ZCWCC1蛋白在L02肝细胞脂肪变性中的表达变化

目的研究ZCWCC1蛋白在人L02肝细胞脂肪变性中的表达变化并探讨其机制。方法培养中加用500μmol/L的油酸处理L02肝细胞,建立肝细胞脂肪变性体外模型,采用油红染色评价脂质蓄积程度,采用免疫荧光及激光共聚焦显微镜观察ZCWCC1蛋白在L02肝细胞脂肪变性时的表达改变,以Western blot对其进行半定量评价,并使用赖氨酸蛋白酶抑制剂N-乙基马来酰亚胺(N-Ethylmaleimide,NEM)及蛋白酶体抑制剂MG132对ZCWCC1蛋白表达变化的相关机制进行初步探讨。结果油红染色及细胞甘油三酯含量测定证明L02肝细胞脂肪变性体外模型成功建立,激光共聚焦显微镜观察发现ZCWCC1蛋白主要定位在胞核内,其荧光信号随油酸诱导时间延长而减弱,Western blot检测结果显示,ZCWCC1表达水平也随油酸诱导时间延长(0、3、6、12、24、48 h)而降低[(56 283±303)、(56 753±539)、(55 561±996)、(56 257±326)、(48 339±712)、(43 022±2 198),P<0.01]。NEM处理可使ZCWCC1降解增加,MG132处理可逆转ZCWCC1在L02肝细胞脂肪变性中的下降趋势。结论 ZCWCC1蛋白在L02肝细胞的脂肪变性过程中表达下降,可能与泛素-蛋白酶体途径有关。     

原代肝细胞脂肪变性细胞模型的构建

目的 为非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)发病机制和防治研究提供可靠的原代肝细胞脂肪变性细胞模型。方法 采用Seglen两步灌流法及其改良方法分离获取小鼠原代肝细胞,体外培养48 h后,给予不同浓度的游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)混合物(油酸∶棕榈酸=2∶1)诱导24 h,采用油红O染色,观察肝细胞内脂滴沉积情况,全自动生化分析仪测定细胞内三酰甘油(TG)含量。结果 与对照组相比,模型组肝细胞内出现红色脂滴沉积,且与加入的FFA混合物浓度呈剂量依赖性;模型组肝细胞内TG含量明显高于对照组(P<0.05),且随着加入的FFA浓度升高而增加,提示肝细胞内脂质沉积随着加入的FFA浓度升高而增加。结论 成功构建了原代肝细胞脂肪变性细胞模型,为NAFLD的研究提供了可靠的细胞模型。     

内质网应激在软脂酸钠诱导的脂肪变性L02肝细胞凋亡中的作用

目的 观察内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）蛋白在软脂酸钠诱导的脂肪变性L02肝细胞凋亡过程中的改变,探讨ERS与脂变肝细胞凋亡的关系。方法用软脂酸钠（饱和脂肪酸）诱导建立L02肝细胞脂肪变性模型。将细胞分为正常对照组和实验组(软脂酸钠72 μmol/L)。MTT法筛选软脂酸...     

肝细胞癌组织p53凋亡刺激蛋白2表达及临床意义

目的 探讨肝细胞癌组织p53凋亡刺激蛋白2(ASPP2)表达及临床意义。方法 选取2016年6月至2019年6月在首都医科大学附属北京同仁医院接受手术切除治疗的80例肝细胞癌患者为研究对象,收集所有患者的肝细胞癌组织及癌旁正常组织,比较两种组织ASPP2表达水平;分析肝细胞癌组织ASPP2蛋白表达与临床病理特征、预后以及与X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）、p53蛋白表达的关系。结果 肝细胞癌组织ASPP2 mRNA表达水平、蛋白高表达率和蛋白表达评分均明显低于癌旁正常组织（均P<0.05）。肝细胞癌组织ASPP2蛋白表达与病理分期、临床分期、脉管浸润等有关（均P<0.05）,与性别、年龄、HBV感染、肝硬化、甲胎蛋白水平、肿瘤数量、包膜侵犯等均无关（均P>0.05）。ASPP2蛋白高表达患者累积无病生存率和累积5年总生存率均明显高于ASPP2蛋白低表达患者（均P<0.05）。ASPP2蛋白高表达的肝细胞癌组织XIAP蛋白表达水平明显低于ASPP2蛋白低表达的肝细胞癌组织,而p53蛋白表达水平明显高于ASPP2蛋白低表达的肝细胞癌组织,差异均有统计学意义（均P<...     

