PCR检测深部致病真菌感染的研究

目的探讨PCR在可疑深部真菌感染临床标本检测中的应用。方法对60份临床标本分别进行传统真菌培养以及真菌通用引物PCR和三重PCR检测。结果真菌培养阳性共19份，其中白念珠菌10份、烟曲霉2份、新生隐球菌2份、其他菌株5份（包括光滑念珠菌2份、热带念珠菌2份、克柔念珠菌1份）；真菌通用PCR检测共有21份阳性，经三重PCR检测共有15份阳性，分别为白念珠菌10份、烟曲霉3份、新生隐球菌2份。PCR方法与传统培养方法相比，检出率差异无统计学意义。结论PCR检测可疑深部真菌感染临床标本快速简便，稳定性好，敏感性和特异性均较理想，适合临床实验室常规使用。     

重要条件致病真菌感染组织免疫组化研究

目的 探索在组织中鉴定重要条件致病真真的组织病理学方法。方法 以实验小鼠白念珠菌感染组织和可疑念珠菌、隐球菌和曲霉感染的临床组织病理标本进行ＰＡＳ染色和免疫组化染色，并比较了两种方法的敏感性。结果 兔抗白念株菌多克隆抗体、兔抗新生隐球菌多克隆抗体和鼠抗曲霉单克隆抗体可以分别鉴定组织中的白念珠菌、新生隐球菌和曲霉。免疫组经和ＰＡＳ染色的敏感性差异无显著性。结论 免疫组化为组织中确定真菌和鉴定真菌种属     

PCR-RFLP鉴别念珠菌、曲霉和隐球菌的探讨

为快速鉴别３类医学上重要真菌－念珠菌、曲霉和隐球菌,应用聚合酶链反应－限制性片段长度多态（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）的分子生物学说法方法对白念珠菌、克柔念珠菌、季地蒙念珠菌、近平滑珠菌、热带念珠菌、乳念珠菌、新生隐球菌格梯变种、新生隐球菌新生变种、罗伦隐球菌格梯变种、新生隐球菌新生变种、罗伦隐球菌１、工霉、黄曲霉和杂色曲霉进行体外研究。新生隐新生变种、罗伦隐球菌、曲霉隐球菌放增出３１０ｂｐ经ＰＣＲ含珠菌、     

免疫磁性技术分离提纯酵母样真菌的研究

用包被有羊抗鼠ＩｇＧ的磁珠结合鼠抗白念单抗后，对白念珠菌，类星形念珠菌，类星形念珠菌，热带念珠菌，新生隐球菌，光滑念珠菌菌悬液及白念珠菌与新生隐球菌两菌混悬液进行了分离纯化研究。结果：免疫磁球和白念珠菌，类星形念珠菌结合尤为明显，与热带念珠菌少量结合而不和新生隐球菌，光滑念珠菌结合。     

PCR检测部分病原真菌的实验研究

为探讨和评价ＰＣＲ技术在检测和鉴定病原真菌方面的作用,重点是引物的选择。首先比较了来自ｒＤＮＡ基因序列的通用引物的通用性,并用３对种特异性引物进行２次套式扩增。结果表明３对通用引物均能扩增出预期的靶ＤＮＡ带,平均大小分别为６２０ｂｐ,４８５ｂｐ和５８０ｂｐ;３对种特异性引物分别扩增出白念珠菌、新生隐球菌和烟曲霉ＤＮＡ,并提高了敏感性。说明用通用引物和种特异引物进行ＰＣＲ扩增可以用于病原真菌的检测和     

玻璃珠－盐析法提取常见致病真菌DNA的研究

目的 进一步提高提取ＤＮＡ的效率并减少污染和毒性,以适应临床ＰＣＲ检测的需要,建立玻璃珠－盐析法快速提取常见致病真菌ＤＮＡ。方法 分别采用玻璃珠－盐析法和经典的酶解－酚氯仿法比较从白念珠菌、乳酒念珠菌、克柔念珠菌、季也蒙念珠菌、新生隐球菌、烟曲霉、黄曲霉和马内菲青霉等８种常见致病真菌中提取ＤＮＡ,同时行ＰＣＲ以评价其可靠性。结果 本方法从８种常见致病真菌均提取浓度较高且较完整的ＤＮＡ,用于ＰＣＲ也     

