磷脂酰肌醇蛋白聚糖3促进肝细胞癌侵袭和转移的初步研究

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）是否能促进肝细胞癌（HCC）侵袭、转移。 方法通过siRNA靶向沉默GPC3在人肝癌细胞Hep3B、HepG2中的表达,慢病毒介导GPC3在人肝癌细胞SMMC-7721和SK-HEP-1中过表达,用于体外细胞功能试验和建立体内裸鼠原位种植瘤模型。Western blotting、qPCR检测GPC3、上皮间质转化（EMT）相关分子N-Cadherin、E-Cadherin、SNAIL、Vimentin和基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-3、MMP-7的表达。 结果过表达GPC3的Hep3B、HepG2细胞株的迁移和侵袭能力显著大于GPC3低表达的SMMC-7721、SK-HEP-1细胞株（P<0.05）;小鼠肝脏原位癌模型显示,过表达GPC3的HCC肝脏转移发生率明显高于GPC3低表达者（P<0.05）。过表达GPC3可以降低E-Cadherin,上调N-Cadherin的表达;干扰GPC3表达后,E-Cadherin表达上调,N-Cadherin表达下调。GPC3过表达可显著上调MMP-2、MMP-3、MMP-7的表达（P<0.05）。 结论GPC3可通过诱导HCC发生EMT和分泌MMPs,促进HCC细胞迁移和侵袭。     

革兰阳性耐药球菌感染较敏感菌株感染预后差

革兰阳性球菌（GPC）越来越成为重要的病原菌,70％以上的菌血症、25％的肺炎、75％的心血管感染由GPC引起,而且耐药菌株无所不在。在弗吉尼亚大学医院的GPC外科感染中,56％由耐药菌株引起,其中59％的金葡菌是甲氧西林耐药株（MRSA）,50％的肠球菌对万古霉素（VRE）或庆大霉素（GRE）耐药。GPC耐药株感染和敏感株感染两者预后有何差别及耐药GPC定植对感染发生有何影响,尚无定论。作者前瞻性收集1996年12月1日～1998年12月1日两年间外科病房及外科ICU共441例GPC感染病例,分为耐药菌组（248例）和敏感菌组（193例）,选取…     

肝癌患者血清中聚糖蛋白3检测的临床意义

目的 探讨血清聚糖蛋白3(GPC3)在肝癌研究中的临床应用价值.方法 应用生物素-链霉亲和素系统亲和力高的特点建立双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测681份不同人群血清中的GPC3.结果 (1)肝硬化组(42.9%)、肝癌组(41.4%)、肝癌复发组(61.1%)患者血清GPC3阳性率与正常人组(4.1%)及乙肝组(8.6%)差异有统计学意义(P<0.01);肝细胞型肝癌组(HCC)血清GPC3阳性率(45.9%)高于胆管细胞型肝癌组(ICC)(20.9%)(P<0.05);HCC组中直径≤3 cm的小肝癌及AFP≤20μg/L的肝癌血清中GPC3阳性率分别为36.0%、41.9%;AFP≤<20μgs/L且直径≤3 cm的小肝癌患者血清GPC3阳性率为44.4%(4/9).(2)联合血清AFP及GPC3,可将单独应用AFP时提示肝癌复发从77.7%提高到88.9%.(3)结肠癌肝转移病例血清中GPC3的阳性率为28.6%.(4)手术切除术前及术后2～16 d内HCC患者血清中GPC3的变化多样.(5)24例HCC组织GPC3阳性20例,其中血清GPC3阳性率为50%.结论 血清中GPC3的测定作为一种新的肿瘤标志物在肝癌的诊断特别是早期诊断、提示复发、转移及评价手术治疗效果中可能均有一定的意义.     

GPC3 mRNA在甲胎蛋白阴性肝癌中的表达及其意义

目的 探讨GPC3基因在甲胎蛋白阴性肝癌中的变化及其临床意义。方法 应用印迹法（Northern)杂交检测48例肝癌组织及其相应的癌旁肝细胞内GPC3mRNA表达的变化，其中肝细胞癌41例、肝内胆管细胞癌4例、大肠癌肝转移2例和肝局灶性结节增生1例，并结合各组织标本的病理学特点进行分析。结果 41例甲胎蛋白阴性肝细胞癌中，有30例肝癌组织可测出GPC3mRNA的表达（73.17%)，而癌旁组织中均不表达。直径＞5cm的大肝癌GPC3的表达率显著高于直径≤5cm的小肝癌，低分化肝癌GPC3 的表达率显著高于高分化的肝癌。GPC3的表达与患者的年龄、性别、包膜完整性、癌栓形成、肝内转移及乙肝病毒感染状况均无明显相关性。GPC3mRNA在非肝细胞肝癌组织内均不表达。结论 GPC3mRNA在AFP阴性肝癌中特异性表达，可作为原发性肝癌的一个新的基因标志。GPC3mRNA在肝癌的发生发展中有重要作用。     

