多发性骨髓瘤基因修饰瘤苗诱导体内抗肿瘤反应的实验研究

本研究目的是评价NOD／SCID小鼠皮下移植瘤模型对多发性骨髓瘤基因修饰瘤苗引发体内抗肿瘤反应的效果。首先给NOD／SCID小鼠腹腔注射人外周血淋巴细胞以在其体内重建人的免疫系统，然后皮下接种γ-射线灭活的基因修饰骨髓瘤细胞sko-007（表达绿色荧光蛋白或者p53、GM—CSF和B7-1基因），以PBS作为对照，最后植入活sko-007细胞进行攻击。结果发现，与对照组相比接种感染腺病毒Ad—p53／GM—CSF／B7-1的sko-007细胞可以明显抑制移植瘤生长，病理分析显示移植瘤纤维组织增生伴弥漫性坏死增多，血管增生显著。免疫组织化学染色显示瘤灶内有人T淋巴细胞浸润。结论：p53、GM—CSF和B7-1基因修饰的骨髓瘤细胞能够诱导产生抗肿瘤免疫反应，有可能用于人类多发性骨髓瘤的免疫治疗。     

SCID小鼠子宫内膜异位症模型的鉴定

目的建立人子宫内膜异位症的移植模型，观察其生物学特性。方法将子宫内膜异位症患者的在位内膜种植于SCID小鼠腹部皮下，建立人子宫内膜异位症模型，用组织病理学检查、血清学指标的检测和免疫组织化学染色鉴定模型。结果从SCID小鼠腹部皮下取出的成活的内膜组织，在形态和结构上与原来的内膜组织一致。结论SCID小鼠腹部皮下移植内异症患者的在位内膜，保留了子宫内膜原有的生物学特性，为研究子宫内膜异位症的发病机理和药物治疗提供了较客观的依据及动物实验模型。     

人源化小鼠异位肺癌动物模型的构建

目的:探讨一种可用于研究肺癌免疫的人源化小鼠动物模型。方法:采用人外周血单个核细胞输注非肥胖糖尿病/严重联合免疫缺陷小鼠体内建立人源化小鼠,在此小鼠模型基础上再构建异位肺癌荷瘤模型。结果:10只人源化小鼠异位荷瘤模型全部构建成功,免疫重构的小鼠外周血及脾脏中均可检测到大量人CD3+T、CD4+T、CD8+T细胞。人源化荷瘤小鼠肿瘤组织内可发现人CD3+T、CD4+T、CD8+T淋巴细胞浸润。结论:该模型为我们了解肺癌发生发展与免疫系统的关系,也为研究免疫治疗干预措施等提供了有价值的工具。     

人卵巢癌重症联合免疫缺陷小鼠腹腔移植瘤模型的建立及其生物学研究

目的建立人卵巢癌重症联合免疫缺陷小鼠(SCID鼠)移植瘤模型,为研究人腹水型卵巢癌的实验研究提供合适的动物模型。方法将2例卵巢癌患者手术切除标本移植于SCID鼠腹腔,原代移植瘤形成后进行鼠间传代,观察移植瘤的生长、转移及腹水形成情况,做腹水细胞学计数、涂片,检测荷瘤鼠血中肿瘤标记物CA125的浓度,肿瘤作病理学检查。结果成功建立3只原代人卵巢癌SCID鼠移植瘤模型,原代移植成功率为37.5%,自第四代后,移植瘤的传代成功率为100%,随着传代次数的增加,移植瘤的成瘤潜伏期及荷瘤鼠的生存期逐渐缩短,荷瘤鼠血中肿瘤标记物的浓度升高,病理组织学证实:移植瘤保持了原卵巢癌生物学特征。结论成功建立了人卵巢癌SCID鼠移植瘤模型,移植瘤保持了原卵巢癌生物学特征,是研究人卵巢癌较理想的动物模型。     

