistar组。Bcl 2蛋白在SHR治疗组及Wistar组表达较SHR非治疗组有增高趋势 (P >0 0 5 )。前两组bax/bcl 2比值较后者显著降低 (P <0 0 5 )。结论　心肌细胞凋亡是代偿性心肌肥厚可能机制之一。高血压病早期缬沙坦在降压同时可有效抑制心肌细胞凋亡 ,具有积极的抗心室重建作用。     

缬沙坦对自发性高血压大鼠心肌凋亡及bcl-2、bax蛋白的表达的影响

目的探讨自发性高血压大鼠(SHR),左心室肥厚过程中,心肌组织凋亡情况及凋亡调节蛋白bcl-2、bax表达的变化,AT1受体拮抗剂缬沙坦对心肌细胞凋亡的影响.方法实验动物为8周龄分为缬沙坦治疗组和非治疗组(SHR无药组),以Wistar鼠作为正常血压对照组,观察期限为8周.采用TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)判定心肌细胞凋亡,并行免疫组化、Western印迹等方法检测实验动物心肌组织凋亡调节蛋白bcl-2、bax的表达情况.结果 SHR心肌组织中存在细胞凋亡现象,并有bax高表达.缬沙坦治疗8周后,SHR心肌组织bax蛋白表达显著降低至接近Wistar组.Bcl-2蛋白在SHR治疗组及Wistar组表达较SHR非治疗组有增高趋势(P>0.05).前两组bax/bcl-2比值较后者显著降低(P<0.05).结论心肌细胞凋亡是代偿性心肌肥厚可能机制之一.高血压病早期缬沙坦在降压同时可有效抑制心肌细胞凋亡,具有积极的抗心室重建作用.     

自发性高血压大鼠心肌凋亡及bcl-2、bax蛋白的表达

1材料与方法 8周龄自发性高血压大鼠(SHR)30只,雌雄各半.随机分为两组,分别为缬沙坦组和无药组各15只.8周龄雄性Wistar大鼠15只作为正常血压对照组.缬沙坦组给予血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂,缬沙坦20mg·kg-1·d-1,溶解于饮用水中每天1次胃管灌入.无药组及正常血压对照组每天饮用水10 ml/kg灌胃.每2周测尾动脉血压.至16周龄所有大鼠乙醚麻醉后断头处死,迅速取左心室组织(包括室间隔)称重.计算心脏指数=心脏重量/体重(mg/g).采用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术原位检测凋亡细胞.采用免疫组织化学定位研究心肌组织bcl-2及bax蛋白表达情况.同时应用Western印迹定量研究心肌bcl-2及bax蛋白表达.研究数据以-x±s表示,P＜0.05为差异有显著性意义.     

卡维地洛（Carvedilol）对心肌bcl-2、bax表达的影响

目的　研究卡维地洛对心肌凋亡相关基因bcl 2、bax表达的影响。方法　SD大鼠随机分三组 :对照组 ,阿霉素组 ,阿霉素 卡维地洛组。阿霉素腹腔注射 (2 0mg/kg)制备心肌毒性动物模型 ;卡维地洛组在注射阿霉素之后立即腹腔注射卡维地洛 (2mg/kg) ;等量生理盐水用于对照组。于用药后第 1,3,5 ,10 ,15d采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和免疫组织化学染色法检测心肌bcl 2、bax基因和蛋白水平表达的变化。结果　 (1)以GAPDH为内标 ,第 1、3、5、10d ,阿霉素组中bcl 2基因表达逐渐减弱 ,bax基因表达逐渐增强 ;阿霉素 卡维地洛组中bcl 2表达逐渐增强 ,于第 5、10天bcl 2表达高于阿霉素组 ,bax表达逐渐减弱 ,于第 5、10天bax表达低于阿霉素组 ;(2 )阿霉素 卡维地洛组Bcl 2、Bax阳性心肌细胞百分比较阿霉素组均有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论　 (1)阿霉素心肌毒性与促进bax的表达同时抑制bcl\|2表达有关 ;(2 )卡维地洛可以促进bcl 2的表达 ,减弱bax的表达。提示卡维地洛的心肌保护作用可能通过差异调节bcl 2和bax的表达而实现。     

