人子宫颈癌中的HPV16E6mRNA,p^53 P^21ras和c—myc蛋白表达

为进一步探讨了子宫颈癌的分子发病机制采用ＰＣＲ，ＩＳＨ和ＩＨＣ方法对５１例子宫颈癌组织的ＨＰＶ１６感染，ＨＰＶ１６Ｅ６ｍＲＮＡ，ｐ＾５３，Ｐ＾２１ｒａｓ和ｃ－ｍｙｃ蛋白表达分布进行了研究。结果表明５１例中有ＨＰＶ１６感染者３８例，ＨＰＶ１６Ｅ６ｍＲＮＡ表达者３５例，其阳性细胞主要分布在高分化癌巢之周边部或中，低分化癌之整个癌巢；     

食管癌组织中HPV16,18E6蛋白和P^21,P^53癌基因产物的免疫组化研究

采用ＳＰ免疫组化法对柳州地区４５例食管鳞状细胞癌和２５例食管粘膜慢性炎对照组材料进行ＨＰＶ１６,１８Ｅ６蛋白和Ｐ６２１ｒａｓ,Ｐ＾５３癌基因蛋白产物的检测。结果显示,癌组织中Ｅ６,Ｐ６２１ｒｑｓ和Ｐ＾５３阳性率分别为６６．４４％,８８．８９％和６２．２２％,与对照组相比差异十分显著。     

肺癌病人乳头瘤病毒感染与P^53基因突变的关系研究

应用病理学证实的肺癌新鲜标本,用ＰＣＲ检测癌组织中ＨＰＶ１６,１８ＤＮＡ,用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析癌组织中Ｐ＾５３基因突变情况。４０例肺癌标本中,ＨＰＶ１６,１８ＤＮＡ阳性１４例,占３５％,Ｐ＾５３基因突变者１６例,占４０％。ＨＰＶ１６,１８ＤＮＡ阳性的１４例中,有Ｐ＾５３基因突变的９例,占６４．３％。而ＨＰＶ１６,１８ＤＮＡ阴性的２６例中,有Ｐ＾５３基因突变的７例,占２６．９％。提示人乳头瘤病毒感     

食管癌组织中 HPV 原位杂交及 E_6、P~(21ras)和 P~(53)免疫组化的研究

采用分子原位杂交和ＳＰ法免疫组化技术对柳州地区４０例食管鳞状细胞癌和２０例食管粘膜慢性炎的材料进行地高辛标记的ＨＰＶ６Ｂ／１１、１６、１８ＤＮＡ及ＨＰＶ１６、１８早期蛋白Ｅ６、Ｐ２１ｒａｓ和Ｐ５３癌基因产物检测，结果显示：食管癌中ＨＰＶ１６、１８ＤＮＡ及Ｅ６蛋白的阳性率分别为２５％（１０／４０）和６５％（２６／４０），与对照组对比差异均有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。Ｅ６、和Ｐ５３蛋白呈双阳性者为５２．５０％（２１／４０），其中９０．４８％（１９／２１）阳性表达出现在同一区域同一癌细胞核内，似表达Ｅ６、可与Ｐ５３结合形成复合物，从而导致野生型Ｐ５３的降解或突变。本组鳞癌组织中Ｐ２１ｒａｓ与Ｐ５３、Ｐ５３与Ｅ６的阳性表达均具有显著相关性（Ｐ＜０．０５）。提示高危ＨＰＶ１６、１８感染与多癌基因协同在本地区食管癌病因学中起着十分重要的作用。     

食管鳞癌P^16与Rb蛋白的表达及相关性

目的：探讨Ｐ＾１６与Ｒｂ蛋白与原发性食管鳞癌发生发展的关系，分析Ｐ＾１６与Ｒｂ蛋白的表达及其相关性。方法：应用免疫组化ＳＰ法检测１０２例原发性食管鳞癌中Ｐ＾１６与Ｒｂ蛋白的表达情况。结果：高分化鳞癌中Ｐ＾１６与Ｒｂ均为阳性表达，低分化鳞癌中阳性表达分别为４８．１％和５７．４％。在３１例Ｒｂ蛋白阳性标本中，２４例显示Ｐ＾１６蛋白表达缺失或低表达，在２３例Ｒｂ蛋白阴性标本中有１９例显示Ｐ＾１５蛋白阳性     