新生隐球菌和肺泡巨噬细胞间的相互作用

新生隐球菌感染在免疫低下者中发病率高。肺泡巨噬细胞(AM)是新生隐球菌入侵机体后的最早防御屏障,它们之间的相互作用机理尚未阐明。早期的研究对AM吞噬新生隐球菌过程的观察仅限于数小时,不能分辨粘附的和吞入的新生隐球菌;只在和新生隐球菌接触     

新生隐球菌不同变种所致小鼠原发性皮肤感染的比较

目的：探讨新生隐球菌不同变种在原发性小鼠新生隐球菌皮肤感染中的作用。方法：按照我们建立的原发性皮肤隐球菌感染模型的方法，将新生隐球菌新生变种标准野生株B3501与格特变种标准株ATCC32609分别皮内接种于免疫抑制与非抑制的BALB／c小鼠，皮损真菌培养与组织病理检查确证感染。观察2种隐球菌感染的病程，比较皮损形成与消退的平均时间。结果：2种变种的新生隐球菌皮下接种于BALB／c小鼠后，可以在免疫抑制与非抑制的BALB／c小鼠皮肤上产生丘疹、结节、溃疡、传染性软疣样皮损，皮损可以自愈，真菌培养与病理确证为隐球菌感染。2种菌株只在免疫正常小鼠的皮损形成时间上存在差异。结论：新生变种与格特变种的新生隐球菌均可以造成BALB／c小鼠相似的皮肤感染。推测2种变种对原发性皮肤感染的致病力可能无差异，新生变种发病较多可能与其分布有关。     

EnVision免疫组织化学二步法在诊断深部真菌感染上的应用

观察微波EnVision免疫组织化学二步法检测临床常见的几种深部真菌感染的敏感性与特异性，选用鼠抗曲霉单克隆抗体、免疫新生隐球菌及兔抗白念珠菌多克隆抗体，分别对34例深部真菌感染的福尔马林固定，石蜡包埋切片进行PAS染色、微波EnVision免疫组织化学标记。结果示免疫组织化学染色示16例可疑曲霉感染14例阳性，11例可疑隐球菌感染全部阳性，7例念珠菌感染6例阳性，菌体染色清晰几无背景。结论：微波EnVision免疫组化二步法应用于深部真菌感染检测具有高敏感、低背景、快速简便的特点，在真菌病的临床病理诊断中具有很好的应用价值。     

脑脊液对新生隐球菌和念珠菌的抗真菌活性研究

隐球菌性脑膜炎是隐球菌病中最严重的一型 ,尽管从隐球菌性脑膜炎患者脑脊液 (ＣＳＦ)中可分离出新生隐球菌 ,但对ＣＳＦ影响病原真菌生长的因素知之甚少。作者参照血清抑制新生隐球菌生长因素的研究方法 ,探讨了ＣＳＦ对新生隐球菌和念珠菌的体外抗真菌活性。材料与方法 :新生隐球菌 8株、白念珠菌 2株、光滑念珠菌 1株、克柔念珠菌 1株、乳酒念珠菌 1株。ＣＳＦ过滤除菌后用乳酒念珠菌作生物测试以排除其中的抗真菌药物活性。用ＲＰＭＩ-1 64 0培养液将ＣＳＦ倍比稀释后加入微测量平板中 ,同时用ＲＰＭＩ-1 64 0作对照 ,然后在上述培养基…     

国产氟康唑体外和体内抗真菌作用研究

国产氧康唑体外对２５株常见致病真菌以及体内对小鼠感染白念珠菌和新型隐球菌的抗菌作用与酮康唑和两性霉素Ｂ进行了比较。结果表明氟康唑在体外最小抑菌浓度（ＭＩＣ）不如其他两药。而口服氟康唑对感染小鼠的保护作用明显优于酮康唑和两性霉素Ｂ，口服治疗白念珠菌感染小鼠的５０％动物的有效浓度（ＥＢ５０）分别为０．８５ｍｇ／ｋｇ和３９．９８ｍｇ／ｋｇ，口服治疗新型隐球菌感染小鼠的ＥＤ５０分别为３．５４ｍｇ／ｋｇ和８１．６９ｍｇ／ｋｇ。     

