来曲唑与三苯氧胺对人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP生长及耐药的影响

目的:研究来曲唑(letrozole,LTZ)与三苯氧胺(tamoxifen,TAM)对人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP生长及耐药的影响。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,比较不同浓度的LTZ、TAM、LTZ+TAM对SKOV3/DDP细胞生长及对顺铂(cisplatin,DDP)耐药的逆转作用。结果:①不同浓度(1×10-9mol/L～1×10-4mol/L)LTZ或低浓度(1×10-9mol/L～1×10-7mol/L)TAM对SKOV3/DDP细胞生长无抑制,不能逆转DDP引发的耐药。高浓度(1×10-6mol/L～1×10-4mol/L)TAM能抑制SKOV3/DDP细胞的生长且能逆转DDP引发的耐药,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。②1×10-6mol/L TAM与各浓度(1×10-9mol/L～1×10-4mol/L)LTZ联合用药,对该细胞的生长抑制作用及逆转DDP引发的耐药较单用1×10-6mol/L TAM无明显增强,差异无统计学意义(P>0.05);(1×10-5mol/L～1×10-4mol/L)TAM与各浓度(1×10-9 mol/L～1×10-4 mol/L)LTZ联合用药,在LTZ为(1×10-6 mol/L～1×10-4 mol/L)时,两药联合对该细胞的生长抑制作用与单用TAM(1×10-5mol/L～1×10-4mol/L)及组间相比差异有统计学意义(P<0.01);在LTZ为(1×10-5mol/L～1×10-4mol/L)时,两药联合逆转DDP引发的耐药与单用TAM(1×10-5mol/L～1×10-4mol/L)逆转及组间相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:高浓度TAM可以逆转SKOV3/DDP细胞对DDP的耐药性;高浓度LTZ与TAM联合可使TAM逆转SK-OV3/DDP细胞对DDP耐药的作用增强。     

高效液相色谱法测定MTX药物浓度

目的:建立以高效液相法(HPLC)测定MTX化疗后丢弃的棉签与针头中含有的MTX浓度的榆测方法。方法:将标本处理后,在AGILENT 1100高效液相色谱仪上进行测定。色谱柱:C18柱(大连依利特,250mm),流动相:0.1mol/L KH2PO4-K2HPO4,甲醇(87:13),流速:1.0ml/min,在UV 313nm处检测。结果:HPLC法检测MTX在10-7-10-4mol/L范围内呈线性,回归方程为:Y=2.73×107X+35.85(r=0.999)。MTX高、中、低浓度平均回收率分别为69.4％、66.7％、47.2％。送检的棉签所含MTX的量1.2×10-8-2.71×10-5mol/L,针头所含MTX的量2.13×10-8-2.50×10-5mol/L。结论:所建立的高效液相色谱法可以简便准确地测出大剂量MTX化疗抽血后丢弃的棉签与针头中所含MTX的浓度,以防止MTX对护理人员造成的皮肤局部刺激如接触性皮炎及长期直接接触引起的口腔粘膜溃疡、呕吐、白细胞下降等典型化疗药物毒副反应,从而对保护护理人员的健康以及避免环境污染有实际指导作用。     

高甲硫氨酸饮食对动脉损伤的实验研究

目的　观察甲硫氨酸诱发高同型半胱氨酸血症对动脉的损伤作用。方法　新西兰白兔 1 8只 ,随机分为甲硫氨酸组 (M组 )和对照组 (C组 )各 9只。 M组每日先喂含 3%甲硫氨酸饲料 2 0 g后 ,再喂予与 C组相同的饲料 ,不限量。1 6wk末处死留血测甲硫氨酸、同型半胱氨酸和其他生化指标 ,同时留主动脉进行病理学检查。结果　两组血浆蛋白、血糖和血脂无显著性差异 (P>0 .0 5)、M组甲硫氨酸和同型半胱氨酸分别为 2 9.97± 5.34μ mol/L和 1 3.30± 2 .1 9μ mol/L,显著高于 C组的 1 9.78± 1 .97μmol/L和 5.36± 1 .1 9μ mol/L(P<0 .0 1 )。光镜检查显示 M组主动脉内膜剥脱、内弹力膜断裂、内膜下胶原纤维增生且暴露、中膜弹力纤维断裂。结论　甲硫氨酸诱发的同型半胱氨酸血症对动脉具有显著的损伤作用     