宫颈癌组织中HPV16 E6C基因变异的研究

为探讨ＨＰＶ１６ 肿瘤相关抗原Ｅ６ 羧基端基因片段（Ｅ６Ｃ）在宫颈癌组织中的变异性以及采用Ｅ６Ｃ做为肿瘤治疗性疫苗抗原基因的可行性,采用ＰＣＲ方法自１８ 例单纯ＨＰＶ１６ ＤＮＡ 阳性的宫颈癌组织中扩增ＨＰＶ１６ Ｅ６ＣＤＮＡ,经单链构象多态性分析（ＳＳＣＰ）和ＤＮＡ序列测定法检测其基因变异性。ＳＳＣＰ分析结果显示,１８ 例宫颈癌组织中ＨＰＶ１６ Ｅ６ＣＤＮＡ 电泳条带与标准对照ＤＮＡ 条带一致,提示无基因变异现象存在,ＤＮＡ 序列测定也证实Ｅ６Ｃ编码区内无核苷酸突变。该研究证实采用ＨＰＶ１６ Ｅ６Ｃ端基因片段作为ＨＰＶ疫苗候选基因可行,为进一步研制ＨＰＶ１６ ＤＮＡ 疫苗奠定了基础     

双温聚合酶链反应检测喉乳头瘤中HPV—DNA

应用双温聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测喉乳头瘤石蜡包埋组织中的人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ》结果与常规ＰＣＲ（三温循环）相同；３０例喉乳头瘤中ＨＰＶ总检出率为４６．７％（１４／３０），ＨＰＶ－６／１１／１６的检出率分别为４０％（１２／３０）、１６．７％（５／３０）和６．７％（２／３０）１６．７％（５／３０）和６．７％（２／３０），ＨＰＶ－６的检出率极显著高于ＨＰＶ－１１／６（ｘ＾２＝１０．６，Ｐ〈）．     

宫颈非典型增生组织中HPV16—DNA的定量PCR检测

（１）目的建立定量聚合酶链技术（ＰＣＲ）方法，检测宫颈组织中乳头瘤病毒１６型ＨＰＶ１６的基因含量。（２）方法通过重叠延伸ＰＣＲ构建一含ＥｃｏＲＩ酶切位点的内参照模板，用竞争性ＰＣＲ（ＣＰＣＲ）检测６例ＨＰＶ１６阳性宫颈非典型增生组织标本中ＨＰＶ１６Ｅ６，基因的拷贝数。结果６例阳性标本ＨＰＶ１６Ｅ６基因的拷贝数为每毫克ＤＮＡ中含１．９９×１０＾５～２．５０×１０＾７。（４）结论用ＣＰＣＲ检测宫颈组织     

宫颈癌组织中HPV16 E6C基因变异的研究

为探讨ＨＰＶ１６肿瘤相关抗原Ｅ６羟基端基因片段（Ｅ６Ｃ）在宫颈癌组织中的变异性以及采用Ｅ６Ｃ做为肿瘤治疗性轩抗原基因的可行性，采用ＰＣＲ方法自１８例单纯ＨＰＶ１６ＤＮＡ阳性的宫颈癌组织中扩增ＨＰＶ１６５Ｅ６ＣＤＮＡ，经单链构象多态性分析（ＳＳＣＰ）和ＤＮＡ序列测定法检测其基因变异性。ＳＳＣＰ分析结果显示，１８例宫颈癌组织ＨＰＶ１６Ｅ６ＣＤＮＡ电泳条带与标准对照ＤＮＡ条带一致，提示无基因变异现象存在     