2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病患者肝脏硬度和脂肪变性程度研究

目的 评估2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者的肝脏硬度和脂肪变性程度。方法 本研究纳入198例T2DM合并NAFLD患者,利用FibroScan瞬态弹性成像技术(TE)评估患者肝脏脂肪变性和纤维化程度。依受控衰减参数(CAP)值将肝脂肪变性分为4个等级:S0(<238dB/m)、S1(238~258dB/m)、S2(259~291dB/m)、S3(≥292dB/m)。依肝脏硬度(LSM)值将肝纤维化分为4个等级:F0F1(＜7.0kPa)、F2[(7.0~8.6)kPa]、F3[(8.7~10.2)kPa]、F4(≥10.3kPa)。结果 198例患者中有171例有效测量病例(86.4%)患者纳入分析。其中有4.1%(7/171)患者有轻度脂肪变性(S1),有21.6%(37/171)患者有中度脂肪变性(S2),有71.3%(122/171)患者重度脂肪变性(S3)。有28.7%(49/171)患者存在显著肝纤维化(F2~F3),有17.5%(30/171)患者LSM值提示肝硬化(F4)。与没有或轻中度脂肪变性(S0~S2)患者比较,重度脂肪变性(S4)患者中显著肝纤维化(F2~F3)比例及肝硬化(F4)比例均更高。单因素及多因素Logistic回归分析提示高ALT和高CAP值可能是肝纤维化发生的独立危险因素。结论 TE是T2DM合并NAFLD患者肝脂肪变性和纤维化的有效评估方法,其中超过90%的患者有中重度脂肪变性,超过45%的患者有显著的肝脏纤维化。肝脏脂肪变性程度和硬度评估具有较好的临床应用价值。     

p53在肝细胞肝癌和食管鳞癌中的表达

目的　通过检测p5 3在肝细胞肝癌和食管鳞癌中的阳性表达 ,探讨p5 3与肝细胞肝癌和食管鳞癌临床病理学之间的关系 ,帮助诊断肿瘤及判断预后。方法　福尔马林固定 ,石蜡包埋 ,免疫组化LSAB法染色 ,免疫组化ABC法检测。结果　肝细胞肝癌中p5 3阳性率为 79.49% ,HBsAg阳性者为 87.93% ,肝硬变者为 90 .14% ,癌转移者为 92 .5 %。食管鳞癌中p5 3阳性率为 5 3.0 1%。癌转移者为 6 3.41%。两种肿瘤p5 3阳性反应均随癌分化程度降低而增强。结论　p5 3在肝细胞肝癌和食管鳞癌中的阳性表达基本平行 ,阳性反应程度与HBsAg、周围病变、癌分化、癌转移等因素呈正相关     

肝细胞肝癌VEGF与p53的表达及其意义

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)和p53蛋白表达与原发性肝细胞肝癌(HCC)的关系。方法用免疫组织化学SP法,检测49例HCC组织、21例癌旁组织、10例正常肝组织VEGF及p53蛋白的表达情况,并与临床病理指标比较分析。结果49例HCC中VEGF、p53蛋白阳性表达分别为63.2%和53.1%;VEGF和p53蛋白表达有相关性(P<0.05)。21例癌旁组织中VEGF和p53蛋白阳性表达分别为19.0%和9.5%。肝癌组织和癌旁组织VEGF和p53蛋白表达差异有显著性(P<0.01)。10例正常肝组织无VEGF和p53蛋白表达。HCC组织中VEGF、p53蛋白阳性表达与血管侵犯和转移倾向明显相关(P<0.05)。结论HCC组织中VEGF、p53蛋白过表达,通过促进HCC肿瘤血管的生成而促进HCC的生长和浸润转移,p53和VEGF可作为反应HCC生物学行为的重要指标。     