阿托伐他汀对自发性高血压大鼠心肌组织p21蛋白表达和心肌肥厚的影响

目的探讨阿托伐他汀对自发性高血压大鼠(SHR)心肌组织p21蛋白表达和心肌肥厚的影响。方法 20只大鼠按照随机数字表法分为干预组和高血压对照组各10只,同时选取10只正常血压大鼠为正常对照组,将阿托伐他汀片剂研碎,1 ml蒸馏水溶解,按照50 mg·kg-1·d-1在同一时间给干预组常规灌胃,高血压对照组和正常对照组均给予等量蒸馏水灌胃,所有大鼠共给药10 w,测定大鼠血压、心室肥厚以及心肌组织p21蛋白mRNA的表达。结果干预后8、10、12、16 w大鼠血压值组间差异显著(P<0.05),其中干预组、高血压对照组血压均高于正常对照组(P<0.05)。干预10 w后大鼠体重(B)、心脏重量(H)、左心室重量(LV)、H/B/1000、LV/B/1000组间差异显著(P<0.05),其中干预组、高血压对照组中H/B/1000、LV/B/1000指标高于正常对照组,干预组低于高血压对照组(P<0.05)。三组大鼠心肌组织p21蛋白表达和p21mRNA差异显著(P<0.05),干预组、高血压对照组中p21蛋白、p21 mRNA表达低于正常对照组,干预组高于高血压对照组(P<0.05)。p21 mRNA与H/B/1000、LV/B/1000均呈负相关(r=-0.567,-0.685,P<0.05)。结论阿托伐他汀可以促使SHR心肌组织p21表达,降低心肌肥厚程度。     

心力衰竭大鼠心室肌细胞表达bax、bcl-2的性别差异及保心康的调节作用

目的:研究心力衰竭的大鼠左心室肌细胞表达bax和bcl-2蛋白的性别差异性,并观察保心康的作用。方法:普通级SD大鼠随机分为保心康组、蒸馏水组和假手术组,用腹主动脉缩窄造成心力衰竭的模型,流式细胞仪检测心室肌细胞内bax和bcl-2的表达率。结果:3组雌性大鼠心脏、左心室重量均较雄性的小;假手术组雌性大鼠的心脏质量指数也较雄性低,其他2组大鼠的心脏质量指数无性别差异;3组大鼠bax蛋白的表达率的无性别差异,雌性bcl-2的表达率均高于相应的雄性大鼠;保心康组雌雄性大鼠左心室肌细胞bcl-2的表达均升高,bax的表达均降低。结论:在充血性心力衰竭大鼠模型左心室肌细胞中,bax的表达雌雄性相似,但bcl-2的表达雌性较雄性高;保心康可上调左心室心肌细胞bcl-2的表达,下调bax的表达,从而抑制心肌细胞的凋亡。     

噪声应激对大鼠心肌葡萄糖调节蛋白78和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白表达的影响与高血压及心肌重构的关系

目的 研究内质网应激相关因子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)在噪声应激环境高血压大鼠模型心肌中的表达,并探讨GRP78和CHOP变化与高血压及其心肌重构的关系.方法 将成年雄性Sprague-Dawly(SD)大鼠40只随机分为两组:噪声组(采用噪声环境建立高血压模型)和...     

卡托普利对自发性高血压大鼠心肌肥厚和心肌纤维化的效应（摘要）

卡托普利对自发性高血压大鼠心肌肥厚和心肌纤维化的效应（摘要）陈义汉龚兰生最近，一些学者认为高血压左室肥厚向心力衰竭发展的决定因素是心肌胶原的过度沉积，即心肌纤维化，而不是心肌细胞本身，故防止或逆转心肌纤维化可能有助于维护心脏功能。本实验探讨卡托普利（...     

自发性高血压大鼠肾脏血管紧张素转换酶2 mRNA转录及其蛋白表达

目的观察不同月龄自发性高血压大鼠(SHR)肾脏血管紧张素转换酶2(ACE2) mRNA转录及其蛋白表达,初步探讨ACE2在高血压发生、发展过程中的可能作用。方法雄性SHR1月龄组(S1)、2月龄组(S2)、3月龄组(S3)、6月龄组(S6)和9月龄组(S9)共5组,每组各6只,各组均有相应月龄匹配的Wistar-Kyoto(WKY)大鼠作对照。采用RBP-Ⅰ型大鼠血压心率测定仪测量大鼠尾动脉收缩压(SBP);逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测肾脏ACE2 mRNA的转录水平;免疫组化染色结合计算机图像分析方法测定肾脏ACE2蛋白的表达水平。结果1)SHR的SBP随着月龄的增加而上升,6月龄后趋于稳定。2)SHR和WKY肾脏ACE2蛋白和 mRNA水平均随着月份的增加而增加,3月龄时达高峰,6月龄后趋于稳定;且SHR肾脏ACE2蛋白和 mRNA水平均低于同龄的WKY。S1肾脏髓质内侧部ACE2免疫染色阳性面积百分比较皮质和髓质外侧部高,与1月后的分布相反。结论1)SHR肾脏ACE2 mRNA和蛋白的表达水平比WKY大鼠低。2)大鼠肾脏ACE2 mRNA和蛋白的表达具有时间和部位分布上的差异。     

