脆性组氨酸三联体基因与胃癌

脆性组氨酸三联体（fragile histidine triad,FHIT）基因定位于人3号染色体短臂（3p14．2）上,许多研究表明其表达改变与人类多种肿瘤疾病关系密切。本文重点描述有关FHIT基因的分子生物学研究新进展,以及在胃癌诊治方面的意义。     

FHIT基因--一种特殊的抑癌基因

FHIT基因定位于3p14.2,包含FRA3B,t(3;8)断裂点及HPV16整合位点.在许多肿瘤中均出现异常.由于FHIT在肿瘤中的基因改变不同于经典的抑癌基因,因此关于其是否为抑癌基因还存在不同的观点.阐明FHIT基因在肿瘤发生、演变中的作用,有可能为肿瘤的分子生物学研究提供新的思路.     

肺泡Ⅱ型上皮细胞染色体脆性位点基因FHIT与肺间质纤维化的关系

目的:研究肺间质纤维化模型大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞染色体脆性位点基因FHIT表达的改变.方法:SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组及川芎嗪用药组,分别于给药7、14、28 d后提取肺泡Ⅱ型上皮细胞行体外培养,RT-PCR法检测FHIT基因mRNA表达的改变,免疫组织化学检测FHIT蛋白表达.结果:与假手术组比较,造模7d后模型组大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞染色体脆性位点基因FHIT mRNA及蛋白表达无变化.用药14、28 d后,FHIT基因mRNA及蛋白表达则明显下降.而川芎嗪组比模型组有显著上调.结论:在肺间质纤维化过程中存在染色体脆性位点基因FHIT的改变,川芎嗪可以一定程度上抑制这种改变从而起到防治作用.     

FHIT基因与肝癌的关系研究进展

脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad，FHIT)基因位于染色体3p14.2区,属于组氨酸三联体(Histidine triad，HIT)基因家族,是第1个将脆性位点和肿瘤联系起来的抑癌基因。它可能主要通过诱导细胞凋亡而发挥抑癌作用。肝癌中存在FHIT基因高甲基化、转录异常、FHIT蛋白表达下降。FHIT基因的改变与肝癌的演进、侵袭性、复发率和生存率等多项临床病理指标有关。FHIT基因的改变在肝细胞癌中是早期频发的事件，可以成为肝癌患者预后一种新的分子指标。     

外源FHIT基因对不同FHIT基因状态肺癌细胞系恶性增殖的影响及其机理的研究

目的研究外源FHIT基因对不同FHIT基因背景肺癌细胞系恶性增殖的影响并探讨抑癌机理.方法用Lipofectamine介导PEGFP-FHIT真核表达质粒转染受体细胞系并建立稳定转染细胞系.RT-PCR、免疫组织化学及Western blot方法鉴定转染细胞中外源FHIT基因和蛋白的表达.细胞集落形成实验研究外源FHIT基因对肺癌细胞恶性增殖的影响,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡.Western blot检测母系及转染细胞系中p21^Waf/cip蛋白的表达.结果3种受体细胞转染外源FHIT基因后均检测到FHIT mRNA和蛋白的表达.集落形成实验801D-FHIT（46.3%）、A2-FHIT（43.7%）、A549-FHIT（32.7%）细胞集落形成率比801D（58.2%）、A2（60.3%）、A549（52.8%）的低,差异有显著性（P〈0.01）.FACS分析细胞周期显示：801D-FHIT、A2-FHIT和A549-FHIT细胞分别出现了G1、S和G2/M期阻滞.转染FHIT基因的801D-FHIT、A2-FHIT和A549-FHIT细胞p21^Waf/cip蛋白表达增加. 结论外源FHIT基因能够抑制不同FHIT基因背景的肺癌细胞的恶性增殖,并引起细胞周期改变,不同FHIT基因背景的细胞产生细胞周期阻滞的时间不同.FHIT基因通过促进p21^Waf/cip蛋白的表达来调节细胞周期.     