p53通过调控p55PIK抑制肝细胞癌SMMC-7721细胞的增殖

目的探讨p55PIK对肝癌SMMC-7721细胞增殖能力的影响,及p55PIK上游可能的调控机制。方法以肝癌SMMC-7721细胞为研究对象,通过脂质体转染p55PIK特异性小干扰RNA(siRNA)si-p55构建p55PIK低表达的实验模型。通过CCK8检测p55PIK对肝癌SMMC-7721细胞增殖能力的影响。通过流式细胞术检测p55PIK对细胞周期进程的影响。转染针对p53的小干扰RNA(siRNA)si-p53低表达p53,采用Western blot检测p53对p55PIK表达的影响,并通过CCK8法检测p53对p55PIK在肝癌细胞增殖调控中的作用。结果低表达p55PIK可导致肝癌SMMC-7721细胞的增殖能力降低[转染后96h,si-NC组、si-p55组的A值分别为(1.325±0.050)、(1.183±0.019)],细胞周期G0/G1期阻滞[si-NC组:(39.07±2.02)%;si-p55组:(49.66±1.05)%]。低表达p53可在肝癌SMMC-7721细胞中上调p55PIK的表达。p55PIK可部分拮抗p53对肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用。结论p53可部分通过调控p55PIK抑制肝癌SMMC-7721细胞的增殖。     

2型糖尿病合并NAFLD患者铁蛋白、TyG-BMI变化及与脂肪变性程度的相关性

目的 探讨2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者铁蛋白、甘油三酯葡萄糖体质指数(TyG-BMI)变化及与脂肪变性程度的相关性。方法 选取2021年1月至2022年7月本院收治的121例T2DM患者为研究对象,根据有无合并NAFLD分为合并组(n=81)和非合并组(n=40),比较两组铁蛋白、TyG-BMI水平及基线资料的差异,采用Logistic回归模型分析铁蛋白、TyG-BMI与T2DM合并NAFLD的关系,并采用受试者工作特征(ROC)曲线评估铁蛋白、TyG-BMI单独及联合应用对T2DM合并NAFLD的预测价值。以磁共振(MRI)肝脏质子密度脂肪分数(PDFF)检测结果作为脂肪变性程度的划分标准,比较不同脂肪变性程度患者铁蛋白、TyG-BMI水平,并采用Pearson法分析铁蛋白、TyG-BMI与PDFF水平的相关性。结果 合并组患者的腰臀比(WHR)、舒张压、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)、空腹C肽(FCP)、甘油三酯(TG)、丙氨酸转移酶(ALT)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、谷草转氨酶(AST)、尿酸(UA)、体质指数(BMI)、...     

bcl—2、P53和p21基因蛋白在肝细胞癌中的表达及意义

目的：了解抑凋亡基因bcl-2、抑癌基因p53和癌基因p21基因蛋白在肝细胞癌（HCC）中的表达状况及意义。方法：用bcl-2、p53和p21基因蛋白抗体对55例肝细胞癌合并结节性肝硬变手术标本进行S－P免疫组化检测,分析基因蛋白表达率与病理分级和预后的关系。结果：bcl-2基因蛋白在HCC和结节性肝硬变中的表达率分别为72．7％（40／55）和36．4％（20／55）,两者存在差异（P＜0．05）;p53蛋白在HCC中表达率为54．5％（30／55）,而肝硬变组织均呈阴性表达,两者存在显著差异（P＜0．01）;p21蛋白在HCC和结节性肝硬变中的表达率分别为63．6％（35／55）和38．2％（21／55）,两者无差异（P＞0．05）;而bcl-2、p53和p21的表达率和表达强度均与HCC的病理分级无关（P＞0．05）。另外,在随访29例HCC患者中发现生存率短组（6个月至1年）的16例中,bcl-2、p53和p21的共同表达率为50％（8／16）。研究结果提示：HCC的发生、发展与bcl-2、p53和p21蛋白的异常表达或突变有关;bcl-2、p53和p21之间可能存在相互协同作用,对HCC的预后有一定的影响;bcl-2、p53和p21蛋白过度表达反应了HCC癌细胞的分化程度及增殖情况,因而可作为HCC诊断和预后的参考指标之一。     