肝癌组织、外周血细胞磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 mRNA表达的意义

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)mRNA表达对肝细胞肝癌(HCC)及其血液微转移的诊断价值。方法参照甲胎蛋白(AFP)mRNA,半定量与巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测41例HCC、41例癌旁组织、52例非瘤肝组织(41例远离癌灶组织与11例正常肝组织)及67例外周血的GPC3表达。结果半定量PCR显示组织与外周血细胞全部存在GPC3 mRNA表达,HCC、癌旁、非瘤肝组织的表达量分别为78.9±35.5、30.6±21.6、23.8±15.5;而AFP mRNA的表达量依次为61.2±32.6、31.5±23.6、21.2±15.9。各基因在HCC与其他组织中的表达量差异具有统计学意义(P<0.01),以各基因在非瘤肝的相对表达量上限(x-+1.96s)为界,HCC中GPC3 mRNA和AFP mRNA的高表达分别占80.5%与63.4%;至少一个基因高表达HCC达总数的92.7%,与AFPmRNA单独检测差异有统计学意义(P<0.01)。临床病理特征分析发现AFP mRNA与HCC分级及血清AFP浓度有关,GPC3 mRNA表达与HCC分级及侵袭性有关。67例外周血GPC3 mRNA的表达量为15.9±9.0,各类组织中GPC3 mRNA表达均强于相应的外周血表达(P<0.01)。外周血GPC3mRNA表达量在HCC组、非HCC组分别为16.1±8.3、15.6±10.2,组间差异无统计学意义;在HCC转移组、HCC无转移组的表达量各为16.0±9.0、16.3±7.7,组间差异无统计学意义。巢式PCR显示,AFP mRNA表达比率在HCC组与非HCC组各为56.1%、23.1%,组间差异有统计学意义(P=0.011);HCC转移组与无明显转移组各为80.9%、30.0%,组间差异有统计学意义(P=0.002)。结论GPC3 mRNA是潜在的HCC组织诊断指标,与AFP mRNA有明显的互补作用,两者联合检测可提高HCC的阳性检出率;外周血存在GPC3 mRNA的广泛表达,但其与HCC的转移复发无关,不能用于HCC微转移的检测。     

GPC5与前列腺癌发生及预后的关系

目的 探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(GPC5)与前列腺癌发生及预后的关系。方法 选取2013年2月至2015年5月在本院治疗的前列腺癌患者104例(病例组),同时选取良性前列腺增生患者89例作为对照组,采用免疫组化染色法检测GPC5蛋白表达,采用荧光定量PCR检测GPC5 mRNA表达。同时选取高侵袭前列腺癌PC3系细胞、低侵袭LNCaP系细胞以及正常前列腺上皮细胞RWPE-1系细胞,采用western blot检测GPC5蛋白表达。结果 观察组GPC5 mRNA相对表达为(0.64±0.15)和GPC5蛋白阳性表达率为34.62%,明显低于对照组(P<0.05);术前PSA≥4 ng/mL、肿瘤分期为T3、Gleason评分≥8分患者GPC5蛋白阳性表达率分别为20.34%、19.44%和21.05%,明显低于术前PSA＜4 ng/mL、肿瘤分期为T2和Gleason评分＜8分患者(P<0.05);GPC5蛋白阳性表达患者中位总生存时间为39.04个月,明显高于GPC5蛋白阴性表达患者(P<0.05);PC3细胞GPC5蛋白表达为(0.083±0.024),明显低于LNcaP和RWPE-1细胞(P<0.05);LNcaP细胞GPC5蛋白表达为(0.301±0.083),明显低于RWPE-1细胞(P<0.05)。结论 前列腺癌组织GPC5 蛋白及mRNA表达下调,与临床病理特征及预后有关,值得进一步研究。     

重组质粒pEGFP-N2-GPC3的构建及GPC3对生长因子FGF2、IGF2促进细胞增殖的影响

目的 构建GPC3基因真核表达重组质粒,观察GPC3对生长因子FGF2、IGF2促进肝癌细胞增殖的影响.方法 自行设计引物从GPC3原核扩增重组质粒pDNR-LIB.GPC3中获得编码GPC3的基因片段.应用基因重组技术,将GPC3基因片段克隆到真核表达载体pEGFP-N2中,然后经脂质体介导转染SK-Hep-1,并通过C418(600 mg/L)筛选出抗性克隆,应用荧光显微镜及逆转录-聚合酶链反应(RT-PER)法对转染细胞内pEGFP-GPC3的表达进行鉴定,采用噻唑蓝(MTT)比色法研究GPC3对生长因子FGF2、IGF2促细胞增殖效应的影响.结果 限制性内切酶酶切分析、重组质粒测序鉴定表明为正确重组子,荧光显微镜下可见转染的SK-Hep-1胞膜区发出强绿色荧光,RT-PCR表明GPC3在SK-Hep-1中成功表达,生长因子实验中,GPC3明显抑制FGF2促细胞增殖效应,与空质粒转染组比较差异有统计学意义(P<0.05),IGF2实验组与空质粒转染组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 测序表明,编码的氨基酸序列与人GPC3完全一致;构建完成真核表达重组质粒pEGFP-N2-GPC3;GPC3基因在SK-Hep-1中成功表达;GPC3在FGF2信号通路中可能发挥负性调控因子的作用.     

