40%四氯化碳大鼠慢性肝损伤模型的研究

目的：研究40％四氯化碳致大鼠慢性肝损伤病理变化过程，完善40％四氯化碳慢性肝损伤的动物模型。方法：雄性Wistar大鼠80只，随机分为对照组和实验组。对照组每周两次给予溶剂玉米油，实验组每周两次给予40％四氯化碳，0．1ml／100g．bw。于实验第1、3、6、8周染毒48h后将动物处死，取肝组织作常规HE、Masson和Retculin染色，光镜下观察病理变化。结果：染毒1周后，中央静脉周围出现较多坏死肝细胞，并伴有气球样变和脂肪变性。染毒3周后，气球样变和坏死进一步增多，并形成桥接坏死，局部网状纤维支架塌陷。染毒6周后出现肝纤维化。染毒第8周出现肝硬化。结论：40％四氯化碳使肝组织严重坏死，从而致肝组织第八周就出现明确的肝硬化。     

福建水华微囊藻毒素主要亚型及其亚慢性肝毒性

目的鉴定福建省某水库水华微囊藻毒素的主要亚型，研究该毒素对大鼠的亚慢性肝毒性。方法采集微囊藻水华，固相萃取法提取微囊藻毒素，以微囊藻毒素LR和RR纯毒素为标准，高效液相色谱法测定其亚型；SD大鼠0．42μg／（ks bw）MC-LR亚慢性染毒35d，观察血清酶学和组织病理学改变。结果该微囊藻水华检测出MC-LR，未检测出MC-RR；用藻细胞裂解液[相当于0．42μg／（ksbw））MC-LR]亚慢性染毒大鼠，血清SOD活性显著降低，SDH水平显著升高，肝脏系数显著增大，肝组织出现炎症样变化。结论福建某水库水华微囊藻毒素的主要亚型为MC-LR；亚慢性接触0．42μg／（ks bw）MC-LR的微囊藻毒素可引起肝损伤。     

D-半乳糖诱导小鼠肝损伤模型的方法研究

目的探讨不同实验方法条件下,D-半乳糖所致小鼠肝损伤各项相关指标的变化及意义。方法采用4周腹腔注射染毒、急性腹腔注射染毒、急性尾静脉注射染毒的方法,测定不同剂量组小鼠血清中AIJT、AST及肝匀浆中SOD、GSH、MDA,肝细胞活性氧（Ros）水平、细胞凋亡率。结果4周腹腔注射染毒各组各指标与对照相比,差异无统计学意义（P〉n05）,模型不成立。急性腹腔注射、急性尾静脉注射各剂量组相关指标变化提示,2种方法均可建立肝损伤模型,但尾静脉注射各组相关指标剂量-效应关系好于腹腔注射各组,灵敏度也更高。结论与其他2种方法相比,急性尾静脉注射D-半乳糖诱导小鼠肝损伤模型,具有染毒特异性高、剂量-效应关系好、指标特异性和灵敏度高等特点,是较理想的肝损伤模型复制方法。     

几种亲肝毒物亚慢性实验中毒时肝纤维化过程的组织学比较

本文对健康雄性SD大鼠进行亚慢性染毒，经腹腔注射CCl4、P4和TNT。发现染毒三周后，CCl4组发生明显的肝纤维化并伴有肝组织脂变、产变及明显的点块状坏死。P4和TNT染毒十二周后才可见肝窦隙、汇管区有胶原纤维增生，并伴有脂变和灶状坏死，在此以前以脂变为主。     