1α,25-(OH)_2D_3对体外培养成骨细胞内钙离子浓度的影响

目的研究不同浓度1α,25-(OH)2D3(0、10-11、10-9、10-7 mol/L)对体外培养成骨细胞(osteoblasts,OB)内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响及钙离子通道机制。方法在体外培养SD大鼠OB基础上,添加不同浓度的1α,25-(OH)2D3或/和10-8 mol/L硝苯地平(NIF)作用20 min,流式细胞仪测定[Ca2+]i。结果 10-11 mol/L 1α,25-(OH)2D3组[Ca2+]i显著低于对照组(P<0.05),10-9、10-7 mol/L组[Ca2+]i显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01);单独添加10-8 mol/L NIF组[Ca2+]i与对照组差异不显著(P>0.05);联合添加10-9 mol/L 1α,25-(OH)2D3和10-8 mol/L NIF组[Ca2+]i与对照组差异不显著(P>0.05),但显著低于单独添加10-9 mol/L 1α,25-(OH)2D3组(P<0.05)。结论 1α,25-(OH)2D3引起[Ca2+]i改变的过程涉及L-型钙离子通道。     

精液中硒含量与精子质量和精子DNA 氧化损伤的关系

目的　探讨血清和精液中硒浓度与精子质量和精子DNA氧化损伤的关系。方法　用原子吸收光谱检测血清和精液中硒浓度 ,按WHO规范方法检测精液量、精子数、每次射出精子总数、活力和活动精子百分率及精子畸形率 ,用高压液相色谱 光电检测系统和高压液相色谱 紫外线检测器同时检测人精子DNA 8 羟基脱氧核糖鸟苷 (8 OHdG)和脱氧核糖鸟苷 (dG)水平。结果　已孕组精液硒平均浓度 (0 74μmol/L)明显高于不孕组 (0 5 6 μmol/L) ,而两组间血清硒平均浓度差异无显著性。已孕组精液量、精子数和每次射出精子总数的平均值 (3 91ml、46 4× 10 9/L和 16 8 0× 10 6)明显高于不孕组 (2 79ml、36 5× 10 9/L和 10 2 0× 10 6) ,两组间精子活力、活动精子百分率和精子畸形率的平均值差异无显著性。精液硒浓度与精子数、每次射出精子总数、精子活力、活动精子百分率之间呈明显的正相关 ,而血清硒浓度与精子质量均无明显相关关系。精子DNA 8 OHdG水平与精液硒浓度呈明显负相关 ,而与血清硒浓度无明显相关关系。结论　精液硒浓度与人类精子质量和精子DNA 8 OHdG有关 ,血清硒浓度不影响精子质量和精子DNA氧化损伤程度     

术后早期肠道通透性改变及其与全身炎症反应的关系

目的 :通过观察胃肠道应用谷氨酰胺 (glutamine ,Gln)对腹部手术后病人早期肠道通透性的影响 ,继而探讨其与全身炎症反应的关系。　方法 :2 0例腹部手术病人以前瞻、双盲、随机的方法分为Gln组和对照组 ,每组各 10例。从术后第 1天开始 ,Gln组每天胃肠道应用Gln颗粒剂 30 g ,共 7天 ;对照组每天应用安慰颗粒剂 30 g ,共 7天。于用药前、后分别检测血清Gln浓度和反映肠道通透性与全身炎症反应有关的实验指标 [尿乳果糖 /甘露醇比值(lactulose/mannitol,L/M)、血清二胺氧化酶、内毒素、丙二醛 ]和临床表现 (体温、心率和血白细胞计数 )。　结果 :对照组的血清Gln浓度从用药前 (432 .17± 14 2 .6 8) μmol/L下降至用药后 (2 5 0 .78± 77.10 ) μmol/L(P <0 .0 1) ,Gln组则由用药前 (36 1.17± 16 1.2 5 ) μmol/L升高至用药后 (5 83.2 2± 171.5 2 ) μmol/L(P <0 .0 5 )。对照组和Gln组用药前尿L/M比值分别是 134.0 0± 18.4 8和 14 6 .10± 2 0 .2 1(P >0 .0 5 ) ,用药后对照组尿L/M比值显著升高 ,Gln组则显著降低 ,分别是 194 .83± 4 5 .31和 117.4 7± 2 5 .6 8,组间比较差异非常显著 (P <0 .0 1)。用药 7天后 ,Gln组的血清二胺氧化酶、内毒素、丙二醛均较用药前显著降低。反映全身炎症反应的临床指     