GPC3/MXR7基因在肾细胞癌及癌旁肾组织中的表达

目的 探讨肾癌、癌旁肾组织中多种相关基因的表达水平及差异,以及与临床分期的关系.方法 应用实时荧光定量PCR方法 检测GPC3/MXR7基因在肾细胞癌组织及癌旁肾组织中的表达,并比较不同临床阶段其表达的差异.结果 GPC3/MXR7在肾癌组织中平均表达(GPC3/MXR7和18 S的比值)是(0.07±0.14)×10-3,而癌旁肾组织中是(0.16±0.14)×10-3,差异有统计学意义(P＜0.05),表明GPC3/MXR7基因在肾癌组织中平均表达均明显低于在癌旁肾组织中的平均表达.GPC3/MXR7在癌旁与肾癌的表达比值在临床分期(I+Ⅱ)期中平均为32.05±48.87,而在(Ⅲ+Ⅳ)期中为22.95±49.58,差异无统计学意义(P＞0.05),表明GPC3/MXR7基因在癌旁与肾癌组织中的表达降低或增高均与临床分期无关.结论 肾癌的发生、发展可能与GPC3/MXR7基因有关,是多种基因共同作用的结果 .     

沉默NANOG基因表达对侧群表型肝癌干细胞化疗耐药的影响

目的观察沉默NANOG基因对侧群表型肝癌干细胞化疗耐药的影响,初步探讨提高肝癌化疗效果的新方法。 方法基于侧群（SP）细胞分选法,采用流式细胞术从肝癌细胞Hep3B中分选SP细胞和非侧群（NSP）细胞,通过特异性靶向NANOG基因的siRNA沉默SP细胞中NANOG基因表达,MTT法检测SP细胞对化疗药物阿霉素（DOX）的敏感性,实时荧光定量PCR（real-time PCR）和免疫印迹（Western blotting）检测NANOG和耐药相关基因ABCB1的表达。 结果（1）肝癌细胞Hep3B中分选的SP细胞比例为（13.3±1.8）%。（2）MTT法结果显示DOX处理后SP细胞存活率为（65.3±5.4）%,NSP细胞存活率为（41.2±4.7）%;SP细胞对DOX的耐药性高于NSP细胞（P<0.05）。（3）NANOG和ABCB1 mRNA在SP细胞中的表达水平分别是NSP细胞的4.5、4.0倍;NANOG和ABCB1蛋白在SP细胞中表达水平分别是NSP细胞的4.2、3.6倍,差异均有统计学意义（P<0.05）。（4）RNAi沉默NANOG表达后,siNANOG组SP细胞NANOG、ABCB1的mRNA和蛋白表达水平均较Mock组和siNC组明显下降（P<0.05）,SP细胞对阿霉素DOX的耐药性显著降低（P<0.05）。 结论NANOG基因在维持SP表型肝癌干细胞耐药性起重要作用,沉默NANOG表达后SP细胞耐药性受到抑制,可能与ABCB1表达下调有关。     

PSTAT3与VEGF在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨PSTAT3和VEGF蛋白在胰腺癌组织中的表达情况及其与胰腺癌临床病理特征、胰腺癌组织中血管新生的关系.方法用免疫组织化学检测了41例手术切除的胰腺癌组织和10例正常胰腺组织中PSTAT3、VEGF的蛋白表达和微血管密度.结果在41例胰腺癌标本中有29（70.7%）例PSTAT3和31（75.6%）例VEGF蛋白的表达阳性,明显高于正常胰腺组织.PSTAT3和VEGF蛋白的阳性表达呈正相关（r=0.758,P＜0.01）.PSTAT3在临床分期较晚和有淋巴结转移的胰腺癌中呈高表达（P=0.003,0.033）,VEGF的表达与临床分期有关（P=0.025）.41例胰腺癌组织中的微血管密度MVD与PSTAT3、VEGF蛋白的阳性表达有关（P=0.003,0.001）.结论胰腺癌组织中存在PSTAT3和VEGF的过表达,PSTAT3与临床病理分期和淋巴结转移有关,PSTAT3可能通过上调VEGF的表达,促进胰腺癌组织中新生血管的形成,可能在胰腺癌的发生发展中起到重要作用.     