二硫化碳对实验大鼠神经系统神经营养因子的影响

目的探讨二硫化碳染毒对大鼠神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达的影响。方法健康雄性Wistar大鼠20只随机分成对照组和二硫化碳组,每组10只。二硫化碳组大鼠腹腔注射二硫化碳玉米油溶液,开始4周染毒剂量为150mg/kg,1次/d,6次/周,后4周染毒剂量为300mg/kg,1次/d,6次/周。对照组腹腔注射等剂量的玉米油溶液。染毒结束后对周围神经损伤体征进行评分,同时检测胫神经运动神经传导速度和腓肠神经感觉神经传导速度;并应用免疫组化方法检测NGF、BDNF在海马及坐骨神经中的蛋白表达情况。结果二硫化碳染毒8周后染毒组大鼠周围神经体征评分明显升高;与对照组比较,神经电生理测定结果显示二硫化碳染毒组胫神经运动神经和腓肠神经感觉神经传导速度明显减慢,潜伏期延长,波幅减低。染毒组大鼠海马及坐骨神经中NGF和BDNF表达较对照组显著降低。结论二硫化碳染毒导致的神经组织NGF、BDNF蛋白表达下降可能参与了其神经毒作用。     

慢性肝炎、肝硬变的肝脏超微结构改变

肝组织的超微结构观察对探讨慢性病毒性肝炎和肝炎后肝硬变中肝损伤的发生机理和发展规律有重要意义。虽然有些超微结构改变是非特异的,但有某些改变对慢性肝病的诊断和分型可能有一定意义,对治疗也可能有某些启示。现将有关情况分述如下。一、慢性迁延性肝炎(慢迁肝) 1.肝细胞的超微病理改变:慢迁肝的炎症反应主要在汇管区。与汇管区炎性细胞相接近的肝细胞有比较明显的亚细胞改变,但并不严重,其主要变化是内质网轻度扩张,胞浆内脂滴增多。少量肝细胞有气球样变性,其内质网扩张较明显。嗜酸性小体很少见,每个肝小叶内只有1～2个。气球样改变则呈明显的肝细胞内质网高度扩张,糖     

铬中毒性肝肾损害的实验研究

给Ｗｉｓｔａｒ 雄性大鼠腹腔注射重铬酸钾７３５ｍｇ／ｋｇ 体重,每天１ 次,连续染毒７ 天,停止染毒后继续观察７ 天。结果显示：肾脏、肝脏先后出现明显的形态和功能异常,并随着染毒时间延长肾、肝病变程度及范围加重;肾损害主要为肾小管功能障碍,染毒后期累及到肾小球;肝损伤的特征为中央静脉区肝细胞的浊肿变性和点片状坏死,血清转氨酶显著升高;停止铬接触后肾功能恢复较慢且不完全,肝功能基本恢复正常。提示铬中毒动物肾脏损害程度较重,肝脏损害相对较轻及肝脏代偿修复能力较强     

四氯化碳急性染毒对大鼠肝脏脂质过氧化的影响

观察一次性经腹腔注射四氯化碳（１０００ｍｇ／ｋｇＢ．Ｗ．）的大鼠３、６、１２、２４小时后肝脏的超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶等抗氧化酶活力及脂质过氧化物—丙二醛含量的变化。结果发现，四氯化碳各染毒组大鼠肝脏中上述的抗氧化酶活性均比对照组低，同时，肝脏丙二醛含量均高于对照组，提示四氯化碳急性染毒大鼠中肝脏抗氧化酶活性受四氯化碳毒性抑制，同时出现肝脏脂质过氧化并造成肝损害。     

菇精蛋白多糖对小鼠急性肝损伤保护作用的研究

目的研究菇精蛋白多糖对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法清洁级ICR小鼠60只,随机分成低、中、高、溶剂对照和模型对照组,三个剂量组动物每日经口灌胃给予受试物,溶剂对照组和模型对照组给予蒸馏水,于实验第30 d模型组及各剂量组动物按0.01 ml/g.bw一次灌胃给予CCl4染毒,溶剂对照组给予玉米油,24 h后取血测定ALT、AST,取肝脏进行组织病理学检查。结果各剂量组均能抑制血清ALT、AST值的升高,减轻肝组织的病理损伤。结论菇精蛋白多糖对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤具有保护作用。     

