高速逆流色谱分离纯化钩吻中钩吻素己和1-甲氧基钩吻碱

目的 建立高速逆流色谱技术分离纯化钩吻素己和1-甲氧基钩吻碱的方法。方法 采用高速逆流色谱分离技术分离纯化钩吻生物碱单体,以氯仿-甲醇-0.1 mol/L HCl(4∶4∶2)为溶剂体系;高效液相色谱技术分析所提产物的质量分数;核磁共振谱、质谱分析确证单体的化学结构。结果 从300 mg钩吻总碱中经过一次高速逆流色谱技术分离纯化获得19.4 mg钩吻素己和21.2 mg 1-甲氧基钩吻碱,质量分数分别为95.4％、98.6％;经过电喷雾质谱及核磁共振的结构鉴定分析,证实分离得到的两种生物碱分别是钩吻素己和1-甲氧基钩吻碱。结论 高速逆流色谱技术可高效分离纯化钩吻素己和1-甲氧基钩吻碱,为钩吻生物碱的研发提供了制备技术。     

均匀设计和正交设计法优选吴茱萸提取工艺的研究

目的对吴茱萸醇提工艺进行考察,优选最佳提取条件,并对均匀设计法和正交设计法进行比较.方法用均匀设计法和正交设计法,以吴茱萸碱与吴茱萸次碱的提出率为指标,对乙醇浓度、溶媒用量、浸泡时间等影响因素进行考察.结果确定提取工艺为用70 %乙醇分别以8倍、7倍量提取2 h、1.5 h.结论本工艺合理,提取率高,适于工业生产;均匀设计在本提取工艺筛选试验中具有很好的可行性.     

闽产钩吻根茎叶中钩吻碱甲和钩吻素子及葫蔓藤碱甲的含量测定

钩吻[Gelsemium elegans(Gardn.et Champ.)Benth.]为马钱科葫蔓藤属植物,又名断肠草、猪人参等。钩吻始载于《神农本草经》,性温味辛、苦,有大毒,全草可入药,主要分布于福建、浙江等地,是我国传统的药用植物,也是世界著名的剧毒药物。我国民间以其毒性大,一直以外用为主,功能祛风散瘀,消肿止痛,攻毒杀虫。近年来的药理研究表明,钩吻还具有镇痛、镇静、抗炎、散瞳、抗肿瘤、减慢心率、抑制心脏收缩、升压、抑制平滑     

钩吻总生物碱中钩吻素子的提取与分离

目的 研究钩吻中总生物碱的提取、总量测定方法及其中主要成分钩吻素子的分离、鉴定方法。方法 采用加热回流提取与氯仿萃取相结合的方法提取总生物碱；采用碱性硅胶柱层析、梯度洗脱法分离钩吻素子并用薄层层析法和紫外分光光度法定性鉴别。结果 从钩吻中分离得到了无色棱柱状钩吻素子晶体。结论 本实验所采用的提取钩吻总生物碱及分离钩吻素子的方法行之有效。     

正交设计优选黄连中盐酸小檗碱的提取工艺

目的:观察正交设计对黄连中盐酸小檗碱提取工艺的优化作用。方法:采用正交设计安排试验,以总生物碱量、小檗碱量、干浸膏得率为指标,考察醇浓度、醇用量、回流时间、提取次数对其影响。结果:最佳工艺条件为药材加6倍量70%乙醇,提取3次,每次回流1小时,该结果在验证试验中得到验证。结论:正交设计优化的提取工艺可充分提取黄连中盐酸小檗碱及生物碱类化合物。     

均匀设计在黄芪提取工艺中的应用

本文以黄芪甲甙为指标 ,采用均匀设计方法 ,对益气颗粒中黄芪的提取工艺进行了探讨。结果 :以煎煮 3次 ,每次加入 9倍水 ,煎煮 80 m in为最佳提取工艺     

正交设计筛选钩藤总碱骨架缓释片的制备工艺研究

目的筛选钩藤总碱骨架缓释片的最佳制备工艺条件。方法应用正交设计法考察不同因素水平对钩藤总碱骨架缓释片释放速率的影响。结果乙基纤维素（EC）的黏度对本制剂的释药影响不大,EC用量增加,释药速率减慢,致孔剂用量增加,释药速率加快。结论钩藤总碱骨架缓释片的释药过程符合Higuchi方程,影响药物释放的主要因素是EC的用量和致孔剂的用量。     