异种抗原对荷S180肉瘤小鼠肿瘤内T淋巴细胞亚群的影响

目的:评价对于小鼠为异种抗原的人A型红细胞膜免疫后序贯瘤内注射对荷S180肉瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用及时肿瘤内T淋巴细胞亚群的影响.方法:24只荷S180肉瘤小鼠分为实验组、抗原对照组、免疫对照组及空白对照组.实验组荷瘤小鼠成瘤前应用A型人红细胞膜悬液腹腔免疫,成瘤后瘤内注射5 mg/mL A型人红细胞膜,连续注射5 d.抗原对照组,不预先免疫,瘤内注射A型人红细胞膜.免疫对照组,成瘤前预先免疫,瘤内注射生理盐水,连续注射5 d.空白对照组,不预先免疫,瘤内注射生理盐水.注射第14天处死小鼠,测量瘤重,检测肿瘤内浸润Th、CTL、Treg细胞亚群数量及IL-2的含量.结果:实验组小鼠肿瘤平均重量低于免疫对照组及空白对照组(P<0.05,P<0.01).实验组肿瘤内IL-2含量高于空白对照组(P<0.01).实验组Th细胞的比例高于其他3组(P<0.01).实验组CTL细胞比例高于免疫对照组及空白对照组(P<0.01).而Treg细胞的比例低于免疫对照组及空白对照组(P<0.01).结论:人A型红细胞膜免疫后序贯瘤内注射可抑制荷S180肉瘤小鼠肿瘤生长,并使肿瘤内部Treg细胞数量降低,Th细胞及CTL细胞数量增多,IL-2含量增加.     

替勃龙对去势裸鼠子宫内膜癌移植瘤的影响

目的 通过裸鼠子宫内膜癌移植瘤模型的体内实验,探讨替勃龙应用于子宫内膜癌患者的安全性.方法 (1)体外培养人子宫内膜癌Ishikawa细胞株;建立去势裸鼠子官内膜癌Ishikawa细胞株皮下移植瘸动物实验模型;(2)将成瘤裸鼠随机分为替勃龙组(15只)和对照组(15只),分别予以替勃龙0.375mg·kg-1·d-1和对照治疗35 d;(3)比较给药前后两组肿瘤体积变化、肿瘤重量和肿瘤转移状况(体表、盆腹腔淋巴结、腹水);应用免疫组化SP法测定两组实验动物皮下移植瘤Ki67、P53、P27、bcl-2蛋白表达情况,判断替勃龙对移植瘤的影响和对内膜癌细胞增殖及凋亡的影响.结果 (1)替勃龙组和对照组裸鼠两组子宫内膜癌皮下移植瘤体积变化无统计学差异[ (2.063±1.038) cm3饥 vs.(2.170±0.822) cm3,P=0.791];肿瘤重量无统计学差异[(0.699±2.02)gvs.(0.807±2.83)g,P =0.314];替勃龙治疗35 d后,没有引起子宫内膜癌肿瘤体表、盆腹腔转移和腹水发生;(2)替勃龙组和对照组两组裸鼠人子宫内膜癌Ishikawa细胞株皮下移植瘤Ki67增殖指数、P53、P27、bcl-2蛋白表达情况均无统计学差异.结论 替勃龙不刺激裸鼠子宫内膜癌Ishikawa细胞株皮下移植瘤生长、转移和细胞增殖、凋亡.替勃龙应用于子宫内膜癌患者的术后激素补充治疗可具有一定的安全性.     

NOD-SCID小鼠移植人体胃癌实验案例分析

目的:鉴定小鼠胃癌移植模型中生成的肿瘤类型及病理特征。方法:采用HE染色法对肿瘤病理组织学特征进行观察,用免疫组织化学的方法分析肿瘤中CD43、CD45RB、CD57、CK等标志物的表达及小鼠脾脏中CD43、CD57的表达以诊断肿瘤类型及来源。结果:经组织学观察,小鼠皮下肿瘤组织与人胃癌组织结构形态并不相符。经免疫组织化学分析,小鼠肿瘤抗人体的CD43、CD45RB、CD57均为阳性,提示肿瘤细胞中由大量T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞组成;但小鼠脾脏内T、B淋巴细胞和NK细胞均为阴性。结论:小鼠皮下肿瘤为淋巴瘤,来源于移植的胃癌组织中带有的淋巴组织。     