硫酸镍致雌性小鼠卵巢损伤作用

目的探讨硫酸镍致小鼠卵巢细胞凋亡的毒作用及其机制，为防治镍毒性导致的卵巢早衰提供科学依据。方法健康昆明种雌性小鼠以每次以10．0，5．0，2．5mg/kg硫酸镍（NiS04）腹腔注射染毒，0．2ml／（10g·bw），1次／d，连续12d。阴道脱落细胞学观察动情周期。摘取小鼠卵巢，制备卵巢贴片观察卵巢细胞的形态学变化，并利用流式细胞仪测定卵巢细胞细胞周期及DNA含量。结果（1）染毒组小鼠动情间期延长且不规则。（2）光学显微镜可观察到细胞凋亡的形态学变化。（3）细胞周期分析显示随染毒剂量增加，小鼠卵巢细胞呈现G0／G1期细胞阻滞且G1峰前出现Ap峰（凋亡峰。亚二倍体峰），G2／M、S期细胞比例下降；细胞凋亡率增加；细胞增殖指数（PI）降低；异倍体指数（DI）增加。结论腹腔注射硫酸镍可导致雌性小鼠卵巢损伤，其损伤作用与NiS04调控细胞周期和诱导卵巢细胞凋亡有关。     

小剂量乙酰半胱氨酸对慢性肝损伤大鼠的治疗作用

目的 研究小剂量乙酰半胱氨酸(NAC)对四氯化碳(CCl4)所致大鼠慢性肝损伤的治疗作用.方法 93只SD大鼠随机分成2组,正常对照组15只和模型组78只.自造模之日开始,模型组大鼠皮下注射25％CCl4橄榄油溶液1 mL/kg,正常组大鼠注射同剂量橄榄油溶液,每周3次,连续4周.4周末,模型组随机取3只进行病理切片检查,观察肝损伤严重程度.将造模成功的大鼠随机分成5组,每组15只,分别为小剂量NAC 45、90、180 mg/kg组、阳性对照组和模型组.阳性对照组给予还原型谷胱甘肽(GSH)54 mg/kg,正常对照组和模型组给予同容积灭菌生理盐水,腹腔注射每日1次,连续4周,末次给药后24 h,麻醉大鼠,腹主动脉取血,检测血清ALT、AST、白蛋白(ALB)、ALP和TBil,取肝脏称重,取部分检测肝组织中丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(Hyp)、SH含量与超氧化物歧化酶(SOD)活力,剩余肝脏用10％福尔马林固定,切片观察肝脏组织病理变化.结果 各组间ALT、AST、ALP、ALB和TBil差异均有统计学意义(F=16.878、9.996、6.099、5.002、11.157,P＜0.01).模型组大鼠血清中ALT、AST、ALP和TBil分别为(112.00±19.05) U/L、(150.67±18.15) U/L、(272.75±34.26) U/L和(1.98±0.10) μmol/L,均高于对照组(t=26.912,P＜0.01;t=15.571,P＜0.01;t=8.238,P＜0.05;t=14.367,P＜0.01).各组间肝组织SOD、MDA、GSH和Hyp差异均有统计学意义(F=3.251,P＜0.05;F=3.232,P＜0.05;F=5.210,P＜0.01;F=41.131,P＜0.01).模型组肝脏MDA和Hyp分别为(0.99 ±0.22) nmol/mgprot和(504.02±84.51) μg/g,高于对照组(t=8.229和69.853,P＜0.01).小剂量NAC低、中剂量组GSH、Hyp和SOD均高于模型组,差异均有统计学意义(P均＜0.05).高剂量组GSH为(1.53±0.76) μmol/gprot,高于模型组;Hyp为(131.53±44.85) μg/g,低于模型组,差异均有统计学意义(t=6.023,P＜0.05;t=58.532,P＜0.01).HE染色结果表明所有NAC剂量组其肝脏病变程度均较模型组明显减轻.结论 小剂量NAC对CCl4诱导大鼠慢性肝损伤具有明显的治疗作用.     