肝细胞色素p450 1A1在大鼠非酒精性脂肪肝形成中的作用

目的研究肝细胞色素p450 1A1在非酒精性脂肪肝大鼠形成中的作用.方法Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组和高脂饲料2、4、8和12周组(其中每组各8只);HE染色光镜观察肝脏组织病理改变;硫代巴比妥酸法测定肝脏组织丙二醛(MDA)的含量变化;免疫组织化学和Western blot方法研究高脂饲料诱导的大鼠脂肪肝形成中肝细胞色素p450 1A1表达变化.结果高脂饲料组大鼠肝脏内MDA含量明显高于对照组,随着脂肪肝程度的加重,MDA含量逐渐增强,肝细胞色素p450 1A1蛋白表达亦明显增强.结论非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素p450 1A1表达变化与脂肪肝引起的脂质过氧化损伤程度密切相关.     

胃癌P^53突变产物的增强表达

作应用ＡＢＣ免疫组化方法，对３８例手术切除的胃癌组织及癌旁胃粘膜的冰炼切片标本进行了Ｐ＾５３突变蛋白表达的检测。结果：３８例胃癌标本，２４例Ｐ＾５３突变蛋白高表达，阳性率６３．２％，高分化腺癌３／４（７５．０％）阳性，中分化腺癌１３／２０（６兜．０％）阳性，低分化腺癌５／９（５５．６％），粘液腺癌３／５（６０．０％）阳性，癌旁胃粘膜有１０例Ｐ＾５３突变蛋白弱表达。２３例伴有淋巴结转移的罗癌标本，     

p53、p27及mdm2在胃肠道间质瘤中的表达

目的 研究p53、p27和mdm2蛋白在胃肠道间质瘤(GIST)中的表达及其与GIST生物学行为的关系,为预测该肿瘤的侵袭潜能提供理论依据和可能的预测指标.方法 收集68例手术切除的GIST标本,应用免疫组织化学法检测肿瘤组织中p53、p27和mdm2蛋白的表达,并结合病理形态学及生物学行为评价进行统计学分析.结果 68例GIST中p53、p27和mdm2蛋白阳性表达率分别为75%、54.41%和27.94%.p53阳性表达率在极低度侵袭危险性(VLB)、低度侵袭危险性(LR)和高度侵袭危险性(HR)组三组间,细胞核分裂数≤10/50 HPF和10/50 HPF两组间的差别均有统计学意义(P<0.05),在肿瘤直径≤5 cm和5cm两组间差异有高度统计学意义(P<0.01);p27阳性表达率在VLR、LR和HR组间比较有统计学意义(P<0.05),在肿瘤直径≤5 cm和5 cm两组间差别有高度统计学意义(P<0.01);mdm2阳性表达率在细胞核分裂数≤10/50HPF和10/50HPF两组间比较差别有统计学意义(P<0.05).结论 p53、p27和mdm2蛋白表达与GIST的发生、发展有关,检测p53、p27及mdm2表达可以作为GIST生物学行为评价的有效指标.     

Bowen病bc1-2及p53蛋白的表达

目的 :探讨bc 1 - 2及p5 3蛋白在Bowen病及Bowen样鳞癌中的表达及其意义。方法 :应用免疫组织化学技术对 1 1例Bowen病及 3例Bowen样鳞癌bc1 - 2和 或p 5 3蛋白的表达进行了检测。结果 :1 1例Bowen病bc1 - 2蛋白阳性者 2例 ( 1 8% ) ,p 5 3蛋白阳性者 3例 ( 2 7% ) ;3例Bowen样鳞癌均见bc1 - 2蛋白表达。Bowen中bc1 - 2蛋白与p 5 3蛋白表达呈显著正相关 (r =0 .76 9,P <0 0 5 )。结论 :Bowen病中bc 1 - 2蛋白的表达与p 5 3基因突变有关 ,并参与了Bowen病的进展及向Bowen样鳞癌演变     

mdm2和p53基因在大肠癌中的相关性分析

目的研究mdm2和p53基因表达与大肠癌发生及胃癌生物学行为的关系。方法采用免疫组织化学技术（sP法）对经病理证实的43例大肠癌和13例正常对照组结肠标本分别进行mdm2、p53基因蛋白检测,并进行对比分析。结果大肠癌的发生与mdm2高表达、p53低表达有关,mdm2与大肠癌局部发展、浸润、转移有明显相关性,p53起负调控作用。结论mdm2、p53基因异常表达与大肠癌的发生、淋巴转移有明显相关性。mdm2、p53联合检测对评估大肠癌预后有重要的临床价值。     