钩吻水溶性总碱对大白鼠血中胆碱酯酶的作用

本实验初步证明钩吻水溶性总碱具有抑制胆碱酯酶活性的作用。     

钩吻总碱对肺腺癌细胞增殖和凋亡作用的研究

目的 以人肺腺癌细胞（A549、SPCA1）为研究对象,通过在培养液中加入不同浓度的钩吻总碱（TAG）研究其抗肿瘤作用。方法 采用加热回流、萃取等方法提取TAG,利用薄层色谱法鉴定TAG的提取,通过Incucyte S3活细胞动态分析系统拟合不同浓度的TAG作用A549、SPCA1细胞的细胞融合度并观察A549、SPCA1细胞的形态,采用CCK-8法、集落形成实验检测细胞增殖,Hoechst33258染色、Rhodamine123染色检测细胞凋亡,碘化丙啶单染法检测细胞周期,Western blotting检测凋亡指标蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达。结果 经薄层色谱法鉴定成功提取TAG。Incucyte S3活细胞动态分析系统拟合出TAG作用A549、SPCA1细胞的EC50值分别是99.2、82.0 μg/mL,由此确定TAG作用A549、SPCA1细胞的低、中、高浓度依次为50、100、150 μg/mL,且细胞拍照观察到随着药物浓度增加细胞融合度下降、细胞数目减少。CCK-8法和集落形成实验结果表明TAG抑制A549、SPCA1细胞增殖（P <0.05）。Hoechst 33258细胞核染色实验发现给药组细胞出现核碎裂;流式细胞术检测Rhodamine123探针发现给药组出现荧光信号强度增加,检测细胞周期发现TAG使A549、SPCA1细胞周期阻滞在G₂/M期;Western blot结果显示TAG诱导Bcl-2蛋白表达下调,Bax表达上调、Caspase-3蛋白切割活化增加,通过细胞染色实验、流式细胞术及Western blotting表明TAG促进A549、SPCA1细胞凋亡（P <0.05）。结论 TAG抑制肺腺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

Comparative study of uniform design and orthogonal design in the extraction of Gelsemium alkaloids]

OBJECTIVE: To develop a simple and efficient method for extracting Gelsemium alkaloids. METHODS: Uniform design and orthogonal design were respectively utilized to optimize the 3 factors in the extraction process, namely the type of solvent used, the solid-to-liquid ratio in the extraction system and the reflux time. RESULTS: Both of the design methods adopted trichloromethane as the solvent, with the solid-to-liquid ratio of 1:7.5 and reflux time of 3 h with 3 repetitions for the highest yield of alkaloids. CONCLUSION: Similar results are obtained from the two design methods for extracting Gelsemium alkaloids.     

钩吻碱类提取物对小鼠脾细胞增殖反应的影响

钩吻碱类提取物在浓度大于１．２５μｇ／ｍｌ以上时对混合淋巴细胞培养反应（ＭＬＲ）均有不同程度的抑制作用，具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）的最低抑制浓度为２．５μｇ／ｍｌ，抑制率为１８．３％。单独采用Ｃ５７ＢＬ／６ｊ小鼠脾细胞进行实验，促有丝分裂剂为细菌脂多糟（ＬＰＳ５μｇ／ｍｌ），在钩吻碱类提取物浓度为４０μｇ／ｍｌ才出现抑制作用（Ｐ＜０．０５），抑制率为１８％，改用刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎＡ２μｇ／ｍｌ）刺激，钩吻碱类提取物最低抑制浓度为２０μｇ／ｍｌ，抑制率为１２．４％（Ｐ＜０．０５）．脾细胞先经ＣｏｎＡ活化．后用白细胞介素２（５ｕ／ｍｌ）维持培养，此时钩吻碱类提取物的最低抑制浓度为４０μｇ／ｍｌ．抑制率为１７．１％（Ｐ＜０．０５）。     

一起大学生误饮用断肠草花茶中毒的调查

目的 调查该批大学生中毒事件的原因。方法 对中毒事件发生地广东省松山职业技术学院进行流行病学调查、现场采样检测。结果 该事件发生中毒者共9例，死亡2例，中毒者均为在校就读的男生。年龄19-22岁；中毒的临床表现以发病急（中住数潜伏期为0．5h）、头晕、恶心、呕吐、视物模糊、呼吸困难、紫绀、昏迷等神经系统毒性作用为特点；经鉴定，中毒者均饮用了误认为“金银花”的断肠草花茶。结论 该事件为一起误饮断肠草花茶中毒事件。     