人急性B淋巴细胞白血病-NOD/SCID/IL2rγnull新生小鼠异种移植模型的建立

本研究旨在应用NOD/SCID/IL2rγnull新生小鼠建立人急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)的异种移植模型。NOD/SCID/IL2rγnull新生期(出生48 h之内)小鼠经亚致死剂量(100 cGy)137Cs全身照射后,由面静脉输注FACSAria流式细胞仪分选纯化的B-ALL患者骨髓CD3-CD4-CD8-CD34+CD19+细胞,于移植后8-12周用流式细胞术检测受鼠外周血、骨髓和脾脏中人源细胞的植入水平及其免疫表型,并通过HE染色评价人源B-ALL细胞在受鼠各组织器官中的迁移浸润能力。结果表明,在接受B-ALL患者CD34+CD19+细胞移植的受鼠外周血、骨髓和脾脏细胞中,不仅检测到了不同程度的人源B-ALL(huCD45+CD19+)细胞的植入〔(83.36±10.05)%,(93.88±5.05)%,(88.31±5.01)%〕,而且植入细胞具有与B-ALL患者相似的细胞形态和免疫表型特征。此外,人源B-ALL细胞广泛迁移浸润到受鼠的肝脏、肺脏、肾脏和脑等组织器官中。结论:NOD/SCID/IL2rγnull新生小鼠模型能够支持B-ALL患者CD34+CD19+细胞的高水平植入,是对人B-ALL进行体内功能性研究的新型异种移植模型。     

SCID鼠人源化及视网膜母细胞瘤模型的建立

目的进行SCID鼠的人源化并建立人化SCID鼠视网膜母细胞瘤模型。方法SCID鼠腹腔注射人脐带血单个核细胞(CBMNC)生理盐水悬液。两周后割尾采血,检测其IgG水平。将10只人化的SCID鼠混分为两组,分别于腹股沟皮下注入视网膜母细胞瘤细胞株(SoRb-70),浓度分别为2×106,2×107,然后对肿瘤的发生率及瘤体大小连续观察,并作统计学分析,最后做病理解剖及组织切片观察。结果该实验经腹腔注射移植入SCID小鼠体内的CBMNC可在小鼠体内存活并大量增殖。移植后2～4周,SCID小鼠血清中即可检测到人免疫球蛋白。视网膜母细胞瘤细胞以两个梯度接种人化SCID鼠10只,观察8周,10只SCID小鼠7只致瘤。结论该模型的建立方法科学合理,在一定程度上可模拟人眼视网膜母细胞瘤的生物学行为,为进一步研究其发生发展机制及免疫治疗提供了一种模型。     

高成瘤性前列腺癌细胞亚克隆细胞株的制备及其生物学特性的研究

目的:建立人前列腺癌LNCap细胞高成瘤性亚克隆细胞株并探讨其生物学特性.方法:慢病毒载体PGK-luciferase-GFP转染LNCap细胞,稳转株与Matrigel混合注入SCID小鼠皮下,反复消化法原代培养皮下瘤获得亚克隆细胞株,CCK8及Transwell实验检测细胞增殖及迁移力;用亲代LNCap细胞及亚克隆细胞皮下注射SCID小鼠成瘤,观察两组瘤体生长及大小,并用生物活体发光、病理及免疫组织化学检测瘤体情况.结果:与亲代LNCap细胞相比,亚克隆细胞的生长速度增快,迁移力增强,皮下瘤成瘤率增高,荧光信号强度增加,皮下瘤组织切片HE染色镜下可见核分裂相,免疫组织化学AR染色阳性.结论:制备的人前列腺癌亚克隆细胞株其恶性生物行为增加.     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

31例误诊哮喘原因分析

目的通过对中央气道不全性梗阻和支气管结核、术后痰栓形成误诊为支气管哮喘的分析,探讨误诊原因及正确诊断的方法。方法对误诊为支气管哮喘的3l例患者的临床资料进行分析。结果临床特征以刺激性咳嗽为主,其次为活动后胸闷、气促,肺部闻及哮鸣音,胸部影像学多无特征性改变或极易漏诊,支气管舒张试验阳性率低,诊断前缺乏气管镜及病理检查,均误诊为支气管哮喘。结论中央气道不全梗阻性病变或炎性病变包括支气管结核、术后痰栓形成时原发疾病症状不典型,肺部影像学检查无异常表现或极易漏诊,故该类以表现为咳嗽、喘息、活动后胸闷,进而出现严重呼吸困难的患者常被误诊为支气管哮喘,延误诊治。支气管镜及病理检查再结合肺CT是鉴别诊断的重要方法。     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。     

