抗癌生物活性肽对实验性裸鼠肿瘤组织中p53和Bcl-2表达的影响

目的探讨抗癌生物活性肽(ACBP)作用于荷胃癌裸鼠后对肿瘤中p53和Bcl-2蛋白表达的影响,探讨ACBP可能的作用机制。方法成功建立荷胃癌裸鼠模型后将鼠随机分为2组,各组10只。对照组给予生理盐水;实验组腹腔注射活性肽0.4 mL(50 mg/L)。连续处理35 d,停药4 d后处死裸鼠,取肿瘤,应用免疫组化链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法检测突变型p53蛋白及Bcl-2蛋白的表达情况。结果 p53和Bcl-2蛋白在对照组肿瘤中阳性表达较强,在活性肽组中的表达均比对照组的表达弱,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 ACBP对荷瘤裸鼠肿瘤生长有明显的抑制作用,可能是通过影响p53和Bcl-2的表达实现的。     

抗癌活性肽对荷人胃癌裸鼠细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响

目的:研究抗癌活性肽(anti-cancer bioactive peptide,ACBP)对荷人胃癌裸鼠的生长和抑癌作用,探讨其诱导细胞凋亡及相关基因Bcl-2、Bax的表达及其临床意义.方法:采用透射电镜、流式细胞术(flow cytometry,FCM)和琼脂糖凝胶电泳方法,观察和检测肿瘤细胞的凋亡及其相关基因Bcl-2、Bax的表达.在裸鼠皮下建立人胃癌模型,将30只裸鼠随机分为对照组、ACBP组和CTX组.结果:对照组、ACBP组、CTX组的肿瘤重分剐为0.52±0.12g、0.23±0.03g和0.12±0.01g,与对照组相比,后两组体重抑瘤率分别为48.08%和76.92%,ACBP组、CTX组的胃癌生长受到明显抑制,差异有显著性(P<0.01);凋亡指数(apoptotic index,AI)分别为4.05%、13.75%和7.09%,以ACBP组极为显著(P<0.01),且ACBP组裸鼠的体重、饮食及活动状态均高于CTX组和对照组.Bcl-2在对照组表达最高,ACBP组最低;Bax正好相反,后者最高,前者最低.琼脂糖凝胶电泳在ACBP组和CTX组出现明显的DNA"梯形"条带;流式细胞仪直方图显示ACBP组和CTX组呈现明显的亚二倍凋亡峰;透射电镜可见典型的凋亡小体,对照组未见有明显的凋亡小体存在.结论:ACBP对胃癌有明显的抑癌作用和诱导胃癌细胞凋亡的功能,能显著提高荷瘤体的生存质量.     

抗癌生物活性肽对人胃癌BGC-823细胞周期相关蛋白CDC2、CDK4表达的影响

目的：探讨抗癌生物活性肽对人胃癌细胞周期相关蛋白CDC2、CDK4的影响及其作用机制。方法：实验分为活性肽组及对照组,将不同浓度的抗癌生物活性肽按不同时间作用于培养的人胃癌细胞株（BGC-823）,应用MTT法检测增殖抑制率。建立荷胃癌裸鼠模型,给予生理盐水作为阴性对照组,应用免疫组化技术对抗癌生物活性肽作用前后的胃癌裸鼠肿瘤中CDK4、CDC2的表达进行检测。结果：不同浓度的抗癌生物活性肽对胃癌细胞均有增殖抑制作用;抗癌活性肽S-2作用后人胃癌组织中的CDK4表达明显低于对照组（P〈0.01）,而CDC2表达高于对照组（P〈0.01）。结论：抗癌生物活性肽具有抗胃癌细胞增殖作用,其抗肿瘤作用机制可能是通过下调CDK4和上调CDC2的表达实现。     

抗胃癌生物活性肽对荷胃癌鼠细胞超微结构的影响

目的：观察经诱导后动物产生的抗胃癌生物活性肽对荷瘤鼠瘤细胞及脾脏细胞超微结构的影响。方法：取４周龄ＢＡＬＢ／Ｌ裸鼠随机分两组均注射ＢＧＣ－８２３细胞，３ｄ后实验组腋皮下注射抗胃癌活性肽，对照组注射生理盐水，３０ｄ后处死动物取瘤体称重，瘤、脾组织按常规法制备电镜样品，Ｈ－７００电镜观察。结果：对照组瘤体重，瘤细胞为典型的瘤细胞特征，脾细胞超微结构受损。实验组瘤体重量减轻、瘤细胞向正常细胞分化并伴有癌     