子宫内膜癌p16、p53和C-erbB-2的表达及其临床意义

目的研究抑癌基因p16、p53和癌基因C-erbB-2在子宫内膜癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化S-P法检测l0例正常子宫内膜组织和40例子宫内膜癌病例中p16、p53和C-erbB-2蛋白的表达。结果正常子宫内膜组织和子宫内膜癌中p16、p53和C-erbB-2阳性表达率分别为100%、0%、0%和47.5%、52.5%、37.5%,两组比较有明显差异(P<0.05)。p16蛋白表达在G1与G3组之间和Ⅰ期与Ⅲ期之间差异有显著性(P<0.05);p53和C-erb-B2表达随组织学分级,临床分期升高,表达逐渐升高。p16、p53和C-erbB-2在子宫内膜癌联合检测中的阳性表达率异常高于单项指标的检测结果。结论p16、p53和C-erbB-2对判断子宫内膜癌的恶性程度和组织学分级都有重要意义,p16、p53和C-erbB-2表达上的差异可能反映了肿瘤不同阶段中各基因的不同表现,联合检测可以弥补单个指标检测的不足,更好地反映肿瘤细胞在不同阶段的动态改变。     

p53和bcl-2在胰腺癌组织中的表达及意义

目的 检测p53和bcl-2蛋白在胰腺癌及其它胰腺疾病组织中的表达,并探讨其临床意义.方法 应用链霉菌抗生物素过氧化酶免疫组化法对32例原发性胰腺导管腺癌、12例胰腺癌手术切缘经病理证实的正常胰腺组织、10例良性疾病组织进行p53和bcl-2蛋白检测.结果 p53蛋白阳性表达仅见于原发性胰腺导管腺癌,阳性率为43.8%,p53蛋白表达与原发性胰腺导管腺癌临床病理特征无关;bcl-2蛋白在原发性胰腺导管腺癌、正常胰腺组织和良性疾病组织中均表达,阳性率分别为46.9%、25.0%和20.0%,在胰腺癌中表达率较高,但无统计学意义;bcl-2蛋白表达在组织学高、中分化和临床Ⅰ～Ⅱ期显著高于组织学低分化和临床Ⅲ～Ⅳ期(P＜0.05).结论 p53和bcl-2蛋白在胰腺癌的发生中起着重要的作用;bcl-2蛋白的表达能反映胰腺癌的生物学行为.     

饮食诱导非酒精性脂肪性肝病大鼠脂联素受体2基因的表达及其意义

[目的]探讨脂联素受体-2（AdipoR2）在饮食诱导非酒精性脂肪性肝病大鼠模型肝脏组织中的表达差异[方法]采用反转录PCR（FIT—PCR）法检测饮食诱导非酒精性脂肪性肝病与对照组大鼠肝脏中的AdipoR2 mRNA表达差异,同时检测大鼠脂联素、胰岛素抵抗指数及血糖水平。[结果]模型组大鼠肝脏组织中AdipoR2 mRNA为0．3964±0．0988,而对照组为1．2254±0．1462,两者间差异有显著性意义（P〈0．01）。模型组血糖为（5．44±0．58）mmol／L,与对照组（5．25±0．14）mmol／L比较差异无显著性意义;模型组脂联素水平（3．56±0．78）mg／mL,低于对照组的（4．71±0．30）mg／mL,P〈0．05,而前者胰岛素抵抗指数为2．39±0．16,较后者1．32±0．30明显增高（P〈0．01）。[结论]肝脏脂联素受体2表达下调可能是引起非酒精性脂肪性肝病的原因;与糖、脂肪代谢障碍,胰岛素抵抗程度提高有关。