铅诱导人脐静脉内皮细胞损伤及机制研究

目的探讨铅诱导人脐静脉内皮细胞损伤效应及机制。方法用不同浓度的铅染毒人脐静脉内皮细胞,观察细胞形态和活性,通过检测细胞上清液丙二醛(MDA)、非对称性二甲基精氨酸(ADMA)、一氧化氮(NO)的含量和一氧化氮合酶(NOS)的活性等指标,观察铅对人脐静脉内皮细胞损伤的量-效关系(终浓度分别为1、2、4、8mg/L的铅处理细胞24h)和时-效关系(终浓度为4mg/L的铅分别于处理0、3、6、12、24、48h后观察检测指标)。实验分为正常对照组(加入与处理组等体积的D-Hank’s液,铅浓度为0mg/L)、铅处理组(加终浓度分别为1、2、4、8mg/L的铅)、铅VitC组(铅终浓度为4mg/L,VitC终浓度为100mg/L)和阳性对照组(加终浓度为500μg/L的过氧化氢)。结果 2～8mg/L的铅能显著改变细胞形态、降低细胞活性;能显著性诱导内皮细胞MDA升高。2～8mg/L的铅还能显著性诱导内皮细胞NO含量降低,具有显著的时间依赖性,各处理组间两两比较差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。4mg/L铅处理时细胞ADMA含量最高,且分别在处理后24h到达最高峰。结论 2～8mg/L铅能显著诱导人脐静脉内皮细胞损伤;ADMA在铅诱导人脐静脉内皮细胞损伤中有着重要作用。     

辛伐他汀对大鼠心肌细胞肥大及PTEN表达的影响

目的观察抑癌基因-第十号染色体缺失的张力蛋白同源区(PTEN)在辛伐他汀调控心肌细胞肥大中的信号转导作用。方法以培养的新生Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌细胞为实验模型,应用图像分析系统测定心肌细胞表面积,[3H]-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白合成速率,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心钠素(ANP)mRNA表达,RT-PCR和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PTEN的mRNA和蛋白表达水平。结果⑴15%血清组干预24h后心肌细胞表面积[(1611.16±160.75)μm2]显著高于无血清对照组[(538.04±118.60)μm2](P<0.01);给予辛伐他汀和血清共同干预后,随着辛伐他汀浓度的增加,心肌细胞表面积呈递减趋势,其中10-5和10-6mol/L组分别为(799.84±167.70)μm2和(1076.88±199.28)μm2,均显著低于血清组(P<0.01)。⑵在15%血清刺激后,心肌细胞[3H]-亮氨酸掺入率为(2360±106)cpm/well,明显高于无血清对照组[(1305±92)cpm/well](P<0.01);10-5和10-6mol/L辛伐他汀组[3H]-亮氨酸掺入率分别为(1707±101)cpm/well和(1962±125)cpm/well,均较血清组明显降低(P<0.01)。⑶随着辛伐他汀浓度的增加,心肌细胞ANP的mRNA表达水平逐渐降低,其中10-5和10-6mol/L辛伐他汀组分别为0.29±0.03和0.40±0.03,与单纯血清干预组0.60±0.03比较明显降低(P<0.01)。⑷心肌细胞PTEN的mRNA和蛋白表达水平均随辛伐他汀浓度的增加而呈递增趋势,其中10-7、10-6、10-5mol/L辛伐他汀组PTEN mRNA表达水平为0.38±0.03、0.83±0.04和0.85±0.05,明显高于血清干预组(0.29±0.04)(P<0.05,P<0.01)。上述3组PTEN蛋白表达水平分别为39.25±3.41、46.35±1.78和47.22±2.39,也较血清组(32.21±4.06)显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论辛伐他汀能够抑制血清诱导的心肌细胞肥大,升高PTEN表达水平可能是其分子生物学机制之一。     