大鼠肝纤维化复合模型的建立及动态观察

目的:采用复合因素建立大鼠肝纤维化模型,并对其肝脏纤维化病变和相关指标进行动态观察。方法:雄性Wistar大鼠随机分为对照组和肝纤维化模型组,模型组大鼠每周2次乙醇灌胃、猪血清腹腔注射、CCl4葵花仔油溶液皮下注射,同时每日喂饲高脂饲料进行联合造模。分别在造模后第2、4、6、7、8、9、10周检测各组大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9、MMP-13)及其抑制物(TIMP1、TIMP-2)水平,并观察肝脏病理病变。结果:从第2周起,模型组大鼠血清ALT、AST水平开始升高,各时间点与对照组比较均具有显著性差别;血清HA和LN水平逐渐增高,第7~10周与对照组比较均具有显著性差别;血清MMP-2水平逐步升高,第4、6~10周与对照组相比均具有显著性差别;血清MMP-13水平从第6周起逐渐降低,第9和10周时显著低于对照组;血清TIMP-1和TIMP-2水平随造模时间延长逐步升高,TIMP-1在第4,6~10周与对照组相比均具有显著性差别,TIMP-2在第7~10周显著高于对照组;模型组大鼠各时间点血清TGF-β1水平均显著高于对照组。病理组织学检查显示,第6周时,模型组大鼠肝脏细胞广泛性空泡变性,汇管区成纤维细胞增生,肝小叶间隔可见胶原纤维沉积,出现典型的肝纤维化改变;到第8周时,形成典型的假小叶,肝硬化形成。结论:采用酒精灌胃,猪血清腹腔注射,喂饲高脂饲料,并结合CCl4皮下注射6周后,可成功建立大鼠肝纤维化模型;HA、LN、TGF-β1、MMP-2、TIMP-1和TIMP-2等可作为较好反映大鼠肝纤维化病变的无创伤化血清学指标。     

Dietary sea cucumber cerebroside alleviates orotic acid-induced excess hepatic adipopexis in rats

ABSTRACT: BACKGROUND: Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) is a prevalent chronic liver disease in industrialized countries. The present study was undertaken to explore the preventive effect of dietary sea cucumber cerebroside (SCC) extracted from Acaudina molpadioides in fatty liver rats. METHODS: Male Wistar rats were randomly divided into four groups including normal control group, NAFLD model group, and two SCC-treated groups with SCC at 0.006% and 0.03% respectively. The fatty liver model was established by administration of 1% orotic acid (OA) to the rats. After 10d, serum and hepatic lipid levels were detected. And the serum alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) activities were also determined. Besides, to gain the potential mechanism, the changes of key enzymes and gene expressions related to the hepatic lipid metabolism were measured. RESULTS: Dietary SCC at the level of 0.006% and 0.03% ameliorated the hepatic lipid accumulation in fatty liver rats. SCC administration elevated the serum triglyceride (TG) level and the ALT, AST activities in OA-fed rats. The activities of hepatic lipogenic enzymes including fatty acid synthase (FAS), malic enzyme (ME) and glucose-6-phosphatedehydrogenase (G6PDH) were inhibited by SCC treatment. And the gene expressions of FAS, ME, G6PDH and sterol-regulatory element binding protein (SREBP-1c) were also reduced in rats fed SCC. However, dietary SCC didn't affect the activity and mRNA expression of carnitine palmitoyltransferase (CPT) in liver. Besides, suppression of microsomal triglyceride transfer protein (MTP) activity was observed in SCC-feeding rats. CONCLUSIONS: These results suggested that dietary SCC could attenuate hepatic steatosis due to its inhibition of hepatic lipogenic gene expression and enzyme activity and the enhancement of TG secretion from liver.     