米托蒽醌对大鼠胃癌基因PCNA、Caspase-3和P53基因表达的影响

目的 研究米托蒽醌对胃癌大鼠病变胃黏膜增殖细胞核抗原(PCNA)、Caspase-3和p53基因表达的影响.方法 制作N-甲基-N＇-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱发的大鼠胃癌模型,实验分为空白对照组(N组)、模型对照组(M组)、小剂量米托蒽醌干预组(ML组)及大剂量米托蒽醌干预组(MH组),每组25只动物.免疫组织化学S-P法检测胃癌组织中PCNA的表达,分光光度计法检测Caspase-3活性,Real-Time PCR和Western blotting检测p53基因和蛋白的表达情况.结果 N组PCNA表达阴性,ML组和MH组的PCNA阳性率显著低于M组(P＜0.01,P＜0.05).M组和MH组的Caspase-3活性均显著低于N组(P＜0.01,P＜0.05);但ML组和MH组的Caspase-3活性又显著高于M组(P＜0.01,P＜0.05).M组的p53基因表达明显高于N组(P＜0.01);ML组和MH组的p53基因表达逐渐降低(P＜0.01,P＜0.05),但仍高于N组.p53蛋白的表达量在M组、ML组和MH组中依次下降.结论 米托蒽醌可能通过改变基因的表达达到治疗胃癌的效果,对抑制或逆转癌症的发展具有一定的作用.     

细胞凋亡及PCNA与胃癌生物学行为的关系

目的:探讨胃癌组织中细胞凋亡、增殖细胞核抗原(PCNA)与胃癌生物学行为的关系。方法:采用原位末端标记法(TUNEL)和SP免疫组化方法分别检测72例胃癌组织中细胞凋亡及PC-NA。结果:粘液癌及低分化胃癌组PCNA明显高于高分化组,而凋亡指数明显低于高分化组。胃癌组织浸润超过肌层PCNA较高,而凋亡指数较低。胃癌淋巴结转移组PCNA较高、凋亡指数较低。结论:检测胃癌组织中细胞凋亡及PCNA有助于评估病人的预后。     

抗癌活性肽抑制肿瘤生长和转移的研究进展

目的：总结抗癌活性肽抑制肿瘤生长和转移的研究进展。方法：检索出40余篇文献,选用与本文相关32篇文献作参考文献。结果：抗癌活性抑制肿瘤细胞增殖和转移的研究进展较快,有些抗癌肽的氨基酸序列已明确,抗癌机理也在深入研究中。结论：抗癌活性肽有抑制肿瘤细胞增殖和转移作用,促进肿瘤细胞的凋亡,副作用小,研究作用时间长能口服的抗癌肽将是未来的研究方向。     

生物活性肽的研究近况

生物活性肽由于具有多种机体调节和代谢功能,如抗癌、降压、降脂、激素调节、抗血栓、免疫调节、抑菌、抗病毒等,所以开发利用前景广阔。本文综述了生物活性肽的研究近况。     

反复冻融对标本生物活性肽含量的影响

用RIA检测反复冻融的血浆,脑脊液,尿液和组织提取液中β-内啡肽,生长抑素,抗利尿激素和催产素含量。结果表明:标本生物活性肽含量每次冻融后均显著降低;含量降低速度由快到慢的标本为血浆、脑脊液、尿液和组织提取液,生物活性肽为β-内啡肽、生长抑素、抗利尿激素和催产素。提示生物活性肽标本的保存不宜反复冻融,特别是检测血浆和脑脊液内长链的生物活性肽时更应注意。     

米托蒽醌对大鼠胃癌基因PCNA、Caspase-3和p53基因表达的影响

目的研究米托蒽醌对胃癌大鼠病变胃黏膜增殖细胞核抗原(PCNA)、Caspase-3和p53基因表达的影响。方法制作N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱发的大鼠胃癌模型,实验分为空白对照组(N组)、模型对照组(M组)、小剂量米托蒽醌干预组(ML组)及大剂量米托蒽醌干预组(MH组),每组25只动物。免疫组织化学S-P法检测胃癌组织中PCNA的表达,分光光度计法检测Caspase-3活性,Real-Time PCR和Western blotting检测p53基因和蛋白的表达情况。结果 N组PCNA表达阴性,ML组和MH组的PCNA阳性率显著低于M组(P<0.01,P<0.05)。M组和MH组的Caspase-3活性均显著低于N组(P<0.01,P<0.05);但ML组和MH组的Caspase-3活性又显著高于M组(P<0.01,P<0.05)。M组的p53基因表达明显高于N组(P<0.01);ML组和MH组的p53基因表达逐渐降低(P<0.01,P<0.05),但仍高于N组。p53蛋白的表达量在M组、ML组和MH组中依次下降。结论米托蒽醌可能通过改变基因的表达达到治疗胃癌的效果,对抑制或逆转癌症的发展具...     