2型糖尿病在急性应激反应时血尿酸与C反应蛋白的相关性研究

目的探讨血尿酸与C反应蛋白(c-reactive protein,CRP)在2型糖尿病急性应激反应时的变化及其相互关系。方法对86例2型糖尿病人(男49例,女37例)合并急性应激病变时的临床资料进行回归分析。结果糖尿病无应激反应组(G3组)CRP为(1.25±0.42)m g/L,而在合并应激反应(G1组)及应激3～5d后(G2组),CRP分别为(3.69±1.92)m g/L和(3.72±1.85)mg/L,两者与G3组比较,差别均有统计学意义(P<0.01),而两者之间比较,无统计学意义。G3组血尿酸水平为(380.78±120.60)μm ol/L,G1组为(385.62±110.70)μmol/L,两组比较无统计学意义。G2组血尿酸水平为(430.00±112.50)μmol/L,与G 1、G 3组比较,差别均有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关分析,G 3组和G 2组CR P与血尿酸水平呈正相关(r=0.589,P<0.05;r=0.526,P<0.05),G1组未观察到两者有相关性。结论CRP和血尿酸是2型糖尿病急性应激反应的危险性敏感指标,而以CRP更为敏感。     

1α,25-二羟维生素D_3对大鼠成骨细胞骨架、间隙连接通讯及[Ca~(2+)]_i的影响

目的研究不同浓度1α,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2·D3]0、10-9、10-8、10-7mol/L对体外培养3～4d龄SD大鼠成骨细胞(OB)骨架F-actin、间隙连接通讯(GJIC)及细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响。方法1,25-(OH)2·D3作用20min、24h后测定[Ca2+]i;作用24、48h后观察F-actin及GJIC。结果20min时,不同浓度1,25-(OH)2·D3组[Ca2+]i均显著高于对照组;24h时10-9mol/L组[Ca2+]i则显著低于对照组,其余各组间差异不显著。此时10-8、10-7mol/L组大部分细胞变得扁平,F-actin排列较对照组有序,形成应力纤维;48h时,对照组及10-9mol/L组F-actin表达减少,10-9mol/L组GJIC非常显著地弱于对照组,而10-8、10-7mol/L组大部分细胞F-actin表达完好,GJIC均非常显著地强于其余两组。结论高浓度1,25-(OH)2·D3能够维持OB形态,增强OB间通讯,而低浓度1,25-(OH)2·D3抑制细胞间通讯。     

超声引导下甲氨喋呤给药辅助宫腔镜治疗剖宫产瘢痕妊娠的临床效果分析

目的探讨超声引导下甲氨喋呤(methotrexate,MTX)囊内注射结合宫腔镜手术治疗剖宫产瘢痕妊娠的临床效果。方法选取2016年9月至2018年10月昆山市第四人民医院收治的80例剖宫产瘢痕妊娠患者,采用随机数字表法分为研究组和对照组,各40例。研究组采用MTX囊内注射结合宫腔镜手术治疗,对照组采用MTX肌肉注射结合宫腔镜手术治疗。观察两组的MTX使用剂量、手术时间、术中出血量、β-人绒毛膜促性腺激素(β-human chorionic gonadotropin,β-h CG)转阴时间、住院时间、月经恢复时间、月经周期、术前及术后3月的卵巢内分泌功能。结果研究组患者的MTX使用剂量、手术时间、术中出血量、β-h CG转阴时间、住院时间、月经恢复时间均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组月经周期时间比较差异无统计学意义(P>0.05);术前及术后3个月,研究组和对照组孕酮、促卵泡激素、促黄体生成素、雌二醇水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);研究组患者不良反应发生率(7.50%)低于对照组(27.50%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论超声引导下MTX囊内注射结合宫腔镜手术治疗剖宫产瘢痕妊娠的临床效果优于MTX肌肉注射结合宫腔镜手术。     