大肠癌组织中HPV16,18E6,p^53癌基因蛋白表达的研究

目的探讨人乳头瘤病毒１６、１８型感染与Ｐ＾５３癌基因协同在大肠癌发生机制中的作用。方法采用ＳＰ免疫组化技术,检测３０例大肠腺瘤、１０例腺瘤恶变、５３例大肠腺癌和３０例正常大肠粘膜组织中ＨＰＶ１６、１８Ｅ６,Ｐ＾５３蛋白并分析其相互关系。结果腺瘤、腺瘤恶变和腺癌组中Ｅ６,Ｐ＾５３的阳性表达分别为３６．７％（１１３０）、３３．３％、（１０／３０）,６０．０％（６／１０）、６０．０％（６／１０）和５４．     

pEGFP-HPV16E6/E7表达载体的构建及转染角朊细胞的瞬时表达

目的：构建ｐＥＧＦＰ－ＨＰＶ１６Ｅ６／Ｅ７表达载体,观察其在角朊细胞中的瞬时。方法：基因重组技术,基因转染技术。结论 ｐＥＧＦＰ－ＨＰＶ１６Ｅ６／Ｅ７表达载体便于观察,转染细胞中ＨＰＶ１６Ｅ６／Ｅ７－ＧＦＰ融合蛋白的表达民政部及蛋白定位,适用于对ＨＰＶ１６Ｅ６／Ｅ７分子生物学特性及致瘤机理的研究。     

喉癌与人类乳头状瘤病毒相关性的研究

本研究采用分子生物学核酸斑等杂交技术，以［ａ－＾３２Ｐ］－ｄＣＴＰ标记的人类乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１６型ＮＤＡ的探针，分别对３９例喉癌组织、１０例正常喉粘膜及１例喉脂肪肉瘤进行了检测，并对ＨＰＶ１６的感染率与喉癌的临床分型、病理分化程度及性别的相关性进行研究。结果表明，ＨＰＶ１６的感染程度与喉癌的临床分型及分期有关（Ｐ＜０．０５），而与病理分化程度及性别无关（Ｐ＞０．０５）。故我们认为ＨＰＶ与喉癌     

P^16抑癌基因产物在肺癌中的表达及临床意义

研究Ｐ１６在肺癌中的表达与临床病理的关系。用免疫组织化学ＡＢＣ法检测６０例肺癌石蜡标本Ｐ１６蛋白的表达水平。结果：８例小细胞肺癌Ｐ＾１６蛋白的阳性表达率为１００％。５２例非小细胞肺癌Ｐ＾１６蛋白的阳性表达率为５７．６％，其中伴有淋巴结转移的肺癌Ｐ＾１６ｎｈｒｒｒ ｂｊ ｎｔｇ ｇｅ ｄｐ ｙｘ ｏ １００％．     

喉鳞癌及乳头状瘤组织中人乳头瘤病毒DNA的PCR检测

①目的探讨人乳头瘤病毒１６型和１８型（ＨＰＶ１６和ＨＰＶ１８）与喉鳞癌、喉乳头状瘤的关系。②方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测３４例喉乳头状瘤、８３例喉鳞状细胞癌石蜡包埋组织中ＨＰＶ１６及ＨＰＶ１８的ＤＮＡ．③结果喉乳头状瘤及喉鳞癌组织中ＨＰＶ１６的检出率为１４．７１％和３０．１２％，两组比较差异无显著性（χ２＝３．００６，Ｐ＞０．０５）；ＨＰＶ１８在喉乳头状瘤组织中未检出，而在喉鳞癌组织中为６．０２％，两组比较，差异无显著意义（χ２＝０．０８７，Ｐ＞０．０５）。高分化喉鳞癌组织中ＨＰＶ１６的检出率显著高于中分化鳞癌（χ２＝６．０３２，Ｐ＜０．０５），而高分化与低分化、中分化与低分化鳞癌之间的差异均无显著性（χ２＝０．３５１，１．５００，Ｐ均＞０．０５）；不同病理分化喉鳞癌组织中ＨＰＶ１８的检出率差异无显著性（χ２＝０．０６０，Ｐ＞０．０５）。④结论喉鳞癌的发生与ＨＰＶ感染密切相关，尤以ＨＰＶ１６明显     

P^16P^21P^53cyclinD1基因在食管癌的表达及其意义

目的 探讨Ｐ＾１６、Ｐ＾２１、Ｐ＾５３、ｃｙｃｌｉｎＤ１在食管癌中的表达及其作用。方法 免疫组化检测Ｐ＾１６、Ｐ＾２１、Ｐ＾５３、ｃｙｃｌｉｎＤ１在食管癌中的表达，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测Ｐ＾５３基因突变情况。结果 阳性表达率Ｐ＾１６、Ｐ＾２１均为６３．３％，Ｐ＾５３为６６．７％，ｃｙｃｌｉｎＤ１为８６．７％，Ｐ＾５３基因突变率为２７％。结论 沂蒙山区食管癌以Ｐ＾５３第７外显子突变为主。Ｐ＾１６、Ｐ＾     