抗癌活性肽对荷白血病鼠的作用

目的 :探讨抗癌活性肽抑制白血病的效应。方法 :建立小鼠白血病模型 ;MTT法检测抗胃癌生物活性肽的抑制作用 ;光镜和电镜技术对癌细胞结构进行分析。结果 :抗胃癌生物活性肽对白血病小鼠细胞增殖有较好的抑制作用 ,抑制率为 45 %。光镜下计数白血病组外周血白细胞数为 2 5 .0× 1 0 9/L,电镜显示白血病组肝、脾有典型的癌细胞浸润 ,淋巴细胞大小及细胞器变化明显。抗胃癌生物活性肽治疗 7d外周血白细胞计数为 6.0×1 0 9/L,电镜显示肝、脾癌细胞浸润减少 ,淋巴细胞大小均一 ,细胞内细胞器变化趋于正常。结论 :抗胃癌生物活性肽 ( ACBP)有抑制白血病细胞增殖的作用     

ESTABLISHMENT AND BEHAVIOR OF A TRANSPLANTED HUMAN PRIMARY GASTRIC CANCER IN NUDE MICE

A human primary gastric cancer tissue (adenocarcinoma Ⅱ—Ⅲ) was transplanted into nude mice (SWISS/DF, nu/nu). It has been transfered for 8 generations at 56 sites in 28 nude mice with transplanting rate of 100%. The transplanted tumor is designated as transplanted human primary gastric cancer-1 in nude mice (THPGC-1). The growth rate of THPGC-1 is rather rapid and the size of transplanted tumor reaches 1cm~2 in 4—5 weeks after transfer. The morphology and histochemistry of the original tumor were retained well in the initial and serial transplanted tumors. THPGC-1 could secrete carcinoembryonic antigen (CEA). After intravenous or intraperitoneal injection of ~(131)Ⅰ-antiCEA monoclonal antibody into the THPGC-1 bearing nude mice, the radiolabeled antibody was concentrated and localized in the tumor as shown by γ-camera analysis. Similar pattern of lactate dehydrogenase isoenzyme was observed both in primary gastric cancer tissue and THPGC-1 tissue. Chromosomal examination revealed that THPGC-1 was human aneuploid ones. Southern blot analysis showed that the pattern of repetitive DNA bands and the structure of 28S rDNA, c-H-ras and c-myc genes in THPGC-1 were identical to the original primary gastric cancer DNA. The results suggest that THPGC-1 be a reliable model for the research of the molecular biology of cancer cells and experimantal gastric cancer diagnosis and treatment.     

抗癌活性肽对人肿瘤细胞株增殖的影响及其机理探讨

目的:探讨由山羊内脏提取制备的抗癌活性肽(Anti -cancer active peptide,ACBP)对人胃癌细胞株BGC - 823、MGC - 803、人鼻咽癌细胞株CNE增殖的影响及作用机理.方法:应用MTT法和流式细胞术观察不同剂量ACBP在不同时间对体外培养的BGC - 823、MGC - 803及CNE细胞增殖的影响,并对细胞周期及凋亡进行了检测.结果:MTT结果显示ACBP对BGC - 823、MGC - 803及CNE的增殖有抑制作用且呈现剂量依赖效应,在ACBP 20ug/mL时,对三种细胞株的抑制率分别达到38.3％、29.79％和42.02％ (P ＜0.01)).流式细胞术检测细胞周期结果显示,3种对照组细胞大部分处于G0/G1期和S期,培养24h后,S期细胞数开始减少,G0/G1期细胞数增加,48h和72h后呈现显著性变化(P＜0.01).流式细胞术检测细胞凋亡结果显示ACBP作用早期,凋亡细胞(AV+/PI -)增多,在48h和72h后更加明显.结论:ACBP对分化不同的胃癌细胞BGC - 823、MGC - 803及鼻咽癌CNE细胞的增殖有抑制作用,其作用机制可能为诱导细胞凋亡,抑制DNA合成.     