自发性高血压大鼠肾脏血管紧张素转换酶2 mRNA转录及其蛋白表达

目的 观察不同月龄自发性高血压大鼠(SHR)肾脏血管紧张素转换酶2(ACE2)mRNA转录及其蛋白表达,初步探讨ACE2在高血压发生、发展过程中的可能作用.方法 雄性SHR 1月龄组(S1)、2月龄组(S2)、3月龄组(S3)、6月龄组(S6)和9月龄组(S9)共5组,每组各6只,各组均有相应月龄匹配的Wistar-Kyoto(WKY)大鼠作对照.采用RBP-Ⅰ型大鼠血压心率测定仪测量大鼠尾动脉收缩压(SBP);逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测肾脏ACE2 mRNA的转录水平;免疫组化染色结合计算机图像分析方法 测定肾脏ACE2蛋白的表达水平.结果 1)SHR的SBP随着月龄的增加而上升,6月龄后趋于稳定.2)SHR和WKY肾脏ACE2蛋白和mRNA水平均随着月份的增加而增加,3月龄时达高峰,6月龄后趋于稳定;且SHR肾脏ACE2蛋白和mRNA水平均低于同龄的WKY.S1肾脏髓质内侧部ACE2免疫染色阳性面积百分比较皮质和髓质外侧部高,与1月后的分布相反.结论 1)SHR肾脏ACE2 mRNA和蛋白的表达水平比WKY大鼠低.2)大鼠肾脏ACE2 mRNA和蛋白的表达具有时间和部位分布上的差异.     

蛋白质摄入对卒中型自发性高血压大鼠脑卒中及繁育能力的影响

本实验结果提示在饲料中适当增加蛋白质含量．既可保持卒中型自发性高血压大鼠（SHRsp）脑卒中的特性（脑卒中病理检出率为86．6％），又保持了大鼠正常的繁育能力及身体健康，显著延长了雌鼠的寿命，增加了雄鼠及仔鼠的体重。     

奥美沙坦酯对自发性高血压大鼠血清蛋白质表达谱的影响

目的探讨奥美沙坦酯对自发性高血压大鼠(SHR)降压作用的蛋白质组学机制。方法选取雌雄各半12周龄的SHR,随机分为对照组(n=10)、奥美沙坦酯组(n=10)。对照组给予0.9%生理盐水灌胃,奥美沙坦酯组给予奥美沙坦酯配制的混悬液灌胃,两组均连续灌胃四周后,分离血清,每组随机各取5份血清样品。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定肽质量指纹图谱(PMF),采用数据库检索鉴定各肽段对应的蛋白质,获取差异表达蛋白质的信息。结果对照组、奥美沙坦酯组凝胶上的平均蛋白点数分别为(476±30)、(508±55)个,两组经统计分析有20个显著差异点,奥美沙坦酯干预后表达增强13个,降低5个,蛋白点消失2个。对这20个差异蛋白点进行质谱分析,鉴定出的8个蛋白质分别为线粒体膜蛋白、锌指蛋白、T细胞受体、视黄醇结合蛋白、转甲状腺蛋白A链、Rho GTPase、假想蛋白(2个)。结论奥美沙坦酯对高血压的作用机制可能与线粒体膜蛋白、锌指蛋白、T细胞受体、转甲状腺蛋白A链高表达,视黄醇结合蛋白、Rho GTPase低表达有关。     

Protein Kinase C Gene Expression in Brain and Heart in Spontaneously Hypertensive Rats

ProteinklnaseC（PKC）IsInvolvedInregulationofintracellularsignaltransdtlctlon［’－‘J．Severallabo－ratorieshavereportedthatPKCactlvltywasIn－creasedInSHRandhypertenslvepatlents．WealsoobservedIncreasedPKCactlvltylnplateletsofpa－tlentswithessentialhyper     

高血压大鼠ACE2的表达及其与一氧化氮相关性分析

目的探讨血管紧张素转换酶2(ACE2)在自发性高血压大鼠(SHR)中的表达情况并对其与血清一氧化氮(NO)水平作相关性分析。方法分别采用实时荧光定量PCR,Northern印迹以及免疫印迹技术测定心、肾组织中ACE2的mRNA与蛋白表达情况,同时用硝酸还原酶法检测血清NO含量。结果与WKY对照组相比,SHR大鼠心、肾组织中ACE2的mRNA和蛋白表达均明显下降(ACE2/GAPDH mRNA拷贝数比值为:心脏0·043±0·012vs1.291±0·619;肾脏0·051±0·016vs0·914±0·433,P均<0·01;蛋白相对OD值为:心脏0·729±0·046vs1±0·053;肾脏0·734±0·063vs1.005±0·05,P均<0·01),同时出现血清NO浓度下降[(24.3±8.0vs78.4±27.9)μmol/L,P<0·01)。相关分析发现,大鼠血清NO水平与心、肾组织中ACE2/GAPDH的mRNA拷贝数比值呈正相关(r=0·610,0·521,P均<0·05),而与血压水平则呈负相关(r=-0·656,P<0·05)。结论SHR大鼠心、肾组织中ACE2的mRNA和蛋白表达均明显下降,很可能与体内NO水平降低及血压上升有关。特异性影响ACE2转录和表达的药物将对高血压病的防治有重要的临床应用价值。     