反复自然流产血清及绒毛组织中NO含量NOS活性和血清中VEGF含量

目的:观察反复自然流产组(RSA)与正常早孕者血清及绒毛组织中NO含量、NOS活性和血清中VEGF含量。方法:采用比色法检测33例RSA患者及30例正常对照组血清和绒毛组织中NO含量、NOS活性,采用ELISA方法检测血清VEGF含量。结果:(1)血清中NO含量RSA组较对照组高,二者有显著差异(P<0.05);绒毛组织中NO含量RSA组较对照组高,二者有显著差异(P<0.01)。(2)血清中NOS活性RSA组较对照组高,二者有显著差异(P<0.01);绒毛组织中NOS活性RSA组较对照组高,二者有显著差异(P<0.01)。(3)血清VEGF含量RSA组较对照组高,二者有显著差异(P<0.001)。结论:RSA组血清和绒毛组织中NO含量、NOS活性及VEGF含量均较高,可能是RSA发病的原因之一。     

习惯性流产者脆性位点检查的意义

目的:探讨应用染色体技术诊断习惯性流产病因的意义。方法:应用常规外周血淋巴细胞染色体标本制备,G显带,镜下核型分析和染色体脆性位点表达研究。结果:318例受检者中检出异常核型40例,检出率为12.58%。其中罗伯逊易位携带者9例,平衡易位携带者31例。实验组染色体脆性位点的频率为15.28%,对照组为4.69%,两组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论:染色体异常是导致习惯性流产发生的重要原因之一,习惯性流产与染色体脆性位点频率增高有关。     

乙酰肝素酶在人类自然流产过程中的作用研究

目的:研究乙酰肝素酶(HPSE)与人类自然流产的关系以及在妊娠中的作用。方法:采用反转录PCR和Western Blot检测正常妊娠者和早期自然流产者流产绒毛组织中HPSE mRNA和蛋白的表达。结果:反转录PCR实验结果显示,正常妊娠组的HPSE mRNA阳性表达比例(12/15)高于自然流产组(9/20),(χ2=4.375,P=0.036);Western Blot正常妊娠组的HPSE蛋白的阳性表达比例(11/15)高于自然流产组(7/20),(χ2=5.042,P=0.025)。结论:HPSE参与正常妊娠过程,自然流产的发生可能与HPSE的低表达有关。     

100例早孕胚胎停育绒毛染色体核型分析

目的:分析早孕胚胎停育与绒毛染色体异常的关系。方法:选择2010年～2011年3月安徽医科大学100例胚胎停育患者,对其进行绒毛染色体核型分析。结果:100例胚胎停育患者,孕周最长15周,最短6周。绒毛培养失败5例,培养成功率95.0%;检出异常核型34例,检出率35.8%,其中单纯染色体数目异常占55.9%,异常类型有:染色体数目异常23例,三倍体4例,四倍体1例,结构异常2例,嵌合体4例。95例早孕胚胎停育中,女性胚胎51例,占53.7%;男性胚胎44例,占46.3%。结论:胚胎染色体异常是胚胎停育的重要原因。     

早孕期经腹绒毛穿刺104例临床分析

目的探讨经腹绒毛穿刺(TA-CVS)在产前诊断中的应用价值及安全性。方法对104例孕11～14周需行产前诊断的孕妇施行超声引导下经腹绒毛活检,抽取绒毛并行染色体及地贫基因分析。结果取材成功率97.1%,自然流产0例,宫内感染0例,未出现肢端缺损。共发现染色体异常核型10例,包括染色体结构异常1例,常染色体三体3例,性染色体异常3例,染色体多态性2例,嵌合体1例。发现地中海贫血46例,其中重型地中海贫血10例。结论妊娠11周后经腹绒毛活检是一项安全可行的介入性产前诊断方法,可用于早孕期产前诊断。     