RNAi沉默livin基因对裸鼠移植瘤生长及Ki67蛋白表达的影响

目的利用慢病毒携带的livin基因短发夹RNA(shRNA)干扰裸鼠移植瘤中Livin蛋白表达,探讨其对肺腺癌裸鼠移植瘤生长及Ki67蛋白表达的影响。方法建立肺腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,待移植瘤长至100mm3左右时,以携带livin基因shRNA慢病毒载体注入移植瘤,观察肿瘤生长情况。用免疫组织化学方法检测各组Livin蛋白、Ki67蛋白表达,分析二者相关性。结果 livin基因shRNA干预组与空白对照组和阴性载体对照组相比,瘤体生长减缓,移植瘤质量明显减小(P<0.01),Livin蛋白、Ki67蛋白的表达明显降低(P<0.01,P<0.01),且Livin蛋白与Ki67蛋白的表达呈正相关(r=0.54,P<0.01)。结论利用livin基因shRNA可抑制移植瘤生长,Livin蛋白表达明显降低,Ki67蛋白的表达也降低,两者呈显著正相关。     

舌癌细胞中FHIT基因异常表达的研究

为了检测FHIT基因舌癌Tca8113细胞中的表达，应用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及DNA测序技术检测舌癌Tca8113细胞中FHIT基因的表达情况。结果发现在舌癌细胞系Tca8113细胞中存在FHIT基因部分缺失，产生异常转录本，大小约247bp。FHIT基因mRNA异常转录本为多个外显子缺失所致，EI-E8全部缺失。因此，FHIT基因在舌癌Tca8113细胞中的异常表达可能在舌癌的发生和发展中起着重要的作用。     

DCC基因与妇科肿瘤研究新进展

结直肠癌缺失基因——DCC基因是近年来发现的一个重要的肿瘤抑制基因,其失活和表达异常与大肠癌的诊断、治疗及预后关系密切。DCC基因在妇科肿瘤的发生发展中所起的作用已受到国内外诸多学者的关注。本文就此方面的研究现状作一简要综述。     

宫颈癌脆性组氨酸三联基因的表达与血浆中的甲基化状态

目的探讨宫颈癌患者血浆中脆性组氨酸三联（fragile histidine triad, FHIT） 基因5′端CpG岛甲基化状态以及该基因在宫颈癌组织中的表达情况。方法用甲基化特异性聚合酶链反应（methylafion specific polymerase chain reaction, MS-PCR）对151例患者的血浆进行FHIT基因甲基化状态的研究，并用免疫组织化学方法检测FHIT蛋白的表达情况。结果31．13％的患者血浆FHIT基因发生甲基化；59．60％宫颈癌组织FHIT蛋白表达减弱或缺失，其中47．78％存在血浆FHIT基因的甲基化。结论血浆中FHIT基因甲基化是引起宫颈癌FHIT蛋白表达减弱的重要因素，利用它可以对宫颈癌进行无创伤诊断和预后的评估。     

DCC基因与妇科肿瘤的研究

结直肠癌缺失基因 ,即 DCC基因 ,是近年来发现的大肠癌中一个重要的肿瘤抑制基因 ,其在妇科肿瘤中的作用也日益受到研究者的重视 ,但有关此方面的研究国内尚未见报道。本文就 DCC基因的分子生物学特性、作用机制、与妇科肿瘤关系的研究等方面作一简要综述     

Livin蛋白和FHIT蛋白在宫颈癌中的表达及意义

目的：探讨Livin蛋白和FHIT蛋白在宫颈癌组织中的表达和意义。方法：用免疫组化sP法检测12例正常宫颈组织、56例宫颈癌组织中Livin蛋白和FHIT蛋白的表达情况,并结合临床病理资料进行分析。结果：Livin蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达率明显高于正常宫颈组织,而FHIT蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达率明显低于在正常宫颈组织,差异均有统计学意义（P〈0．05）。在宫颈癌组织中,Livin蛋白阳性表达率随临床分期、病理分级的升高而逐渐升高,有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者;而FHIT蛋白阳性表达率随临床分期、病理分级的升高而减低,有淋巴结转移者低于无淋巴结转移者,差异均有统计学意义（P〈0．01）。在宫颈癌组织中,Livin蛋白和FHIT蛋白表达呈负相关（P〈0．05）。结论：Livin蛋白和FHIT蛋白的异常表达可能在宫颈癌的发生、发展中有着重要的作用。联合检测二者在宫颈癌中的表达情况,可为宫颈癌的早期诊断、靶向治疗及预后判断提供重要的理论依据。     