钩吻B2组分对Hela细胞增殖和细胞周期的影响

目的:探讨钩吻醇提-氯仿萃取(GW-B2)组分对Hela细胞生长与增殖以及细胞周期的影响。方法:采用XTT法分析细胞生长与增殖,Timelapse显微镜观察细胞生长和形态,流式细胞仪检测凋亡和细胞周期,综合评价GW-B2组分抗Hela细胞的作用。结果:GW-B2具有明显抑制Hela细胞生长与增殖的作用,1μL/mL GW-B2组分处理的Hela细胞生长速度明显降低,在2~5μL/mL的剂量范围内,细胞生长与增殖能力基本完全被抑制。GW-B2组分处理后,Hela细胞主要的形态学变化为贴壁能力丧失,悬浮细胞增多,细胞分裂阻滞,部分细胞崩解破碎。GW-B2组分能明显的诱导Hela细胞凋亡,1μL/mL、2μL/mL和5μL/mL GW-B2组分处理72h后,Hela细胞的凋亡率分别可达8.16%、36.83和61.32%,而对细胞周期的影响主要是G2/M期阻滞,同时对G0/G1期也有一定的阻滞作用。结论:GW-B2组分具有抑制Hela细胞增殖、诱导凋亡,具有明显的抗肿瘤细胞的作用;GW-B2组分对细胞周期的影响主要是G2/M期阻滞,随后可诱导细胞的凋亡。     

钩吻总生物碱中钩吻素子的提取与分离

目的 研究钩吻中总生物碱的提取、总量测定方法及其中主要成分钩吻素子的分离、鉴定方法。方法 采用加热回流提取与氯仿萃取相结合的方法提取总生物碱;采用碱性硅胶柱层析、梯度洗脱法分离钩吻素子并用薄层层析法和紫外分光光度法定性鉴别。结果 从钩吻中分离得到了无色棱柱状钩吻素子晶体。结论 本实验所采用的提取钩吻总生物碱及分离钩吻素子的方法行之有效。     

闽产钩吻资源分布及药用部位的研究

目的 调查福建省钩吻资源的分布情况,并确定钩吻的最佳药用部位. 方法 依据文献记载和实地考察闽产钩吻的生境与分布;正交设计试验优化超声提取钩吻素子的工艺条件,采用高效液相色谱法测定钩吻根、茎和叶中的钩吻素子含量. 结果 闽产钩吻资源主要集中分布于23°84′N～26°92′N、116°36′E～120°05′E、海拔800 m以下光照良好的山坡、路旁.超声提取钩吻素子的最佳条件为超声功率250 W、时间20 min、温度50℃、料液比1∶20.闽产钩吻根和茎的钩吻素子含量高,叶的含量较低. 结论 闽产钩吻分布较广,资源丰富;钩吻的入药部位以根和茎为佳.     

均匀与正交设计法优化水飞蓟宾微粒制备工艺的比较研究

[目的] 通过快速膜乳化耦合溶剂挥发法制备粒径均一可控的水飞蓟宾微粒,对其制备工艺进行考察,优选最佳制备条件,并对均匀设计法和正交设计法进行比较。[方法] 以水飞蓟宾微粒的平均粒径Ｄ(0.5)及径距为指标,用均匀设计法和正交设计法对水相浓度、油水相体积比、过膜压力及固化时间等影响因素进行考察。[结果] 确定制备工艺为水相浓度3 %、油水相体积比1:2、过膜压力0.6 MPa、固化时间60 min。[结论]　该制备工艺简单、快速、稳定、可靠,所得水飞蓟宾微粒粒径均一,均匀设计在水飞蓟宾微粒制备工艺筛选实验中具有很好的可行性。     

钩吻吲哚生物碱化学成分研究

目的 为了寻找钩吻Gelsemium elegans的活性成分,对其化学成分进行研究。方法 运用正反相柱色谱、葡聚糖凝胶等分离技术,根据化合物的波谱数据鉴定化合物的化学结构。结果 从乙醇提取物的氯仿萃取部位分得8个化合物,分别鉴定为gelsemoxonmine II（1）、koumine（2）、gelsemine I（3）、胡蔓藤碱IV（4）、19-(Z)-koumidine（5）、19-(Z)-akuammidine（6）、4-(R)-gelsemine-N-oxide（7）和4-(S)-gelsemine-N-oxide（8）。结论 化合物1～7是首次从采自西双版纳的钩吻地上部分分离得到的钩吻类吲哚生物碱,化合物8为新天然产物。     

正交设计试验法优选淫羊藿提取工艺条件

目的：优化乙醇回流法提取淫羊藿的工艺条件。方法：以淫羊藿苷的含量为指标，通过正交设计试验筛选乙醇回流法提取淫羊藿的最佳提取工艺，结果：影响淫羊藿乙醇回流法提取的主次因素为：溶媒用量＞乙醇浓度＞提取次数＞提取时间，最佳提取工艺条件是：用8倍80％的乙醇回流，提取3次，每次30min，结论：通过正交设计试验优选得到的淫羊 藿乙醇回流法的提取工艺条件稳定可行。