P^53和P^16基因蛋白在软骨肉瘤中表达及其意义

目的：为探讨抑癌基因Ｐ＾５３和Ｐ＾１６在软骨肉瘤发生发展中的作用以及基因蛋白检测对软骨肉瘤分级和预后判断的意义。方法：用免疫组化ＳＰ法检测Ｐ＾５３和Ｐ１６基因蛋在２１例软骨肉瘤中表达并分析其与肿瘤病理分级的关系。结果：Ｐ＾５３过渡表达和Ｐ＾１６阳性率分别为５７．１％、１９．０％,Ｐ＾５３阳性率与软骨肉瘤的恶性程度具有相关性（Ｐ〉０．０５）。Ｐ＾１６缺失和Ｐ＾５３突变在软骨肉瘤中有协同表达。结论：Ｐ     

宫颈湿疣的临床病理与HPV亚型分析

目的 探讨宫颈温疣的临床类型及组织病理学特征与人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）亚型的关系。方法 对１３０例宫颈湿疣进行病理形态学观察,同时采用ＰＣＲ技术进行ＨＰＶ６／１１、ＨＰＶ１６／１８检测。结果 扁平型宫颈湿疣与ＨＰＶ６／１１感染密切相关（Ｐ〈０．０１）,凹空细胞呈轻度异型性。乳头型宫颈湿疣与ＨＰＶ１６／１８密切相关（Ｐ〈０．０１）,凹空细胞呈重度异型性。结论 宫颈湿疣的临床类型及组织病理学特征与ＨＰＶ     

维吾尔族妇女子宫颈癌中 p53 基因的表达和 HPV DNA 检测研究

应用Ｅ６特异性引物ＰＣＲ检测新疆维吾尔族妇女子宫颈癌活检组织标本中的ＨＰＶ６，１６和１８ＤＮＡ。并应用免疫组化研究ｐ５３基因的表达。结果显示，６５例标本中７例不适应用于ＰＣＲ，其余５８例中ＨＰＶ１６ＤＮＡ阳性４５例（７７．６％），而ＨＰＶ６ＤＮＡ和１８ＤＮＡ为阴性。免疫组化显示，６５例中ｐ５３表达阳性４９例（７５．４％）。在４５例ＨＰＶＤＮＡ阳性标本中，ｐ５３表达阳性３４例（７５．６％）；１３例ＨＰＶＤＮＡ阴性标本中，ｐ５３表达阳性１１例（８４．６％）。提示，ＨＰＶ阳性或阴性与ｐ５３表达之间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。     

宫颈癌人乳头状瘤病毒感染与P53蛋白表达的关系

采用聚合酶链反应对４９例宫颈癌组织石膜包埋标本中人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）６、１１、１６、１８型ＤＮＡ进行检测，并与本组研组增报导的同标本中Ｐ５３蛋白检测结果进行比较。结果表明：①ＨＰＶ－ＤＮＡ的检出（８７．７６％０分别与ＨＰＶ６、１１、１８－ＤＮＡ的检出（２７．５２％、３６．７３％、３８．７８％）相比有显著性差异（Ｐ〈０．００１）。②ＨＰＶ各型间有交叉感染，单独ＨＰＶ１６感染与各型间交叉感染相比有     

喉癌与人类乳头状瘤病毒相关性的研究

本研究采用分子生物学核酸斑点杂交技术，以［α－３２Ｐ］一ｄＣＴＰ标记的人类乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１６型ＤＮＡ为探针，分别对３９例喉癌组织、１０例正常喉粘膜及１例喉脂肪肉瘤进行了检测，并对ＨＰＶＩ６的感染率与喉癌的临床分型、临床分期、病理分化程度及性别的相关性进行研究。结果表明，ＨＰＶ１６的感染程度与喉癌的临床分型及分期有关（Ｐ＜０．０５），而与病理分化程度及性别无关（Ｐ＞０．０５）。故我们认为ＨＰＶ与喉癌的发生有一定的关系，ＨＰＶｌ６在喉组织中的存在属于病理性侵袭，致喉癌的危险度较高。