白癜风患者郎格罕细胞的光,电镜研究

白癜风患者郎格罕细胞的光、电镜研究杜娟①朱铁君①郎格罕细胞（ＬＣ）是抗原呈递细胞，在许多皮肤病的发病中占重要地位，很多文献也报道了ＬＣ在白癜风皮损中的数量变化，但结论很不一致。本研究旨在通过严格的自身平行对照，观察白癜风患者白斑、白斑边缘及远离白斑处...     

黑素与新生隐球菌

黑素的产生与多种微生物的毒力相关.新生隐球菌主要通过酚氧化酶(漆酶)合成黑素,黑素主要通过抵抗宿主微生物杀伤机制和影响宿主免疫应答来致病.主要就新生隐球菌黑素的微观结构、生物合成,漆酶的分子调节,黑素与新生隐球菌毒力的关系,黑化对真菌生存的影响及与抗真菌治疗的关系等方面进行概述,以期通过对黑素特征的理解为抗真菌药物的开发和对疾病的治疗策略选择提供帮助.

Abstract：

The production of melanin is associated with the virulence of various microorganisms.Cryptococcus neoformans produces melanin mainly via phenoloxidase(laccase)pathway.Melanin contributes to virulence likely by reducing the susceptibility of melanized fungi to host defense mechanisms and affecting immune responses in infected hosts.This review mainly focuses on the microstructure and biosynthesis of Cryptococcus neoformans melanin, molecular regulation of laecase, relationship between melanin and Cryptococcus neoformans virulence, effects of melanization on the survival of fungi, relationship between melanization and antifungal treatment, ete, which may facilitate the design and development of antifungal agents and strategies.     

聚合酶链反应检测深部致病真菌的实验研究

目的 建立能用于临床实践的检测常见致病真菌的聚合酶链反应(PCR)方法.方法 设计了以热启动PCR为基础的实验方法,首先用真菌通用引物对标本进行单重PCR,若阳性,再用白念珠菌、烟曲霉和新生隐球菌的种特异性引物进行三重PCR来检测这3种常见致病真菌.结果 对9属55种78株常见深部真菌均扩增出260bp的DNA片段,而对细菌和人DNA均未扩增出目的 片段,具有高度特异性和敏感性,该方法操作简便且成本低.结论 以热启动PCR为基础的单重PCR和三重PCR方法可能成为临床上深部真菌感染理想的快速诊断工具.     

Triple fungal infection--chronic mucocutaneous candidiasis, exophytic dermatophytosis and cryptococcal meningitis: a new and unusual combination

The clinical and immunological studies of an unusual case of chronic mucocutaneous candidiasis (CMCC) are reported. An 18-year-old male with life-long CMCC was superinfected by a dermatophyte showing exophytic clinical features in his childhood. In addition he has suffered from fatal cryptococcal meningitis since the age of 18. The combination of three fungi, i.e., Candida albicans, Trichophyton mentagrophytes and Cryptococcus neoformans, has not been found in an examination of the literature. The author's hypothesis, "immune deviation theory" in the pathogenesis of CMCC, is presented in detail. The possible role of hypovitaminosis A anddisorder of iron metabolism in CMCC and treatment of CMCC are reviewed briefly.     

PCR方法快速检测一些常见医学真菌

目的 为选择一种快速、敏感和特异的方法来检测临床感染的真菌。方法 选取真菌１８ＳｒＤＮＡ序列中两个片段设计引物,对１２种菌株进行ＰＣＲ扩增,均扩增出长约３１０ｂｐ产物。对一些临床常见细菌扩增均无反应。对酶母相真菌白念珠菌、新生隐球菌进行敏感性实验检测。结果 发现二者ＰＣＲ最小检出量均为菌体数达每个反应体系１０＾３。本实验过程总耗时３６ｈ以内。结论 本实验方法可快速特异性检测一些常见医学真菌。