子宫颈癌FHIT基因表达与杂合性丢失

目的　探讨抑癌基因FHIT基因在子宫颈癌发生中的作用及其失活的可能机制。方法　选取FHIT基因内 2个微卫星位点D3S130 0和D3S12 34,对 5 6例经显微切割分离肿瘤组织的原发性子宫颈癌进行杂合性丢失 (LOH)分析 ,同时采用免疫组化方法 (S P法 )检测FHIT的表达情况。结果　D3S130 0和D3S12 34的LOH发生率分别为 36 2 % (17/ 4 7)、32 7% (16 /4 9) ,5 2 % (2 9/ 5 6 )的子宫颈癌组织至少在一个位点存在LOH。 5 7 1%的子宫颈癌FHIT表达减弱或缺失 ,其中 71 9%存在FHIT基因LOH ,FHIT低表达与FHIT基因LOH之间有相关性 (P <0 0 1)。子宫颈鳞癌组织的LOH发生率及FHIT低表达率均高于腺癌 (6 4 3%vs 14 3% ,6 9 0 %vs 2 1 4 % ,P <0 0 5 )。子宫颈鳞癌LOH发生率及FHIT低表达与组织学分级、FI GO分期均不相关 (P >0 0 5 )。结论　FHIT基因可能在子宫颈鳞癌发生中起重要作用 ,杂合性丢失可能是FHIT基因失活的重要机制     

外源性FHIT基因表达对肺腺癌细胞株A549恶性表型的逆转作用

目的 探讨FHIT（fragile histidine triad)基因表达在肺癌细胞增殖、凋亡、成瘤性中的作用。方法 应用脂质体转染法构建能高效表达外源性FHIT基因的A549－FHIT细胞和作为空载体对照的A549－vector细胞，裸鼠皮下接种构建肺癌移植瘤动物模型，应用逆转录－PCR、Western杂交、免疫组化、流式细胞计数等技术检测外源性FHIT基因转录、表达及对肺癌细胞株增殖、凋亡、成瘤性等的影响。结果 A549－FHIT细胞的生长曲线、克隆形成率、移植瘤体积和重量均显著低于A549－vector和亲本A549细胞；A549－FHIT细胞凋亡水平显著高于A549－vector和亲本A549细胞；与两个对照组相比，A549－FHIT细胞G0／G1比例显著增高。结论 外源性FHIT表达基因能够显著抑制肺癌细胞增殖和分裂，诱导其凋亡，抑制其成瘤性，提示FHIT基因在肺癌中具有抑癌基因的功能。     

Local injection of lentivirus-delivered livinshRNA suppresses lung adenocarcinoma growth by inducing a G0/G1 phase cell cycle arrest

The inhibitor of apoptosis protein (IAP) plays an important role in tumorigenesis and may be a potential target for cancer therapy. Livin, which belongs to this family, is highly expressed in various tumors. The previous study demonstrated that silencing Livin gene promoted lung cancer cell apoptosis; however, the effects on tumor growth suppression by targeting this gene in vivo, to thereby determine the efficacy of targeting Livin for patient therapy, have not been determined. This study injected lentivirus-delivered livinshRNA into established xenograft tumors derived from the lung adenocarcinoma cell line SPC-A-1 in BALB/C nude mice, the result showed that LivinshRNA down-regulated Livin expression effectively, induced tumor cell apoptosis, reduced tumor cell proliferation, and suppressed tumor growth dramatically, with a tumor volume inhibitory rate of (58.65±4.82)% and a tumor weight inhibitory rate of (47.44±1.64)%, but with less severe adverse reaction to the mouse. This study further demonstrated that Livin gene silencing induced a G0/G1-phase cell cycle arrest and cyclin D1 downregulation, which is a key regulator of the G0/G1- to S-phase transition. These findings suggest that LivinshRNA local injection may serve as a therapeutic method for patient treatment, and that LivinshRNA may suppress tumor growth by arresting the cell cycle in the G0/G1-phase.     

FHIT在喉癌中的研究进展

［摘要］ 脆性组氨酸三联体基因（fragile histidine triad， FHIT）是位于3p14.2上的抑癌基因，它可以通过水解Ap3A、改变线粒体跨膜电位及增强微管蛋白聚合来诱导细胞凋亡。FHIT的改变包括纯合性缺失、微卫星不稳定(MSI)、杂合性缺失（LOH）及启动子甲基化在喉鳞状细胞癌中有非常重要的作用。FHIT基因可能成为喉鳞状细胞癌的基因治疗靶点     

FHIT和HPV与宫颈癌的研究进展

宫颈癌是最常见妇科恶性肿瘤之一,发病与人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染密切相关,其中HPV16/18型最常见。脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)基因是近年在染色体3p区域发现的候选抑癌基因,在人类许多肿瘤组织和细胞系中表现为高频率缺失和异常转录。FHIT基因可被HPV插入整合,这二者之间可能存在某种关联而共同参与宫颈癌的发病,因此FHIT基因及蛋白表达的检测有望和HPV一起作为宫颈癌早期诊断和基因治疗的工具。