胰腺癌治疗的Cochrane系统评价证据

目的评价胰腺癌治疗的Cochrane系统评价证据,以及纳入系统评价的临床随机对照试验（RCT）的方法学质量。方法检索Cochrane Library数据库（2009年第4期）中有关胰腺癌治疗的系统评价,并运用RewMan5.0.21对所纳入研究的偏倚进行评估。结果共检索到胆道支架置入术姑息治疗梗阻型胰腺癌的系统评价、放化疗治疗不能手术的进展期胰腺癌的系统评价共2篇系统评价,共纳入79个RCT。依照Cochrane协作网推荐的质量评价方法,对所纳入RCT的偏倚进行评估,表明均存在不同程度的偏倚,方法学质量普遍较低。结论 Cochrane系统评价是公认的最高质量的研究证据,但目前缺少足够强度的证据来支持胆道支架置入术姑息治疗梗阻型胰腺癌的疗效。其他治疗手段的疗效如胰腺癌围手术期的营养支持治疗等还需要通过进一步的完成系统评价来评估。建议推行临床试验透明化,实施临床试验注册制度以及按照CONSORT声明严格规范RCT的报告,以便于总结胰腺癌治疗的临床证据。     

护理干预对提高中风患者生活质量的效果观察

目的探讨提高中风患者生活质量的护理方法。方法将50例中风患者随机分为对照组23例和实验组27例,对照组给予针灸内科常规护理,实验组在此基础上给予心理护理和康复训练。结果两组患者治疗护理后日常生活活动(ADL)能力和贝克抑郁量表(BDI)评分均有好转,但实验组疗效明显优于对照组(P<0.05)。结论实施针对性心理护理和康复训练可明显提高中风患者的治疗效果。     

中国人四肢瘫日常生活能力评定量表的信度研究

目的研究四肢瘫日常生活能力评定量表评测四肢瘫患者的重测信度及观察者间信度。方法由1位评定者应用四肢瘫日常生活能力评定量表对20例四肢瘫患者进行评定,评定后1周内再次对该患者进行评定;另1位评定者在第1位评定者初次评定后2 d内对该患者进行评定。结果第1位评定者两次评定总分的组内相关系数为0.994(P<0.01);第1位评定者与第2位评定者评定总分的组内相关系数为0.971(P<0.01)。结论四肢瘫日常生活能力评定量表具有良好的重测信度及观察者间信度。     

乳腺叶状肿瘤的影像分析

目的 分析乳腺叶状肿瘤的X线钼靶摄片和超声表现.方法 收集经手术病理证实的19例乳腺叶状肿瘤,术前均行超声检查,其中15例行X线钼靶摄片,回顾分析其临床特点和影像学表现.结果 19例乳腺叶状肿瘤中,良性8例,交界性6例,恶性5例.15例患者X线钼靶摄片中病灶均为高密度孤立肿块影,呈圆形(8例)或浅分叶状(7例),边界清晰(10例)或部分不清(5例),部分肿块周边见"晕"征(4例).超声检查6例发现囊性变,6例表现为后方回声增强.病灶为圆形(8例)、浅分叶状(8例)或有角状突起(3例).所有病例均未发现腋下转移淋巴结及周围组织浸润等恶性征象.结论 认识乳腺叶状肿瘤的病理类型和临床特点,结合影像表现综合分析,可提高术前诊断率.     

肇庆市居民颈椎病流行病学调查

目的 :调查肇庆市居民颈椎病发病情况及相关问题。方法 :通过分层随机抽样选择该市区18～70岁居民5000人为研究对象 ,入户或至单位询问调查。结果 :该市居民颈椎病发病率为8.11% ,男女差异无显著性 ,随着年龄的增长 ,发病率逐渐增加。经多因素分析 :体位姿势不正确、情绪紧张、潮湿、疲劳是发病的主要诱因。结论 :该病严重影响肇庆市居民的健康 ,做好防治应从早做起 ,综合防治。     

超声评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响

目的 探讨超声在评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响的价值。方法 回顾性收集经病理学证实为头颈部肿瘤、放疗前后的颈动脉超声资料以及其他基线资料完整的患者93例,比较放疗前后放疗侧颈动脉和非放疗侧颈动脉粥样硬化斑块和溃疡斑块的总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积。结果 放疗前后颈动脉超声检查的平均间隔时间为（6.1±1.9）年;放疗前放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积与非放疗侧比较差异均无统计学意义（P均>0.05）;放疗后放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积均较非放疗侧加重,差异有统计学意义（P均<0.05）。结论 放疗可导致头颈部肿瘤患者颈动脉粥样硬化斑块的形成和进展,且斑块具有易损性特点。