112例早期绒毛细胞染色体检查及其结果分析

目的:探讨绒毛细胞染色体制备的最佳方法及其临床意义。方法:112例早期绒毛细胞分别采用直接法或培养法制备染色体,并进行染色体核型分析。结果:在112例绒毛细胞染色体核型中,绒毛染色体异常38例(33.9%);常见异常核型为染色体数目异常26例,占异常核型68.4%,其中三体16例,占异常核型42.1%,单体和三倍体各5例,各占异常核型13.2%;嵌合体2例,占异常核型5.3%;结构异常10例,占异常核型26.3%。结论:先兆流产、自然流产与染色体异常的发生有直接关系,染色体检查对查找自然流产的原因和选择合理的治疗有重要的临床意义。绒毛细胞染色体检查培养法优于直接制备法,可在临床中广泛推广。     

自然流产胚胎染色体数目异常的临床研究

目的:探讨染色体数目异常与自然流产的关系及其影响因素。方法:采用荧光原位杂交技术对100例早期妊娠自然流产绒毛进行染色体数目检测,分析其与自然流产的关系。结果:100例绒毛标本中,染色体数目异常42例,占42.00%;嵌合体16例,占16.00%。最常见的染色体异常是三倍体,占35.71%;其次为45,X和16三体,分别占16.67%和14.29%。高龄组(≥35岁)和非高龄组(<35岁)异常染色体检出率分别为45.46%(10/22)和41.03%(32/78),差异无统计学意义(P>0.05);有自然流产史和无自然流产史者异常染色体检出率分别为42.55%(20/47)和41.51%(22/53),差异无统计学意义(P>0.05);妊娠≤10周和妊娠>10周者染色体异常率分别为45.00%(27/60)和37.50%(15/40),差异无统计学意义(P>0.05)。结论:染色体异常是早期自然流产最主要的原因,无论孕母年龄大小、既往有无自然流产史及无论孕周大小,本次发生自然流产者均有可能与染色体异常有关。临床医师应重视染色体的检查,以便为再次妊娠做好遗传咨询指导。     

Amniocentesis or chorionic villus sampling for prenatal genetic testing: a decision analysis

We used decision analysis to examine the strategies of amniocentesis, chorionic villus sampling, and no prenatal testing for a pregnant woman who would be 35 years of age at the expected date of delivery. Probabilities were obtained from the obstetric and genetic literature, and utilities from previously published standard reference gambles and from responses of obstetric residents and students recorded on a linear rating scale. The expected utility of amniocentesis exceeded that of chorionic villus sampling by 0.1 utility units, and of no prenatal testing by 0.12 utility units. The decision was insensitive to clinically plausible values for the probabilities of spontaneous abortion after amniocentesis and chorionic villus sampling, the probabilities of abnormal and indeterminate chorionic villus sampling results, the probability of an abnormal amniocentesis result after an indeterminate chorionic villus sampling, the sensitivities and specificities of amniocentesis and chorionic villus sampling, and the probabilities of significant maternal morbidity after first- and second-trimester therapeutic abortion. Chorionic villus sampling was preferred to amniocentesis when the utility of a first-trimester therapeutic abortion exceeded that of a second-trimester abortion by 23.2 utility units, or when the anxiety "cost" of awaiting second-trimester amniocentesis results exceeded 0.1 utility unit. We conclude that over a range of assumptions concerning the probabilities involved in the prenatal testing decision, amniocentesis was preferred to chorionic villus sampling. However, for a decision maker for whom a second-trimester therapeutic abortion would be significantly less acceptable than a first-trimester procedure, or for whom the anxiety of awaiting second-trimester chromosomal diagnosis might be an important consideration, chorionic villus sampling could become the procedure of choice.     

150例绒毛产前诊断及随访的研究

目的探讨用绒毛进行早期产前诊断的可行性、准确性及安全性。方法经宫颈盲法抽吸绒毛,采用绒毛直接法或短期培养法制备染色体、G显带。结果150例中发现6例异常核型。35例经羊水、人流绒毛或脐带血染色体复查核型与产前诊断一致。65例出生胎儿随访发育正常。结论绒毛产前诊断是安全可靠的。