高血压大鼠ACE2的表达及其与一氧化氮相关性分析

目的探讨血管紧张素转换酶2(ACE2)在自发性高血压大鼠(SHR)中的表达情况并对其与血清一氧化氮(NO)水平作相关性分析.方法分别采用实时荧光定量PCR,Northern印迹以及免疫印迹技术测定心、肾组织中ACE2的mRNA与蛋白表达情况,同时用硝酸还原酶法检测血清NO含量.结果与WKY对照组相比,SHR大鼠心、肾组织中ACE2的mRNA和蛋白表达均明显下降(ACE2/GAPDH mRNA拷贝数比值为心脏0.043±0.012 vs 1.291±0.619;肾脏0.051±0.016 vs 0.914±0.433,P均<0.01;蛋白相对OD值为心脏0.729±0.046 vs 1±0.053;肾脏0.734±0.063 vs 1.005±0.05,P均<0.01),同时出现血清NO浓度下降[(24.3±8.0 vs 78.4±27.9)μmol/L,P<0.01).相关分析发现,大鼠血清NO水平与心、肾组织中ACE2/GAPDH的mRNA拷贝数比值呈正相关(r=0.610, 0.521,P均<0.05),而与血压水平则呈负相关(r=-0.656,P<0.05).结论 SHR大鼠心、肾组织中ACE2的mRNA和蛋白表达均明显下降,很可能与体内NO水平降低及血压上升有关.特异性影响ACE2转录和表达的药物将对高血压病的防治有重要的临床应用价值.     

卡维地洛(Carvedilol)对心肌bcl-2、bax表达的影响

目的研究卡维地洛对心肌凋亡相关基因bcl-2、bax表达的影响.方法SD大鼠随机分三组对照组,阿霉素组,阿霉素+卡维地洛组.阿霉素腹腔注射(20 mg/kg)制备心肌毒性动物模型;卡维地洛组在注射阿霉素之后立即腹腔注射卡维地洛(2 mg/kg);等量生理盐水用于对照组.于用药后第1,3,5,10,15 d采用逆转录聚合酶链反应(R-PCR)和免疫组织化学染色法检测心肌bcl-2、bax基因和蛋白水平表达的变化.结果(1)以GAPDH为内标,第1、3、5、10 d,阿霉素组中bcl-2基因表达逐渐减弱,bax基因表达逐渐增强;阿霉素+卡维地洛组中bcl-2表达逐渐增强,于第5、10天bcl-2表达高于阿霉素组,bax表达逐渐减弱,于第5、10天bax表达低于阿霉素组;(2)阿霉素+卡维地洛组Bcl-2、Bax阳性心肌细胞百分比较阿霉素组均有显著性差异(P＜0.05).结论(1)阿霉素心肌毒性与促进bax的表达同时抑制bcl-2表达有关;(2)卡维地洛可以促进bcl-2的表达,减弱bax的表达.提示卡维地洛的心肌保护作用可能通过差异调节bcl-2和bax的表达而实现.     

脑心通对自发性高血压大鼠心肌纤维化的影响

目的观察脑心通对自发性高血压(SHR)大鼠心肌纤维化的影响。方法选择12周龄雄性SHR大鼠(二级)32只,随机分成4组,脑心通大剂量组予脑心通1.5g/(kg.d),脑心通小剂量组予脑心通0.5g/(kg.d),氯沙坦组予氯沙坦30mg/(kg.d),SHR组每日灌等量蒸馏水。另设周龄、性别相匹配的WistarKyoto(WKY)大鼠8只(WKY组)。治疗12周后用尾袖法测定动脉血压,称重后处死。计算左心室重量与体重比(LVM/BW)。天狼星红染色,计算机图像分析计算心肌胶原容积分数。结果脑心通大、小剂量组治疗后SBP均显著低于SHR组(P<0.01)。脑心通大剂量组SHR治疗后SBP较治疗前明显降低(P<0.01),而小剂量组治疗前后SBP比较无统计学意义。脑心通大、小剂量组SHR心肌胶原纤维含量显著低于SHR组(P<0.01)。结论脑心通可以抑制SHR大鼠的心肌纤维化,改善高血压所致的心肌重塑。