Survivin基因在不同胃黏膜中的表达的研究

目的:研究胃癌(gastric cancer,GC)及不同胃黏膜组织中生存素(Survivin)基因的表达关系,为临床应用以生存素为靶点的胃癌防治措施提供理论依据.方法:采用免疫组织化学染色(SP法)检测不同胃黏膜组织中Survivin.30例浅表性胃炎(chronic superficial gastritis,CSG);31例萎缩性胃炎(chronic Atrophic gastritis,CAG),15例异型增生(Dysplasia,Dys).胃癌组织32例.结果:从CSG→CAG→ Dys→GC过程中,Survivin表达均呈递增趋势.CSG灰度值(57.64±4.44)、CAG灰度值(55.05±6.97)、Dys灰度值(48.59±4.16);GC灰度值(32.25±4.13).Survivin表达在CSG、CAG、Dys、GC之间表达有统计学意义(P＜0.05).胃癌组织Survivin的表达与年龄,性别,肿瘤大小无关;在临床分期和组织分化程度方面Survivin阳性表达率明显不同,具有统计学意义(P＜0.05).结论:Survivin基因在胃癌的发生发展过程中可能起重要作用.     

EXPERIMENTAL STUDY ON APOPTOSIS OF GASTRIC CANCER CELLS INDUCED BY TRICHOSANTHIN

ffeSUItt Objectif Pour mvOr Si lbaptose se ndle au nzhanthe de cytotOxicitd de trichomnthinecontre les cellules de cancer M' N tw WueF et rm CObodri etahatutilde pour exPlore qualitatiest et quantitatinyt l'dtat mptOtique des cellules de cancer gastrique.ssulfots Dens le rechend in vitrO, qUand les ceuules de cancer ~que an7gu dtaicnt traitds por tri-chomnthine (0. 1ng/mI, 36h ), quelques changNts nZOndhaques twipo dhaptOse etaicnt ObServds. II yavait une aUgnZentatthe shamptive de l…     

残胃癌发生机理的实验及临床研究

目的 探讨残胃癌的发生机理。方法 将９条试验用杂种大随机分成３组，均行胃大部切除术，行不同方式胃肠重建，Ｂ－Ｉ且；３条，Ｂｉｌｌｒｔｈ－Ｉ式胃肠重建；Ｂ－Ⅲｘｅｇ ；３ｔｓ ，Ｂ－Ⅱ式胃肠重Ｒｏｕｘ－Ｙ组，３条，Ｒｏｕｘ－Ｙ型肠重建。３组实验犬 分别地榱及术后６个月，行残胃内胆汁酸测定，细菌鉴定及胃青草便学检查。临床中，回顾性分析２０年２６例残胃癌病人，统计不同式术所占的百分比。结果 Ｒｏｕｘ－Ｙ     

体外RNA干扰抑制REG4基因表达对胃癌细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨体外RNA干扰抑制REG4基因表达对胃癌细胞增殖及凋亡的影响。方法应用实时定量PCR方法检测七株胃癌细胞株中REG4基因的mRNA表达。针对REG4基因设计三条小干扰RNA片段(siRNA1、siRNA2、siRNA3),瞬时转染高表达胃癌细胞株。用RT-PCR方法检测转染后REG4基因的mRNA表达水平、MTT法检测细胞增殖能力、AnnexinV-PI法检测细胞凋亡水平。结果以永生化正常胃粘膜细胞株GES-1作为参照。MKN-45和AGS胃癌细胞株中REG4表达水平升高200倍以上,遂选用AGS细胞进行RNA干扰。RT-PCR结果证实siRNA2、siRNA3均有干扰效果,尤以siRNA3效果明显。选用siRNA3干扰AGS细胞株,MTT实验结果证实干扰AGS后,细胞增殖受到明显抑制(P<0.05)。AnnexinV-PI实验结果显示细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。结论干扰REG4基因具有抑制胃癌细胞增殖、促进凋亡的作用,REG4基因可能成为胃癌基因靶向治疗的新靶点。     

海洋生物表面活性肽小鼠急性毒性实验

目的 观察海洋生物表面活性肽(SRP)的安全性.方法 取昆明种小鼠40只,随机分为对照组和实验组,每组20只,实验组每只小鼠给予113.3 g/kg的SRP灌胃1次,给药体积为50 mL/kg,对照组给予等体积生理盐水,观察小鼠的死亡率和脏器的大体病理改变.结果 实验组20只小鼠观察14 d无1例死亡,亦无任何异常及...