肝脏炎性肌纤维母细胞瘤

目的探讨肝脏炎性肌纤维母细胞瘤的临床病理特征、诊治和预后。方法总结了一例肝脏炎性肌纤维母细胞瘤病人的临床资料,并复习了国内外的文献,分析和归纳其临床表现、诊断和治疗。结果肝脏炎性肌纤维母细胞瘤的临床病理特征和预后如下:①常见于儿童和青少年;②临床症状常表现为贫血、发热、上腹部隐胀痛、体重下降等;③物理检查可见肝脏包块;④病理特征:该瘤由分化的肌纤维母细胞性梭形细胞组成,常伴大量浆细胞和(或)淋巴细胞浸润;⑤外科切除或肝移植后,预后佳,无复发。结论肝脏炎性肌纤维母细胞瘤有其特征性的临床表现,经手术切除后可治愈。     

肝脏炎性肌纤维母细胞瘤

目的 探讨肝脏炎性肌纤维母细胞瘤的临床病理特征、诊治和预后。方法总结了一例肝脏炎性肌纤维母细胞瘤病人的临床资料，并复习了国内外的文献，分析和归纳其临床表现、诊断和治疗。结果肝脏炎性肌纤维母细胞瘤的临床病理特征和预后如下：①常见于儿童和青少年；②临床症状常表现为贫血、发热、上腹部隐胀痛、体重下降等；③物理检查可见肝脏包块；①病理特征：该瘤由分化的肌纤维母细胞性俊形细胞组成．常伴大量浆细胞和（或）淋巴细胞浸润；⑤外科切除或肝移植后，预后佳，尤复发。结论肝脏炎性肌纤维母细胞瘤有其特征性的临床表现，经手术切除后可治愈。     

Pancoast (Superior Sulcus) Tumors

Primary carcinomas arising in the apex of the lung (Pancoast tumors) have attracted attention because of the characteristic syndrome that is produced by local extension into the chest wall and the brachial plexus. This article reviews the history of the treatment of this disease, the natural history of untreated patients, and the diagnosis of Pancoast tumors. The published data on results, prognostic factors, and technical aspects of treatment with combined irradiation and operation are examined, as well as those pertaining to treatment with irradiation alone.     

Suprasellar yolk-sac tumor in two sisters

The familial occurrence of intracranial tumors is rare except in patients with phacomatoses. The occurrence of suprasellar yolk-sac tumors in two sisters without phacomatoses is reported. The pertinent literature is reviewed, and the possible role of heredity in the pathogenesis of these tumors is discussed briefly.     

Malignant hemangiopericytoma of the liver: Report of a case

A 30 year old female was admitted with right upper abdominal pain and fever. Ultrasonography and computed tomography revealed a large cystic mass in the right lobe of the liver, and aspiration bacteriology was negative. A right hepatic lobectomy was performed for a suspected cystadenocarcinoma, however, the tumor was histologically diagnosed as a hemangiopericytoma with prominent venous invasion. The patient died within a short time of multiple pulmonary metastases. Primary hepatic hemangiopericytoma is extremely rare, and according to our research, this is only the 4th case reported in the literature.     

Papillary glioneuronal tumor: case report and review of literature

Papillary glioneuronal tumor (PGNT) is a recently described central nervous system neoplasm that mostly occurs in the supratentorial system, adjacent to the lateral ventricles.In 2007, WHO classified PGNT as grade I neuronal-glial tumor because of the characteristic papillary architecture and bipartite (astrocytic and neuronal/neurocytic) cell population. As a newly established entity of mixed glioneuronal tumor family, PGNT attracted extensive attention recently.In our report we discuss the clinical, neuroradiological and surgical features. The final result is compared with literature data.     

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目的　探讨胃肠道间质瘤的临床表现、诊断及治疗。方法　回顾性分析上海建工医院及复旦大学华山医院外科 2000年 9月至 2003年 12月间收治 35例胃肠道间质瘤病人的临床及病理资料。结果　35例均行手术治疗。肿瘤根治 4例,近端或远端胃大部切除、病变肠段切除、肿块切除或扩大切除 26例;因肿瘤广泛粘连,无法完整切除 5例。病理:CD117阳性 29例(82 .9% ),CD34阳性 31例 (88 .6% )。结论　胃肠道间质瘤在中老年人中好发,以便血、腹痛和腹部不适、腹部肿块表现为主。肿瘤的大小是胃肠道间质瘤良、恶性的重要临床指标。病理形态学检查是确诊间质瘤的唯一方法。完整的局部手术切除是最有效的治疗手段。对无法切除或有肿瘤残余及术后复发的病人可应用甲磺酸伊马替尼(格列卫)进行治疗。