Chitosan reduces plasma adipocytokines and lipid accumulation in liver and adipose tissues and ameliorates insulin resistance in diabetic rats

Chitosan is a natural product derived from chitin. To investigate the hypoglycemic and anti-obesity effects of chitosan, male Sprague-Dawley rats were divided into four groups: normal control, diabetic, and diabetic fed 5% or 7% chitosan. Diabetes was induced in rats by injecting streptozotocin/nicotinamide. After 10 weeks of feeding, the elevated plasma glucose, tumor necrosis factor-α, and interleukin-6 and lower adiponetin levels caused by diabetes were effectively reversed by chitosan treatment. In addition, 7% chitosan feeding also elevated plasma glucagon-like peptide-1 levels and lowered the insulin resistance index (homeostasis model assessment) in diabetic rats. Lower adipocyte granular intensities and higher lipolysis rates in adipose tissues were noted in the 7% chitosan group. Moreover, chitosan feeding reduced hepatic triglyceride and cholesterol contents and increased hepatic peroxisomal proliferator-activated receptor α expression in diabetic rats. Our results indicate that long-term administration of chitosan may reduce insulin resistance through suppression of lipid accumulation in liver and adipose tissues and amelioration of chronic inflammation in diabetic rats.     

四氯化碳和免疫血清法大鼠肝纤维化模型进程的时效关系对比研究

目的 比较四氯化碳(CCl4)法和免疫血清(PS)法两种肝纤维化制模方法在肝纤维化形成进程中时效关系和病理学特征。方法 采用CCl4和PS10周法制作SD大鼠肝纤维化模型，分别观察在造模第6、10、14、20周时肝脏组病学特征，Masson三色染色和计算机图像分析系统进行分析。结果 CCl4法于制模第6周即可见肝脏假小叶形成，于第10周始最为典型；随着假小叶的形成和造模方法停止，肝脏病理结构变化趋于稳定；肝细胞脂肪变性尤为突出，与模型制作进程相平行。PS法于造模第10周即造模结束时方见纤维间隔形成，造模虽已停止但肝纤维化进程加速完成，肝组织分隔严重，假小叶形成较多并进展到第20周；制模自始至终，肝细胞未见明显脂肪变性。结论 CCl4和PS两种制模方法在肝纤维化形成进程中所表现出的时效关系和病理特征有所不同，结合使用两种方法研究肝纤维化更为合理；以抗肝纤维化干预因子进行干预研究时，干预因子的持续时间宜延长至肝纤维化形成之高峰期或之后，持续时间至少14周。     

饮食对胰岛素抵抗大鼠肝脏组织中PTP 1B表达的影响

目的在高脂饮食诱导胰岛素抵抗的基础上,观察饮食对大鼠肝脏中蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)表达的影响.方法选取雄性Wistar大鼠30只,随机分为正常对照组10只,给予基础饲料;模型组20只,给予高脂饲料.模型组大鼠给予高脂喂养4周后,随机分为2亚组胰岛抵抗组,继续高脂饮食;饮食组,给予低脂饮食干预.干预6周后,用蛋白印迹法检测各组大鼠肝组织中PTP1B蛋白含量.结果在胰岛素抵抗状态时,大鼠肝组织中PTP1B蛋白与对照组相比,含量增加98.3%(t=9.335,P＜0.001);饮食干预能明显降低PTP1B的表达,与胰岛素抵抗组相比减少32.7%(t=4.076,P＜0.001).结论饮食干预能改善机体胰岛素抵抗,可能与降低肝脏组织中PTP1B蛋白表达有关.     

阿藿烯对四氯化碳所致大鼠肝纤维化的保护作用

目的探讨阿藿烯对四氯化碳(CCl4)所致大鼠肝纤维化的保护作用。方法将40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、低(25mg/kg)和高剂量(50mg/kg)阿藿烯组,用40%CCl4皮下注射制作肝纤维化模型,阿藿烯按低和高剂量分别连续灌胃6w后,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性、总蛋白(TP)和清蛋白(ALB)含量、总胆红素(TBIL)和间接胆红素(DBIL)及肝纤维化的透明质酸(HA)和层粘连蛋白(LN)水平;检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和脂质过氧化(MDA)水平;并进行肝脏组织病理学检查。结果低、高剂量组阿藿烯均可显著降低血清ALT和AST活性、TBIL、DBIL、HA和LN水平(P<0.01或P<0.05);增加ALB含量(P<0.05);提高肝脏SOD活性和减少MDA含量(P<0.01);并明显改善肝脏的纤维化程度(P<0.01或P<0.05)。结论阿藿烯能够减轻CCl4所致的大鼠肝纤维化作用,其机制可能与抗氧化作用有关。     

缬沙坦抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的观察缬沙坦预防、治疗大鼠肝纤维化的作用和机制。方法雄性SD大鼠30只,随机分为3组：缬沙坦预防组（A组）,模型组（B组）,缬沙坦治疗组（C组）。二甲基亚硝胺（DMN）腹腔注射,各组每周连续3d,1;L／d,共4周。A组造模同时给于缬沙坦10mg／（kg·d）灌胃,共4周,第5周起停止腹腔注射DMN后仍按原剂量灌胃,再4周。C和B2组停止造模后,分别给予缬沙坦10mg／（kg·d）或生理盐水灌胃,共4周。8周后留取肝标本,行HE染色和Masson染色,以免疫组化法检测a-平滑肌肌动蛋白（a—SMA）含量。结果（1）A组：肝索排列基本整齐,有少量出血,汇管区稍扩大,未见胶原纤维增生。B组：肝组织大片出血坏死,有假小叶形成。c组：肝索排列紊乱,有出血坏死,汇管区扩大,有纤维间隔伸向肝小叶。（2）Masson染色胶原定量分析：B组明显高于A、C2组（P〈0．01）,A组低于C组（P〈0．05）。（3）肝窦壁a—SMA观察：c组肝窦壁强阳性表达,A组肝窦壁基本不表达,仅见于汇管区,B组肝窦壁阳性表达,3组定量差异有统计学意义（P〈0．05）。结论在DMN诱导的肝纤维化模型中,缬沙坦部分通过抑制肝星状细胞（HSC）的活化预防和治疗肝纤维化,且预防效果优于治疗。     

CCl_4橄榄油溶液对肝硬化大鼠模型制备成功率的影响

目的:对现有肝硬化大鼠造模方法进行改良,构建出稳定的肝硬化大鼠模型并降低制模过程中大鼠的死亡率,同时探索乙型肝炎病毒导致肝硬化大鼠模型的制备,为相关的实验提供稳定可靠的动物模型。方法:40只Wistar雌性大鼠,按0.4 ml/100g剂量予以腹腔注射50%CCl4的橄榄油溶液,每周注射2次并称量其体重,同时以10%乙醇溶液为其惟一饮用水源;体重降低大于或等于10 g以上时,暂停给药,并改用自来水为饮用水源,直到体重恢复到下降少于10 g时继续上述方案。20只Wistar雌性大鼠,按人乙型肝炎病毒患者血清1∶20生理盐水稀释予以腹腔注射,每周注射1次,同时每周按2次30%乙醇溶液灌胃,以自来水和10%乙醇溶液交替作为水源,高脂饮食。结果:CCl4橄榄油组:40只Wistar大鼠10周后,死亡11只,成模29只;病毒组:20只Wistar雌性大鼠12周后,死亡1只,未成模。结论:经过改良的肝硬化大鼠制模方案可增加建模的成功率,并可形成由慢性肝炎转化而来的小结节性肝硬化模型;病毒性肝硬化大鼠模型为以后成功制备模型提供了参考依据。